学术投稿

生物碱类中药组分荧光标记方法的建立及评价

刘春叶;苗延青;尤静;张雪娇

关键词:荧光偏振, 荧光各向异性, 异硫氰酸荧光素, 盐酸麻黄碱
摘要:目的 建立生物碱类中药组分的荧光标记方法,并对标记效果进行评价.方法 以异硫氰酸荧光素和盐酸麻黄碱组成研究体系.使用带有偏振镜的荧光分光光度计测量出荧光各向异性值,以FITC荧光各项异性值对麻黄碱浓度的对数作图,得到荧光偏振曲线,计算出样品的标记比,进行标记效果的评价.结果 生物碱类中药组分的较优标记条件为:100mmol·L-1,pH 9.0的碳酸盐缓冲溶液中,盐酸麻黄碱溶液浓度在1×10-6~1 ×10-3mol·L-1,FITC浓度0.5 mmol·L-1,室温避光反应、过夜.绘制荧光偏振曲线,计算得到rB=0.327.通过测量计算可得盐酸麻黄碱浓度为2.0×10-5mol·L-1、FITC浓度为3×10-5 mol·L-1时标记液的标记比为1.23,与理论符合.结论 建立了生物碱类中药组分的荧光标记方法,基于荧光各向异性测量标记比的新方法具有简便快速和灵敏度高的特点,可用于标记效果的评价.
时珍国医国药杂志相关文献
  • 四申丸对溃疡性结肠炎小鼠外周血CD40,CD40L的调节作用

    目的 评价四神丸治疗小鼠结肠炎的疗效并探讨其对外周血CD40/CD40L的调节作用.方法 昆明种小鼠60只,TNBS/乙醇法复制溃疡性结肠炎动物模型,随机分成正常组、四神丸高、中、低剂量组,柳氮磺吡啶(SASP)对照组,给药10d,观察小鼠结肠重量指数、病理变化及病理损伤评分以评价四神丸疗效,同时采用流式细胞术法检测结肠炎小鼠外周血CD40/CD40L的表达情况.结果 模型组小鼠结肠重量指数明显高于正常组,并具有统计学意义(P<0.05),同时,各治疗小鼠结肠重量指数明显降低(P 0.05或P<0.01),而且模型组小鼠结肠病理损伤评分明显高于正常组(P<0.01),同时除高剂量组外,各治疗组小鼠结肠病理损伤评分明显低于模型组,且均有显著性统计学意义(P<0.05或P<0.01),治疗组镜下可见黏膜上皮完整或少量受损,炎细胞散在性分布,淋巴滤泡增生,基底层可见纤维结缔组织增生,溃疡修复.在CD40/CD40L表达方面,与正常组比较,模型组小鼠外周血细胞CD40分子表达明显偏高(P<0.05),而CD40L分子表达明显偏低(P<0.01),并具有统计学意义.各治疗组可见CD40分子表达较模型组明显降低(P<0.05或P<0.01),而CD40L分子表达则明显偏高并具有统计学意义(P<0.01).结论 四神丸可有效缓解结肠炎小鼠结肠损伤其作用途径可能与调节外周血CD40/CD40L信号有关.

    作者:黄小英;赵海梅;管咏梅;万盼婷;童文婷;刘端勇 刊期: 2011年第11期

  • 血液中痕量乙醇代谢物:乙基葡萄糖醛酸苷的气相色谱质谱法测定

    目的 建立气相色谱质谱( GC - MS)检测人体血液中乙醇代谢产物乙基葡萄糖醛酸苷(EtG)的方法.方法 1ml乙二胺四乙酸二钠( EDTA - Na2)抗凝全血离心后取上层血浆,采用高氯酸去蛋白,并经氨基固相萃取小柱富集净化,提取物经BSTFA +TMCS(99∶1,v/v)衍生化,采用气相色谱-质谱法检测,总离子和选择离子模式(SIM)同时扫描,内标法定量分析.结果 样品在0.2~4.0 mg/L范围内线性关系良好(0.998 8),检出限为0.17 mg/L,绝对回收率位于75.3%~85.6%之间,相对标准偏差(RSD)为5.6% ~7.6%.结论 该方法灵敏度高,特异性好,分析结果准确可靠,适用于法医学鉴定和临床检验中EtG的分析测定.

    作者:于天晓;李青;李剑波;丁世家 刊期: 2011年第11期

  • 次乌头碱对乳大鼠原代培养心肌细胞Ca2+及Cx43表达的影响

    目的 观察次乌头碱对原代培养的心肌细胞内Ca2+浓度及缝隙连接蛋白Cx43表达的影响.方法 体外培养乳大鼠心肌细胞,采用流式细胞技术观察30,60,120 μmol/L的次乌头碱在15,30,60 min对心肌细胞内Ca2+浓度变化的影响,并应用Western blot技术检测次乌头碱作用心肌细胞15 min后的细胞缝隙连接蛋白Cx43的表达水平.结果 次乌头碱能提高心肌细胞[ Ca2+]i,这种作用在给药后15 min时显著,随着作用时间的延长,细胞[Ca2+]i下降;次乌头碱作用心肌细胞15 min能降低心肌细胞Cx43的表达量,但无显著性差异.结论 次乌头碱能促进心肌细胞内Ca2+增高,进而导致细胞Cx43表达降低,增加心肌细胞发生心律失常的易感性.

    作者:李志勇;谭鹏;孙建宁;刘永刚;李彦文 刊期: 2011年第11期

  • 红凤菜中黄酮类化合物的高效液相色谱与多级质谱联用分析

    目的 检测红凤菜中黄酮类化学成分.方法 采用高效液相色谱与多级质谱联用法( HPLC - MSn)对黄酮成分进行鉴定分析.结果 初步鉴定了5个黄酮类物质,其中槲皮素-3 -O -β - D-吡喃葡萄糖和槲皮素-3 -0 -鼠李糖苷未见文献报道.结论 采用HPLC - MSn可以快速鉴定红凤菜黄酮类化合物.

    作者:吕寒;裴咏萍;李维林;徐德然 刊期: 2011年第11期

  • 艾灸预刺激对AD大鼠细胞周期调节因子CyclinA,p21/cip的影响

    目的 通过观察艾灸预刺激对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠细胞周期调节因子CyclinA、p21/cip的影响,以探讨艾灸防治AD的作用机理.方法 将SD大鼠随机分为4组,即正常组、假手术组、模型组、预艾灸组,每组10只,以双侧海马注入Aβ1-42制作AD大鼠模型,造模前预艾灸组采用艾条温和灸“百会”、“肾俞”穴,采用免疫组化法测定大鼠海马区CyclinA、p21/cip的阳性细胞数.结果 通过3个疗程的预艾灸治疗,预艾灸组大鼠海马区CylinA阳性细胞数较模型组有显著降低(P<0.01),p21/cip阳性细胞数有显著增强(P<0.01).结论 艾灸预刺激对异常表达的细胞周期相关蛋白有一定的调节作用,从而减少AD的病理改变或相关的细胞凋亡,达到防治AD的目的.

    作者:刘静;杜艳军;李婧;刘若兰;王晓兰;孙国杰 刊期: 2011年第11期

  • 家蝇免疫血淋巴抗HeLa肿瘤细胞蛋白的筛选及纯化

    目的 从家蝇3龄幼虫血淋巴筛选具有抗肿瘤细胞HeLa(宫颈癌细胞)的蛋白.方法 采用固相萃取、反相高效液相色谱分离、四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法,从热诱导家蝇3龄幼虫免疫血淋巴筛选抗肿瘤多肽.结果 经10%~50%乙腈洗脱C18固相萃取柱,获得mp1、mp2、mp3、mp4、mp5等5个具有抗HeLa的活性组分,以40%乙腈萃取组分活性强达38%,而顺铂抑制率为57%,经反相高效液相色谱分析,该固相萃取活性组分由2个片段组成,分别为出现在280nm波长下24 min和29 min,对HeLa具有抑制作用,与顺铂的抗肿瘤活性相接近.结论 家蝇3龄幼虫血淋巴具有抗HeLa的mp1、mp2、mp3、mp4、mp5 5个组分,MP4活性强,由2个分子量为16KDa成酸性的多肽片段组成.

    作者:魏洪;吴建伟;王硕石;国果;付萍 刊期: 2011年第11期

  • 中医英语教学中的词汇教学

    中医英语教学是促进中医药对外交流的一个重要手段,而中医英语词汇教学又是中医英语教学的一个重心.中医英语是一门新兴学科,处于起步阶段,其教学方法尚未完善.然而大学专业英语的教学方法已相对成熟和完善.文章将大学专业英语教学和中医英语教学联系起来,分析了中医英语词汇教学的现状,旨在探讨中医英语教学中的词汇教学.

    作者:张斌;燕燕 刊期: 2011年第11期

  • 急性期电针对面神经损伤模型兔的影响

    目的 探讨急性期电针对面神经损伤的影响.方法 将80 ~ 85日龄日本大耳白免面神经用特制止血钳压榨5min,损伤长度约3 cm,造成面神经损伤模型,电针组在术后第2天立即进行治疗,模型组术后不进行任何治疗.于电针治疗后5d、进行光镜、电镜组织学观察和形态学定量分析.结果 电针治疗后5d,两组髓鞘计数,髓鞘厚度、轴索面积t检验,两组差异有显著性意义(P<0 05).结论 急性期电针对于面神经损伤具有良性修复作用.

    作者:孙运花;李瑛;彭晓华;张薇 刊期: 2011年第11期

  • 鹿角盘蛋白酶解工艺优化及其水解物抗氧化活性研究

    目的 优化鹿角盘蛋白酶解工艺,测定其酶解物抗氧化活性.方法 以水解度为指标通过正交实验,优化鹿角盘蛋白酶解工艺.选取具有代表性的羟自由基、DPPH·、超氧阴离子3种自由基体系,以不同浓度水解物的抗氧化作用为指标,评价酶水解物的抗氧化活性.结果 酶解的优工艺为温度50℃,pH 8.5,酶与底物比([E/S])4%,水解时间5h.胰蛋白酶水解物对羟自由基的半抑制浓度( IC50)为0.38mg/ml,对DPPH·的IC50为1.89 mg/ml,对超氧阴离子的IC50为0.70 mg/ml.结论 筛选出鹿角盘蛋白酶解优工艺,其酶解物具有较好的抗氧化活性.

    作者:于文影;郜玉钢;郝建勋;李萍;张连学 刊期: 2011年第11期

  • 复方桂术胶囊对小鼠肝癌及肿瘤坏死因子-α影响的研究

    目的 研究复方桂术胶囊对小鼠移植性肝癌的抑制和对肝癌小鼠细胞因子的作用.方法 以昆明小鼠右前肢腋部皮下注射小鼠腹水型肝癌细胞建立动物肝癌模型,并以化疗药物顺铂(DDP)为对照,采用灌胃给药,观察复方桂术胶囊对动物肝癌的抑制作用,并采用ELISA双抗体夹心法测定小鼠血清TNF -α含量.结果 中药高剂量组、中剂量组和低剂量组对小鼠H22肝癌均有显著的抑瘤作用(P<0.001),中药高、中、低剂量组小鼠血清TNF -α含量均显著升高,尤以中药高、中剂量组为显著(P<0.001).结论 表明中药复方桂术胶囊对小鼠H22肝癌有显著的抑制作用,并对H22肝癌小鼠血清TNF -α含量具有显著升高作用.

    作者:曹勇;张歌;张树涌;张娜;宋璟;李可馨 刊期: 2011年第11期

  • 按摩联合柴胡散结汤治疗产后乳汁郁积症56例疗效观察

    乳汁郁积症是哺乳期妇女常见病,多由于哺乳期哺乳不当或其他原因致使乳络阻塞,乳腺导管不畅,排乳受阻,终使乳汁不能及时排出而郁积于乳房,出现乳房胀痛、结块,如治疗不及时将引发急性乳腺炎.笔者自2007-01 ~2010 - 12采用按摩结合柴胡散结汤治疗了56例产后乳汁郁积症患者,获得理想的冶疗效果.现整理报道如下.

    作者:齐惠莉 刊期: 2011年第11期

  • 四氧嘧啶糖尿病小鼠模型的复制与应用体会

    目的 探讨糖尿病小鼠模型复制过程中出现的影响因素并对解决这些影响因素进行分析.方法 用四氧嘧啶复制糖尿病模型,在复制过程中,就动物的种类、性别、给药的途径、剂量,血糖测值、测糖选时等进行观察比较.结果 经模型复制发现,由于动物的种类、性别、给药的途径、剂量不同等因素,会给模型复制产生不同的影响.结论 由于多种因素的影响,四氧嘧啶糖尿病模型复制时应引起注意.

    作者:黄彦峰;晋玲;赵善民;刘波;黄永毅 刊期: 2011年第11期

  • 炮制对生药化学成分的影响研究概述

    文章综述了炮制对生药具有明显生理活性的成分——挥发油、生物碱、苷类、多糖、鞣质及微量元素的影响,进而为探讨中药炮制的真正意义,制定合理的炮制工艺和质量标准提供参考.

    作者:钟伯雄;张婉;刘伟志;秦阿娜;庞宗然;崔箭 刊期: 2011年第11期

  • 地锦草抗真菌有效部位中芦丁及槲皮苷含量的高效液相色谱法测定

    目的 建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定维吾尔医药地锦草抗真菌有效部位中芦丁及槲皮苷含量的方法.方法 色谱柱为waters symmetry C18(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液(42:58,V/V),,检测波长为360nm;流速为1.0 ml· min-1;柱温25℃;进样量10μl.结果 芦丁和槲皮苷线性范围分别在0.42~2.52 μg,0.6~3.6μg内线性关系良好(r≥0.999 5),平均加样回收率分别为99.2%,101.1%,RSD≤3.3%.结论 该方法操作简便、准确、灵敏度高、重复性好,可用于地锦草抗真菌有效部位的质量控制.

    作者:库尔班尼沙·买提卡思木;祖里皮亚·塔来提;古丽娜·达吾提;希尔艾力·吐尔逊;斯拉甫·艾白 刊期: 2011年第11期

  • 眼针对肠易激综合征模型大鼠结肠组织血管活性肠肽表达的影响

    目的 观测眼针对腹泻型肠易激综合征(D - IBS)模型大鼠血清、结肠组织血管活性肠肽(VIP)含量及基因表达变化,探讨眼针治疗D - IBS的作用机制.方法 采用慢性应激与束缚相结合的方法复制D- IBS模型后,进行眼针治疗,然后采用ELISA方法检测血清和结肠组织中VIP含量的变化;采用RT - PCR和免疫组化检测VIP的基因表达水平变化.结果 与对照组比较,模型组血清、结肠组织中VIP含量及基因表达明显增高和上调;与模型组比较,眼针组血清、结肠组织中VIP含量及基因表达明显下降和下调.结论 眼针治疗D- IBS的机制之一可能与抑制结肠组织VIP的释放、下调VIP基因表达有关.

    作者:王德山;王艳杰;李任锋;刘旭东;刘慧慧;柴继严 刊期: 2011年第11期

  • 芳香开窍药对脑缺血再灌注损伤小鼠血脑屏障通透性的影响

    目的 观察4味芳香开窍药(冰片、麝香、苏合香、安息香)及其不同提取部位对脑缺血再灌注损伤小鼠血脑屏障(BBB)通透性的影响.方法 结扎小鼠双侧颈总动脉30min再灌注1h后,小鼠尾静脉注射伊文思蓝(Evans blue,EB) 250mg·kg -,采用甲酰胺浸泡,荧光法测定小鼠脑组织中EB含量以评价药物对缺血再灌注损伤小鼠BBB通透性的影响.结果 冰片全药(200mg·kg-1)、麝香全药与麝香石油醚提取部位(66.6 mg·kg-1)能显著性降低脑缺血再灌注损伤模型小鼠脑组织中EB含量;苏合香生药(1.33 2 g·kg-1)、安息香生药与石油醚提取部位(1g·kg-1)有降低EB含量的趋势.结论 麝香、冰片能对抗不完全缺血再灌注损伤模型小鼠血脑屏障通透性的异常增高,表现出对病理状态下血脑屏障功能的保护作用.苏合香与安息香的作用强度弱于麝香、冰片.该类药物对病理状态下血脑屏障功能的保护效应是其用于治疗缺血性脑病的药理学基础之一.实验结果亦提示药物的脂溶性部位可能是其作用于脑组织的物质基础.

    作者:倪彩霞;曾南;汤奇;许福会;苟玲;王建;夏厚林 刊期: 2011年第11期

  • 了哥王提取物及其不同提取部位的急性毒性研究

    目的 观察了哥王提取物及其不同提取部位的急性毒性大小.方法 小鼠一次灌胃给予了哥王提取物及其不同提取部位后,观察14 d内各受试样品小鼠的反应情况及死亡情况.记录各样品不同剂量组小鼠死亡只数,用Bliss法计算出该样品的半数致死量(LD50);无小鼠死亡的样品,则测定其大给药量.结果 了哥王提取物的LD50为3.276 g/kg;了哥王石油醚部位的LD50为1.691 g/kg;了哥王醋酸乙酯部位的LD50为1.948 g/kg;了哥王正丁醇部位的大给药量为24.364 g/kg;了哥王水部位的大给药量为:32.788 g/kg.结论 了哥王提取物的毒性随脂溶性的增大而增大,可以推断其毒性成分主要为脂溶性成分.

    作者:张金娟;熊英;张贵林;李玮 刊期: 2011年第11期

  • 石墨炉测定铅含量方法研究

    目的 对石墨炉测定铅含量的方法进行研究.方法 以石墨炉测定重金属铅含量为宗旨,考察灰化温度、原子化温度、基本改进剂等因素.结果 通过实验条件优化,样品峰的拖尾现象得到解央,校正曲线从原来的0 999 473提高到0 999 903.结论 该方法能大程度改善样品峰的双峰和拖尾现象,具有简洁、准确、灵敏度高的优点,对于人类密切相关的食品、药品、化妆品、医疗器械等产品重金属铬含量测定方法提供一定的参考.

    作者:徐向彩;李家忠;龚治湘;郭蓉 刊期: 2011年第11期

  • 禹州漏芦的本草考证

    目的 通过对禹州漏芦的本草学研究,考证其基源及药用品种.方法 通过查阅有关历代文献,实地考察并结合禹州漏芦的现代化学成分和药理作用的研究报道对其考证.结果 其基源仅菊科蓝刺头属植物蓝刺头Echinops latifolius Tausch或华东蓝刺头Echinops grijisii Hance的干燥根为药用正品,表明历代本草文献中所记载禹州漏芦的生长特征及其功能主治与现代研究结果基本一致.结论 近现代记载其药用部位为干燥的根、全草、茎叶等,极不统一,造成了药用部位的混乱,今对其来源进行考证,以正本清源.

    作者:李喜凤;余云辉;邱天宝;胡利欣;胡春月;高伟利 刊期: 2011年第11期

  • 不同厂家阿苯达唑片的溶出度考察

    阿苯达唑为广谱驱虫药,除用于治疗钩虫、蛔虫、鞭虫、蛲虫、旋毛虫等线虫病外,还可用于治疗囊虫和包虫病,其制剂有片剂、胶囊剂和颗粒剂,收载于《中国药典》2005年版二部.阿苯达唑片为2010年国家基本药物抽验计划品种之一,我们所共抽验了17批,涉及6家生产企业.按《中国药典》2005年版Ⅱ部检验均符合规定[1].溶出度是其中的一个重要的检测项目,药物溶出度能有效区分同一制剂生物利用度的差异,是目前较能反映药物体内外相关性的体外测试项目,对于指导新药研究、控制药物质量、保证药物的有效性等具有重要意义.

    作者:方海燕;方学勤 刊期: 2011年第11期

时珍国医国药杂志

时珍国医国药杂志

主管:湖北省黄石市卫生局

主办:时珍国医国药杂志社