刘书昊；潘运龙；覃莉；李伟；阳小燕；李鑫；杨文德；潘璠
目的 观察不同浓度的骨髓间充质干细胞(BMSCs)对糖尿病大鼠血糖浓度的影响.方法 取正常SD大鼠的骨髓,分离、纯化培养得到BMSCs,并检测表面分子标志物CD34、CD44、CD45和CD90的表达.建立的糖尿病大鼠模型随机分为对照组、低浓度组、高浓度组以及正常饲养的大鼠为正常组.低浓度组、高浓度组分别注射1×105和5×106个BMSCs,正常组和对照组则注射磷酸盐缓冲液(PBS),分别检测注射后1、2、3周的血糖浓度并进行统计学分析.结果 细胞免疫荧光检测显示CD34(-)、CD44(+)、CD45(-)和CD90(+),证实为BMSCs.静脉注射BMSCs治疗后,低浓度治疗组大鼠血糖浓度在治疗前2周无明显变化,第3周下降16.1％;高浓度治疗组与对照组比较,随着治疗时间推移,大鼠的血糖浓度表现出显著的降低,第3周血糖浓度下降42.0％.正常组和对照组治疗前后血糖浓度无明显变化.结论 静脉移植高浓度(5×106个)的BMSCs,有助于控制并调节糖尿病大鼠的血糖浓度.
作者：邹新华；杜烨；任国强；王知；张静；李炳辉 刊期： 2018年第04期
前梯度蛋白2 (AGR2)属于蛋白二硫键异构酶家族[1],自1998年被发现以来,大量研究结果显示其在乳腺癌、胰腺癌、胃癌等肿瘤中呈高表达,并且通过调控细胞周期相关蛋白的折叠、成熟和分泌过程,在恶性肿瘤的生长过程中扮演重要的角色[2].本研究旨在观察AGR2与血管内皮生长因子C(VEGF-C)在前列腺癌组织中的表达,探讨其与临床资料的关系.
作者：时景伟；陈欢；崔蕊；张华；高锋；孔庆阔；晋学飞 刊期： 2018年第04期
目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-214在前列腺癌中的表达及其生物学功能.方法 采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测36例前列腺癌患者癌组织和癌旁组织中miR-214的表达.在人前列腺癌细胞株DU145中转染miR-214模拟物miR-214 mimic,阴性对照miR-214-nc.采用噻唑蓝(MTT)法检测过表达miR-214后DU145细胞的增殖能力,采用小室(Transwell)实验检测细胞的侵袭能力.结果 miR-214在36例前列腺癌患者癌组织与癌旁组织中的相对表达量分别为0.85±0.84和1.75±0.93,癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织且差异有统计学意义(P=0.001);MTT实验显示miR-214 mimic组、miR-214nc组及对照组前列腺癌细胞DU145培养72 h后,细胞计数分别为(5.40±0.32)、(8.15±0.33)、(8.65±0.41)个,miR-214 mimic显著低于其他两组,且差异有统计学意义(P=0.001),提示上调DU145细胞miR-214表达后,细胞增殖能力明显降低;Tranwell实验显示,miR-214 mimic组、miR-214nc组及对照组细胞的穿膜细胞数分别为(23.45±2.80)、(25.22±3.11)、(24.31±4.20)个,3组穿过基底膜的细胞克隆数差异无统计学意义(P =0.722).结果提示上调DU145细胞miR-214表达后,其迁移侵袭能力无明显变化.结论 miR-214可能参与了前列腺癌的发生发展并与其细胞增殖能力有关.
作者：刘骞；朱朝阳；李晓东；李扬；田鑫；张广伟 刊期： 2018年第04期
富勒烯(Fullerene)及其衍生物自被发现以来,以其独特的结构和无可比拟的理化性质,在生物医学研究中得到了广泛应用.富勒烯的生物学特性主要体现在对自由基的吸附清除作用和强抗氧化性,被赞誉为“自由基海绵”.诸多研究结果表明,活性氧自由基(ROS)调节了细胞增殖、分化、凋亡等细胞功能.在骨科领域,ROS则与细胞成骨分化、骨性关节炎关节软骨退变、类风湿关节炎炎症的介导、骨坏死、骨质疏松、椎间盘退变等疾病发生机制密切相关.富勒烯及其衍生物通过影响ROS水平,间接达到不同的生物学目的.现从生理和疾病产生的机制入手,就富勒烯C60及其衍生物在骨组织干细胞工程、非化脓性关节炎、骨质破坏、椎间盘退变及其诱发腰痛等方面的研究进展进行综述.
作者：马宏道；刘宏建；杨新林；金莉；崔全军；尚国伟 刊期： 2018年第04期
随着肿瘤学、免疫学以及分子生物学等相关学科的迅速发展和交叉渗透,肿瘤免疫治疗的研究突飞猛进.免疫治疗成为继手术、放射治疗和化学治疗之后又一种重要的治疗胃肠道恶性肿瘤的手段.新型的免疫治疗技术得到迅速发展,为晚期胃肠道恶性肿瘤患者带来新的希望.化学治疗联合免疫治疗有望成为晚期胃肠道恶性肿瘤治疗的新模式.同时如何客观评价免疫治疗疗效也成为研究热点.
作者：陶凯雄；吴轲 刊期： 2018年第04期
目的 探讨经尿道前列腺电切术(TURP)后尿失禁的危险因素及防治方法.方法 行TURP的263例患者根据术后有无尿失禁分为两组,其中术后出现尿失禁患者55例为尿失禁组,其余208例为无尿失禁组,比较分析2组患者的相关资料.结果 尿失禁组的国际前列腺症状评分表(IPSS)评分、切除前列腺比例分别为(23.25±3.56)分、(67.25±5.36)％,均高于无尿失禁组的(18.34±4.05)分、(52.15±6.23)％,差异均有统计学意义(t=8.191、16.433,P均=0.000).尿失禁组的年龄、大尿流率、病程、前列腺体积、手术时间、术后留置尿管时间分别为(69.78±6.47)岁、(6.21±2.82) ml/s、(33.54±16.54)个月、(65.46±33.52) ml、(70.36±19.21) min、(6.81±0.46)d,与无尿失禁组的(70.05±4.82)岁、(5.62±2.63) ml/s、(35.20±17.50)个月、(62.65±35.23) ml、(68.21±17.86) min、(6.79±0.52)d比较差异均无统计学意义(t=0.289、1.457、0.633、0.531、0.781、0.260,P=0.773、0.146、0.528、0.596、0.435、0.795).随访发现,55例尿失禁患者中,真性尿失禁1例(1.82％)、急迫性尿失禁25例(45.45％)、压力性尿失禁29例(52.73％).结论 尿失禁是TURP常见的并发症,术前IPSS评分高及术中过度的切除前列腺组织是导致术后尿失禁的主要因素,临床上可通过术中对功能尿道的保护以及手术前后盆底肌锻炼减少尿失禁的发生.
作者：张道秀；顾朝辉；高宛生；王智勇；魏金星 刊期： 2018年第04期
目的 采用浓度梯度法诱导建立顺铂(DDP)及吉西他滨(GEM)多药耐药膀胱癌细胞株(T24/DDP&GEM),并分析其生物学特征.方法 利用人膀胱癌细胞株T24,采用DDP和GEM作为诱导剂在体外建立DDP及GEM多药耐药的人膀胱癌细胞模型T24/DDP&GEM.通过倒置相差显微镜下观察T24、T24/DDP&GEM细胞形态差异,细胞计数试剂盒(CCK-8)方法检测相关细胞的耐药性,生长曲线检测相关膀胱癌细胞的增殖能力,Western blot检测P-糖蛋白(P-gP)的表达.结果 经过DDP和GEM 12个月的交替的诱导,成功建立了T24/DDP&GEM.倒置相差显微镜下观察并与T24细胞比较,T24DDP/GEM形态不规则,体积变大,细胞内可见空泡和颗粒形成.T24/DDP&GEM的增殖能力与T24比较显著下降,T24/DDP&GEM的倍增时间为(39.51 ±0.36)h,T24的倍增时间为(28.06±0.76)h,倍增时间延长(11.45 ±0.41)h.T24/DDP&GEM的耐药性明显提高,其耐药指数对于DDP为4.25,对于GEM为62.97.与T24细胞比较,T24/DDP&GEM细胞的S和G2期的细胞比例显著减少,而G1期细胞比例显著增多,细胞周期减慢.Western blot结果显示,T24/DDP&GEM细胞中P-gp的表达水平明显高于T24.结论 人工诱导的DDP及GEM耐药膀胱癌细胞株T24/DDP&GEM具有多药耐药肿瘤细胞特征.
作者：王鹏；陈明坤；陈子坚；郭晓彬；杨诚；卞军；周其赵；郭文彬；薛康颐；张万松；杨建昆；刘存东 刊期： 2018年第04期
目的 探讨转录延伸样因子7(TCEAL7)对低分化人胃癌细胞株BGC823侵袭、迁移的影响及其机制.方法 应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法检测TCELA7 mRNA和蛋白在BGC823和正常胃黏膜细胞株GES-1中的表达;构建TCEAL7真核表达载体GFP-TCEAL7并转染BGC823细胞48 h,检测转染效果;噻唑蓝(MTT)法检测GFP-TCEAL7转染对BGC823细胞活性的影响;划痕实验、Transwell小室实验检测细胞侵袭、迁移;应用Real-time PCR和Western blot法检测转染GFP-TCEAL7转染对BGC823细胞侵袭、迁移基因表达水平的影响.结果 Real-time PCR和Western blot法显示,BGC823的TCEAL7表达(mRNA:0.280±0.048,蛋白:0.181±0.038)明显低于GES-1(mRNA:0.474±0.062,蛋白:0.346±0.057;t=-6.061,P=0.000;t=-5.900,P=0.000).GFP-TCEAL7转染后胃癌BGC823细胞TCEAL7的mRNA及蛋白表达(1.886±0.326、1.007±0.262)比对照组(0.302±0.053、0.172±0.030)显著上调(t=11.748,P =0.000:t=7.756,P=0.000).MTT结果显示,转染了GFP-TCEAL7的BGC823细胞活性(0.672±0.083)比对照组(1.242±0.215)显著减弱(t=-6.058,P =0.000).划痕实验、Transwell小室实验显示转染了GFP-TCEAL7的BGC823细胞迁移能力[转染组(53.945 ±9.952)％,对照组(81.017±7.208)％]和侵袭能力(转染组76.333±12.420,对照组121.167±11.771)均明显降低(t=-5.396,P =0.000;t=-6.418,P=0.000).Real-time PCR和Western blot法显示转染GFP-TCEAL7的BGC823细胞基质金属蛋白酶(MMP)-7 、MMP-9的mRNA和蛋白表达水平下降,组织基质金属蛋白酶抑制剂-1 (TIMP1)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达明显增高.结论 过表达TCEAL7可抑制BGC823细胞的侵袭、迁移.
作者：梁巍；耿玮；范亚男；叶智斌；高明；张立晓 刊期： 2018年第04期
目的 探讨红景天苷对人骨肉瘤143B细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制.方法 杜尔伯科改良伊格尔培养基(DMEM,含10％血清及1％双抗)培养骨肉瘤143B细胞,实验分组为对照组、30、60 μmol/L红景天苷处理组.噻唑蓝(MTT)实验检测各组24、36、72 h的细胞增殖活性;处理24 h后,采用Transwell法检测3组细胞的侵袭能力;处理24 h后采用划痕实验检测各组细胞迁移能力,计算细胞迁移率.3组细胞在处理24 h后,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的mRNA相对表达水平变化,Western blot实验检测各组细胞MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平.透射电镜检测处理24 h后的细胞自噬体.结果 处理24 h后,60 μmol/L组(0.038±0.002)和30μmol/L组(0.054 ±0.002)143B细胞吸光度值低于对照组(0.074±0.004,t2.659,P=0.016;t=1.993,P=0.039).处理48、72 h后,与对照组比较,浓度为30、60 μmol/L的红景天苷组143B细胞吸光度值同样分别低于对照组,呈剂量依赖和时间依赖性.60 μmol/L[(48.7±8.2)个]和30 μmol/L[(76.8±12.8)个]红景天苷组143B细胞跨膜数目分别少于对照组[(94.5±11.9)个,t=8.056,P=0.000;t=2.472,P=0.038].60 μmol/L[(52.9±6.8)％]和30 μmol/L[(82.6±3.7)％]红景天苷组143B细胞迁移率分别低于对照组[(98.7±0.3)％,t=12.576,P=0.000;t2 =9.794,P=0.000].60 μmol/L和30 μmol/L红景天苷处理组MMP-2、MMP-9的蛋白和mRNA相对表达量分别低于对照组.60 μmol/L红景天苷实验组自噬体形成数目[(2.6±0.5)个]多于对照组[(1.3±0.4)个,t=3.517,P=0.025].结论 红景天苷抑制了骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭,其机制可能与诱导自噬及抑制MMP家族蛋白表达相关.
作者：赵迎春；陶海；郭卫春 刊期： 2018年第04期
目的 观察Notch3通过Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路介导基质金属蛋白酶(MMP)-2/MMP-9对肝癌侵袭转移的影响.方法 应用实时荧光定量聚合酶连反应(FQ-PCR)方法检测30例肝癌及癌旁组织中Notch3基因的表达.免疫组织化学检测Notch3蛋白在组织样本中的表达.培养肝癌QGY7701细胞,传代细胞培养,并分为3组:空白对照组(Control组)、脂质体转染组(si-NC组)和小干扰RNA (siRNA)-Notch3转染组(si-N3组).细胞划痕及Transwell小室研究各组细胞侵袭转移能力.Western blot检测Notch3、β-catenin和MMP-2、MMP-9蛋白的表达.结果 Notch3基因在肝癌组织中明显高表达,差异有统计学意义(P=0.006);免疫组织化学实验结果示Notch3蛋白在肝癌组织中呈阳性表达;细胞划痕实验示:在不同时间点,si-N3组迁移细胞数较Control组和si-NC组均较少,细胞迁移能力被抑制;Transwell细胞侵袭实验显示:si-N3组侵袭细胞数明显少于Control组和si-NC组[(75±8)个比(125 ±11)个比(118±10)个,P=0.001、0.002];Western blot检测发现下调Notch3后,β-catenin的表达增加,MMP-2、MMP-9的表达减弱.结论 Notch3在肝癌中被激活,Notch3可通过Wnt/β-catenin通路介导MMP-2/MMP-9,促进肝癌细胞侵袭和转移.
作者：杨永光；鲁才杰；刘丽娟；贺翊峰；张剑；林满洲；李明意 刊期： 2018年第04期
目的 大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在铁蓄积环境下培养,观察细胞增殖指标和成骨方向分化的影响.方法 无菌条件下取正常SD 4周龄雌性大鼠股骨髓腔细胞,经分离纯化后传代培养,并经流式细胞仪鉴定成功后,体外扩增后接种,由不同浓度枸櫞酸铁铵(FAC) (50、100、200 μmol/L)及成骨诱导培养基共同培养,以不加FAC为空白对照组,在第4、7、10、14天收集细胞,采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR),分别检测成骨细胞分化关键基因:成骨相关转录因子2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨桥蛋白(OPN)表达;在第14天茜素红染色并半定量检测钙结节形成情况;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测不同浓度FAC对BMSCs增殖的影响.结果 随着铁剂浓度的增加,大鼠BMSCs的增殖能力逐渐降低;BMSCs经成骨诱导14 d后,在铁剂影响下,形成的钙结节较空白对照组明显减少,但铁剂干预各组间无明显差异,半定量结果亦显示相同结果(对照组:2.357±0.160、50 μmol/L组:0.308±0.029、100 μmol/L组:0.281±0.031、200 μmol/L组:0.224±0.017,P=0.000);不同浓度的铁剂对BMSCs成骨分化的各个阶段基因都有不同程度的影响.在成骨早期,Runx2的表达在对照组、100 μmol/L和200μmol/L铁剂干预组有明显差异(对照组:1.000±0.229、100 μmol/L组:0.198±0.044、200 μmol/L组:0.149±0.009,P=0.001),且与浓度存在一致相关性;在成骨中期,不同浓度铁剂对ALP的表达都具有明显抑制(对照组:0.980±0.063、50 μmol/L组:0.018±0.001、100 μmol/L组:0.014±0.002、200 μmol/L组:0.008±0.001,P=0.001);在成骨晚期阶段,不同浓度铁剂较对照组对OPN有明显抑制表达作用(对照组:0.999±0.001、50 μmol/L组:0.170 ±0.072、100 umol/L组:0.142±0.008、200 μmol/L组:0.117 ±0.028,P =0.003).结论 铁蓄积培养环境可明显抑制BMSCs的增殖,同时抑制其向成骨细胞方向的分化,且有剂量依赖性.
作者：俞晨；杨帆；李健；陈斌；袁晔；高焱；李勇；费蓓蓓；徐又佳；彭笳宸 刊期： 2018年第04期
目的 观察干扰谷氨酰胺酶1(GLS1)表达对人胃肠道神经内分泌肿瘤细胞生物学特性的影响.方法 Western blot检测GLS1在人胃肠道神经内分泌肿瘤中的表达;将正常对照(NS)-小干扰RNA (siRNA)、GLS1-siRNA1、GLS1-siRNA2、GLS1-siRNA3转染人胃肠道神经内分泌肿瘤细胞株BON-1,未转染任何siRNA的作为对照组,Westem blot检测转染后各组细胞中GLS1蛋白表达;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测转染12、24、48 h后细胞增殖;细胞转染24 h后,Transwell小室检测细胞侵袭数;Western blot检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR (p-mTOR)、人核糖体蛋白S6激酶(rps6k)、磷酸化rps6k (p-rps6k)蛋白表达;细胞中加入10 nmol/L mTOR信号通路抑制剂雷帕霉素,检测其对细胞增殖侵袭的影响.结果 GLS1在人胃肠道神经内分泌肿瘤组织中的表达显著高于瘤旁组织(P=0.000);GLS1-siRNA1、GLS1-siRNA2、GLS1-siRNA3组细胞中GLS1蛋白表达水平均显著低于对照组,选择GLS1-siRNA2作为后续研究;GLS1-siRNA组在12、24、48 h的细胞存活率为(85.31±4.42)％、(76.12±2.93)％、(69.22±3.62)％,均显著低于对照组[(97.02±2.21)％、(96.61±1.52)％、(97.11 ±2.32)％;t12 h =4.104,P12 h =0.015;t24 h=10.752,P24 h=0.000;t4s h=11.235,P48 h=0.000];GLS1-siRNA组细胞侵袭数及MMP-2、MMP-9、p-mTOR、p-rps6k蛋白表达水平均显著低于对照组;加入抑制剂后的细胞增殖及侵袭结果与干扰GLS1表达的结果趋势一致.结论 GLS1在人胃肠道神经内分泌肿瘤中呈高表达,抑制GLS1的表达能显著抑制BON-1细胞增殖和侵袭,其机制与mTOR信号通路的调控有关.
作者：唐礼恭；徐勇超；李星；任莹坤；韩广森；尹路 刊期： 2018年第04期
目的 观察天冬氨酸β羟化酶(ASPH)在调节细胞自噬中的作用.方法 向OUMS-29、HEK-293T细胞转染ASPH质粒,Western blot检测转染后细胞p62、微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ的表达;向OUMS-29细胞共转染ASPH、pEGFP-LC3质粒,荧光显微镜下计算绿色荧光蛋白(GFP)-LC3-Ⅱ点状聚集阳性细胞数占GFP阳性细胞数的比率.沉默HuCCT1、SSP25细胞ASPH基因,Western blot检测细胞p62、LC3-Ⅱ的表达,并用噻唑蓝(MTT)法检测细胞自噬诱导剂雷帕霉素(Rapa)或二甲双胍(Met)对细胞生长速率的影响.结果 过表达ASPH使OUMS49、HEK-293T细胞内LC3-Ⅱ表达下降44％ (P =0.002,P=0.008),但不改变p62表达量(P =0.060,P=0.798);过表达ASPH使OUMS-29细胞GFP-LC3-Ⅱ点状聚集阳性细胞数占GFP阳性细胞数比率由50.84％降至28.31％ (P =0.002);ASPH基因沉默使HuCCT1、SSP25细胞内LC3-Ⅱ表达分别上调87％、133％(P =0.001,P=0.000),但不影响p62表达(P =0.677,P=0.168);细胞自噬诱导剂雷帕霉素或二甲双胍掩盖ASPH沉默对HuCCT1、SSP25细胞生长速率的影响.结论 ASPH通过抑制LC3-Ⅱ生成抑制细胞自噬;ASPH对细胞自噬的调节可能是其参与细胞生长调控的机制之一.
作者：邹婧；何继满 刊期： 2018年第04期
目的 筛选早期甲状腺乳头状癌(PTC)特征性微小RNA(miRNAs,miR)表达谱,旨在寻找一种无创早期诊断PTC标志物.方法 采用基于实时荧光定量聚合酶反应(PCR)的miRNA芯片分析10例早期PTC特征性miRNAs表达谱,采用10例甲状腺结节组织作对照鉴定和验证PTC特征性标记;同时在100例早期PTC患者术前和术后7d外周血、100例甲状腺结节患者外周血、以及100例健康人外周血标本中进行验证分析.结果 与癌旁正常组织比较,早期甲状腺乳头状癌组织中有20种miRNAs表达存在差异,其中11种miRNAs(hsa-miR-21-5p、hsa-miR-31-5p、miR-34a等)上调、9种miRNAs(hsa-miR-15a-Sp、hsa-miR-16-5p 、hsa-miR-26a-5p等)下调;hsa-miR-181 b-5p在良性甲状腺结节标本中表达上调.hsa-miR-21-5p、hsa-miR-146a-5 p、hsa-miR-155-5p、hsa-miR-221-3p、hsa-miR-222-3p、hsa-miR-181b 6种miRNAs在PTC患者术前血清中的表达显著高于健康对照组(六者在PTC组和健康对照组表达中位数分别为:hsa-miR-21-5p(8.25比3.38)、hsa-miR-146a-5p(13.63比3.42)、hsa-miR-155-5p(10.83比3.49)、hsa-miR-221-3p(18.63比3.82)、hsa-miR-222-3p(22.74比3.92)、hsa-miR-181b(9.52比3.43),均P=0.000.术后7d血清hsa-miR-146a-5p、hsa-miR-221-3 p、hsa-miR-222-3p水平均显著下调(均P=0.000).结论 筛选出hsa-miR-146a-5p、hsa-miR-221-3p、hsa-miR-222-3p 3种miRNAs分子组合作为早期PTC外周血循环miRNAs指纹图谱,有助于PTC早期诊断.
作者：魏丽君；马小琴；凌志强 刊期： 2018年第04期
目的 探讨姜黄素对人血管瘤内皮细胞(HemECs)中血管内皮细胞生长因子(VEGF)、血管生成素2(Ang-2)的影响及促进其凋亡的机制.方法 酶消化法分离培养HemECs,并经不同浓度(0、6.25、12.50、25.00、50.00和100.00 μmol/L)姜黄素作用后,用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测HemECs增殖,原位缺口末端标记法(TUNEL)法检测HemECs的凋亡,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测VEGF、Ang-1和Ang-2 mRNA,细胞免疫荧光定量检测血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)1、VEGFR2、内皮特异性酪氨酸激酶受体(Tie)1和Tie2蛋白表达.结果 25.00、50.00 μmol/L姜黄素作用48 h比24 h细胞存活率降低[(62.34±10.08)％比(79.25±8.17)％和(15.23 ±4.01)％比(26.10±6.05)％;t=3.192,P=0.010和t=3.668,P=0.004].25.00μmol/L姜黄素作用48 h后,TUNEL阳性细胞数为(16.00±2.80)个,高于0.μmol/L姜黄素作用48 h后的[(5.00±1.40)个,t=8.607,P=0.000].25.00 μmol/L姜黄素作用24h后,VEGF mRNA相对表达量为0.34±0.09,低于0μmol/L姜黄素的1.00±0.12(=8.193,P=0.001);Ang-2 mRNA相对表达量为0.45±0.07,低于0μmol/L姜黄素的0.99 ±0.12(t =6.756,P=0.003).25.00 μmol/L姜黄素作用24h后,VEGFR2和Tie2的相对表达量分别为0.30 ±0.05、0.30±0.04,较0μmol/L姜黄素的0.48±0.09、0.52±0.07降低(=4.300,P=0.002;t=6.602,P=0.000).结论 姜黄素可抑制HemECs的生长并促进其凋亡,其可能与下调VEGF、Ang-2的表达有关.
作者：赵松峰；张晓坚；赵高峰 刊期： 2018年第04期
目的 探讨脂肪非典型钙黏蛋白(FAT1)通过靶向调控缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)调节缺氧条件下胶质瘤细胞侵袭能力的作用机制.方法 选择我院收治的48例Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤患者的手术病理组织样本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测FAT1和HIF-1α表达水平并分析其相关性.以人胶质瘤细胞U87MG和GOS3作为研究对象,采用FQ-PCR技术检测正常氧气和缺氧条件下FAT1和HIF-1α表达.采用脂质体2000法将FAT1小干扰RNA(siRNA)、HIF-1α siRNA以及对照siRNA转染至U87MG和GOS3细胞株,检测正常氧气和缺氧条件下FAT1和HIF-1α表达,并采用Transwell小室技术检测U87MG和GOS3胶质瘤细胞的侵袭能力.结果 48例Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤患者病理组织FAT1和HIF-1α相对表达水平分别为4.07(0.72,13.42)和0.94(0.29,3.49),Spearman相关分析显示FAT1和HIF-1α相对表达水平明显相关(r=0.835,P=0.000).正常氧气浓度下GOS3细胞株FAT1(0.29±0.03)和HIF-1α(0.34 ±0.09)相对表达水平均显著低于U87MG细胞株的1.08 ±0.15、1.00 ±0.12,差异有统计学意义(t=8.945、7.621,P=0.010、0.002);缺氧条件下,U87MG和GOS3细胞株FAT1和HIF-1α相对表达水平均显著高于正常氧气浓度下(t=17.994、8.920、14.047、4.037,P=0.000、0.001、0.004、0.016);U87MG细胞株缺氧条件下FAT1 (4.38 ±0.28)和HIF-1α(2.76 ±0.32)相对表达水平均显著高于GOS3细胞株的1.69±0.17、0.83±0.19,差异有统计学意义(t=14.224、8.982,P=0.000、0.001).转染FAT1 siRNA后U87MG和GOS3细胞在正常氧气和缺氧条件下FAT1 (0.17 ±0.06、0.16 ±0.03、0.16±0.03、0.18 ±0.03)和HIF-1α(0.18 ±0.03、0.17 ±0.04、0.15 ±0.04、0.21 ±0.02)相对表达水平均显著降低,差异均有统计学意义(t=7.577、7.793、7.793、7.783、9.285、9.260、9.484、9.042,P=0.002、0.013、0.013、0.014、0.009、0.007、0.007、0.011);转染HIF-1αsiRNA后U87MG和GOS3细胞在正常氧条件下的FAT1 (0.16 ±0.04、0.28 ±0.03)以及正常氧气和缺氧条件下HIF-1α(0.15 ±0.03、0.16 ±0.02、0.15 ±0.03、0.17 ±0.02)相对表达水平显著降低,差异均有统计学意义(t=7.890、6.834、9.624、9.614、9.624、9.500,P=0.012、0.018、0.008、0.009、0.008、0.010);但缺氧条件下的FAT1 (4.27±0.41、2.72 ±0.25)相对表达水平显著高于正常氧,差异均有统计学意义(t=12.649、9.671,P=0.000、0.001).缺氧条件下,转染FAT1 siRNA、转染HIF1αsiRNA的U87MG细胞侵袭细胞数量[(23.2±4.2)、(21.5±3.1)个]显著低于正常氧条件[(57.6±8.1)、(58.7±7.6)个],差异有统计学意义(t=6.530、7.850,P=0.003、0.001).结论 高级别胶质瘤中FAT1和HIF-1α表达具有较强的相关性,缺氧条件下两者高表达,FAT1可通过靶向调控HIF-1α促进胶质瘤细胞侵袭.
作者：蒋广义；孙剑瑞；丁大领；庞长河；刘献志 刊期： 2018年第04期
目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-148b和miR-152在胆管癌中的表达及其生物学功能.方法 用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-148b和miR-152在胆管癌与正常胆管组织、胆管癌细胞株QBC939和良性胆管细胞株H-69中的表达;分别用Real-time PCR、噻唑蓝(MTT)检测法、克隆形成实验和流式细胞术检测miR-148b和miR-152的表达及其对细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响.结果 与正常胆管组织比较,miR-148b和miR-152在胆管癌组织中分别下调(2.75±0.16)倍和(3.05 ±0.18)倍,差异均有统计学意义(P=0.013、0.019);与良性胆管细胞比较,miR-148b和miR-152在胆管癌细胞中分别下调(2.52±0.03)倍和(3.96±0.02)倍,差异均有统计学意义(P=0.018、0.012);miR-148b和miR-152过表达显著抑制胆管癌细胞的增殖速率,分别为(38.49±0.31)％和(52.69±1.01)％,同时也能显著抑制克隆形成率(P=0.031、0.023),miR-148b和miR-152均可使细胞周期阻滞于S期(P=0.027、0.017),并且miR-148b和miR-152过表达均可诱导细胞凋亡.结论 胆管癌组织中miR-148b和miR-152表达均下调,过表达miR-148b和miR-152后可抑制胆管癌细胞增殖及诱导胆管癌细胞凋亡.
作者：曹坤；孙良权；龚勇军；张涛；李海洋；左石 刊期： 2018年第04期
我们构建靶向长链非编码RNA (lncRNA)结肠癌相关转录本2(CCAT2)基因的短发卡RNA (shRNA)载体,观察其对胃癌BGC-823细胞增殖和凋亡的影响.一、材料与方法1.shRNA载体构建及转染:pRNAT-U6.1(美国GenScript公司)和shRNA模板双酶切后定向连接后测序鉴定.胃癌细胞转染按照转染试剂盒(美国Invitrogen公司)说明书进行.2.实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测:提取总RNA,检测CCAT2及POU5 F1B基因的表达情况.3.噻唑蓝(MTT)法检测:细胞存活率检测按照MTr细胞增殖检测试剂盒(碧云天公司,南通)说明书进行.
作者：余招焱；袁平；朱昕；张忠民；丁杰 刊期： 2018年第04期
目的 探讨塞来昔布(celecoxib)对肺腺癌手术应激所致非小细胞肺癌细胞A549的抗失巢凋亡的影响及其分子作用机制.方法 采用多聚2-羟乙基甲基丙烯酸酯(poly-HEMA)覆盖细胞培养板培养A549细胞,分别设立对照组、前列腺素E2(PGE2)处理组、PGE2联合塞来昔布处理组,处理48 h后应用流式细胞术检测各组中细胞发生失巢凋亡情况.采用Western blot方法检测各组细胞的丝裂原细胞外激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)通路和磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路激活以及下游凋亡相关蛋白Mcl-1和Bim的表达.应用BALB/c小鼠开胸手术模拟手术应激,进行尾静脉注射A549细胞建立肺转移动物模型.将小鼠分成对照组、手术组和手术+塞来昔布组(完全随机化分组),4周后处死小鼠并观察肺转移,同时采用免疫组织化学方法检测转移产生的肺结节中Mcl-1和Bim的表达.结果 流式细胞术检测结果表明poly-HEMA培养的A549细胞凋亡率为(41.0±2.4)％,而PGE2处理组的凋亡率为(22.8±3.2)％,与对照组比较差异有统计学意义(P=0.012),PGE2联合塞来昔布处理组的凋亡率为(36.6±2.4)％与PGE2组比较,差异有统计学意义(P=0.034).Westem blot结果显示,PGE2能激活MEK/ERK1/2通路,上调ERK1/2的磷酸化水平,并降低Bim的表达,而塞来昔布能明显抑制PGE2的作用.另外PGE2对PI3K/Akt通路无明显作用,但塞来昔布可以抑制该通路,并下调Akt的磷酸化水平,抑制Mcl-1的表达.体内实验中,手术组的肺结节数明显多于对照组,而塞来昔布组肺结节数与手术组比较明显减少,免疫组织化学检测肺结节中的Mcl-1和Bim蛋白的表达水平,结果与体外实验一致.结论 PGE2是手术应激中产生的主要细胞因子,PGE2具有明显的体外抗失巢凋亡作用,且塞来昔布在体内外皆能通过抑制MEK/ERK1/2通路和PI3K/Akt通路来升高促凋亡蛋白Bim的表达和降低抗凋亡蛋白Mcl-1的表达,从而达到促进失巢凋亡,减少肺癌细胞转移的作用.
作者：王雅静；施润；游庆军；王安彭；夏文杰；许林；张帅；蒋峰 刊期： 2018年第04期
骨水泥渗漏是经皮椎体成形术(PVP)中常见的并发症[1-2].实验已经证实采用小空腔技术能够降低骨水泥渗漏的发生[2].本研究旨在探讨新型活检钳及小空腔技术在椎体成形术中的临床应用.一、资料与方法1.一般资料:2017年1月至2018年1月,符合本研究纳入标准的椎体压缩性骨折患者46例,其中男19例,女27例,年龄(68.13±8.19)岁.T10 5例,T11 10例,T12 14例,L1 12例,L2 5例.采用随机数字表法进行随机分组:A组(n=23):行传统椎体成形术治疗椎体压缩骨折,B组(n=23):PVP中应用新型活检钳及小空腔技术治疗椎体压缩骨折.上海凯利泰公司生产的PVP部分手术器械.自行研发的新型活检钳:工作长度230 mm、大直径1.8mm、钳头大直径2 mm、齿长5 mm、槽深1.5 mm、张开角度45°.
作者：赵云；齐向北；李旭；高翔；王坤龙 刊期： 2018年第04期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
