于亚峰;吴文璎;刘济生;肖根生
目的 构建neuritin基因的高表达系统,观察其转染雪旺细胞后neuritin的表达.方法 根据大鼠neuritin mRNA序列体外合成编码序列(CDS区),构建到pGH载体,与酶切后的GV208-绿色荧光蛋白(GFP)慢病毒载体片段进行连接、转化、酶切及测序鉴定重组克隆.提取阳性克隆,转染入293T细胞,包装成慢病毒,以此感染大鼠雪旺细胞.将雪旺细胞分为三组:空白对照组(A组)、无意义干扰组(B组)、高表达组(C组).实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹实验检测细胞neuritin的表达.结果 大鼠neuritin正确插入慢病毒载体,C组neuritin mRNA水平显著高于A组、B组(P<0.01).检测到neuritin蛋白与GFP的融合蛋白.结论 成功构建neuritin慢病毒高表达系统;其转染的雪旺细胞neuritin表达升高.
作者:解敏;李剑波;晏玲飞;颜莓;徐宽枫;许馨予;陈恒;杨涛;陈家伟 刊期: 2013年第09期
目的 探讨呼出气一氧化氮(FEN())浓度测定在慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重病情评估中的意义.方法 测定38例CO)PD急性加重期患者治疗前后肺通气功能、FENO和治疗前血浆C反应蛋白(CRP)水平.结果 经有效治疗后,患者用力肺活量(FVC)、用力肺活量占预计值百分比(FVC/pre)、第一秒用力呼气容积(FEV1)和第一秒用力呼气容积占预计值百分比(FEVl/pre)均明显增高,而FEN()水平明显下降(P<0.05),且与吸烟状态、有无维持吸入激素治疗及治疗前CRP水平并无关联.治疗前FEN()水平与治疗后FEV1的改善值呈正相关.结论 FENO测定无创,简便易行,对COPD急性加重疗效评价及预测有一定的临床应用价值.
作者:周童;钱斌;施敏骅 刊期: 2013年第09期
目的 探讨早期自然流产绒毛标本染色体核型.方法 应用长期培养法对52例早期流产的胎儿绒毛组织进行绒毛细胞培养,对培养成功的绒毛细胞制备染色体及核型分析.结果 52例自然流产的绒毛组织中绒毛细胞培养成功47例(90.38%).其中,检出染色体异常22例(46.81%);异常核型中以染色体数目异常为主(86.36%),并以三体征常见(59.09%).结论 胚胎染色体异常是早期自然流产的主要原因;对流产绒毛行染色体检查有利于查明流产原因,合理指导下次妊娠.
作者:李欣;霍然;凌秀凤;赵纯;郭锡熔 刊期: 2013年第09期
目的 探讨全胸腔镜肺叶切除术与开胸肺叶切除术对患者围手术期免疫功能的影响.方法 80例肺叶切除患者随机分为两组,A组35例,采用全胸腔镜肺叶切除术,B组45例,采用开胸肺叶切除术.比较两组手术资料,并采用流式细胞仪检测手术前后外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及NK细胞水平.结果 A组术中失血量、术后胸管引流时间和引流量、住院时间及术后疼痛时间均少于B组(P<0.05).术后1d,两组患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK细胞活性较术前均显著降低(P<0.05);术后7d,A组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK细胞活性恢复至术前水平.结论 与开胸肺叶切除术相比,全胸腔镜肺叶切除术创伤小、恢复快,对患者免疫功能影响小.
作者:唐兴;何靖康;马海涛;宋心雨;徐澄澄 刊期: 2013年第09期
目的 探讨人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)向胰岛素分泌细胞分化的可能性.方法 采用直接贴壁法从脐带中分离UC-MSCs,取第3代细胞作流式细胞术鉴定其表型.用β-巯基乙醇、尼克酰胺和碱性成纤维生长因子(bFGF)诱导UC-MSCs(诱导组),对照组在未添加任何诱导试剂的培养基中培养.倒置显微镜下观察UC-MSCs的形态学变化;取诱导后3周的细胞进行双硫腙染色,采用化学发光免疫法测定培养上清液中胰岛素水平,RT-PCR检测胰岛细胞相关基因的表达.结果 细胞高表达UC-MSCs相关抗原CD90、CD105和CD13,而低表达造血细胞相关抗原CD34、CD45和HLA-DR.UC-MSCs经诱导后细胞形态由梭形变为圆形或椭圆形,双硫腙染色为阳性.诱导组胰岛素水平明显高于对照组[(0.305±0.065) μU/ml vs.(0.085±0.024)μU/ml](P<0.01).RT-PCR显示诱导后细胞表达胰岛细胞相关基因.结论 UC-MSCs具有向胰岛素分泌细胞分化的潜能.
作者:禹亚彬;陈维;储建;卞建民 刊期: 2013年第09期
合理的气道湿化可保持气管切开患者气道湿润、稀释痰液、保持呼吸道通畅、预防肺部感染.临床上采用的持续气道湿化方法多种多样,不同的方法湿化效果也存在差异[1].我科应用氧气驱动一次性湿化液气道持续湿化法对气管切开患者进行气道湿化,收到良好效果.
作者:徐锡明;董志霞;胡婷婷 刊期: 2013年第09期
目的 建立双抗体夹心ELISA定量检测人血清高尔基蛋白73(GP73)的方法,并用于检测血清GP73含量.方法 利用杂交瘤法制备纯化的抗GP73单克隆抗体(mAb)进行辣根过氧化物酶(HRP)标记后,通过棋盘滴定法确定包被抗体和酶标抗体及其适工作浓度;以重组人的GP73抗原为标准品建立标准曲线;以重复性、灵敏性和回收率实验评价ELISA方法.应用该ELISA法对正常人、肝炎、肝硬化及肝癌患者血清中的GP73水平进行定量检测.结果 当抗GP73 mAb 3D5A10和7H3F5分别为捕获抗体和酶标抗体、工作浓度分别为40 μg/ml和1∶ 4000时,双抗体夹心ELISA法优.该方法的平均批内和批间变异系数分别为4.6%和7.6%,灵敏度达3.76 ng/ml,平均回收率为(102.2±5)%.用本方法重复测定肝癌(33例)、肝硬化(28例)、乙型肝炎(44例)及正常人(44例)血清样本中GP73浓度(中位数)分别为25.9、27.6、16.7、9.9μg/L;除肝癌与肝硬化组间差异无统计学意义外,其余各组间均有统计学差异(P<0.05).结论 成功建立了双抗体夹心ELISA定量检测GP73的方法.检测血清GP73可作为诊断肝脏疾病的重要辅助手段之一.
作者:周云;包林;徐言;金秋;张黎;张建平;焦永军 刊期: 2013年第09期
对老年机械通气患者早期肠内营养支持治疗有利于维持胃肠道结构和功能,促进营养状态,改善预后.但胃内容物的返流和误吸可能是呼吸机相关性肺炎(VAP)发生和死亡的重要原因.研究表明,留置鼻胃管或经鼻胃管进行肠内营养是VAP发生的独立危险因素,可能与胃管破坏食管抗反流机制造成上消化道定植菌移位入呼吸道有关[1].VAP是ICU患者常见的感染并发症,在ICU发生感染的患者中VAP高达47%,病死率达20%-70%[2].如果在误吸发展成VAP前及早诊断,则有助于防止误吸的进一步发展并指导早期治疗.
作者:何向兰;郁蓉芳;黄颖 刊期: 2013年第09期
目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)表达在甲亢性心脏病(HHD)大鼠心室重构过程中的作用及缬沙坦对HHD大鼠心肌的保护作用.方法 SD大鼠32只随机均分为4组:A、B、C组腹腔注射L-甲状腺素0.5 mg·kg-1·d-1×28 d建立甲亢模型,B、C组同时分别用缬沙坦10 mg·kg-1·d-1、30 mg·kg-1·d-1灌胃;D组不用药,作为空白对照组.造模前后分别采取静脉血,用化学发光法检测血清三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)水平;第28天行超声心动图检测左室舒张末期内径(LVEDD)、左室后壁厚度(LVPWT)、室间隔厚度(IVST).完成心脏超声检查后,解剖动物测定各组大鼠心肌肥厚指数(MCHI)、左心室心肌细胞直径和胶原容积分数(CVF)及免疫组化观察心肌VEGF的表达.结果 与D组比较,A、B、C三组血清T3和T4水平均明显升高,A组心肌VEGF表达明显增强,左室腔扩大,室壁增厚,MCHI、心肌细胞直径和CVF增大.而B、C组上述心室重构指标和VEGF表达的改变均比A组轻.结论 VEGF可能参与了HHD大鼠心肌重构过程;缬沙坦可抑制VEGF表达和心室重构,从而保护心功能.
作者:施晶晶;李拜红;王晓彦;朱栋晓;魏喆强;金伟东 刊期: 2013年第09期
目的 研究全反式维甲酸(ATRA)对人胚胎肾HEK-293细胞中CD2相关蛋白(CD2AP)基因表达的影响.方法 ATRA作用HEK-293细胞后,采用RT-PCR和Western blot分别检测CD2AP mRNA及其蛋白的表达.将构建的不同Sp1/Sp3位点的定点突变、巢式缺失突变的CD2AP启动子质粒转染HEK-293细胞,检测报告质粒的荧光素酶活性.结果 ATRA明显上调HEK-293细胞中CD2AP mRNA和蛋白水平(P<0.05).缺失突变及点突变研究显示,Sp1/Sp3-A、C位点在介导ATRA上调CD2AP过程中发挥重要作用.结论 ATRA通过Sp1/Sp3结合位点诱导HEK-293细胞中CD2AP的表达;ATRA对CD2AP基因缺陷肾病患者可能有治疗作用.
作者:高珊;徐华国;金蕊;邱灵芝;朱亮华;蒋莉;庄丽丽;周国平 刊期: 2013年第09期
目的 探讨人参皂甙Rg1对软骨细胞凋亡的影响.方法 正常大鼠关节软骨细胞分为三组:A、B组用白细胞介素1β(IL-1β)10 ng/ml作用24 h,建立软骨细胞凋亡模型;B组事先加入10 μg/ml的人参皂甙Rg1保护2h;C组作为空白对照.TUNEL法检测人参皂甙Rg1对软骨细胞凋亡的影响;Western blot检测人参皂甙Rg1对凋亡软骨细胞基质金属蛋白酶13(MMP-13)和基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)蛋白表达的影响.结果 A、B和C组细胞凋亡率分别为(37.30±4.05)%、(10.30±1.08)%和(2.20±1.93)%,B组胞凋亡率低于A组(P<0.05).与A组比较,B组软骨细胞TIMP-1的表达增加,MMP-13的表达降低(P<0.05).结论 人参皂甙Rg1具有拮抗大鼠关节软骨细胞凋亡的作用.
作者:吴东迎;惠宇坚;左强;范卫民 刊期: 2013年第09期
原发性手汗症对患者的社会交际和职业活动影响明显,造成患者社交心理障碍并部分妨碍其日常工作.有文献报道,原发性手汗症往往有家族史,且青春期的女性较男性多见.其发病机制不明,多由交感神经功能亢进引起的外分泌腺异常所导致的多汗性疾病,发病率为0.5%-1.0%[1].焦虑会影响手术、麻醉的顺利进行.我院胸外科对65例原发性手汗症患者行胸腔镜下交感神经节切除术,本文探讨术前夜口服舒乐安定对原发性手汗症患者焦虑程度的影响.
作者:张永芳;陈勇兵 刊期: 2013年第09期
巨大甲状腺肿瘤常压迫周围组织、器官,全麻气管插管常有难度[1],我们应用用自制光亮引导器的纤维支气管镜辅助插管操作,取得良好效果.资料与方法1.一般资料 择期行巨大甲状腺手术患者32例,年龄42-69岁,病程12-30年.甲状腺大达16 cm×9 cm×11 cm.CT示:气管大移位者约3.3cm,气管前后径1.0cm以下者21例,窄1例约0.4cm.其中有2例不能平卧,伴有不同程度的呼吸困难.术前脉搏氧饱和度(SpO2) 88%-96%.两组随机分为加用自制光亮引导器的纤维支气管镜插管(A组)和传统纤维支气管镜辅助插管组(B组)两组.
作者:黄政坤;苏海丰;张云仙 刊期: 2013年第09期
目的 探讨原发性外耳道及中耳恶性肿瘤的治疗及预后.方法 对29例外耳道和中耳恶性肿瘤的临床资料进行回顾性分析.29例中,Ⅰ期病变8例,Ⅱ期5例,Ⅲ期4例,Ⅳ期12例.手术方法包括外耳道袖状切除、颞骨部分切除和颞骨次全切除,必要时联合颈淋巴结清扫术和腮腺切除术;对进展期病变辅助术后放射治疗.结果 总的5年生存率63.6%.其中,Ⅰ期和Ⅱ期病变5年生存率为85.7%,Ⅲ期和Ⅳ期病变5年生存率为25%.随访过程中4例患者肿瘤复发或转移.结论 早期颞骨恶性肿瘤,单纯的外耳道袖状切除或颞骨部分切除术是有效的治疗方法,而对于Ⅲ、Ⅳ期病变,更为广泛的手术切除联合术后放疗较为可取.
作者:张义娟;陈智斌;周涵;赵晓埝;李芳丽;邢光前 刊期: 2013年第09期
目的 探讨2型糖尿病(T2DM)患者颈动脉内中膜厚度(CIMT)与尿蛋白排泄率的关系.方法 167例T2DM患者根据CIMT水平分为两组:A组116例(CIMT>0.9 mm);B组51例(CIMT≤0.9mm).检测两组CIMT和24-h尿蛋白定量.结果 A组年龄、全血白细胞、血浆纤维蛋白原和24-h尿蛋白定量高于B组(P<0.05).年龄、糖尿病程、血浆纤维蛋白原和24-h尿蛋白定量与CIMT呈正相关(P<0.05).24-h尿蛋白定量、年龄是CIMT的独立相关因素(P<0.05).结论 年龄联合24-h尿蛋白定量可能是T2DM患者CIMT的独立预测因素.
作者:魏迎凤;卢学超;徐园园;翟林云 刊期: 2013年第09期
目的 探讨聚合酶链式反应(PCR)在阴道念珠菌病检测中的应用.方法 取82例初步诊断患有阴道念珠菌病患者的阴道分泌物,接种于科玛嘉培养基上.采用PCR法进行念珠菌的检测;同时也用显色法和快速凝集法检测,比较检测结果.结果 PCR法阴道念珠菌阳性检出率为79.27%,显著高于显色法和快速凝集法的45.12%和48.78%(P<0.05).通过对PCR过程进行优化,用菌液直接热裂解作DNA模板进行扩增和单菌落溶解于20μl的菌液PCR电泳均可检测出结果.结论 与显色法和快速凝集法比较,PCR方法检测阴道念珠菌的阳性检出率高,且方法简便、检测快捷.
作者:常大黎 刊期: 2013年第09期
目的 探讨低温等离子射频消融联合局部注射干扰素治疗成人复发性喉乳头状瘤的疗效.方法 使用低温等离子射频消融和肿瘤基底局部注射干扰素治疗成人复发性喉乳头状瘤5例.结果 5例患者均治愈,1例在2个月后失访,其余4例分别随访3个月、5个月、11个月和1年2个月,肿瘤无复发.结论 低温等离子射频消融术治疗成人复发性喉乳头状瘤损伤小,出血少,联合肿瘤基底局部注射干扰素可以提高疗效.
作者:于亚峰;吴文璎;刘济生;肖根生 刊期: 2013年第09期
目的 探讨1,6-二磷酸果糖(FDP)在心脏瓣膜置换术患者中的脑保护作用.方法 体外循环(ECC)下心脏瓣膜置换术的患者30例,随机分为实验组(A组,14例)和对照组(B组,16例).A组术中将FDP 200 mg/kg加入预充液;B组加入等量生理盐水.两组分别于麻醉诱导后5 min(T0)以及主动脉开放后5 min(T1)、1 h(T2)、4 h(T3)和24 h(T4)采集颈内静脉血,检测血浆S-100蛋白、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素8(IL-8)水平.结果 与T0时比较,T1-T4时A组和B组S-100蛋白、NSE、MDA、SOD、TNF-α及IL-8水平显著增高(P<0.01);T1-T3时,A组S-100蛋白、NSE、TNF-α、IL-8和MDA水平低于B组(P<0.05),SOD活性高于B组(P<0.05).术后发生认知障碍;A组4例(28.5%),B组8例(50%)(P<0.05).结论 在ECC心脏瓣膜置换术中应用FDP具有一定的脑保护作用,其机制可能与其抑制炎症反应、减轻脑组织缺血再灌注损伤有关.
作者:钟斌;秦建伟;黄陈军;李芝;梁永年;仲昭澎 刊期: 2013年第09期
目的 探讨偏心型封堵器在经胸微创镶嵌手术治疗毗邻主动脉瓣的室间隔缺损(VSD)中的临床应用价值.方法 用偏心型封堵器治疗VSD边缘距主动脉瓣均<2mm的22例VSD患儿.经食道心脏超声(TEE)观察室间隔缺损大小、部位及与周边组织的解剖关系,选择合适的封堵器.结果 22例VSD微创镶嵌术全部成功.术后TEE显示封堵器与VSD边缘吻合紧密,其中3例封堵器边缘存在细小左向右分流(分流束<1.5 mm),均于术后1个月内愈合.术后1个月、3个月、6个月随访,22例患儿均无封堵器移位.结论 微创镶嵌术使用偏心型封堵器治疗毗邻主动脉瓣的VSD损疗效确切.
作者:林泽邦;莫绪明;孙剑;彭卫;戚继荣;左维嵩;陈俊;武开宏;丁晋阳 刊期: 2013年第09期
目的 探讨上皮钙黏蛋白(E-cadherin)和基质金属蛋白酶(MMP-2和MMP-9)在胃癌组织中的表达及临床意义.方法 应用免疫组织化学SABC法和Western blot法检测60例原发性胃癌和15例正常胃黏膜组织E-cadherin和MMP-2、MMP-9的表达.结果 胃癌组织中E-cadherin的阴性表达率为88.33%,显著高于正常胃黏膜组织的20.00% (P<0.01).MMP-2和MMP-9在胃癌组织中的阳性表达率分别为67.39%和73.91%,高于正常胃黏膜组织的31.54%和21.47%(P<0.01).E-cadherin的阴性表达率与胃癌的分化程度、淋巴结转移有关,而与患者年龄、性别、肿瘤大小及临床分期无显著相关性;MMP-2和MMP-9的阳性表达率与E-cadherin的阴性表达率呈正相关(r=0.453和r=0.579,P<O.01).结论 胃癌组织高表达MMP-2和MMP-9,同时低表达E-cadherin,提示E-cadherin和MMP-2、MMP-9的异常表达可能参与了胃癌的发生、发展过程.
作者:赵远;王永忠 刊期: 2013年第09期