王运涛；吴小涛；郑启新；陈辉；李永刚；茅祖斌
目的:建立一种多探针同时标记同步杂交检测多基因的简化的Northern blot方法.方法:通过T4多聚核苷酸激酶5'末端放射性磷酸化标记法对Northern blot中多寡核苷酸探针同时标记,实现对同一张转移印迹膜上的多基因同步杂交显影检测.结果:与常规mRNA逐一检测的效果进行比较,同步简化法的各目的基因同时得到较好的检测.结论:同步简化法简化了实验过程,缩减了实验时间,节省了实验试剂,并使各基因表达丰度之间的比较具有更高的准确性,提高了Northern blot的检测效率和成功率.
作者：杜明梅；叶玲；翟冰；刘建伟；刘静；杨立娜 刊期： 2007年第07期
牙周炎是牙周支持组织常见的细菌感染性疾病,随年龄的增长逐渐增加.一些全身因素和疾病如衰老、吸烟、糖尿病等对牙周组织有明显的影响[1,2],是牙周炎的诱发因素.近的研究表明,患有重症牙周炎的患者常有全身炎性反应的表现[3,4],同时发现,牙周炎与发生心血管疾病的可能性增加[5]、分娩出低体质量早产儿的发生率增加[6]、2型糖尿病控制效果差[2]等有关.据此提出了一个假说:牙周炎与某些系统疾病如动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)、低体质量早产儿、2型糖尿病等的发生发展有关[3].
作者：毛钊 刊期： 2007年第07期
目的:克隆人诱导细胞死亡的DFF45样效应因子3(CIDE3)全长基因,构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-CIDE3,并检测其促凋亡作用.方法:①提取人腹部皮下白色脂肪组织的总RNA,经RT-PCR获得CIDE3全长基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),构建重组质粒pcDNA3.1(+)-CIDE3,并进行序列测定.②用脂质体法将pcDNA3.1(+)-CIDE3转染人宫颈癌细胞系HeLa细胞,通过TUNEL法检测细胞凋亡情况.结果:①经RT-PCR扩增得到特异性717 bp的目的片段,构建的重组质粒pcDNA3.1(+)-CIDE3经序列测定,结果与Genbank发表的序列完全一致.②转染Hela细胞后,经Tunel染色法检测发现,转染pcDNA3.1(+)-CIDE3后有大约25%的细胞发生了凋亡,与转染空质粒pcDNA3.1(+)(＜5%)及未转染质粒的细胞相比,其凋亡细胞明显增多.结论:成功克隆了人CIDE3全长基因,构建了真核表达质粒pcDNA3.1(+)-CIDE3,并验证了CIDE3基因可诱导细胞发生凋亡的生物学作用,为进一步研究CIDE3的生物学功能奠定了坚实基础.
作者：王淑芳；李青；姚丽；程虹；张静；叶菁；李繁烦；李南林 刊期： 2007年第07期
目的:观察端粒酶逆转录酶显性负突变体(DN-hTERT)对乳腺癌细胞MCF7端粒酶活性的抑制作用.方法:将携带DN-hTERT基因的真核表达载体IRES2-EGFP空载体通过脂质体2000介导转入MCF7细胞,以G418进行稳定筛选,得到阳性克隆;倒置荧光显微镜观察转染细胞的生长情况;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染细胞hTERT mRNA的表达;TRAP-ELISA方法检测转染细胞端粒酶活性.结果:MCF7细胞转染DN-hTERT后生长受到抑制;转染DN-hTERT的MCF7细胞(MCF7/DN)hTERT mRNA表达升高;改进端粒重复序列扩增法(TRAP-ELISA)检测MCF7/DN细胞端粒酶活性与转染空载体MCF7细胞(MCF7/I)比较显著降低(P＜0.05).结论:DN-hTERT能特异性抑制MCF7细胞生长和端粒酶活性.
作者：饶耀剑；刘慧娟；王拥军；奚玲 刊期： 2007年第07期
目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad3信号促进大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)成骨分化的机制.方法:常规细胞培养、免疫细胞化学染色观察TGF-β1作用下MSC中Smad3的表达情况;脂质体介导稳定转染Smad3中部分C端功能域突变体(Smad3△C),间接免疫荧光试验鉴定;采用RT-PCR检测转染细胞中碱性磷酸酶(ALP)和核心结合因子(cbfa1)mRNA的表达,用Gomori钙钴法定性检测ALP,用对硝基苯磷酸盐(PNP)法检测细胞ALP活性,观察Smad3△C对MSC成骨分化的影响.结果:MSC细胞表达Smad3,受TGF-β1刺激后,呈现出即刻由细胞质向细胞核转位的趋势.稳定转染细胞中c-Myc抗原阳性表达;受TGF-β1刺激后,MSC和空载体对照MSC(V-MSC)中ALP染色呈强阳性反应,而Smad3△C-MSC中阳性率仅为34.9%(P＜0.01);MSC和V-MSC中ALP、cbfa1 mRNA的表达水平以及ALP活性明显高于Smad3△C-MSC(P＜0.05或P＜0.01),而MSC和V-MSC之间无显著性差异(P＞0.05).结论:MSC中的Smad3是作为TGF-β1信号转导通路下游转导介质而存在的;通过Smad3选择性调节,具有多重生物学效应的TGF-β1才得以实现其促进MSC成骨分化的功能.
作者：王运涛；吴小涛；郑启新；陈辉；李永刚；茅祖斌 刊期： 2007年第07期
目的:探讨磁共振成像(MRI)对骨嗜酸性肉芽肿的影像诊断价值.方法:回顾分析经病理诊断证实的13例骨嗜酸性肉芽肿患者,所有病例均行X线平片及MRI检查,12例经CT检查.结果:MRI能显示所有的病变,除1例患者外,所有患者的病灶都于T1加权像呈低信号,T2加权像呈高信号;骨损害和周围软组织异常在短时间反转恢复序列(STIR)和T1加权增强后图像上显示尤为明显;2例患者使用化疗药物治疗后进行随访,MRI显示与治疗前相比较病灶的范围变小且信号强度降低.3例患者X线平片病灶显示不明显,MRI能显示更多的异常信息.CT检查均能发现异常,表现为骨质破坏及邻近骨皮质损害、骨膜反应、软组织肿胀或肿块形成.结论:MRI对病变范围、软组织改变及邻近结构是否受累显示十分清楚,能获得骨骼软组织解剖及病理结构改变的细节,结合X线平片和CT能提高诊断与鉴别诊断水平.
作者：刘强；卢光明；袁彩云 刊期： 2007年第07期
糖尿病慢性并发症的发生、发展不仅与整体血糖水平相关,而且与血糖波动性有密切关系.血糖大幅波动可能通过激发多种代谢途径而导致微血管和大血管损伤.临床造成糖尿病患者血糖波动过大的主要原因有两个:未经合理控制的餐后高血糖和治疗不当导致的低血糖.α-葡萄糖苷酶抑制剂、格列萘类胰岛素促泌剂及速效、长效人胰岛素类似物等新剂型的出现,使糖尿病的治疗更加精细和安全,血糖控制更加严格和平稳,为减少血糖波动提供了有力武器.
作者：王燕燕 刊期： 2007年第07期
Wnt途径是一种对控制胚胎发育起重要作用的信号传导途径,而其不恰当地活化参与人类多种肿瘤的发生.新近多项肿瘤相关研究显示,Wnt-5a是一个良好的肿瘤侵袭和预后标记物,但令人费解的是,它在不同肿瘤中具有截然不同的表达方式.现就近年来Wnt-5a与肿瘤间的相关性研究进展作一综述.
作者：刘晓红；周晓军 刊期： 2007年第07期
目的:分离大鼠胎鼠小肠黏膜来源的边缘群(SP)细胞,并分析其生物学特性.方法:取Wistar大鼠胎鼠小肠全长,按文献[3]方法制作小肠黏膜的类器官片段并制备成单细胞悬液.使用Hoechst33342和PI染色后用流式细胞仪分选SP细胞.提取分选前后的细胞总RNA和蛋白,用实时定量PCR及Western-blot方法分别检测其中MSI-1RNA及MSI-1蛋白的表达水平.结果:大鼠胎鼠来源的小肠黏膜单细胞悬液中包含一个特定的细胞群体-SP细胞,染色液中加入维拉帕米后,SP细胞被阻断后消失.定量PCR检测显示SP细胞中MSI-1mRNA水平是分选前的8.125倍,是非SP细胞的20.077倍.Western-blot结果显示MSI-1蛋白水平明显高于分选前.结论:大鼠胎鼠的小肠黏膜SP细胞富集小肠黏膜干细胞,与小鼠来源SP细胞生物学特性基本一致.
作者：王震龙；韩钦；赵春华；李宁；黎介寿 刊期： 2007年第07期
目的:探讨微创清除术治疗中重型高血压脑出血的临床疗效.方法:将2000年4月至2004年7月采用微创术治疗的124例中重型高血压脑出血患者(微创组)与原来常规内科治疗的120例同类患者(对照组)进行疗效对比.结果:微创组对中型脑出血患者的近期疗效优于对照组(P＜0.01),微创术能显著降低重型患者的病死率(P＜0.01).结论:微创术能显著提高中重型高血压脑出血患者的救治成功率.
作者：阳世宇；孙海晨；吴学豪；钱晓明；唐文杰 刊期： 2007年第07期
目的:比较舒芬太尼或芬太尼复合二异丙酚在腹腔镜胆囊切除术麻醉的心血管反应.方法:腹腔镜胆囊切除术全身麻醉患者113例,随机分为两组,舒芬太尼组(舒芬太尼0.3μg/kg)60例和芬太尼组(芬太尼3μg/kg)53例.分别记录麻醉诱导前、气腹前、气腹后即刻、手术结束时的以下指标:平均动脉压(MAP)、心率(HR)、每搏量(CO)和心排血指数(CI).结果:两组患者麻醉诱导前的MAP、HR、CO和CI组间比较,差异均无统计学意义;气腹后即刻与气腹前时比较,芬太尼组HR和C0有明显增高(P＜0.05),舒芬太尼组差异无统计学意义.结论:在腹腔镜胆囊切除手术中对气腹引起的心血管反应,舒芬太尼比芬太尼有更好的抑制作用.
作者：陈兴东；段满林；李伟彦 刊期： 2007年第07期
Neurotrophin 3(NT-3)是本体感觉神经存活和发挥生理功能所必需的营养因子.在胚胎期缺失NT-3,可直接导致本体感觉神经元凋亡,进而导致本体感受器(肌梭)不能分化发育.同时,NT-3在本体感觉神经投射和形成突触联系中起关键的诱导作用.成年后缺失NT-3,也同样可导致本体感觉神经功能下降.在病理状态下NT-3可以保护本体感觉神经,并促进其恢复正常生理功能.
作者：王嵘；邱勇 刊期： 2007年第07期
目的:研究在内眼手术中局部低温环境是否对血-眼屏障具有保护作用.方法:20只新西兰大白兔行双眼睫状体平部玻璃体切割术,术中左眼用低温(4～10 ℃)眼内灌注液为低温组,右眼用室温(25℃)眼内灌注液为室温组,每组各20只眼.术后24 h检查对比视网膜变化;玻璃体腔穿刺抽取眼内液送生化检测;取视网膜送透射电镜(TEM)检查.结果:低温组葡萄膜炎性反应普遍轻于室温组,屈光间质透明度总体优于室温组.眼内液总蛋白浓度室温组明显高于低温组,差异具有显著性意义(P＜0.01).电镜下低温组视网膜节细胞超微结构改变轻微,而室温组则变性、损坏相对明显.结论:在实验动物眼后段手术中,局部低温环境对手术引起的创伤炎性反应具有抑制作用,对血-视网膜屏障有一定的保护作用.
作者：刘军；李一壮；陈晖；印洪林 刊期： 2007年第07期
B7同系物1(B7-H1)分子是共刺激分子B7家族的重要成员,在淋巴细胞及大部分外周组织可以广泛诱导性表达.B7-H1可以和T、B细胞上程序性死亡-1(PD-1)受体及另一未知的刺激性受体结合,调节淋巴细胞的功能.B7-H1分子的表达与肿瘤、炎症、器官移植排斥以及病毒感染等疾病密切相关.通过调控B7-H1的表达水平来调节淋巴细胞的免疫功能,将为疾病的免疫治疗提供新的思路.
作者：陈良恩；王福生 刊期： 2007年第07期
乳糜尿是晚期班氏丝虫病的常见并发症[1].早期乳糜尿可采用饮食及药物等保守方法进行治疗,但当患者丢失大量脂肪和长期血尿以致消瘦、贫血或伴有乳糜块阻塞尿道造成排尿困难等严重症状时,就需进行肾盂灌注或手术治疗.用硝酸银进行肾盂灌注的作用机制是硝酸银有较强的抑菌及黏膜收敛作用,快速灌注后药液在肾盂内形成一过性高压,使药液逆流入淋巴管内烧灼而产生无菌性炎性反应,封闭淋巴管和肾盂的通道,闭塞瘘管而使乳糜尿消失[2].我科近年来采用此法对乳糜尿患者进行积极的治疗和护理,均取得满意疗效.现总结报道如下.
作者：达建平；张征宇 刊期： 2007年第07期
目的:探讨化脓性膝关节炎伴有邻近骨骨髓炎的的治疗.方法:对2000年9月至2006年3月诊断为化脓性膝关节炎的52例患者进行回顾分析,其中9例磁共振(MR)显示伴有临近骨髓炎.采用清创、负压引流等方法治疗.结果:9例感染均得到控制,膝关节功能评分:优33例,良44例,满意11例,差11例.结论:难治性化脓性膝关节炎患者应考虑伴有邻近骨骨髓炎的可能,MR应作为常规检查,此类患者感染的关节及骨髓应同时进行清创.
作者：李斌；陆维举；赵建宁；陈勇；时宁文；任可 刊期： 2007年第07期
目的:观察婴幼儿血管瘤中免疫细胞的分布及其变化过程.方法:52例婴幼儿血管瘤标本,以CD3、CD8、S-100分别作为T细胞、细胞毒性T细胞(Tc细胞)和树突细胞(DC)的标记性抗原,采用免疫组化染色观察上述免疫细胞在血管瘤组织中的分布.结果:①早期血管瘤组织中基本无CD3+T细胞;增殖中期CD3+T细胞增多,CD8+T细胞仍然稀少;增殖晚期CD3+T细胞很多,CD8+T细胞也增多;消退早期在微血管周围仍散在分布少量CD3+T细胞和CD8+T细胞;消退中期和消退完成期血管瘤组织中有少数CD3+T细胞,而CD8+T细胞很少.②增殖早期血管瘤组织中散在分布少量DC;增殖中期和晚期DC数量显著增多.消退早期之后,DC数量迅速减少,以至基本消失.结论:T细胞及其亚群和DC的分布及其功能变化,与血管瘤病理演变过程有密切联系,婴幼儿免疫系统功能逐渐成熟,可能是血管瘤消退的主要原因之一.
作者：袁斯明；姜会庆；欧阳天祥；邢新 刊期： 2007年第07期
目的:通过与选择性冠状动脉造影(SCA)对比,评价双源CT(DSCT)在冠状动脉狭窄患者中的应用价值,并系统分析其对不同程度冠状动脉狭窄的诊断价值.方法:52例疑似冠心病患者,男44例,女8例,平均年龄70.59岁,分别予以SCA和DSCT检查.由两位医师采用双盲法对检查结果进行比较.结果:发现DSCT对冠状动脉重度狭窄评价的敏感性为92.31%,特异性为99.82%,阳性预测值为90.57%,阴性预测值为99.32%.结论:提示DSCT可以用于判断冠状动脉狭窄情况,尤其对冠状动脉重度狭窄患者的敏感性和特异性较高,可作为冠心病患者筛查、冠状动脉手术患者术前评价和术后随访的可靠方法.
作者：郭华；张龙江；江时森；王立军；钟勇；汤沂；卢光明 刊期： 2007年第07期
目的:研究抗卵泡刺激素(FSH)自身抗体大鼠模型睾丸生精功能低下的可能机制.方法:SD大鼠(21d龄,30只),随机分为实验组和对照组,每组各15只.实验组用18肽-KLH免疫,对照组用KLH免疫,每隔2周加强免疫1次,共7次,直至实验结束.分别于免疫第77、91及105 d时心脏取血处死实验组和对照组大鼠各5只,收集血清.采用ELISA法检测模型大鼠血清FSH、黄体生成素(LH)和抑制素B水平,并以Rpl19为内参照,用荧光定量PCR法检测睾丸内Bax mRNA水平,同时用末端标记技术(TUNEL)检测睾丸生精细胞凋亡情况.结果:免疫后第77和91 d的实验组大鼠血清FSH水平显著低于对照组(P＜0.05),免疫105 d后,实验组大鼠FSH水平有所回升.与对照组相比,实验组大鼠血清抑制素B水平均显著降低(P＜0.05).血清LH水平在两组大鼠间无显著差异.免疫后第77、91及105 d的实验组大鼠睾丸内Bax mRNA水平,分别为对照组的2.15、3.77和1.89倍,TUNEL检测结果也显示实验组大鼠睾丸生精细胞凋亡指数显著高于对照组.结论:抗FSH自身抗体可能通过与FSH形成抗原抗体免疫复合物,以降低外周血中FSH浓度,进而激活Bax相关凋亡通路,诱导生精细胞凋亡,导致模型大鼠睾丸生精功能低下.
作者：徐会茹；侯林；王晨阳；蒋超；黄祝；姚兵 刊期： 2007年第07期
肾嗜酸细胞瘤(oncocytoma)是一种肾良性肿瘤,来源于集合小管的间质细胞,发生率约占肾肿瘤的3%～7%,大多数(56%～91%)为偶然发现,2000年3月至2005年12月,我院共收治3例肾嗜酸细胞瘤患者,我们通过对这3例患者的超声资料回顾,旨在提高彩色多普勒超声对肾嗜酸细胞瘤的诊断水平.现结合文献复习讨论如下.
作者：陈松华；王炼 刊期： 2007年第07期
医学研究生学报杂志
主管:南京军区联勤部卫生部
主办：南京军区南京总医院
