袁功武；兰生辉；刘曦明
骨肉瘤(Osteosarcoma)是常见的原发恶性骨肿瘤,其恶性程度高、预后差,严重威胁儿童和青少年的健康.表皮生长因子受体(EGFR)家族属于Ⅰ型跨膜酪氨酸激酶受体,其表达能够抑制肿瘤细胞凋亡,促进肿瘤细胞增殖、血管生成和远处转移.目前国内外有关EGFR家族与骨肉瘤进展的研究十分有限且存在较大争议.本文将对EGFR家族表达与骨肉瘤进展相关性以及EGFR抑制剂在骨肉瘤治疗中的应用作综合性阐述.
作者：王生淋；余凤强；林建华 刊期： 2018年第04期
高血压脑出血是神经内外科常见的急重症,死亡率高,严重危害患者的生命安全[1-2].以往研究表明高血压脑出血是一种与年龄相关的疾病,主要发生在中老年患者.然而,近年来高血压脑出血越来越多的出现在青年人中.一、资料与方法1.一般资料:2014年10月至2016年10月期间,吉林大学第一医院神经血管病外科采取行扩大翼点经外侧裂入路治疗青年高血压脑出血的76例患者资料(按照世界卫生组织颁布的青年标准:患者年龄在18～45岁),其中男62例,女14例.
作者：常鹏飞；李明；时敬国；鲁质成；王长坤；綦斌 刊期： 2018年第04期
目的 观察天冬氨酸β羟化酶(ASPH)在调节细胞自噬中的作用.方法 向OUMS-29、HEK-293T细胞转染ASPH质粒,Western blot检测转染后细胞p62、微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ的表达;向OUMS-29细胞共转染ASPH、pEGFP-LC3质粒,荧光显微镜下计算绿色荧光蛋白(GFP)-LC3-Ⅱ点状聚集阳性细胞数占GFP阳性细胞数的比率.沉默HuCCT1、SSP25细胞ASPH基因,Western blot检测细胞p62、LC3-Ⅱ的表达,并用噻唑蓝(MTT)法检测细胞自噬诱导剂雷帕霉素(Rapa)或二甲双胍(Met)对细胞生长速率的影响.结果 过表达ASPH使OUMS49、HEK-293T细胞内LC3-Ⅱ表达下降44％ (P =0.002,P=0.008),但不改变p62表达量(P =0.060,P=0.798);过表达ASPH使OUMS-29细胞GFP-LC3-Ⅱ点状聚集阳性细胞数占GFP阳性细胞数比率由50.84％降至28.31％ (P =0.002);ASPH基因沉默使HuCCT1、SSP25细胞内LC3-Ⅱ表达分别上调87％、133％(P =0.001,P=0.000),但不影响p62表达(P =0.677,P=0.168);细胞自噬诱导剂雷帕霉素或二甲双胍掩盖ASPH沉默对HuCCT1、SSP25细胞生长速率的影响.结论 ASPH通过抑制LC3-Ⅱ生成抑制细胞自噬;ASPH对细胞自噬的调节可能是其参与细胞生长调控的机制之一.
作者：邹婧；何继满 刊期： 2018年第04期
目的 观察巴戟天寡糖(MOO)对去卵巢大鼠心肌缺血再灌注损伤(IRI)的作用.方法 健康雌性SD大鼠100只按随机数字表法随机均分为5组,每组20只:空白对照组、假手术组、IRI组、MOO2.1 g/(kg·d)组、MOO 0.7 g/(kg·d)组.空白对照组仅开腹并分离卵巢,假手术组开腹切除双侧卵巢并开胸暴露心脏,其余3组均按去卵巢心肌IRI模型处理,其中MOO 2.1g/(kg·d)组、MOO 0.7 g/(kg·d)组给予含相应浓度MOO的10 ml/kg药液灌胃.实验结束均称重大鼠及其子宫,并取出心脏组织,采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),采用硫代巴比妥酸法检测微量丙二醛(MDA)水平;采用酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;采用Western blot法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)、磷酸化p38(p-p38)、磷酸化p53(p-p53)蛋白表达.结果 各组SOD、GSH-Px、MDA、TNF-0、IL-1β、IL-6、bcl-2、bax、p-p38、p-p53比较差异均有统计学意义(F=205.773、268.788、57.214、205.395、264.242、221.096、202.681、70.138、132.288、64.817,P均=0.000). MOO2.1 g/(kg·d)组[(152.11±4.53)、(134.34±5.20) U/mg]、MOO 0.7 g/(kg·d)组[(137.96±5.21)、(118.60 ±4.37) U/mg] SOD、GSH-Px水平高于IRI组[(87.40±6.28)、(69.91±5.48) U/mg],而MOO 2.1 g/(kg·d)组[(2.30±0.11) nmol/mg,(79.26±8.32)、(96.76±7.63)、(137.42 ±7.85) ng/g]、MOO 0.7g/(kg·d)组[(2.81±0.15) nmol/mg,(99.87 ±8.84)、(130.86±8.37)、(157.19±12.20) ng/g] MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6水平低于IRI组[(4.06±0.65) nmol/mg,(158.46±14.65)、(192.47 ±9.61)、(233.59±14.37) ng/g,P均=0.000].与MOO 2.1 g/(kg·d)组比较,MOO 0.7g/(kg·d)组SOD、GSH-Px水平降低,而MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高(P均=0.000).MOO 2.1 g/(kg·d)组(1.45±0.15)、MOO 0.7 g/(kg·d)组bcl-2水平(1.03±0.13)高于IRI组(0.60±0.12,P均=0.000);而MOO 2.1 g/(kg·d)组bax、p-p38、p-p53水平[(1.71±0.16)、(4.25±1.07)、(2.99±0.61)]、MOO 0.7g/(kg·d)组(2.05±0.14、5.90±1.46、5.19±1.16)低于IRI组(2.39±0.23、11.79±1.46、6.22±1.35,P均=0.000).MOO 2.1 g/(kg,d)组和MOO0.7g/(kg·d)组SOD、GSH-Px、MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6、bcl-2、bax、p-p38、p-p53比较差异均有统计学意义(P均=0.000).结论 MOO对去卵巢心肌IRI有保护作用,能够减轻去卵巢心肌IRI中细胞损伤或凋亡,其中p38、p53信号通路发挥重要作用.
作者：王志红；刘海；黄冬梅；邓克红；王武亮；徐臻；袁博；胡滨；王燕 刊期： 2018年第04期
目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对胃癌细胞SGC-7901、BGC-823迁移和侵袭的影响及机制.方法 采用Transwell小室将BMSCs与胃癌细胞共培养的方式,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路相关蛋白的表达.结果 与BMSCs(-)组比较,BMSCs(±)组胃癌细胞活力、迁移能力、侵袭能力均显著降低;在胃癌细胞SGC-7901中,MMP-2、MMP-9、PI3K以及磷酸化Akt(p-Akt)表达量分别为0.92 ±0.06、0.68±0.08、0.58 ±0.03、0.29±0.02,较对照组显著下调(P=0.000、0.012、0.031、0.027);在胃癌细胞BGC-823中,MMP-2、MMP-9、PI3K以及p-Akt表达量分别为0.50±0.05、0.26 ±0.04、0.31 ±0.02、0.13 ±0.03,较对照组均显著下调(P=0.018、0.023、0.029、0.016).结论 BMSCs可能通过阻断PI3 K/Akt信号通路抑制胃癌细胞的迁移及侵袭.
作者：张琳；李良庆；郑建涛 刊期： 2018年第04期
胶质瘤相关癌基因同源蛋白2(GLI2)是Hedgehog(Hh)信号通路中重要的转录因子.本研究旨在观察GLI2在膀胱癌组织中的表达,探讨其作用机制.一、材料与方法1.材料与方法:77例病理检查证实为膀胱尿路上皮癌的患者.人膀胱癌细胞株T24购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心.我们利用小干扰RNA(siRNA)下调GLI2的表达,并进行进一步的细胞实验.2.统计学方法:计量资料和计数资料分别采用t检验和x2检验.使用Stata 12.0统计软件分析,以P＜0.05为差异有统计学意义.
作者：孙立江；徐升；官丰菊；李斌；董大海；骆磊；张桂铭 刊期： 2018年第04期
目的 观察大黄素对肺动脉平滑肌细胞的增殖和迁移抑制作用.方法 采用原代人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC),常规培养、建立缺氧细胞模型,采用不同浓度(0、5、10、15、20 μmol/L)大黄素分别处理于缺氧环境下培养12、24、48、72 h后,噻唑蓝(MTT)和Transwell侵袭实验检测缺氧肺动脉细胞增殖及迁移.用Westemblot法测定大黄素对缺氧HPASMC p38蛋白的表达.结果 大黄素对缺氧HPASMC的增殖及迁移呈浓度及时间依赖性抑制.浓度为20 μmol/L时效果显著,其12、24、48、72 h抑制率依次为(53.46±1.81)％、(61.32±2.69)％、(76.34±3.05)％、(84.43±3.18)％.Transwell实验组(5、10、15、20μmol/L)大黄素干预后细胞迁移数依次为(68.90±8.49)、(46.10±5.63)、(27.56±5.38)、(12.61±3.68)个与对照组[(88.59±8.56)个]比较明显减少.与对照组比较,实验组p38蛋白的表达均减少(P=0.001).结论 大黄素可明显抑制缺氧环境下人肺动脉平滑肌细胞的增殖及迁移,并下调其p38蛋白表达水平.
作者：李海燕；李鲲；冯旭；王康；覃家锦 刊期： 2018年第04期
目的 观察人脐带沃顿胶(WJ)对脑外伤小鼠的神经修复作用.方法 采用小鼠CCI脑外伤模型建立动物模型,将实验小鼠随机分为Veh和WJ移植组.术后3d,干湿称重法检测小鼠损伤侧脑含水量,酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-10的表达,碘化丙锭(PI)染色检测损伤附近区域坏死细胞数量;术后28 d,神经功能缺损评分评价小鼠运动功能,新物体识别实验检测小鼠认知功能,糖水偏好实验评价小鼠抑郁状况,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测神经元特异性相关蛋白和神经营养因子表达.结果 (1)WJ移植组小鼠脑含水量[(84.61±1.61)％]与Veh组比较[(11.06±2.24)％]明显降低,差异有统计学意义(t=4.935,P=0.001).(2)小鼠神经功能缺损评分结果显示WJ移植组术后第7、14、21、28天神经功能缺损评分[(11.80±1.30)、(10.60±1.14)、(9.40±1.14)和(8.20±1.30)分]与Veh组比较有统计学意义[(9.80±1.09)、(8.40±1.14)、(7.20±1.09)和(5.80±0.84)分,P =0.000].(3)小鼠新物体识别实验结果显示WJ移植组小鼠新物体辨别率为(65.57±1.543)％,高于Veh组[(50.03±1.704)％],差异有统计学意义(t=6.760,P=0.000).(4)糖水偏嗜实验表明WJ移植组和Veh组比较差异有统计学意义[(63.05±2.10)％和(48.62±1.80)％,t=4.935,P=0.001].(4)WJ移植组抑炎因子IL-10表达量[(659.39±14.40) pg/ml]明显高于Veh组[(554.39±15.54) pg/ml,t=4.957,P=0.008],而促炎因子TNF-α(755.90±16.89) ng/ml明显低于Veh组[(1 081.22±14.81) ng/ml,t=14.480,P=0.000].(5)WJ移植组神经元特异性相关蛋白微管相关蛋白-2(MAP-2)、双皮质蛋白(DCX)和神经营养因子脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)的表达(0.94±0.18、1.38±0.06、1.02±0.02和0.85±0.67)明显高于Veh组(0.41±0.03、0.81±0.04、0.52±0.03和0.23 ±0.03),差异有统计学意义(=2.900,P=0.044;t=8.007,P=0.001;t=13.060,P=0.000;=8.640,P=0.001).(6)对比Veh组[(321.60±17.98)个],WJ移植组的坏死细胞数量显著减少[(179.60±18.95)个],差异有统计学意义(t=5.435,P=0.001).结论 人脐带沃顿胶对脑外伤小鼠有神经修复作用.
作者：程田；刘雯雯；刘宏建；关方霞 刊期： 2018年第04期
目的 通过3D打印脊柱骨盆模型及计算机软件辅助导航,介绍S3髂骨螺钉内固定的置钉入路及参数分析.方法 通过3D打印模型及计算机软件相关数据确定S3节段的置钉空间,并选取本次髂骨螺钉进针点位置.随机抽取已进行过骨盆三维CT重建扫描的男女成年患者图像各20份,选取本次已确定可以进钉的螺钉入点(O),以身体冠状面或骶骨水平横切面为水平切面(X),测量球形探针进针偏角小角度范围(A)、大角度范围(B)及佳进钉角度范围(Z),并测量本次进针点位置螺钉钉道长度及宽度.对应成人3D打印模型中证实本次新型置钉方式的准确性及安全性.结果 进针角度由小角度OA范围至大角度OB角度范围内,在窄横径超过7 mm的条件下,均可安全置入万向髂骨螺钉(平均长度80 ～ 90 mm)进行固定.进针角度范围:男性X-OA-OB平面[(47.1±1.9)°～(56.7±1.4)°],佳角度X-OZ范围[(52.3±1.1)°];女性X-OA-OB平面[(49.6±0.8)°～(59.9±1.1)°],佳角度X-OZ范围[(53.7±0.8)°].钉道长度范围:男性OA平面为(91.4±2.3) mm,OB平面为(89.5±4.6)mm,OZ平面范围为(94.2±2.1)mm;女性OA平面为(90.4±1.9) mm,OB平面为(85.6±2.3)mm,OZ平面范围为(96.4±1.7) mm.在佳置钉角度OZ,男性与女性比较,置钉角度(F =4.276,P =0.001)及置钉长度比较差异均有统计学意义(F =3.647,P=0.001);OA中,男性与女性的置钉偏角数值比较,差异有统计学意义(F=5.268,P=0.001),置钉长度数值比较差异无统计学意义(F=1.513,P=0.139).OB中,男性与女性比较,置钉角度(F=8.153,P=0.001)及置钉长度比较差异均有统计学意义(F=3.341,P=0.002).在相同的置钉平面上,不同性别的成人钉道尾向偏角数值差异无统计学意义(P＞0.05).结论 经S3侧块髂骨螺钉置钉均可安全有效置入髂骨螺钉,通过进针点O-Z方向的髂骨螺钉是理论上安全性及稳定性较好的脊柱骨盆固定术置入髂骨螺钉的位置角度.
作者：惠宝锋；王志杰；褚言琛；侯庆先；杨文玖；宫硕 刊期： 2018年第04期
目的 检测微小RNA(miRNA,miR)-187在原发性肝癌患者癌组织和癌旁组织中的表达,使用miR-187 mimics转染后观察其对Hep3b和HepG2两种细胞株增殖和迁移侵袭的影响.方法 收集74例原发性肝癌患者的癌组织和癌旁组织,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测miR-187的相对表达.使用噻唑蓝(MTT)法、划痕实验和Transwell小室侵袭实验观察miR-187mimics转染后其对Hep3b和HepG2两种细胞株增殖、迁移和侵袭的影响.结果 在癌组织与癌旁组织的比较中,癌组织[1.61(1.55,1.68)] miR-187表达水平明显高于癌旁组织[0.47(0.41,0.49)],差异有统计学有意义(P =0.028).肝癌细胞系Hep3B (4.1±0.6)和HepG2(2.5±0.4)的miR-187相对表达水平,明显高于肝正常细胞系THLE-2(1.0±0.1),差异有统计学意义(P =0.003,P=0.013).转染miR-187 mimic后36h和48h,HepG2和Hep3B均表现出明显的增殖能力(0.75±0.16和0.56±0.22)、迁移能力[(64.6±8.3)％和(58.4±6.2)％]和侵袭能力[(37.5±7.8)％和(71.2±5.0)％]的增强,且差异有统计学意义(P=0.011和P=0.020;P=0.009和P=0.016;P=0.004和P=0.008).结论 癌组织中的miR-187表达水平升高,通过机制研究结果显示,miR-187与肿瘤细胞株的增殖和迁移侵袭有关,miR-187的过表达能够明显增加HepG2和Hep3B细胞株的增殖和迁移侵袭能力.
作者：庄正陵；刘江涛；柳洪周；段俊虎；王永贵；丁俊辉；刘洋 刊期： 2018年第04期
目的 检测胃癌及癌旁组织中M2型丙酮酸激酶(PKM2)和张力蛋白同源物基因(PTEN)的差异表达,探讨PKM2表达水平及PTEN表达水平与胃癌临床病理特征之间的关系.方法 应用免疫组织化学方法检测88例胃癌组织和癌旁组织中PKM2和PTEN表达,结合相关临床资料进行分析.结果 PKM2在胃癌组织的阳性表达率为71.59％ (63/88),明显高于癌旁组织阳性表达率[30.68％ (27/88)],两者比较差异有统计学意义(t=29.470,P=0.000),PKM2表达水平与胃癌TNM分期、淋巴结转移呈明显相关(分别为t=4.130,P=0.040;t=5.840,P=0.020);PTEN在胃癌组织的阳性表达率为39.77％(35/88),明显低于胃癌癌旁组织阳性表达率[92.05％(81/88)],两者差异有统计学意义(t=53.510,P=0.000),PTEN表达水平与胃癌TNM分期、组织学分化程度、淋巴结转移呈明显相关(分别为t=5.550,P=0.020;t =4.330,P=0.040;t =5.840,P=0.020).结论 PKM2和PTEN的表达水平可能与胃癌的发生、发展及淋巴结转移明显相关.
作者：黄哲；蔡朋株；林琳；徐飞鹏；许庆文 刊期： 2018年第04期
目的 观察肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)联合顺铂对荷PC-9肺癌小鼠肿瘤生长的影响.方法 将60只荷PC-9肺癌肿瘤的裸鼠随机分为对照组、TRAIL组、顺铂组和联合治疗组,每组15只,TRAIL组经腹腔注射TRAIL 10 mg/kg,顺铂组经腹腔注射顺铂1.5 mg/kg,联合治疗组经腹腔分别注射TRAIL 10 mg/kg和顺铂1.5 mg/kg,对照组经腹腔注射等体积的生理盐水.所有小鼠每隔1d给药1次,连续治疗30d,测定每组小鼠肿瘤的生长情况和体重的变化.并采用原位缺口末端标记法(TUNEL)染色法分析4组小鼠肿瘤组织中细胞的凋亡水平.采用Western blot分析4组小鼠肿瘤组织细胞中p53、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3等凋亡相关蛋白的表达水平.结果 与对照组比较,TRAIL组、顺铂组和联合治疗组小鼠肿瘤生长受到显著抑制(P=0.030、0.026、0.009),而联合治疗组小鼠肿瘤生长速度明显缓于TRAIL组和顺铂组(P=0.036、0.018).与对照组比较,顺铂组和联合治疗组小鼠体重明显下降(P=0.030、0.038),而TRAIL组小鼠体重变化差异无统计学意义(P =0.070).与对照组比较,TRAIL组、顺铂组和联合治疗组小鼠肿瘤组织中细胞凋亡比例明显增加(P=0.023、0.034、0.027).与顺铂组比较,TRAIL组和联合治疗组小鼠肿瘤组织细胞凋亡比例明显增加(P =0.028、0.013).Western blot结果显示与对照组比较,TRAIL组、顺铂组和联合治疗组p53和Caspase-3表达水平明显增加,而联合治疗组增加水平更加显著(P=0.018).结论 TRAIL联合顺铂能显著抑制荷PC-9小鼠肿瘤的生长,这一现象是通过促进肿瘤细胞凋亡相关基因表达,进而促进肿瘤细胞凋亡来实现的.
作者：张春敭；齐宇；吴恺；张岩；赵松 刊期： 2018年第04期
目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-214在前列腺癌中的表达及其生物学功能.方法 采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测36例前列腺癌患者癌组织和癌旁组织中miR-214的表达.在人前列腺癌细胞株DU145中转染miR-214模拟物miR-214 mimic,阴性对照miR-214-nc.采用噻唑蓝(MTT)法检测过表达miR-214后DU145细胞的增殖能力,采用小室(Transwell)实验检测细胞的侵袭能力.结果 miR-214在36例前列腺癌患者癌组织与癌旁组织中的相对表达量分别为0.85±0.84和1.75±0.93,癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织且差异有统计学意义(P=0.001);MTT实验显示miR-214 mimic组、miR-214nc组及对照组前列腺癌细胞DU145培养72 h后,细胞计数分别为(5.40±0.32)、(8.15±0.33)、(8.65±0.41)个,miR-214 mimic显著低于其他两组,且差异有统计学意义(P=0.001),提示上调DU145细胞miR-214表达后,细胞增殖能力明显降低;Tranwell实验显示,miR-214 mimic组、miR-214nc组及对照组细胞的穿膜细胞数分别为(23.45±2.80)、(25.22±3.11)、(24.31±4.20)个,3组穿过基底膜的细胞克隆数差异无统计学意义(P =0.722).结果提示上调DU145细胞miR-214表达后,其迁移侵袭能力无明显变化.结论 miR-214可能参与了前列腺癌的发生发展并与其细胞增殖能力有关.
作者：刘骞；朱朝阳；李晓东；李扬；田鑫；张广伟 刊期： 2018年第04期
目的 观察转录因子性别决定区Y框蛋白2(SOX2)在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响.方法 利用免疫组织化学方法分析SOX2在32例肝癌及其癌旁组织中的表达;在肝癌细胞株SMMC-7721中通过细胞增殖、侵袭等功能实验分析SOX2通过上皮-间充质转化(EMT)促进转移复发的具体机制.结果 在人肝癌组织标本中SOX2较其配对癌旁组织及正常组织表达上调,其在癌组织、癌旁组织及正常肝组织中SOX2的阳性率分别为73.8％、32.5％及12.4％ (P =0.008、0.006).在体外克隆形成实验结果示pWPI-SOX2转染组细胞克隆形成数为(654.9±39.4)个,显著高于对照组(232.7±19.4)个(P=0.000).Transwell小室实验结果显示它能促进肝癌细胞侵袭能力(P =0.003).慢病毒转染的SOX2高表达SMMC-7721肝癌细胞株发生EMT,上皮化表型E-钙黏蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白(ZO-1)的表达下调和间质化表型N-钙黏蛋白(N-cadherin)和纤维连接蛋白(Fn)表达上调.结论 SOX2表达与肝癌的发生、发展密切相关,其具体机制可能是通过诱导EMT促进肝癌的转移复发.
作者：薛玉龙；汪传一；韩杰；杨征宇；辛永利 刊期： 2018年第04期
目的 观察Notch3通过Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路介导基质金属蛋白酶(MMP)-2/MMP-9对肝癌侵袭转移的影响.方法 应用实时荧光定量聚合酶连反应(FQ-PCR)方法检测30例肝癌及癌旁组织中Notch3基因的表达.免疫组织化学检测Notch3蛋白在组织样本中的表达.培养肝癌QGY7701细胞,传代细胞培养,并分为3组:空白对照组(Control组)、脂质体转染组(si-NC组)和小干扰RNA (siRNA)-Notch3转染组(si-N3组).细胞划痕及Transwell小室研究各组细胞侵袭转移能力.Western blot检测Notch3、β-catenin和MMP-2、MMP-9蛋白的表达.结果 Notch3基因在肝癌组织中明显高表达,差异有统计学意义(P=0.006);免疫组织化学实验结果示Notch3蛋白在肝癌组织中呈阳性表达;细胞划痕实验示:在不同时间点,si-N3组迁移细胞数较Control组和si-NC组均较少,细胞迁移能力被抑制;Transwell细胞侵袭实验显示:si-N3组侵袭细胞数明显少于Control组和si-NC组[(75±8)个比(125 ±11)个比(118±10)个,P=0.001、0.002];Western blot检测发现下调Notch3后,β-catenin的表达增加,MMP-2、MMP-9的表达减弱.结论 Notch3在肝癌中被激活,Notch3可通过Wnt/β-catenin通路介导MMP-2/MMP-9,促进肝癌细胞侵袭和转移.
作者：杨永光；鲁才杰；刘丽娟；贺翊峰；张剑；林满洲；李明意 刊期： 2018年第04期
目的 观察纳米金结合重组人血管内皮抑素对原代人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)增殖、凋亡及迁移的影响,并探讨其机制.方法 将原代HUVECs培养传至第4代,分为对照组、重组人血管内皮抑素组(ES)、纳米金组(AU)和纳米金结合重组人血管内皮抑素组(AU-ES).采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法分别检测在24、48、72 h和25、50、100 μg/ml下各组细胞增殖抑制率,可得出佳时间及浓度组合条件;在该条件下采用流式细胞仪、Transwell实验观察各组HUVECs的凋亡率、迁移能力的变化;采用Western blot检测各组与细胞增殖、凋亡及迁移功能相关蛋白质表达水平变化.结果 (1) CCK-8结果表明在不同浓度及时间下,AU-ES组(24h,100μg/ml)增殖抑制率为(35.166±3.076)％,差异有统计学意义(t=4.251,P=0.013);(24 h,100 μg/ml)为佳处理条件;(2)流式细胞仪结果表明在24h,100 μg/ml下,AU-ES组对HUVECs的凋亡率为(27.197±0.390)％,与对照组[(10.357±3.012)％]比较,差异有统计学意义(t=9.603,P=0.001);(3)Transwell实验24 h后小室底膜迁移面积比为(42.943±3.129)％,与对照组(58.98±1.543)％比较,差异有统计学意义(t=7.963,P=0.001);(4)与细胞增殖、凋亡及迁移有关蛋白如:B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、c-Myc、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、血管内皮因子生长受体-2(VEGFR-2)、波形蛋白(Vimentin),与对照组比较AU-ES组的蛋白表达水平是明显降低.结论 在一定条件下AU-ES能对原代HUVECs具有抑制增殖及迁移、促进凋亡的作用,并且降低有关蛋白的表达.
作者：刘书昊；潘运龙；覃莉；李伟；阳小燕；李鑫；杨文德；潘璠 刊期： 2018年第04期
目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)影响肺腺癌细胞侵袭迁移,以及对上皮-间充质转化(EMT)和自噬的影响.方法 Transwell检测体外TGF-β1对肺腺癌细胞A549和SK-LU-1迁移与侵袭能力的影响;免疫荧光检测TGF-β1引起的A549细胞自噬水平变化;Western blot实验检测在A549细胞中TGF-β1对EMT标志分子及自噬调控基因表达的影响.结果 在A549和SK-LU-1细胞中,sh-TGF-β1干扰效率约为60％,GV358-TGF-β1过表达组过表达效率均在4倍以上;迁移实验结果显示,A549细胞中,随机干扰对照组(shNC组)迁移率为1.02±0.06,TGF-β1过表达组为5.14±0.43(t=16.440,P=0.004);SK-LU-1细胞中,shNC组迁移率为1.04±0.08,TGF-β1过表达组为4.92±0.48(t=13.810,P=0.005),差异均有统计学意义;侵袭实验结果显示,A549细胞中,随机干扰对照组(shNC组)侵袭率为0.96±0.07,TGF-β1过表达组为4.28 ±0.51(t=11.170,P =0.007);SK-LU-1细胞中,shNC组侵袭率为1.03±0.05,TGF-β1过表达组为4.11±0.36(t=10.410,P=0.009),差异均有统计学意义;免疫荧光实验结果可见,与对照组比较,TGF-β1过表达组点状分布的自噬小体数目明显增多(t=22.340,P=0.000),荧光强度显著增强;Westem blot实验结果显示,TGF-β1过表达组E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达量明显减少,波形蛋白(Vimentin)、Twist、Snail的表达显著增加;自噬相关蛋白Beclin1表达上调,磷酸化的雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)表达上调;而TGF-β1干扰组的结果则与过表达组相反.结论 在肺腺癌细胞中,TGF-β1阳性表达诱导的自噬和EMT可能与其增强肺腺癌细胞侵袭迁移能力相关.
作者：柳惠斌；郭骏；蒲艳；张萌萌；宋建忠；王强 刊期： 2018年第04期
目的 观察丘脑底核脑深部电刺激(STN-DBS)对帕金森(PD)大鼠认知记忆的影响.方法 取60只健康SD (Sprague-Dawley)雄性大鼠按随机数字表法分为正常对照组(n=15),PD组(n=15),假刺激组(n=15),刺激组(n=15).刺激组植入电极术后给予连续脉冲刺激,假刺激组植入电极但关闭电源.分别于刺激前中后行阿扑吗啡(APO)旋转行为学测试.应用Morris水迷宫(MWM)测定各组大鼠的寻台潜伏期、游泳速度、游泳距离及穿越平台次数等.结果 帕金森大鼠经STN-DBS治疗后症状明显改善.刺激组分别与PD组和假刺激组比较,寻台潜伏期减少(P=0.008,P=0.009),游泳速度下降(P=0.002,P=0.001),游泳距离减少(P=0.091,P=0.001).刺激组穿越平台(6.800±1.135)次、平台所在象限游泳距离百分比为(28.010 ±4.113)％,游泳时间百分比为(31.836±9.940)％,PD组各项分别是(1.380 ±.1.193)次,(19.470±3.226)％,(18.766±5.486)％,假刺激组各项分别是(1.730±1.009)次,(19.862±4.125)％,(21.846±4.234)％.刺激组分别与PD组和假刺激组在穿越平台数方面(P=0.003,P=0.022),在平台所在象限游泳距离百分比方面(P=0.011,P=0.014)和在平台所在象限时间百分比方面(P=0.016,P=0.021)比较,差异有统计学意义.结论 STN-DBS慢性刺激对PD大鼠认知功能下降有一定程度上的保护作用,延缓病情发展.
作者：李浩；裴明阳；郝春艳；段虎斌 刊期： 2018年第04期
目的 观察膜联蛋白A9(ANXA9)在人结肠癌细胞株SW620增殖中发挥的作用,并探讨其机制.方法 实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法检测人结肠癌细胞株HT29、SW620、SW480、LoVo、SW1116中ANXA9的表达;应用40 nmol/L的ANXA9-小干扰RNA(siRNA)转染ANXA9表达强的SW620细胞株,抑制内源性ANXA9的表达;细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测转染对SW620细胞活性的影响;流式细胞术(FCM)检测转染ANXA9-siRNA对SW620细胞周期的影响;Real-time PCR和Western blot法检测增殖相关基因增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(Cyclin)D、Cyclin E、p21、p16的表达.结果 人结肠癌细胞株HT29、SW620、SW480、LoVo、SW1116中ANXA9 mRNA表达强度分别为0.027±0.004、0.041±0.005、0.028±0.003、0.033±0.003、0.025±0.005;ANXA9蛋白表达强度分别为0.287±0.076、1.246±0.103、0.326±0.040、0.387±0.097、0.295±0.064,其中SW620细胞ANXA9的mRNA和蛋白表达强(F=8.212,P=0.003;F=81.728,P=0.000).转染组、阴性对照组、空白组的ANXA9mRNA和蛋白的表达水平分别为0.209±0.016、0.317±0.104,0.957±0.070、0.647±0.155,1.031±0.171、0.727±0.145.转染后转染组的细胞ANXA9的mRNA和蛋白均明显低于对照组及空白组(F=54.072,P=0.000;F=7.601,P=0.023).CCK8结果显示,转染组、阴性对照组、空白组的细胞活性24h分别为0.605±0.024、0.612±0.022、0.628 ±0.027;48 h分别为0.810±0.049、1.196±0.118、1.308±0.070;72 h分别为1.145±0.070、1.531±0.062、1.454±0.081.转染组的细胞活性明显低于对照组及空白组(F =38.742,P=0.000;F=32.56,P=0.000).G0/G1、G2/M、S期的细胞比例在转染组为(66.870±3.850)％、(15.060±2.480)％、(18.080± 1.420)％;阴性对照组为(50.070±3.370)％、(32.520±2.500)％、(17.410±0.920)％;空白组为(48.740±2.170)％、(32.390±1.820)％、(19.210±0.390)％.转染组细胞的G0/G1期比例升高(F=29.752,P=0.001)、G2/M期的比例降低(F=57.860,P=0.000),S期细胞的比例无明显变化(F=1.568,P=0.284).转染组细胞Cyclin D1、Cyclin E1的mRNA和蛋白表达明显降低[mRNA:F=462.821、5.512,P=0.000、0.044;蛋白:F=15.148、8.300,P=0.005、0.019)],而p21的mRNA和蛋白表达明显增高[mRNA:F=6.472,P=0.032;蛋白:F=21.230,P=0.002].结论 ANXA9可能通过Cyclin D1、Cyclin E1、p21表达而参与了结肠癌细胞株SW620的增殖过程.
作者：卞红磊；于溯洋；张盛君；高鑫 刊期： 2018年第04期
目的 观察不同浓度的骨髓间充质干细胞(BMSCs)对糖尿病大鼠血糖浓度的影响.方法 取正常SD大鼠的骨髓,分离、纯化培养得到BMSCs,并检测表面分子标志物CD34、CD44、CD45和CD90的表达.建立的糖尿病大鼠模型随机分为对照组、低浓度组、高浓度组以及正常饲养的大鼠为正常组.低浓度组、高浓度组分别注射1×105和5×106个BMSCs,正常组和对照组则注射磷酸盐缓冲液(PBS),分别检测注射后1、2、3周的血糖浓度并进行统计学分析.结果 细胞免疫荧光检测显示CD34(-)、CD44(+)、CD45(-)和CD90(+),证实为BMSCs.静脉注射BMSCs治疗后,低浓度治疗组大鼠血糖浓度在治疗前2周无明显变化,第3周下降16.1％;高浓度治疗组与对照组比较,随着治疗时间推移,大鼠的血糖浓度表现出显著的降低,第3周血糖浓度下降42.0％.正常组和对照组治疗前后血糖浓度无明显变化.结论 静脉移植高浓度(5×106个)的BMSCs,有助于控制并调节糖尿病大鼠的血糖浓度.
作者：邹新华；杜烨；任国强；王知；张静；李炳辉 刊期： 2018年第04期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
