学术投稿

丝状真菌脱氧核糖核酸片段快速扩增法

李立青;苏明权;郝晓柯

关键词:丝状真菌, 聚合酶链反应, 脱氧核糖核酸
摘要:目的:用聚合酶链反应(PCR)法扩增丝状真菌中脱氧核糖核酸(DNA)片段. 方法:将菌丝液氮研磨成粉状后溶于三羟甲基氨甲烷缓冲液(TE),煮沸15~20 min后,用上清做模板扩增DNA片段,然后将PCR产物作琼脂糖电泳,把含有目的片段的胶切下后溶于TE,做第2次PCR的模板,PCR后琼脂糖凝胶电泳. 结果:获得大量目的DNA片段. 结论:此方法从丝状真菌中扩增DNA片段,是一种既经济又方便可行的方法,大大提高了工作效率,其效果显著.
医学研究生学报杂志相关文献
  • 逆行胰胆管注射制备改良的大鼠急性坏死性胰腺炎模型

    急性出血坏死性胰腺炎(acute hemorrhagic necrotizing pancreatitis,AHNP)是临床常见的腹部疾病,其发病机制至今尚未完全阐明.AHNP动物模型的制作已有半个多世纪的发展历史,自1950年Farber等予以小鼠口服乙硫氨酸饲料成功诱发急性胰腺炎,至1980年Aho等首次采用逆行胰胆管注射法诱导出AHNP,以及近年来采用的动脉微球注射法、胰腺包膜下均匀注射法、电针刺激法、腹腔注射精氨酸法[1-4]等,AHNP的动物模型制作方法历经了许多变革,各种模型制作方法有着不同的优缺点.本研究拟在经典的并得到广泛公认的经十二指肠乳头插管逆行注射致活剂(AHO)法的基础上,结合一些改进措施,介绍一种改良后的、简便可行的、适宜大批量制作AHNP动物模型的方法.

    作者:黄骞;全竹富;石群立 刊期: 2005年第07期

  • 球样子宫平滑肌瘤钙化

    子宫平滑肌瘤是育龄女性的高发疾病,因其局部供血不足等原因,在其病程发展过程中可出现囊性、玻璃样、钙化等变性,而子宫平滑肌瘤的钙化常以局灶点状钙化为主要形式,全子宫平滑肌瘤类似于鹅卵石的球样钙化实数罕见.国内自1994年至2004年共报道子宫平滑肌瘤钙化11例,其中>3 cm的球样钙化肌瘤有4例[1-4].现将我们收治的1例结合文献复习总结报道如下.

    作者:朱洪磊;孙惠敏;严循娣;刘琦 刊期: 2005年第07期

  • 人体测量指数和脂质代谢与胰岛素抵抗的相关性

    目的:探讨江苏南京地区健康人群中体重指数(BMI)、腰臀围比(WHR)、腹围(AC)这三种人体测量值以及脂质代谢指标与胰岛素抵抗的相关性. 方法:对3 445例南京地区18~90岁长期居住汉族健康成人的BMI、WHR、AC进行流行病学调查,对受检者检测身高(m)、体重(kg)、腰围(cm)、AC(cm)、臀围(cm), 并测定空腹血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A(apoA)、载脂蛋白B(apoB)和空腹血糖(FPG)、真胰岛素(TI)及免疫反应性胰岛素(IRI).分别以Si1=1/(FPG×TI)和Si2=1/(FPG×IRI)作为胰岛素敏感指数(Si),对BMI、WHR、AC和脂质代谢指标与胰岛素抵抗的相关性进行分析. 结果:在去除年龄、性别对血糖代谢的影响以及几种测量指标和脂质代谢指标之间的相互影响后, BMI与FPG、TI呈现显著正相关,与Si1呈现显著负相关(r=-0.261,P<0.001);TG与TI呈现显著正相关(r=0.170,P<0.01),而与Si1呈现显著负相关(r=-0.158,P=0.001),多元逐步回归也证实了Si1与BMI、TG呈显著负相关.所有指标与Si2均无相关性. 结论:BMI和血清TG是评价胰岛素敏感性和胰岛素抵抗的佳指标.TI与肥胖和脂质代谢紊乱相关性明显强于IRI,以TI计算的胰岛素敏感指数与肥胖和脂质代谢紊乱的相关性明显强于以IRI计算的胰岛素敏感指数.TI和以TI计算的胰岛素敏感指数是理想的胰岛素抵抗观测指标.

    作者:邵加庆;于镔;赵明;王燕燕;王坚;田成功 刊期: 2005年第07期

  • 原发性肝癌患者血清p16基因启动子甲基化的分析

    目的:分析原发性肝癌(PLC)患者血清中p16启动子区域甲基化的改变状况及其临床意义. 方法:运用甲基化特异性PCR技术,检测64例PLC患者血清p16基因启动子区域甲基化的改变情况,并分析与临床病理资料的关系. 结果:PLC患者血清p16基因甲基化检出率为76.6%(49/64),而正常对照组和良性肝病组患者血清未检出p16基因甲基化,p16基因甲基化检出率与乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、甲胎蛋白(AFP)、疾病分期及转移状态无明显关系. 结论:p16基因检出启动子区域异常甲基化是PLC早期辅助诊断的分子标记物之一.

    作者:陈龙邦;林勍;唐永明;王晶 刊期: 2005年第07期

  • 以问题为基础的学习教学法在肝胆外科临床实习中的应用

    以问题为基础学习(problem-based learning, PBL)教学始于1969年加拿大的麦克玛斯(Me Master)大学医院,是近年国际上较新的一种教学方法.其教学的基本程序是:临床病案-问题-自学-讨论-总结.PBL教学法具有以下特点:它以学员为中心,老师为引导者,自我指导学习及小组讨论为教学形式的课程模式,有效调动学员主观能动性,能切实提高学员分析问题、解决问题的能力,有助于创造力的培养,是全面贯彻素质教育的途径之一.

    作者:鲁曼华;王春晖;展德廷;张爽 刊期: 2005年第07期

  • 多次上腹部手术患者腹腔镜胆囊切除术的可行性研究

    目的:探讨多次(≥2次)上腹部手术患者腹腔镜胆囊切除术(LC)的可行性和手术特点. 方法:连续观察21例有多次上腹部手术史的LC患者,对治疗结果进行回顾性分析. 结果:LC成功13例,成功率为61.9%.2次上腹手术后患者LC成功率为66.7%,3次者为33.3%.8例中转剖腹手术,中转率为38.1%,平均手术时间为72.1 min,明显高于同期无上腹部手术史的患者.LC完成及中转剖腹手术患者均无相关手术并发症发生. 结论:多次上腹手术史不应成为LC的禁忌证,但其手术难度加大,中转剖腹率增高,手术时间延长,对手术医师的技术要求较高.

    作者:李令堂;嵇武 刊期: 2005年第07期

  • 数字化X线胸片计算机辅助检测在肺结节诊断中的应用价值

    目的:评价计算机辅助检测 (CAD )系统对肺结节诊断的价值. 方法:选取120例有肺部单发结节( 直径9~30 mm)的患者, 所有肺结节病灶均经病理证实. 另从健康体检人群中随机抽取120例年龄、性别与受检组相仿者作为对照组. 两组患者均经CT证实, 并由多位放射学专家共同诊断. 所有X线胸片均通过数字化放射成像 (DR) 获得. 由5名高年资和5名低年资影像医师作为观测者,分别对不用和用CAD输出图像的X线胸片进行诊断. 观察者积分用受试者操作特性(ROC)曲线分析来衡量. 结果: 平均ROC曲线下面积从不用CAD输出图像的0.762增加至用CAD输出图像的0.825 (P<0.05 ) , 在使用CAD输出图像时, 低年资影像医师比高年资影像医师的平均ROC曲线下面积增加更多. 结论:运用数字化X线胸片所配置的CAD系统,能帮助影像诊断医师提高对肺结节性病灶的检出率.

    作者:陈自谦;张碧云;赵政文;卢光明 刊期: 2005年第07期

  • 梗阻性不稳定膀胱模型的尿流动力学评价

    目的:建立兔不全梗阻性不稳定膀胱动物模型,并观察其尿流动力学的变化. 方法:取雄性成年新西兰大白兔30只,随机分为对照(假手术)组和梗阻组各15只.不全梗阻性手术后第8周,在氯胺酮和氟哌利多全麻下行尿流动力学等检侧. 结果:梗阻8周后,梗阻组兔的膀胱尿流动力学主要参数较对照组有显著变化.梗阻组不稳定膀胱的发生率为60%.该膀胱出口不全梗阻动物模型无论从膀胱的病理或尿流动力学的改变,均与人类慢性膀胱出口不全梗阻类似. 结论:这一动物模型的成功建立,为进一步研究人类慢性不全梗阻性不稳定膀胱疾病的病理、病理生理变化及治疗提供了一个平台.

    作者:龚隽;程文;高建平;张征宇;葛京平;周水根;周文泉;马宏青;魏武;薛松;徐振宇;王冬;许松 刊期: 2005年第07期

  • 彩色多普勒超声检测重度贫血患者心脏结构和功能的研究

    我院自1992年至2002年应用彩色超声心动图对慢性重度贫血(chronic severe anemia, CSA)患者116例的心脏结构和功能进行观察研究,并与对照组进行比较,现报道如下.

    作者:郭维琼;黄承 刊期: 2005年第07期

  • 大鼠死亡后外周血和尿液中心脏型脂肪酸结合蛋白的研究

    目的:观察心肌梗死大鼠死亡后不同时间段外周血和尿液中心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)含量变化.方法:按Johns法结扎大鼠左冠状动脉前降支,复制心肌梗死模型,用酶联免疫吸附(ELISA)法测定大鼠死亡后不同时间段外周血和尿液中H-FABP含量. 结果:①实验组外周血H-FABP浓度显著高于对照组;随着死亡时间的延长,其含量持续升高,12 h组H-FABP含量显著高于0 h组,48 h组显著高于24 h组.②实验组尿液H-FABP浓度均显著高于对照组,大鼠死亡后其浓度呈现波浪状升高;心肌梗死大鼠死亡6 h组尿液H-FABP浓度显著高于0 h组,12、24 h时H-FABP含量降低,但仍显著高于0 h组,48 h组尿液H-FABP浓度再次升高,显著高于6 h组. 结论:心肌梗死大鼠死亡后外周血和尿液中H-FABP 浓度受组织自溶的影响出现异常升高,因而H-FABP外周血和尿液浓度检测用于死后诊断心肌梗死性猝死证据不足.

    作者:郎博娟;孟祥志;王琼 刊期: 2005年第07期

  • RECK基因在前列腺癌组织中的表达及其与基质金属蛋白酶的关系

    目的:通过检测RECK基因以及基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)在前列腺癌组织及正常前列腺中的表达,探讨RECK基因在前列腺癌发生及转移过程中的作用. 方法:抽取组织总RNA,应用RT-PCR方法检测RECK及MMP-2、MMP-9 mRNA的表达;抽取组织总蛋白,应用Western blot方法检测RECK蛋白的表达. 结果:前列腺癌组织RECK mRNA的含量较正常组织明显降低(P<0.05),MMP-2、MMP-9 mRNA含量则明显升高,RECK蛋白的表达亦较正常组织明显降低. 结论:RECK是一种抑癌基因,可抑制MMP-2、MMP-9的表达,从而抑制前列腺癌的发生和转移.

    作者:徐振宇;高建平;张征宇;葛京平;许传亮;孙颖浩 刊期: 2005年第07期

  • 储尿和排尿的中枢性控制

    猫与人类排尿和储尿存在着相似的中枢性控制调控方式.近十年来,关于储尿和排尿神经通路的研究已获丰硕成果,为此作者作一简要综述.

    作者:程文;高建平;张征宇 刊期: 2005年第07期

  • 壳糖止血海绵的药效学研究

    目的:研究壳糖止血海绵对家兔耳静脉创口的吸渗、止血作用及皮肤烫伤后促进愈合的作用,为临床用药提供实验依据. 方法:用刀片划破血管,分别用壳糖止血海绵、明胶海绵和纱布压迫出血处,30 s后去除海绵和纱布,观察止血效果;在家兔烫伤创面,分别敷壳糖止血海棉、明胶海棉和纱布,观察10天内脱痂情况. 结果:与明胶海绵组比较,壳糖止血海绵止血时间明显缩短(P<0.05);促进创口愈合,创面脱痂时间缩短. 结论:壳糖止血海绵对创口的止血、促愈合疗效确切.

    作者:宋炳生;李汉宝;陈家英 刊期: 2005年第07期

  • 营造重症监护室以人为本的护理氛围

    重症监护室(intensive careunitI, ICU)是危重患者集中的地方,ICU先进的监测设备和医护人员精心的医疗护理,挽救了许多患者的生命,使之恢复了健康.然而,ICU的特殊环境、管理制度和在治疗护理过程中所经受的痛苦体验,往往导致患者情绪异常.有调查显示,ICU中约有50%的急、危、重症患者产生不良的心理反应.对200例外科患者专访表明,高达86%的患者有精神或行为异常,而胸部手术后精神障碍则更为多见.这些心理和精神的障碍不同程度地干扰了康复进程和愈后生活.因此,必须密切关注ICU患者的心理健康,预防并减少不良心理因素,积极营造以人为本的护理氛围.

    作者:仲继红 刊期: 2005年第07期

  • 尼氟酸对大鼠体外心脏缺血-再灌注性心律失常及心功能的影响

    目的:观察氯通道阻断药尼氟酸(NFA)对大鼠体外心脏缺血-再灌注性心律失常及心功能的影响. 方法:采用大鼠Langendorff体外心脏灌注模型,阻断冠状动脉,模拟心肌缺血,观察心功能指标、心率和心律失常积分值的变化. 结果:NFA(10 μmol/L)可使缺血性心律失常分数值明显降低(P<0.01),但对再灌注性心律失常无明显影响;NFA对体外大鼠心脏具有明显的负性变时和变力作用(P<0.05),且呈剂量依赖性. 结论:氯通道阻断药NFA具有明显的抗缺血性心律失常作用.

    作者:朱军;王跃民;马恒;张鹏;杨俊;赖小刚;周士胜 刊期: 2005年第07期

  • 清创Ⅰ期植骨治疗胫骨感染性骨不连

    目的:探讨胫骨感染性骨不连的治疗. 方法:采用彻底清创,Ⅰ期植骨的方法对38例患者进行治疗. 结果:38例中,35例感染控制达到骨性愈合,3例失败,其中感染复发2例,骨不连1例. 结论:彻底清创,Ⅰ期植骨是治疗胫骨感染性骨不连的可行方法.

    作者:李斌;陆维举;赵建宁;吴苏稼;陈勇;陆萌 刊期: 2005年第07期

  • 期刊编辑部信息管理系统的应用研制

    期刊稿件处理工作量大、繁琐、重复劳动多,如何有效地组织和管理在稿件、审理、编发、组版等工作中产生的大量数据是编辑部工作的重要环节.目前,编辑部办公管理系统软件大多较复杂,且需投入较多人力,易造成浪费.我们在工作中自制了简易的期刊稿件信息管理系统,大大减轻了工作量,提高了工作效率,现介绍如下.

    作者:程童大;朱培元;马百坤;商学军;王安铁;陈丽艳;黄婷婷;黄宇烽 刊期: 2005年第07期

  • 核苷类抗乙型肝炎病毒药物耐药的分子机制与体外评价

    核苷类药物是目前抗乙型肝炎病毒(HBV)的主要药物,但它可引起HBV基因的变异,从而引起耐药.作者就核苷类药物引起变异的特点、产生抗药性的分子机制及体外评价等方面作一综述.

    作者:张岩;白雪帆 刊期: 2005年第07期

  • 减少毒性和不良反应的免疫抑制策略研究进展

    新型、高效免疫抑制剂的临床应用使肾移植术后急性排斥反应的发生率明显降低.然而,免疫抑制剂的毒性作用对肾移植患者的人/肾长期存活率却产生明显影响,正日益受到人们的重视.作者对目前减少毒性和不良反应的免疫抑制方案进行综述.

    作者:贾瑞鹏 刊期: 2005年第07期

  • Ⅰ型糖原贮积症肾损害临床表现和病理改变

    目的:分析Ⅰ型糖原贮积症(GSD-Ⅰ)肾损害的临床表现和病理改变. 方法:2000年该院收治1例GSD-Ⅰ肾损害患者,进行了为期15个月的随防,并结合收集的10例GSD-Ⅰ患者临床资料分析. 结果:①一般情况:11例患者平均年龄(20.4±7.17)岁,男∶女=7:4.大多数儿童及青年患者智力正常(9/9例)、身材矮小(男<163 cm,女<140 cm,10/10例)、消瘦[体质指数(BMI)<18.0 kg/m2,7/10例].8例患者有家族史.②肾损害:表现多种多样,蛋白尿(3/6例),镜下血尿(1/5例)和高血压(1/5例).高尿酸血症多见(7/7例),可有代谢性酸中毒(2/2例)及肾结石和(或)肾钙质沉着(3/4例),绝大多数患者肾肿大.③肾外表现:肝肿大(10/11例)、脾肿大(7/9例)、高脂血症,以三酰甘油升高(7/8例)为主,可合并高乳酸血症(4/4例),出血倾向也较常见(5/5例),约半数患者出现贫血(5/10例).低血糖发作(3例低血糖发作+1例饥饿感/7例),空腹血糖低于正常(7/10例)或在正常低界(2/10例). 结论:GSD-Ⅰ肾损害比较罕见,肾病临床表现和病理改变以及肾外临床表现在不同的患者间存在着差异.

    作者:王金泉;刘志红;王文荣;黎磊石 刊期: 2005年第07期

医学研究生学报杂志

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主管:南京军区联勤部卫生部

主办:南京军区南京总医院