夹心免疫PCR方法检测金葡菌肠毒素B

宋云扬；吴方晖；张靖；李蕊；王惠芳；李艳军

关键词：金葡菌肠毒素B, 免疫PCR, 戊二醛, 生物素, 亲和素

摘要：目的建立双抗夹心免疫PCR的检测技术,用于检测极微量的抗原.方法以亲和素作为连接分子,连接生物素化抗体和生物素化DNA,应用于免疫PCR中检测极微量金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB).结果双抗夹心免疫PCR的检测技术,检测SEB的灵敏度达0.1 ng/L,与夹心ELISA方法比较灵敏度高103倍.结论双抗夹心免疫PCR系统灵敏度高,可用于各种微量抗原的检测.

中国公共卫生杂志相关文献

南沙守礁人员心身健康状况调查研究

驻守在南沙岛礁人员,由于特殊的地理位置及职责、艰苦的环境对生理和心理可产生巨大的影响,而对这一特殊群体的研究较少.本研究旨在探讨南沙岛礁人员心身健康状况及其影响因素,以便为岛礁人员的卫勤保障提供依据.

作者：曾伟杰；支晓兴；吴新文；张东清；周静；夏菱；郑耕宇；薛松刊期： 2004年第07期
SARS突发疫情促使公共卫生事业准确定位

2003年突如其来的SARS突发疫情,不仅使人们认识了新发传染病所带来的危害和对社会生活所造成的巨大影响,更促使人们重新审视公共卫生事业在当今整个社会生活中的地位与作用,SARS已不是一个单纯的医学与健康问题,而正演化成为社会公共卫生管理的重大课题.由此而引发对公共卫生事业准确定位的探讨.

作者：田凤华刊期： 2004年第07期
食品中氯霉素残留量的定量检测方法研究

我国已实行了食品中氯霉素的高残留限量,但目前尚无与其配套的国家标准测定方法.氯霉素测定的常用方法有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱联用法(GC/MS)、酶联免疫法(ELISA),但其检测限相对较高.本文采用的二级质谱(GC/MS/MS)法,针对目前小型质谱仪的普及,采用台式离子阱质谱电子轰击电离(EI)源MS/MS方式,使检测具有灵敏、低限(0.1μg/kg),且净化相对简单,对需要检测的已知物质来说,一旦条件确定,GC/MS/MS法相当于此物质的专用检测器.现报告如下.

作者：王玉飞；吴开封；李继革刊期： 2004年第07期
气象因素与疟疾的数学模型研究进展

疟疾的发生与流行与多种自然及社会因素有关.近年来,建立气象因素与疟疾之间的模型及用模型预测在变化的气候中疟疾的流行潜势引起了许多学者的关注.现综述如下.

作者：武新民刊期： 2004年第07期
硫化镍对16HBE细胞中基因的影响

目的检测结晶型硫化镍(NiS)对K-ras基因和P15基因的改变及基因组不稳定性的影响,从而进一步探讨镍化合物致癌的分子机制.方法采用限制性片段长度多态性分析和聚合酶链反应-单链构象多态性分析方法探查结晶型NiS在诱导16人气管上皮细胞(HBE)恶变过程中的K-ras基因Exonl第12密码子及第12密码子以外的密码子改变情况.采用PCR-SSCP分析方法探查结晶型NiS在诱导16HBE细胞恶变过程中的P15基因Exon2存在状况.采用随机扩增多态性技术来对结晶型NiS在诱导16HBE细胞恶变过程中的基因组不稳定性进行分析.结果K-ras基因Exonl和P15基因Exon2未发生改变.本实验所选用的7条随机引物均能扩增出清晰、明显的条带.其中P4、P5、P7两条引物扩增的片段在实验组和对照组之间无差异,其余4条引物均有差异.对于同一随机引物他们都具有特异的带型.结论P15基因第2外显子和K-ras基因第1外显子(包括第12、13密码子)可能不是结晶型NiS作用的靶部位.在结晶型NiS诱发细胞恶性转化过程中,基因组变得逐渐不稳定.

作者：陈传德；吴中亮；陈家堃；纪卫东刊期： 2004年第07期
单克隆抗体在甲肝减毒活疫苗毒种检定中应用

目的利用单克隆抗体代替常规的人、猴免疫血清进行甲型肝炎减毒活疫苗毒种外源因子检查及鉴别试验.方法选择适宜的单克隆抗体浓度与甲肝病毒进行中和试验,观察单克隆抗体的中和作用;利用单克隆抗体中和毒种,进行外源因子检查,并应用于鉴别试验.结果此单克隆抗体可中和105细胞培养半数感染量(CCID50)甲肝病毒,比人、猴免疫血清的中和能力高约100倍;将此高效价的单克隆抗体中和毒种后进行血吸附及非血吸附外源因子检查,结果均为阴性;此单克隆抗体还可用于毒种鉴别试验.结论此高效价的单克隆抗体可代替人、猴免疫血清应用于毒种的外源因子检查及鉴别试验.

作者：钱汶；陈悦青；黄海鹰；汪媛；姜立民；庄昉成刊期： 2004年第07期
大连市游泳池尿素监测结果分析

游泳池水尿素是评价游泳池水质卫生的一个重要指标,其含量超标时将对人体产生危害.为加强游泳池水质卫生质量管理,了解池水卫生质量状况,保障游泳者身体健康,2003年1～12月我们对大连市人工室内游泳池进行统一检测.现将结果分析如下.

作者：洪雅洁；张淑云；关磊；郑岩；王民刊期： 2004年第07期
信息化管理系统在预防性健康体检中的应用

预防性健康体检是公共卫生体系中不可缺少的内容.为了更加系统化、规范化、高效率开展预防性健康体检工作,沈阳市疾控中心与沈阳东软公司联合开发了体检信息管理软件系统,使健康体检工作进入了信息化管理领域.现介绍如下.

作者：刘瑾；孙铭；李雅丽刊期： 2004年第07期
二氧化钛光降解饮用水中藻毒素的研究进展

近年来随着含有大量氮、磷等营养物质的工业废水、生活污水及农田排水进入水体,藻类获取了丰富的营养物而大量繁殖.在世界范围内,包括很多作为饮用水水源的水库、湖泊在内的水体有大量蓝藻水华(water bloom)形成.水华的爆发,不仅造成水体的感官性状恶化,而且由于某些藻类能分泌藻毒素,对人类健康构成危害.二氧化钛(TiO2)是一种优良的光催化剂,在废水处理、空气净化、抗菌等领域得到广泛应用.本文主要论述TiO2在降解饮用水中藻毒素方面的研究进展.

作者：隋少峰；刘志艳；张红；江媛媛刊期： 2004年第07期
妇女卫生用品监测结果分析

市场销售的妇女卫生用品主要包括卫生巾和卫生纸两大类.为了保护广大妇女的身心健康,为国家制定标准提供可靠的依据,我们对妇女卫生用品进行了监测,现将监测结果报告如下.

作者：董德义；王武环；王颖；张玉宽刊期： 2004年第07期
原发性高血压人群AGT基因多态性的研究

目的运用分子流行病学的研究方法,测定在中国人群中原发性高血压病人血管紧张素原(AGT)基因(A-20C)多态性分布频率并探讨上述基因多态性及环境因素与原发性高血压之间的关系.方法对安徽省西部原发性高血压病人进行流行病学调查,并运用多聚合酶链反应(PCR)结合限制性内切酶方法(RFLP)进行血管紧张素原基因(A-20C)多态性分布频率的测定,同时对影响高血压的诸多环境因素亦进行流行病学分析.结果 A等位基因的频率为84.7%,C等位基因的频率为15.3%,经卡方检验(χ2=0.58,P＞0.05)符合H-W平衡.AGT基因型与血压值的线性回归结果显示,在女性中AGT基因多态性(A-20C)的AC和CC基因型与AA基因型相比,SBP值显著升高(P＜0.05).结论ACT(A-20C)基因多态性测定尚属国内首次.与野生型(AA)比较,ACT突变型(AC+CC)对血压的影响以收缩压增高为主,而且以女性更为显著.

作者：张宁；李光刊期： 2004年第07期
接种乙肝疫苗后影响人体免疫应答的因素分析

目前,我国用于人群的接种乙肝疫苗均为基因重组乙肝疫苗.该疫苗主要分为酵母细胞和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)两种,虽然具有良好的免疫原性,但按目前WHO推荐的0、1、6个月免疫程序接种,仍有近10%的人群乙肝病毒表面抗体(抗-HBs)为阴性或达不到保护阈值(＜10 Mu/ml),用放射免疫法(RIA)检测时低应答或无应答者占15%～20%.现就影响乙肝疫苗免疫应答的因素及补救措施进行探讨分析.

作者：姚文清；张玉宽；王凯刊期： 2004年第07期
流感病毒裂解过程中的形态变化规律

目的研究流感病毒在裂解剂作用下不同时间的形态变化及对病毒亚单位结构形态上的影响,掌握流感病毒在裂解剂作用下的裂解规律.方法将纯化后的流感病毒抗原按0.5%～0.6%比例加入裂解剂Triton N101,分别在0.5,1,2,3,3.5,4,5,6 h取样,用有膜电镜载网粘取样品,用2%磷钨酸(PTA)负染,电镜下观察.结果流感病毒裂解可大致分为基质蛋白(Mprotein,MP)包膜膨胀阶段,神经胺酸酶(Neuraminidase NA)、血凝素(Hemagglutinin HA)、脂质双层(Lipid bilayer LB)脱落阶段,基质蛋白包膜破裂核衣壳(Nudeocapsid NP)溢出阶段、基质蛋白溶解阶段.结论采用震荡措施可使病毒间裂解进程趋于同步.

作者：颜淑芹；刘建华；舒适；王敏文；王志刚；赵晓青；张玉辉；袁延宝；盛军刊期： 2004年第07期
鞘氨醇对人结肠癌细胞的抑制作用

目的研究鞘氨醇对人结肠癌细胞的影响.方法采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)、细胞核分裂指数和3H-TdR掺入试验方法,所设剂量鞘氨醇分别为0,0.82,1.63,3.125,6.25,12.5μmol/L,以二甲基亚砜(DMSO)为溶剂对照.结果鞘氨醇对HT-29细胞的生长有明显抑制作用.在MTT试验中,不同浓度鞘氨醇对HT-29细胞的7 d抑制率分别为18%,45%,72%,87%和89%;在核分裂指数试验中,随着鞘氨醇剂量的增高,其核分裂指数明显降低;在3H-TdR掺入试验中,可见随着鞘氨醇剂量的增高,3H-TdR掺入到HT-29细胞中明显的减少,与阴性对照组相比有显著性差异.结论鞘氨醇对HT-29细胞的生长增殖有明显抑制作用,这可能是鞘磷脂抑制结肠癌的机制之一.

作者：宋士利；李百祥；韩云峰刊期： 2004年第07期
夹心免疫PCR方法检测金葡菌肠毒素B

目的建立双抗夹心免疫PCR的检测技术,用于检测极微量的抗原.方法以亲和素作为连接分子,连接生物素化抗体和生物素化DNA,应用于免疫PCR中检测极微量金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB).结果双抗夹心免疫PCR的检测技术,检测SEB的灵敏度达0.1 ng/L,与夹心ELISA方法比较灵敏度高103倍.结论双抗夹心免疫PCR系统灵敏度高,可用于各种微量抗原的检测.

作者：宋云扬；吴方晖；张靖；李蕊；王惠芳；李艳军刊期： 2004年第07期
氯化镧对大鼠全血中铁、铜和锌含量的影响

随着稀土元素应用的日益广泛,越来越多的稀土进入生活环境,进入食物链[1,2].通常人或动物的稀土摄入是经消化道进入血液.血液中的各种蛋白可能成为稀土离子的配体,从而影响血液中其它微量元素的运输.为探讨饮食中稀土元素摄入对血液中微量元素平衡的影响,我们在大鼠的饮水中加入不同剂量的氯化镧,X-射线荧光法测定大鼠血液中Fe、Cu和Zn的含量,并对实验结果进行统计分析,报告如下.

作者：冯流星；于彤；张智勇；刘年庆；李福亮；王文仲；任艳；李亚明；赵宇亮刊期： 2004年第07期
早期干预对双胎婴儿智能发育的影响

目的了解早期干预对双胎婴儿智能发育的影响.方法将2000年9月～2002年8月我院分娩的双(三)胎婴儿88例分为干预组(A)41例、对照组(B)47例,同期分娩的正常足月儿为正常对照组(C)51例.A组生后1月开始接受早期干预训练,B、C组未接受早期干预,3组均在纠正年龄1周岁进行中国婴幼儿智能发育测验(CDCC).结果A组精神发育指数(MDI)、运动发育指数(PDI)高出B组8.9和7.0分,有显著性差异(P＜0.01,P＜0.05),与C组比无显著性差异,而B组MDI、PDI较C组低13.7和8.4分,有显著性差异(P＜0.001,P＜0.05);身高、头围在3组间无显著性差异;A、B组体重无显著性差异,但2组均落后于C组(P＜0.01,P＜0.05).结论早期干预可促进双胎婴儿智能发育.

作者：张泓；冯秀娟；季平；郑明康；曾辉剑刊期： 2004年第07期
构树叶总黄酮对人永生化表皮细胞的防护效果

目的探讨构树叶总黄酮(totalflzvonoids of Broussonetia papyrifera,TFBP)对铅、砷引起的人永生化表皮细胞活性损伤和氧化损伤的防护效果.方法采集构树叶并利用聚酰胺柱洗脱法提取构树叶总黄酮.用不同剂量的铅和砷处理细胞,加入不同浓度的构树叶总黄酮,采用噻唑蓝(MTT)染色法检测细胞活性变化,采用丙二醛(MDA)试剂盒测MDA的变化.结果 0.1～1.0 mmol/L的醋酸铅对细胞的活性有抑制作用.低浓度亚砷酸钠(0.5～1.0μmol/L)对人永生化表皮细胞有增值作用,高于5.0 μmol/L的亚砷酸钠对表皮细胞生长有抑制作用.添加大于100mg/L TFBP后与对照组比较,MTT值明显升高,MDA的含量明显降低,有显著性差异.结论醋酸铅和亚砷酸钠对人永生化表皮细胞有活性损伤和氧化损伤,构树叶总黄酮TFBP能降低这种氧化损伤,对细胞有防护功能.

作者：杨雪莹；何瑞；王亭；曹玉广刊期： 2004年第07期
药物代谢酶维生素E琥珀酸酯抑制苯并(a)芘

目的探讨药物代谢酶在维生素E琥珀酸酯(VES)抑制苯并(a)芘毒性中的作用.方法建立B(a)P诱导的小鼠前胃癌模型,观察不同途径投予VES对前胃癌的抑制作用.再选择佳途径观察两相药物代谢酶在此过程中的变化.采用免疫荧光光度法检测小鼠肝脏微粒体(S-9组分)中Ⅰ相药物代谢酶乙氧基异吩恶唑0-脱乙基酶(Ethoxyresorufin 0-deethyase,EROD)活性;应用试剂盒测定S-9组分中Ⅱ相药物代谢酶谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性.结果经口投予和腹腔注射VES均可明显降低B(a)P诱导的小鼠前胃癌的发生.VES可显著降低肝脏Ⅰ相药物代谢酶乙氧基异吩恶唑0-脱乙基酶(EROD)的活性(39.1±3.05),与阳性对照组(57.9±3.16)比较,有显著性差异.结论VES可降低B(a)P诱导的小鼠前胃癌,作用机制可能是通过影响肝脏药物代谢酶的活性来实现.

作者：单毓娟；吴坤；于建武刊期： 2004年第07期
高效液相色谱法测定水发食品中甲醛

甲醛是具有致突变和致癌作用的毒害物质[1].甲醛含量的测定方法主要有滴定法、分光光度法、气相色谱法、高效液相色谱法(HPLC)[2,3]等,针对市场上多次出现水发食品含有甲醛的违法事件,笔者在水发食品中甲醛的测定方面,应用高效液相色谱法进行反复实验,取得了快速准确的预期目的.现将结果报告如下.

作者：宋新刊期： 2004年第07期