学术投稿

成人骨髓基质干细胞体外诱导成骨细胞

丁亮华;罗光华;董选

关键词:基质干细胞, 骨髓, 细胞培养, 组织工程, 骨生成
摘要:目的建立成人骨髓基质干细胞(BMSCs)分离、扩增以及诱导和分化为成骨细胞的体外培养方法,为骨组织工程选择理想的种子细胞来源.方法抽取健康成人骨髓组织,用Percoll分离液分离出骨髓中的单个核细胞,在含体积分数为10%小牛血清的高糖DMEM培养液中,置于37℃、含体积分数为5%的CO2湿化空气孵箱中培养,通过传代培养扩增BMSCs,传三代时改用含地塞米松、β-甘油磷酸和维生素C的条件培养基培养,用倒置显微镜、HE染色观察增殖和分化情况,并测定碱性磷酸酶活性和钙结节形成能力.结果体外培养的成骨细胞生长良好,表现出与典型的成骨细胞相似的形态特征和生物学特性.结论所建立的成人BMSCs分离、扩增以及诱导和分化为成骨细胞的体外培养方法稳定和实用,可作为骨组织工程种子细胞来源的常规方法之一.
江苏医药杂志相关文献
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    目的评估椎弓根内固定系统治疗腰椎滑脱症的临床效果和安全性.方法 66例Ⅰ~Ⅱ度腰椎滑脱症患者采用后路椎管减压、经椎弓根内固定系统固定和侧后方植骨融合术,其中经椎弓根复位固定器(TPRF)10例,Steffee 29例,Tenon 5例,Tenor 17例,改良脊柱椎弓根矫形复位固定系统(MRF) 5例,并进行定期随诊和影像学检查观察.结果复位率:Tenor 100%,Steffee 69%,MRF 80%,TPRF和Tenon均为0%.52例经1~11.4年随访,疗效按Henderson标准,优73%,良17%,可6%,差4%;融合率按Lenke标准,A级58%,B级30%,C级10%,D级2%.2例采用Steffee固定螺钉断裂,1例采用MRF固定框架明显松动,1例切口感染.7例出现神经损伤,1例未完全恢复.结论对Ⅰ~Ⅱ度腰椎滑脱症采用椎弓根内固定系统固定临床效果满意,脊柱融合率高,并发症发生与掌握椎弓根内固定技术的熟练度有关.

    作者:沈忆新;郑祖根;董启榕;成茂华;徐又佳;孙永明 刊期: 2005年第02期

  • 纵隔恶性淋巴瘤的特殊CT表现

    恶性淋巴瘤根据组成肿瘤的主要细胞成分和组织结构分为何杰金氏病(HD)和非何杰金氏淋巴瘤(NHL),经常累及纵隔,常表现为前、中纵隔多发大小不等的淋巴结肿大,部分可有融合,但以纵隔团块出现较少见.笔者自2002年至2004年,从237例纵隔淋巴瘤病例中搜集了11例融合肿块型病例,现报道如下.

    作者:冯勇;沈文荣;钱云铉 刊期: 2005年第02期

  • 细胞生长抑制因子对体外培养创面成纤维细胞的生物学作用

    目的探讨γ-干扰素(IFN-γ)、转化生长因子β3(TGFβ3) 对体外培养的创面成纤维细胞生物学作用的影响.方法采用体外细胞培养技术,通过MTT测定法、3H-TdR 掺入法、成纤维细胞胶原凝胶模型研究IFN-γ、TGFβ3 对不同时期创面来源的成纤维细胞的增殖、DNA合成及其在胶原凝胶中收缩的变化.结果 IFN-γ和TGFβ3在体外对正常皮肤真皮和烧伤后不同时期创面来源的成纤维细胞的生物学作用不同: (1)相同浓度的两种因子均能明显抑制正常真皮和伤后10、14 d创面成纤维细胞,对伤后28、35 d的创面成纤维细胞γ-干扰素的抑制作用较弱、TGFβ3作用则不明显;(2)对成纤维细胞在胶原凝胶中的收缩能力,两种因子均有明显的抑制作用,而强的作用均表现在对伤后21 d的创面成纤维细胞上.结论γ-干扰素和转化生长因子β3可能参与了调节创面成纤维细胞的表型转化与调控而影响其生物学特征,进一步的研究有利于为临床用生物学方法在创面愈合过程中控制瘢痕增生或挛缩提供参考依据.

    作者:李永林;祁强;赵小瑜;周兆平 刊期: 2005年第02期

  • CD44v6在口腔鳞癌组织中的表达及意义

    口腔癌是头颈部常见的恶性肿瘤,其患病率和死亡率占恶性肿瘤的第六位,其中鳞癌占首位且其发病率有增加趋势.影响口腔鳞癌扩散和转移的因素很多,也很复杂.目前研究较多的是细胞与细胞间粘附功能的丧失和恶性肿瘤细胞突破基底膜向远处游走的过程及其相关因素上,本文研究CD44v6在口腔鳞癌扩散和转移中的表达及对于肿瘤预后判断的意义.

    作者:刘健;浦剑虹;顾永平;吴德明 刊期: 2005年第02期

  • 苏州地区轮状病毒腹泻的分子流行病学特征

    目的了解苏州地区小儿轮状病毒(RV)性腹泻的发病规律和血清型特征.方法采用酶联免疫吸附实验、巢式逆转录聚合酶链式反应,对2001年9月~2003年8月期间5岁以下的腹泻住院病儿的粪标本,进行病毒抗原鉴定和血清分型.结果 721份小儿腹泻粪标本,轮状病毒阳性为345例(47.85%);年龄在7~18个月时发病率高为239例(69.28%);10月份~1月份是发病高峰季节,为248例(71.88%);血清型分型以G3型199例(60.49%)为主,其次是G1型74例(22.49%);少见的血清型G9型3例(0.90%).在对G血清分型标本中的80份进行P血清分型,其中P[4]型29株,P[8]型11株,P[4]、[8]混合型8株.G型和P型的组合型是P[4]G3、P[8]G3、P[4]G1等29例(36.25%)为主,P[8]G1和P[4]G2为6例,仅占8.20%.出现2例(0.60%)P[4]G9少见组合型.结论苏州地区2001年9月~2003年8月间小儿轮状病毒性腹泻是以G3型流行毒株为主,全国则以G1型为主.

    作者:武庆斌;顾红英;唐伟国;金辉;王蓓 刊期: 2005年第02期

  • 三种不同载体材料体外生物相容性的比较

    目的探讨纳米晶羟基磷灰石胶原复合材料(NHAC)、非纳米晶羟基磷灰石胶原复合材料(HAC)和珊瑚羟基磷灰石(CHA)的体外生物相容性,为组织工程提供理想的细胞基质载体材料.方法将人骨髓基质干细胞分别与上述三种载体材料体外复合培养,应用倒置显微镜、扫描电镜、四唑盐比色试验(MTT法)及碱性磷酸酶(ALP)活性测定,对材料上复合培养的细胞进行形态学和功能测定.结果骨髓基质干细胞能在NHAC和CHA两种材料上良好地黏附、增殖和生长.细胞的活性和碱性磷酸酶活性未受到材料的影响;而HAC不利于人骨髓基质干细胞的黏附、增殖,并使碱性磷酸酶活性降低.结论 NHAC和CHA两种材料具有良好的生物相容性,可作为骨组织工程理想的骨替代材料;HAC不适合做细胞外基质.

    作者:王晓东;刘新晖;张亚;张德强;王明海;张希峰;王科文;张锡庆 刊期: 2005年第02期

  • 体外培养时间对兔间充质干细胞软骨形成的影响

    目的探讨生长因子(bFGF,TGF-β1)诱导下,培养时间对兔间充质干细胞(MSCs)体外软骨形成的影响.方法取兔MSCs梯度离心,分离培养.取P3、P5、P7、P10代细胞,在bFGF、TGF-β1各20 ng/ml诱导下培养.观察细胞生长形态变化,用甲苯胺蓝染色观察细胞蛋白多糖的分泌.RT-PCR半定量检测Ⅱ型胶原mRNA的相对表达量,取关节软骨细胞作阳性对照.结果各代细胞形态无明显差异.MSCs甲苯胺蓝染色呈异染性,RT-PCR检测Ⅱ型胶原阳性表达,各代细胞灰度值,P3 0.16±0.05,P5 0.37±0.03,P7 0.88±0.08,P10 0.47±0.05,软骨细胞2.08±0.13.P7代细胞灰度值达大(P<0.01),软骨细胞是MSCs的3倍以上.结论生长因子能维持MSCs细胞活性,促进生长繁殖.一定培养时间内,软骨生成能力渐增强,但随时间进一步延长,软骨分化减弱.

    作者:谢宗刚;董启榕 刊期: 2005年第02期

  • 乳牙空管治疗与常规根管治疗疗效分析

    1999~2002年我科分别行空管药物和常规根管治疗乳牙牙髓炎、死髓牙及尖周炎382例,现分析如下.资料与方法1. 一般资料 382例中男186例,女196例,年龄3~10岁.乳前牙180颗,乳磨牙322颗,共计502颗牙;其中牙髓炎143颗牙,死髓牙122颗牙,尖周炎237颗牙.实际终治疗482颗牙,因尖周炎20颗牙在治疗时没有按时复诊,所以统计时略去.

    作者:杨昭宇;吴国萍 刊期: 2005年第02期

  • 手术治疗髋臼骨折的临床体会

    髋臼骨折系高能量损伤所致,骨折类型复杂,治疗上较为困难.1997年3月~2003年12月,我们对35例移位的髋臼骨折患者采用手术治疗,疗效满意,现报道如下.

    作者:高恩建;卢则陈;邓杰林 刊期: 2005年第02期

  • 椎弓根螺钉固定相对稳定性的体外生物力学试验

    目的探讨椎弓根螺钉固定相对稳定性变化.方法选用7具骨质疏松脊柱标本,测试单枚螺钉与器械中螺钉、平行与非平行方向植入螺钉、两节段与三节段固定中螺钉以及有无横向连接装置器械中螺钉的大拔出力(F-max)和螺钉拔出4 mm的能量吸收值(E-4 mm).结果单枚螺钉F-max为(296±17)N,E-4 mm(673±21) Nm,器械中螺钉分别为(345±24)N和(1 120±35) Nm(P<0.01);三节段固定螺钉大于两短节段(分别增加4.96%和8.30%,P<0.05);有横向连接装置器械螺钉大于无横向连接装置(分别增加3.5%和7.2%,P<0.05);非平行植入螺钉大于平行植入(分别增加1.5%和2.9%,P>0.05).结论采用螺钉与连接棒强直性连接,有横向连接装置器械,非平行方向植入螺钉和增加固定点或固定节段等方法,可以提高器械中螺钉固定的相对稳定性.

    作者:殷渠东;郑祖根;蔡建平 刊期: 2005年第02期

  • 预扩张以腕部血管网供血前臂岛状皮瓣的临床应用

    20世纪90年代以来,国外学者先后报道皮神经-浅静脉皮瓣及对腕部血管网进行研究[1~3],提供了临床应用的理想术式.自2002年12月至2004年1月我们在此基础上结合皮肤软组织扩张术修复手腕部软组织缺损7例,现报道如下.

    作者:祁强;李永林;林伟 刊期: 2005年第02期

  • 凝血因子Ⅻ缺乏一例

    患者,女,5岁,因双耳听力下降1月余于2003年12月来院就诊.1个月前家长发现患儿听力下降,门诊检查听力反应在正常范围.近期反复上呼吸道感染,伴鼻塞、黄脓涕,无耳漏.既往无耳病史、自发性出血史、药物、食物过敏史,无外伤及血制品使用史.父母无近亲婚配.查体:神志清,咽部黏膜无充血,双扁桃体Ⅲ度肿大,未见异常分泌物.全身皮肤黏膜无黄染、瘀点、瘀斑及出血点,两肺未闻及干湿性罗音,心率120次/分,律齐,无杂音.腹软,无压痛,肝脾肋下未触及.

    作者:朱文艳;高华强;邹嘉平 刊期: 2005年第02期

  • 儿童右室双出口的外科治疗

    目的探讨小儿右室双出口(DORV)的外科治疗体会.方法 DORV病儿63例,年龄2个月~13岁,平均(4.25±3.46)岁,体重5~44 kg,平均(14.3±7.46) kg.室间隔缺损(VSD)位于主动脉瓣下44例,肺动脉瓣下4例,靠近主、肺动脉开口14例,远离主、肺动脉开口1例.肺动脉高压(PH)19例,肺动脉狭窄(PS)41例和肺动脉闭锁(PA)3例.合并双VSD 3例,房间隔缺损10例,冠状动脉畸形4例,左肺动脉狭窄3例,二尖瓣病变3例,动脉导管未闭6例,无脾综合征1例,主动脉弓缩窄2例,右位心3例,左心发育不良4例,无顶冠状窦1例,室壁瘤/胸腹壁缺损1例.结果一期根治手术51例,分期手术12例.手术死亡6例,病死率9.52%.随访1个月~12年,2例有轻度流出道残余梗阻,2例VSD残余漏,其中1例死亡,余生存良好,仍在随访中.结论认清病理解剖关系,采取合适的手术方法,尽量在幼儿期行根治手术,加强术后监护,是取得DORV良好治疗效果的保证.

    作者:莫绪明;谷兴琳;钱龙宝;张儒舫;顾海涛;夏建海 刊期: 2005年第02期

  • 第二、四掌背动脉复合组织移植修复指背伸肌腱及皮肤缺损

    手指皮肤、伸肌腱同时缺损,传统的方法是先皮瓣覆盖,二期再作肌腱移植,不但疗程长,且往往造成关节僵硬,严重影响其功能恢复.我院自1998年至2004年利用带固有伸肌腱的掌背动脉逆行岛状皮瓣修复手指皮肤及伸肌腱缺损9例,取得良好效果,现报道如下.

    作者:薛明宇;许亚军;吴永伟;陆尧 刊期: 2005年第02期

  • 巨细胞病毒感染与儿童特发性血小板减少性紫癜的关系

    特发性血小板减少性紫癜(ITP)是临床上常见的出血性疾病,常发生于病毒感染后,目前发现人类巨细胞病毒(CMV)、人细小病毒(B19)、风疹病毒等感染后均有可能引起血小板减少,CMV感染相关性ITP的发病机理目前尚未完全定论.为探讨ITP与CMV活动性感染的关系,2001年11月~2003年11月,我们应用聚合酶链反应(PCR)技术对16例ITP患儿进行了尿CMV-DNA序列的测定,同时进行了CMV-IgM的检测,现报道如下.

    作者:张丽娜 刊期: 2005年第02期

  • 儿童肱骨远端全骨骺分离

    肱骨远端全骨骺分离是一种罕见的儿童肘部损伤,由于骨骺在X线片上不显影,易引起误诊而造成治疗偏差.我院1992年2月~2003年6月间共收治17例,现报道如下.

    作者:唐凯;范毓华 刊期: 2005年第02期

  • 钩钢板固定喙锁韧带重建术治疗肩锁关节脱位

    肩锁关节脱位在上肢损伤中较为常见,若治疗不当易造成肩关节不同程度的病废.我院自2000年10月至2003年10月采用AO肩锁钩钢板、螺钉(MATHYS公司)加喙锁韧带重建术治疗Ⅲ~Ⅴ度肩锁关节脱位18例,疗效满意,现报道如下.

    作者:周建刚 刊期: 2005年第02期

  • 上颈椎损伤51例诊治体会

    上颈椎损伤较下颈椎损伤更容易误诊和漏诊,而治疗上更有其特殊性和复杂性.随着交通事故等高能量损伤的增多,上颈椎损伤即使在市级医院也很常见.我院自1998年起开展上颈椎损伤的手术治疗[1,2],为探索基层医院在诊治寰枢椎损伤方面的策略,我们对此进行了回顾性研究.

    作者:徐瑞生;王立邦;王刊石;吴洁石;王雪松;伍亚菊;沈小松;包聚良 刊期: 2005年第02期

  • 锁骨钩钢板治疗不稳定型锁骨远端骨折

    目的探讨锁骨钩钢板治疗Neer Ⅱ型锁骨远端骨折的疗效.方法运用锁骨钩钢板治疗新鲜Neer Ⅱ型锁骨远端骨折15例,术中喙锁韧带破裂未予修复.结果所有患者均获得良好的复位和固定,骨折全部愈合.随访时间6~23个月.按锁骨远端骨折肩部功能评分标准,优良13例,1例满意,1例差.结论锁骨钩钢板固定牢固,不损伤肩锁关节面,可早期进行功能锻炼,是治疗锁骨远端骨折的理想方法.

    作者:鞠文;杨惠林;姜为民;杨同其 刊期: 2005年第02期

  • 磁共振胰胆管成像在肝内外胆管结石诊断中的应用

    诊断肝内外胆管结石常用的影像学方法有B超、CT、直接法胆道造影如ERCP、PTC等,对胆总管结石诊断价值高的是ERCP.自磁共振胰胆管成像(MRCP)应用于临床以来,为胰胆系疾病的诊断提供了新的方法[1].我科2002~2003年对疑有胆系结石61例患者行MRCP检查,现对MRCP在肝内外胆管结石诊断中的应用价值讨论如下.

    作者:尹卫民;周建新;仇毓东;丁一波 刊期: 2005年第02期

江苏医药杂志

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主管:江苏省卫生厅

主办:江苏省人民医院(南京医科大学第一附属医院)