学术投稿

四种提取重楼根茎总RNA方法的研究

赵爽;潘少丽

关键词:重楼, 根茎, RNA提取, 改良Trizol法
摘要:目的 探索重楼根茎总RNA提取的佳方法.方法 以重楼根茎为材料,比较研究了4种不同的RNA抽提方法如改良Trizol法、异硫氰酸胍法、改良CTAB法和SDS法提取总RNA的效果.结果 改良Trizol法提取的重楼根茎总RNA的电泳条带清晰,RNA完整性好,A260/A280比值在1.8 ~2.0之间,A260/A230比值在2.0 ~2.3之间,能够满足一般的分子操作要求;但异硫氰酸胍法、改良CTAB法和SDS法所提取的根茎总RNA有明显的DNA或蛋白质污染,并且均有一定程度的降解.结论 改良Trizol法方便、快捷、高效,可有效地从富含多酚和多糖的重楼根茎中分离出高质量RNA,为重楼进行基因克隆、cDNA文库构建等分子生物学研究奠定基础.
时珍国医国药杂志相关文献
  • 人体十二经脉井原穴和俞募穴的相关性研究

    目的 利用穴位的电导性,观察井原穴、俞募穴4种穴位间的相关性.方法 选取健康在校大学生30人,男女各15人,在相同的环境下、同一时间段进行4种穴位的电导检测.结果 4种穴位0<r<1,提示:井原穴和腹募穴呈正相关.结论 井原穴与俞募穴之气是通过气街相互贯通的,井原穴的电导值可反映俞募穴的电导值趋势,为课题穴位的选取提供了科学依据.

    作者:杨宁;欧阳育树;原嘉民;刘赟;徐福平;杨志敏 刊期: 2013年第06期

  • 灰毡毛忍冬中五环三萜类化合物的抗氧化活性研究

    目的 探讨灰毡毛忍冬中23个五环三萜类化合物的体外抗氧化能力.方法 采用DPPH法和Fenton法对本课题组前期得到的23个五环三萜及其皂苷进行体外抗氧化活性评价,以Vc作阳性对照.结果 23个五环三萜类化合物中3个含绿原酸取代基的皂苷(绿原酸酯皂苷)对自由基有较强的清除作用,且对羟基自由基的清除作用显著强于VC和绿原酸.结论 灰毡毛忍冬绿原酸酯皂苷可作为天然抗氧化物质资源,具有潜在的开发利用价值.

    作者:管福琴;刘敏;单宇;陈雨;赵友谊;王鸣;孙浩;冯煦 刊期: 2013年第06期

  • 人参和有氧运动对大鼠创面修复TNF-α和TGF-β1的影响

    目的 观察中药人参和有氧运动大鼠创面修复过程TNF-α和TGF-β1的影响,探讨其对创面愈合过程中可能的影响机制.方法 大鼠随机分为三组:模型对照组(A)、人参+有氧运动组(B),人参+安静组(C).采用付氏改良造模方法,在动物造模治疗后第5、12天进行断尾取血,ELISA法测TNF-α、TGF-β1.结果 治疗后5d:A组的TNF-α含量高,与B、C组比较,具有显著性差异(P<0.01),提示A组仍然处于高度的免疫应激状态;在TGF-β1方面,C组含量较高,与其它各组比较,有显著性差异(P<0.01),提示人参对创面愈合有促进作用.在治疗后第12天,B组的TGF-β1升高幅度明显,与A、C组比较,分别具有显著性差异(P<0.01),提示有氧运动促进创面修复后期成纤维细胞的增殖方面作用明显.结论 人参和适量有氧运动干预能改善大鼠创面免疫能力低下状态,提高其免疫应激能力和免疫功能,均能促进成纤维细胞的增殖,其中有氧运动在大鼠创面修复后期作用尤为显著,提示后期进行适当的有氧运动有助于创面的修复.

    作者:张晓辉;黄治官;谢单洁;李裕和 刊期: 2013年第06期

  • 青蒿琥酯纳米脂质体抗肿瘤作用的特点

    目前肿瘤已经成为威胁人类健康的主要因素之一,寻找新的治疗肿瘤的药物成为人们研究的热点.随着研究的不断深入,发现青蒿素及其衍生物除具有抗疟作用外,还具有抗肿瘤作用,但其半衰期短,抑制了它的用药效果.纳米脂质体具有靶向性和稳定性,它作为抗肿瘤药物的载体可以延长药物的血液循环时间,增加药物的利用率.青蒿琥酯纳米脂质体结合了青蒿琥酯的优点和纳米脂质体的优点,但它能否成为新一代抗肿瘤药物并应用于临床还有待研究.

    作者:赵春霞;沈雪松;金美华 刊期: 2013年第06期

  • 中药止痛贴对骨癌痛大鼠脊髓背角MAPK信号转导通路影响的实验性研究

    目的 观察中药止痛贴对骨癌痛大鼠痛行为及脊髓背角神经节p-ERK和p-p38表达的影响.方法 108只180~ 220 9雌性Wistar大鼠随机分为3组,分别为空白对照组(Con组,n=24)、假手术组(Sham组,n=24)、骨癌痛模型组(Ca组,n=60),3组分别于手术前2d、术后每隔4日测定机械痛阈(MWT)和热痛阈(TWL).于术后7天确认造模成功后,将成功的模型鼠随机分为两组,即模型组(Ca组,n=28)和中药止痛贴组(CM组,n=25).术后7d,14 d和21 d各组处死大鼠(n≥8),取大鼠脊髓腰椎L4-6膨大处,用免疫组化方法测定脊髓背角p-ERK和p-p38的变化.结果 脊髓背角神经pERK和p-p38表达:Ca组阳性神经元数目增加,术后7,14,21 d与Con组和Sham组比较有统计学差异(P<0.05);CM组于术后14 d、术后21 d与Con组和Sham组统计学差异逐渐缩小(P>0.05).结论 中药止痛贴对骨癌痛有比较明显的镇痛作用,其对脊髓背角c-fos的影响,可能是通过降低脊髓背角pERK和-p38的表达而产生的,即通过MAPK-CREB信号转导通路完成的.

    作者:姜涌;张文学;史振广;王文萍 刊期: 2013年第06期

  • 瓦楞子膏治疗小面积烧伤的临床观察

    目的 观察瓦楞子膏治疗小面积烧伤的临床治疗效果.方法 小面积烧伤患者72例,分治疗组42例,对照组30例.治疗组清创后用瓦楞子膏包扎治疗,对照组清创后用传统油纱包扎治疗.结果 该院中医科应用瓦楞子膏治疗43例小面积烧伤患者,通过较系统观察发现,烧伤早期因创面疼痛、烧伤后期因创面刺瘁而哭闹不安的患儿,经涂布药膏后能安静入睡,成人创面疼痛缓解,大约30分钟后疼痛消失;因烧伤创面感染发烧的患者,涂布药膏后体温下降较快,毒血症得到改善;治疗中无创面继发感染(细菌培养均阴性)及加深现象.浅Ⅱ度烧伤平均治愈天数约6~8d,深Ⅱ度烧伤平均治愈天数约12~ 18 d.结论 瓦楞子膏治疗小面积烧伤总有效率达98%以上,止痛、抗感染、促进创面上皮化功能的作用,明显优于对照组,操作方便,经济实用,患者易于接受,值得在临床上进一步推广应用.

    作者:刘永萍;蒋建纲 刊期: 2013年第06期

  • 乳房按摩联合通乳颗粒治疗产后缺乳的临床研究

    目的 探讨乳房按摩联合通乳颗粒治疗产后缺乳的临床疗效.方法 将100例产后乳汁分泌过少的初产妇随机分为两组,均给予常规母乳喂养.观察组50例用乳房按摩联合通乳颗粒治疗,对照组仅予通乳颗粒治疗,比较两组患者的乳汁分泌量及乳房胀痛情况.结果 观察组的乳汁分泌量与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);观察组对乳房胀痛的缓解情况与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论 乳房按摩联合通乳颗粒能够增加乳汁分泌量、缓解乳房胀痛,是治疗产后缺乳的一种有效方法.

    作者:胡静;王冬芹 刊期: 2013年第06期

  • 中西医结合综合治疗膝关节粘连24例疗效观察

    目的 探讨多种方法联合治疗膝关节粘连的方法和疗效.方法 24例膝关节粘连患者,年龄20 ~ 58岁.采用关节镜下关节松解,CPM机功能锻炼、中药熏洗及针灸治疗综合治疗膝关节粘连.结果 随访时间为4个月~10个月,平均6个月.治疗后膝关节活动度平均活动度108°,平均增加71°.根据judet的疗效评定标准:优(屈膝>100°)13例,良(80~ 100°)7例,一般(50 ~80°)4例.无复发粘连者.结论多种治疗方法联合治疗膝关节粘连具有创伤小、术后疼痛轻、并发症少、康复快等优点,且治疗效果满意,值得临床推广.

    作者:秦练;陈崎;周赤兵 刊期: 2013年第06期

  • 羚羊角不同部位显微鉴定的研究

    目的 探讨羚羊角药材及其不同部位的粉末结构.方法 采用光学显微镜,观察羚羊角药材不同样品的显微结构特征.结果 髓管为羚羊角粉末的鉴定依据;髓腔轴长比作为羚羊角尖部与基部的区分特征;骨碎片作为羚羊角塞的鉴别特征.结论 该方法适用于羚羊角药材及其不同部位的鉴别.

    作者:刘萌萌;李峰 刊期: 2013年第06期

  • 复方血栓通胶囊联合弱剂量光动力治疗中心性浆液性脉络膜视网膜病变疗效观察

    目的 观察口服复方血栓通胶囊联合弱剂量光动力治疗中心性浆液性脉络膜视网膜病变的临床疗效.方法 回顾分析经临床视网膜荧光血管造影(FFA)、光学相干断层扫描(OCT)检查确诊的中心性浆液性脉络膜视网膜病变的患者,125例患者125只眼,随机分治疗组65例65只眼和对照组60例60只眼,,治疗组给予口服复方血栓通胶囊,每日3次,每次3粒,同时给予1/2剂量光动力治疗;激光后避光48 h.对照组仅给予维生素C、曲克芦丁、银杏叶片等常规治疗.随访1年以上.结果 治疗组65例65只眼,有效率为98.45%对照组60例60只眼,有效率78.33%;治疗组随访复发率为0,而对照组复发率为21.67%.结论 复方血栓通胶囊联合弱剂量光动力治疗中心性浆液性脉络膜视网膜病变浆安全有效,有效降低复发率.

    作者:彭志华;金小琴;吴岚 刊期: 2013年第06期

  • 得力生注射液在大鼠体内的药动学研究

    目的 研究得力生注射液中华蟾酥毒基和酯蟾毒配基在大鼠体内的的药动学特征.方法 大鼠静脉注射得力生注射液后,于不同时间点采取静脉血,高效液相色谱法测定血浆中华蟾酥毒基和酯蟾毒配基的含量,采用DAS 2.1.1药动学软件,自动拟合药代动力学房室模型,计算药代动力学参数.结果 华蟾酥毒基在5~1 000 μg.L-1范围内线性关系良好(r =0.999 6,n=7);酯蟾毒配基在10~3000 μg.L-1范围内线性关系良好(r =0.999 7,n=7);日内和日间RSD均小于8%,平均萃取回收率大于80%;华蟾酥毒基和酯蟾毒配基的分布半衰期t1/2α分别为0.072 h和0.507 h;中心室分布容积V1均数分别为1.286 L.kg-1和1.427 L·kg-1;华蟾酥毒基、酯蟾毒配基在大鼠体内的血药浓度-时间曲线符合二室模型.结论 该法准确、简便、灵敏,可用于得力生注射液在大鼠体内药动学的研究.

    作者:黄毅岚;赖丹;叶云 刊期: 2013年第06期

  • 生脉饮中五味子乙素和人参皂苷的鉴定分析与质量控制

    目的 使用高效液相色谱法(HPLC)检测生脉饮中主要活性成分五味子乙素和人参皂苷(人参皂苷Re、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1)的含量,探讨生脉饮制剂的活性成分测定和质量控制方法.方法 自制3个批次的生脉饮样品溶液及阴性对照溶液.按HPLC法进行检测,绘制上述几种活性成分的色谱图,测定样品溶液五味子乙素和人参皂苷含量,并进行精密度、稳定性和重复性试验.结果 HPLC图谱各成分色谱峰清晰,各活性成分线性关系良好,精密度、稳定性、重复性之相对标准偏差(RSD)均小于5.0%.结论 使用高效液相色谱法检测生脉饮中五味子乙素和人参皂苷的含量具有灵敏度高、重复性好、操作简便等优点,可用于生脉饮制剂的活性成分测定和质量控制.

    作者:钱梅 刊期: 2013年第06期

  • 高血压病患者中医证型与脑血液循环动力学参数的相关性研究

    目的 分析高血压患者中医证型与脑血液循环动力学参数的相关性,探讨脑血液循环动力学参数对中医辨证可行性.方法 回顾自2006年6月至2011年12月以来,入我院治疗的高血压病患者的资料,如高血压患者中医证型,及脑血液循环动力学参数的各项指标如经枕窗检测椎动脉(VA)、基底动脉(BA),经两侧颞窗探测大脑中动脉(MCA)、大脑后动脉(PCA)、大脑前动脉(ACA),血流参数包括平均流速(Vm)、脉冲指数(PI)等,并观察频普形态.采用卡方检验;单因素非条件Logistic回归分析.分析高血压患者中医证型与脑血液循环动力学参数的相关性.结果 通过logistic分析,肝火旺盛证、痰湿壅盛证与脉冲指数(PI)正相关(b>O,P<0.05),阴虚阳亢证、肝火旺盛证与平均流速(Vm)正相关(b>0,P<0.05),痰湿壅盛证、阴阳俱虚与平均流速(Vm)负相关(b<0,P<0.05),阴阳俱虚与脉冲指数(PI)呈负相关(b<0,P<0.05).结论 可知随着脑动脉平均流速、脉冲指数的减少,阴阳俱虚证的可能性大,脑动脉平均流速减少、脉冲指数的增加,痰湿壅盛证的可能性大;随着脉冲指数、平均流速的上升,肝火旺盛证可能大;随着平均血流的升高,脉冲指数可能大.

    作者:王莉娅;张婕;毛袁心;吴晓红;刘春苏;李凤昔 刊期: 2013年第06期

  • 叠鞘石斛与石斛药典收载品种脂溶性成分GC-MS对比研究

    目的 运用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法研究叠鞘石斛与石斛药典收载品种的脂溶性成分,为叠鞘石斛的开发利用提供参考.方法 采用有机溶剂法提取脂溶性成分,运用GC-MS进行分离测定,结合质谱库检索技术对化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量.结果 初步鉴定出95种化合物,其中分别从叠鞘石斛、金钗石斛、鼓槌石斛、流苏石斛中分析鉴定出33、55、37、36种化合物,四者脂溶性成分在组成和相对含量上均有一定差异.结论 首次采用GC-MS联用技术对叠鞘石斛与药典收载品种金钗石斛、鼓槌石斛、流苏石斛进行对比研究,为叠鞘石斛的进一步开发利用提供了一定的理论基础.

    作者:罗方利;郭力;许莉;陈佳江;韦练;张廷模;韩瑜 刊期: 2013年第06期

  • 宁心红杞胶囊有效部位指纹图谱归属分析

    目的 分析宁心红杞胶囊活性部位的特征峰在复方全方及单味药材中的归属.方法 采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版对相同实验条件下提取的复方、具抗颗粒细胞凋亡活性的有效部位及其组方各单味药材的HPLC图谱进行对比分析.结果 宁心红杞胶囊复方、各有效部位及各单味药材有较好的相关性,复方中含有梓醇、芦丁、金丝桃苷和槲皮素等化合物;复方活性部位色谱峰在各单味药材中都有分布,样品16色谱峰主要来源于熟地、枸杞子、山楂;样品17色谱峰主要来源于熟地、枸杞子、山楂;样品38、39、40色谱峰较多,成分复杂,主要来源于山楂和红花两味药材.结论 复方各部位的指纹图谱为阐明各部位的药效物质基础提供科学依据,为下一步的临床应用以及新药的开发提供参考.

    作者:汝文文;韦敏;吕晔;勇维 刊期: 2013年第06期

  • 热毒宁注射液治疗婴幼儿毛细支气管炎74例疗效观察

    目的 观察热毒宁注射液治疗婴幼儿毛细支气管炎的疗效.方法 将145例住院治疗毛细支气管炎患儿随机分成观察组74例和对照组71例,两组均常规给予利巴韦林、α-干扰素抗感染,观察组加用热毒宁注射液0.6ml/kg,一天一次,治疗7天.观察两组患儿症状、体征恢复时间及住院时间.结果 观察组在热退时间、咳嗽消失时间、喘憋缓解时间、肺部罗音消失时间及住院时间均明显缩短,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).观察组治愈率及总有效率均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 热毒宁注射液在治疗婴幼儿毛细支气管炎可缩短病程,提高疗效,且副作用没有明显增加,值得在临床推广.

    作者:吴风栋;洪国华;陈坚强 刊期: 2013年第06期

  • 常见抗菌中草药对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌作用

    目的 探讨金银花、黄连、黄芩等10种常见中草药对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑菌作用.方法 从临床标本中分离MRSA,采用水提法制备抗菌中草药无菌药液,通过打孔法测定中草药提取液对MRSA的抑菌圈大小,通过两倍稀释法测定中草药提取液对MRSA的小抑菌浓度(MIC)和小杀菌浓度(MBC).结果 10种常见中草药对耐MRSA均有不同程度的抑制作用,以黄连的抑菌效果好,其次依次为金银花、大黄、黄芩、马齿苋、紫草、苦参、射干、黄柏、艾叶.结论 抗菌中草药对MRSA临床株具有一定的抗菌作用,有望成为抗MRSA的候选药物.

    作者:尹长江;路国兵;赵长祺;王磊;杨坤宝;于海龙;宋鸿儒 刊期: 2013年第06期

  • 近五年菝葜科植物化学分离工作研究进展报告

    通过查阅近五年国内外菝葜科植物化学成分研究的相关文献,并对其进行分析整理和归纳,以期为该资源的开发利用提供依据.

    作者:黄慧莲;刘丽莎;邵峰;任刚;林涛;刘荣华 刊期: 2013年第06期

  • 瓜蒌薤白白酒桂枝汤治疗不稳定型心绞痛的疗效观察

    目的 观察瓜蒌薤白白酒桂枝汤治疗不稳定型心绞痛的临床疗效.方法 将60例不稳定型心绞痛患者随机分为对照组和治疗组各30例,对照组采用常规治疗方法,治疗组在常规治疗基础上加用瓜蒌薤白白酒桂枝汤,两组疗程均为1月.结果 治疗组总有效率为96.67%,对照组总有效率为80.00%,治疗组优于对照组(P<0.05).结论瓜蒌薤白白酒桂枝汤对不稳定型心绞痛ST段偏移有积极明显的影响作用.

    作者:阮艳梅 刊期: 2013年第06期

  • 四种提取重楼根茎总RNA方法的研究

    目的 探索重楼根茎总RNA提取的佳方法.方法 以重楼根茎为材料,比较研究了4种不同的RNA抽提方法如改良Trizol法、异硫氰酸胍法、改良CTAB法和SDS法提取总RNA的效果.结果 改良Trizol法提取的重楼根茎总RNA的电泳条带清晰,RNA完整性好,A260/A280比值在1.8 ~2.0之间,A260/A230比值在2.0 ~2.3之间,能够满足一般的分子操作要求;但异硫氰酸胍法、改良CTAB法和SDS法所提取的根茎总RNA有明显的DNA或蛋白质污染,并且均有一定程度的降解.结论 改良Trizol法方便、快捷、高效,可有效地从富含多酚和多糖的重楼根茎中分离出高质量RNA,为重楼进行基因克隆、cDNA文库构建等分子生物学研究奠定基础.

    作者:赵爽;潘少丽 刊期: 2013年第06期

时珍国医国药杂志

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