学术投稿

重组人IL-8在大肠杆菌中的表达及纯化工艺的优化

张维延;马泓冰;徐颖;张学光

关键词:白细胞介素-8, 大肠杆菌, 表达, 纯化
摘要:目的优化重组人IL-8(rhIL-8)大肠杆菌表达及纯化工艺,以便获得高纯度的重组蛋白.方法将已构建好的表达载体转化大肠杆菌HB101,经3-吲哚丙烯酸诱导,在发酵罐中进行表达,比较不同诱导剂浓度、温度、pH值及时间,以获得佳表达工艺参数.离心收集菌体,超声破壁,收集包涵体和胞浆,其中包涵体经变性、复性处理,与包浆部分合并,经肝素亲和层析柱、阳离子交换柱和凝胶层析柱分离纯化,比较不同的洗脱条件,得到纯品,并对重组蛋白的纯度和生物学活性进行鉴定.结果用大肠杆菌HB101在发酵罐中表达rhIL-8,在30℃、pH为7.0的条件下加入50 mmol/L 3-吲哚丙烯酸,诱导28 h,得到约为100 mg/ml的高表达,其分泌的重组蛋白以包涵体和胞浆的形式存在,经三步层析纯化后,得到高纯度的rhIL-8(纯度>95%),经中性粒细胞趋化实验证实,所获IL-8具有良好的趋化白细胞迁移的作用.结论建立高效表达rhIL-8的原核表达和纯化工艺,所获的纯化IL-8具有良好的生物学活性.
苏州大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 麻醉恢复室术后并发症的临床评估

    通过对该院1998年至2004年麻醉恢复室(PACU)9623例成年患者资料的回顾性分析,探讨PACU患者术后并发症的发生.结果显示:术后各种并发症的总发生率为14.9%,其中循环系统为6.6%,呼吸系统为4.3%.老年(年龄≥65岁)组各种并发症的发生率(23.7%)显著高于非老年组(10.4%,P<0.01).成人未发生并发症组在恢复室平均留置时间为67±27 min,发生并发症组平均留置时间为124±21 min,两组有显著性差异(P<0.01).结果表明:循环系统、呼吸系统异常在PACU内较常见,老年患者术后并发症的发生率高.

    作者:魏兴;范瑛;陈红芳;谢红 刊期: 2005年第05期

  • 经瞳孔温热疗法治疗黄斑部脉络膜新生血管的初步报告

    目的探讨经瞳孔温热疗法(Traspupillary Thermotherapy,TTT)治疗黄斑部脉络膜新生血管(Choroidal neovascularization,CNV)的临床效果.方法采用810nm半导体激光经瞳孔温热疗法治疗经眼底荧光血管造影(FFA)证实的黄斑部CNV患者19例20眼,治疗参数为光斑直径800~3000 μm,能量120~480 mW,曝光时间均为60 s,光凝数量1~4点.随访视力、中心视野及FFA,时间为2~8个月(平均4.90个月).结果视力改善6眼(占30.00%),视力稳定13眼(占65.00%),视力下降1眼(占5.00%).治疗后视力平均为0.12,与治疗前的平均视力0.09比较有改善,但差异无显著性(P>0.05).FFA显示治疗后CNV完全闭合者占20.00%,CNV较治疗前面积减小、渗漏减轻者占70.00%,CNV增大和渗漏增加者占10.00%.结论 TTT是一种安全有效的黄斑部CNV治疗方法,可使大部分患者视力稳定或提高.

    作者:沈伟;蔡琴华;李龙标 刊期: 2005年第05期

  • 球囊扩张椎体后凸成形术在脊柱压缩性骨折治疗中的复位作用

    目的评价球囊扩张椎体后凸成形术在脊柱压缩性骨折治疗中的复位作用.方法 15例胸腰椎压缩性骨折患者,首先全麻俯卧过伸复位,排除体位复位对伤椎高度的恢复作用,C型臂X线机透视记录后凸成形球囊扩张前伤椎的影像资料,然后行经皮穿刺球囊扩张椎体后凸成形术,术后摄片.比较手术前后伤椎及相邻椎间隙高度、脊柱后凸Cobb角.结果手术前后伤椎及相邻椎间隙高度、脊柱后凸Cobb角等数据配对比较,差异有显著性(P<0.05).结论排除体位复位因素后,球囊扩张椎体后凸成形术对伤椎及相邻椎间隙高度有明显的恢复作用,可以矫正脊柱后凸畸形.

    作者:顾晓晖;杨惠林;张志明;孟斌;张亚峰;刘凌;唐天驷 刊期: 2005年第05期

  • 卵巢妊娠21例分析

    对21例卵巢妊娠的临床资料进行回顾性分析.结果:21例卵巢妊娠患者月经史无异常,无盆腔炎病史及不孕史,放置宫内节育器12例,无药物避孕者,部宫产史2例,阑尾炎手术史2例;21例均以急腹痛就诊.内出血>500 ml者13例,其中>1000 ml者8例,均手术治疗,其中1例采取腹腔镜手术.认为宫内节育器不能阻止卵巢妊娠的发生,腹腔镜有助于早期诊治卵巢妊娠.卵巢妊娠术前容易误诊,确诊有赖于病理检查,治疗以手术为主.

    作者:杨晓琴;张纪平 刊期: 2005年第05期

  • 氡及其子体吸入对大鼠肺与血细胞的氧化应激损伤

    目的研究氡及其子体吸入对大鼠肺与血细胞的氧化应激损伤.方法雄性Wistar大鼠20只,随机分为4组,除对照组外,处理组整体暴露于多功能生态氡室,吸入氡及其子体的累积剂量分别达27,52,105 工作水平月(Working Level Month,WLM)后,检测各组大鼠肺组织匀浆以及外周血的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,并使用荧光探针技术,检测外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell ,PBMC)以及支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar Lavage Fluid ,BALF)细胞,其细胞内活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)的平均含量.结果与对照组相比,各处理组SOD含量均有降低(P<0.01),MDA均有上升(P<0.01),其中肺组织匀浆中SOD含量,27WLM组与105WLM组有显著性差异(P<0.01),MDA含量27WLM组、52WLM组与105WLM组相比分别有显著性差异(P<0.01),外周血中MDA 含量,27WLM与105WLM有显著性差异(P<0.01);BALF以及PBMC细胞内的ROS含量,各处理组与对照组相比均增高(P<0.01),但各组间无显著性差异(P<0.05).结论在该实验条件下,氡及其子体吸入扰乱了大鼠的氧化应激平衡体系,使其受到一定的损伤.

    作者:仲恒高;苗超;臧黎慧;聂继华;苏世标;童建 刊期: 2005年第05期

  • 原发性空、回肠肿瘤22例诊断分析

    回顾性分析1993年至2003年经手术和病理证实的22例原发性空、回肠肿瘤患者的临床资料.结果:空、回肠腺癌6例,平滑肌瘤4例,平滑肌肉瘤5例,非何杰金氏淋巴瘤和恶性间质瘤各2例,神经鞘瘤平滑肌母细胞瘤和类癌各1例.患者早期症状不明显,中晚期常有消化道出血、腹痛、肠梗阻、腹部肿块和贫血.认为原发性空、回肠肿瘤的病程早期诊断困难,对于有消化道出血、腹痛、肠梗阻、贫血和腹部肿块的患者,小肠钡餐、腹部CT以及DSA检查相结合可提高诊断的阳性率.

    作者:金涛;李军成;吴浩荣;沈钧康;郭盛仁;金一琦 刊期: 2005年第05期

  • 维思通口服液治疗精神分裂症56例疗效观察

    以维思通口服液治疗精神分裂症患者56例,疗程8周,采用PANSS、BPRS和TESS量表观察疗效和副反应.结果:维思通口服液治疗精神分裂症的总有效率达83.93%,PANNS评分和BPRS评分治疗前后相比有显著性差异(P<0.05),不良反应有口干、失眠、EPS等.认为维思通口服液是一种安全有效的抗精神病药物.

    作者:唐英 刊期: 2005年第05期

  • 腰部蛛网膜下腔持续引流的临床应用体会

    腰部蛛网膜下腔持续引流是临床上常用的治疗手段之一.我科于2002年1月至2004年12月间采用腰部蛛网膜下腔持续引流辅助治疗破裂动脉瘤、颅内感染及脑脊液漏共136例,取得了令人满意的疗效.现报告如下.

    作者:徐颖;沈梅芬;周岱 刊期: 2005年第05期

  • 纺织行业噪声对作业工人健康影响的调查

    目的探讨纺织行业噪声对该职业人群健康的影响.方法选择225名接触噪声作业工人(接触组)与225名非噪声作业人员(对照组)进行流行病学调查.结果 (1)接触噪声作业工人可有类神经症,其中耳鸣(P<0.01)和记忆力下降(P<0.05)主诉率较对照组高.(2)接触组高血压和心电图异常的检出率较对照组高(P<0.05).(3)接触组高频、语频听损的检出率也较对照组高(P<0.01).而且在接触组中1年~工龄组与5年~工龄组的高频听损存在非常显著的差异(P<0.01),1年~工龄组与10年~工龄组的高频听损有显著性差异(P<0.05),5年~工龄组与10年~工龄组间存在显著性差异(P<0.05).结论纺织行业噪声对作业工人的听觉、心血管和神经系统均有不同程度的影响.

    作者:赵燕芳;傅雪;姜岳明;姚建华 刊期: 2005年第05期

  • 2型糖尿病患者血和尿中t-PA、PAI-1的变化及其临床意义

    目的探讨2型糖尿病患者血和尿t-PA及PAI-1浓度的变化,了解它们在糖尿病血管病变中的变化及其临床意义.方法根据尿白蛋白排泄率(UAER)将37例2型糖尿病患者分为两组:正常白蛋白尿组(DM)17例,微量白蛋白尿组(DN)20例.另取正常健康者20例作为对照组.用ELISA法分别检测3组的血浆和尿液t-PA及PAI-1浓度.结果尿液中t-PA浓度在正常白蛋白尿组低于正常对照组(P<0.05);微量白蛋白尿组明显低于正常对照组(P<0.01).结论尿液中t-PA浓度较血浆浓度更能反映中糖尿病的肾脏血管病变.

    作者:沈蕾;卢国元;谢燕;王兆钺 刊期: 2005年第05期

  • 猪到猴异种胸腺修饰对受体心脏移植物存活时间及外周血T细胞的影响

    目的通过猪-猴心脏移植模型来探讨异种胸腺修饰对移植物存活时间的影响,并在此基础上,研究异种器官移植中T细胞的作用及诱导异种T细胞中枢性耐受的可能性.方法将受体(中国猕猴)分为4组:(1)空白组:对受体不作任何处理.(2)照射组:于心脏移植前30 d(d30),接受60Co 3Gy全身剂量,余同空白组.(3)胸腺注射组:于心脏移植前21 d(d21),胸腺内注射供体脾细胞(5×107),余同空白组.(4)照射+胸腺注射组(8只):于心脏移植前28 d(d28),即1.5月龄时接受60Co 3Gy全身剂量,心脏移植前21 d(d21),胸腺内注射供体脾细胞(5×107),余同空白组.结果照射+胸注组存活期较空白组明显延长(P<0.01),照射+胸注组存活期较胸注组和照射组延长(P<0.05).CD4+、CD8+与同期未照射的另两组相比有显著性差别(P<0.01),但照射的两组同期相比差别不大(P>0.05).照射+胸腺注射组于手术当天MLR刺激效应较空白组、照射组下降明显(P<0.01),同时单独胸腺注射组与照射组、照射+胸腺注射组相比,刺激效应也有所下降(P<0.05).结论 (1)异种胸腺修饰对CD4+、CD8+T细胞亚群的生成与分布情况并无影响,但其针对异种抗原反应能力有所下降.(2)异种胸腺注射可支持T细胞的重建和诱导供体特异性的T细胞功能抑制或耐受,并有效地延长供心存活时间.

    作者:瞿冀琛;沈振亚;姜格宁;丁嘉安;倪斌;张治;何建明;余云生;叶文学 刊期: 2005年第05期

  • 肺曲菌病外科治疗13例临床分析

    分析13例经外科手术治疗、病理检查确诊的肺曲菌病患者的临床资料.结果:术前诊断正确率为69.2%.所有患者均顺利完成手术,未发生严重并发症,预后良好.认为本病术前不易确诊,漏、误诊率较高;对诊断明确者应及早手术治疗;病灶局限者若无明显手术禁忌,亦应积极手术;术式以肺叶切除为主.

    作者:陈浩;何靖康;倪斌;马海涛 刊期: 2005年第05期

  • 降钙素原测定在儿童呼吸道感染中的应用分析

    将198例呼吸道感染患者被随机分配到对照组(n=98)和血清降钙素前体(PCT)组(n=100).对照组按常规治疗方法进行治疗,PCT组通过检测血清PCT浓度来决定治疗方案.结果:198例患儿临床特征相似,对照组88%应用了抗生素,而PCT组仅有43%应用了抗生素,且全部患儿预后良好.认为降钙素原在儿童呼吸道感染治疗中的指导作用可以减少抗生素的使用且不影响预后.

    作者:黄建萍;童晓 刊期: 2005年第05期

  • 海人酸颞叶癫痫模型的建立及其行为与病理学改变

    目的探讨脑内局部给药建立颞叶癫痫(EP)模型方法及其行为与病理学改变.方法通过立体定向术向大鼠海马局部注射海人酸(KA)而建立颞叶EP模型,观察其行为学、脑电图和病理学改变情况.结果 KA注入海马后大鼠表现出凝视、湿狗样抖动、口的咀嚼运动、点头、肢体阵挛等表现.随着时间的推移,大鼠主要表现为阵发性旋转,并身体立起、向上窜跳、跌倒、四肢抽搐,约10 h后发作停止,逐渐恢复到正常大鼠状态,以后每周发作1~2次,主要为Ⅱ~Ⅳ级.结论大鼠脑内局部注入KA后EP发作明显,其行为症状、海马病理改变类似人类颞叶EP,可作为很好的研究颞叶EP的工具.

    作者:汤继宏;包仕尧;顾琴;胡斯明 刊期: 2005年第05期

  • 吻合器痔上粘膜环切术治疗重度混合痔的方法改进

    目的观察改良吻合器痔上粘膜环切术(Procedure for Prolapse and Hemorrhoids,PPH)治疗重度混合痔的有效性.方法回顾性分析近3年来该院应用吻合器痔上粘膜环切术治疗重度混合痔54例的术式演变与临床疗效.结果改良PPH不仅创伤小、疼痛轻、恢复快,且对控制出血、防止脱垂以及减少并发症的作用显著.患者满意率达96.3%.结论改良的吻合器痔上粘膜环切术可有效治疗重度混合痔.

    作者:邢春根;李伟;吕孝东;蒋国勤;王浩炜 刊期: 2005年第05期

  • 398例未婚人工流产妇女的心理状态调查分析

    采用症状自评量表SCL-90对398例接受传统的人工流产或静脉麻醉下行人工流产的未婚妇女进行测评.结果:未婚妇女与全国常模相比,普遍存在较多的心理负担(P<0.05),但选择静脉麻醉下的人工流产组的心理状态明显好于传统的人工流产组(P<0.01).认为对未婚育龄妇女应有针对性地进行性行为及性健康方面的教育,以降低未婚妊娠的发生率,提高妇女的心理健康水平.

    作者:王利明 刊期: 2005年第05期

  • 18F-FDG SPECT符合线路肿瘤显像检查前后患者的观察与管理

    18氟-脱氧葡萄糖(18F-FDG)PET(正电子发射断层)检查对肿瘤的诊断、鉴别诊断及分期等有重要的临床价值,但其设备和检查费用昂贵.而在SPECT基础上发展起来的符合线路ECT除可进行常规SPECT检查外,还可进行18F-FDG符合显像1.

    作者:吴星红;尹立杰;张玮 刊期: 2005年第05期

  • 氧氟沙星不良反应观察

    氧氟沙星是第三代喹诺酮类抗菌药,对革兰阳性菌、阴性菌群和厌氧菌的消化链球菌属均有很高的抗菌活性,广泛应用于临床各种感染症.为了减少或避免其不良反应的发生,指导临床安全用药,笔者对我院1995年9月至2003年9月使用该药出现的不良反应进行了观察.现报告如下.

    作者:沈玉兰 刊期: 2005年第05期

  • 原发性心脏肿瘤引起肺动脉高压及相关肺部表现分析

    对44例原发性心脏肿瘤根据是否合并肺动脉高压分成两组,比较这两组在肺部的临床表现和影像学特征.结果:两组在肺部的症状、体征和X线表现方面存在明显的差异(P<0.05).结果提示:原发性心脏肿瘤尤其左心肿瘤可引起肺动脉高压,出现相应的肺部临床表现和影像学表现,易与呼吸系统疾病相混淆,对怀疑心脏肿瘤的患者应尽早作心脏超声心动图以明确诊断.

    作者:侯梅凤;陆存林;徐德民;赵强 刊期: 2005年第05期

  • 脊髓运动神经元的形态学分析

    目的通过不同培养时间细胞的存活率和形态学特征了解体外培养的脊髓神经元的生长规律,以便选择施加干预因素及观测结果的佳时间.方法在倒置显微镜(×250)和高倍镜视野(×400)下,利用图像分析系统测量培养1 d、3 d、5 d、7 d、9 d CHAT阳性细胞的轴突长度、树突数目、树突总长度、树突分叉点数目和胞体面积5个形态学指标.结果存活率在第3~5 d维持在50%左右.细胞突起长度、突起数目、胞体面积前3 d增长幅度快,第4~7 d各项指标缓慢上升,生长稳定,7 d后各项指标快速下降.结论原代培养的脊髓运动神经元的存活率、突起长度、分叉点数目和胞体面积等指标可以反映细胞的生长状况,适宜于实验中各项指标的观测.

    作者:赵合庆;杨晓玲;李文 刊期: 2005年第05期

苏州大学学报(医学版)杂志

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主办:苏州大学