魏丽君；马小琴；凌志强
目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-148b和miR-152在胆管癌中的表达及其生物学功能.方法 用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-148b和miR-152在胆管癌与正常胆管组织、胆管癌细胞株QBC939和良性胆管细胞株H-69中的表达;分别用Real-time PCR、噻唑蓝(MTT)检测法、克隆形成实验和流式细胞术检测miR-148b和miR-152的表达及其对细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响.结果 与正常胆管组织比较,miR-148b和miR-152在胆管癌组织中分别下调(2.75±0.16)倍和(3.05 ±0.18)倍,差异均有统计学意义(P=0.013、0.019);与良性胆管细胞比较,miR-148b和miR-152在胆管癌细胞中分别下调(2.52±0.03)倍和(3.96±0.02)倍,差异均有统计学意义(P=0.018、0.012);miR-148b和miR-152过表达显著抑制胆管癌细胞的增殖速率,分别为(38.49±0.31)％和(52.69±1.01)％,同时也能显著抑制克隆形成率(P=0.031、0.023),miR-148b和miR-152均可使细胞周期阻滞于S期(P=0.027、0.017),并且miR-148b和miR-152过表达均可诱导细胞凋亡.结论 胆管癌组织中miR-148b和miR-152表达均下调,过表达miR-148b和miR-152后可抑制胆管癌细胞增殖及诱导胆管癌细胞凋亡.
作者：曹坤；孙良权；龚勇军；张涛；李海洋；左石 刊期： 2018年第04期
目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对胃癌细胞SGC-7901、BGC-823迁移和侵袭的影响及机制.方法 采用Transwell小室将BMSCs与胃癌细胞共培养的方式,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路相关蛋白的表达.结果 与BMSCs(-)组比较,BMSCs(±)组胃癌细胞活力、迁移能力、侵袭能力均显著降低;在胃癌细胞SGC-7901中,MMP-2、MMP-9、PI3K以及磷酸化Akt(p-Akt)表达量分别为0.92 ±0.06、0.68±0.08、0.58 ±0.03、0.29±0.02,较对照组显著下调(P=0.000、0.012、0.031、0.027);在胃癌细胞BGC-823中,MMP-2、MMP-9、PI3K以及p-Akt表达量分别为0.50±0.05、0.26 ±0.04、0.31 ±0.02、0.13 ±0.03,较对照组均显著下调(P=0.018、0.023、0.029、0.016).结论 BMSCs可能通过阻断PI3 K/Akt信号通路抑制胃癌细胞的迁移及侵袭.
作者：张琳；李良庆；郑建涛 刊期： 2018年第04期
目的 观察肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)联合顺铂对荷PC-9肺癌小鼠肿瘤生长的影响.方法 将60只荷PC-9肺癌肿瘤的裸鼠随机分为对照组、TRAIL组、顺铂组和联合治疗组,每组15只,TRAIL组经腹腔注射TRAIL 10 mg/kg,顺铂组经腹腔注射顺铂1.5 mg/kg,联合治疗组经腹腔分别注射TRAIL 10 mg/kg和顺铂1.5 mg/kg,对照组经腹腔注射等体积的生理盐水.所有小鼠每隔1d给药1次,连续治疗30d,测定每组小鼠肿瘤的生长情况和体重的变化.并采用原位缺口末端标记法(TUNEL)染色法分析4组小鼠肿瘤组织中细胞的凋亡水平.采用Western blot分析4组小鼠肿瘤组织细胞中p53、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3等凋亡相关蛋白的表达水平.结果 与对照组比较,TRAIL组、顺铂组和联合治疗组小鼠肿瘤生长受到显著抑制(P=0.030、0.026、0.009),而联合治疗组小鼠肿瘤生长速度明显缓于TRAIL组和顺铂组(P=0.036、0.018).与对照组比较,顺铂组和联合治疗组小鼠体重明显下降(P=0.030、0.038),而TRAIL组小鼠体重变化差异无统计学意义(P =0.070).与对照组比较,TRAIL组、顺铂组和联合治疗组小鼠肿瘤组织中细胞凋亡比例明显增加(P=0.023、0.034、0.027).与顺铂组比较,TRAIL组和联合治疗组小鼠肿瘤组织细胞凋亡比例明显增加(P =0.028、0.013).Western blot结果显示与对照组比较,TRAIL组、顺铂组和联合治疗组p53和Caspase-3表达水平明显增加,而联合治疗组增加水平更加显著(P=0.018).结论 TRAIL联合顺铂能显著抑制荷PC-9小鼠肿瘤的生长,这一现象是通过促进肿瘤细胞凋亡相关基因表达,进而促进肿瘤细胞凋亡来实现的.
作者：张春敭；齐宇；吴恺；张岩；赵松 刊期： 2018年第04期
随着骨科手术中金属植入物使用的增多,术后伴有金属植入物的CT检查也逐渐增多,而CT扫描会产生严重的伪影,干扰临床诊疗.为了解决这一问题,近年来大量研究分别从工程学和医学角度提出不同的方法和理论来减少金属伪影.工程学方面主要包括改变CT机的型号与性能,如应用双能CT (DECT)、锥状束CT(CBCT)等代替传统的螺旋CT.医学方面主要有改变CT电子管电压、扫描范围(FOV)、扫描层厚等参数,应用CT后处理软件与算法(如O-MAR技术)等.本综述将从以上两个大的角度,详细阐述近年来国内外在CT金属去伪影方面相关研究的进展,并据此为骨科金属植入物CT去伪影扫描方法提供参考.
作者：张客松；韩青；单悦展；邹运；陈炳鹏；王金成 刊期： 2018年第04期
目的 将热激启动子(pHSP)调控的Polo样蛋白激酶1(shPLK1)以及柔红霉素(DOX)耦联于载体磁小体(BMs)上,制备复合物磁小体/PLK1基因/柔红霉素(BMs/pHSP-shPLK1/DOX)的干扰质粒并检测其表征.方法 改变趋磁细菌培养液中成分优化趋磁细菌AMB-1的培养条件;分离纯化磁小体,在电镜下观察磁小体的形态;利用聚乙烯亚胺(PEI)将质粒pHSP-shPLK1和DOX耦联至BMs构建复合物BMs/pHSP-shPLK1/DOX,检测复合物的粒径及电荷;观察在交变磁场(AMF)中复合物的产热效应及DOX的释放率;细胞免疫荧光检测复合物处理后U20S细胞中绿色荧光蛋白(GFP)的表达.结果 趋磁细菌AMB-1的佳生长条件为:以20 μmol/L FeSO4为铁源,以800 mg/L NaNO3为氮源,以200 mg/L的琥珀酸为碳源;电镜显示磁小体大小均匀,分散度好;复合物BMs/pHSP-shPLK1/DOX的粒径为(129.5±9.7) nm,Zeta电位为(-11.7±2.9)mV;在AMF下,复合物可在3 min之内升温至42℃,并维持30 min,该条件下,在24 h及48 h,50％胎牛血清(FBS)组上清液中DOX含量均明显高于磷酸盐缓冲液(PBS)组(t24 h=6.887,P24 h=0.020;t48 h=17.145,P48 h =0.000),50％ FBS中DOX的释放率可达到54％;复合物处理后的细胞可见明显的GFP蛋白表达 .结论 成功制备BMs介导的复合物BMs/pHSP-shPLK1/DOX.
作者：柯友群；程里；余水生；荆珏华 刊期： 2018年第04期
目的 以转移性前列腺癌患者为研究对象,探讨基于循环肿瘤细胞(CTCs)的前列腺癌相关基因标志物,用于转移性前列腺癌的诊断.方法 通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术对人前列腺癌细胞(LNCap)中人激肽释放酶相关酶2(KLK2)、人激肽释放酶相关酶3(KLK3)、叉头框蛋白A1(FOXA1)、粒状头样转录因子2(GRHL2)及同源盒B13 (HOXB13)5个基因的表达进行检测,建立多基因表达的联合检测的方法.采集30例转移性前列腺癌患者和20例健康志愿者的血液样本,利用血液样本和前列腺癌细胞对检测方法的一致性、重复性、线性和灵敏度方面进行了评估.通过比较患者血液样本中CTCs计数和基因表达结果,确定前列腺癌相关标志基因表达水平对于患者预后的意义.结果 该联合检测方法中各基因表达水平与单基因表达水平具有一致性;5个基因表达量在LNCap RNA不同稀释浓度(1 pg～1 μg)的对数范围内呈现较明显的线性关系:KLK2(0.995)、KLK3 (1.000)、FOXA1 (0.992)、GRHL2 (0.999)、HOXB13 (1.000);各基因检测浓度范围分别是KLK2(5 pg ～1 μg)、KLK3(1 pg～1 μg)、FOXA1(10 pg ～1 μg)、GRHL2(100 pg～1 μg)、HOXB13(100 pg ～1 μg);患者血液样本中CTCs计数和基因表达结果对比显示两者具有相关性,即CTCs计数越高的患者,其基因表达阳性率也越高.结论 KLK2、KLK3、FOXA1、GRHL2及HOXB13 5个基因表达水平的联合检测方法具有操作更简单便捷的技术优势和较好的准确性和灵敏度.
作者：张靖；宁松毅；何明芳；谢婧婧；胡建鹏；崔飞伦 刊期： 2018年第04期
目的 探讨经尿道前列腺电切术(TURP)后尿失禁的危险因素及防治方法.方法 行TURP的263例患者根据术后有无尿失禁分为两组,其中术后出现尿失禁患者55例为尿失禁组,其余208例为无尿失禁组,比较分析2组患者的相关资料.结果 尿失禁组的国际前列腺症状评分表(IPSS)评分、切除前列腺比例分别为(23.25±3.56)分、(67.25±5.36)％,均高于无尿失禁组的(18.34±4.05)分、(52.15±6.23)％,差异均有统计学意义(t=8.191、16.433,P均=0.000).尿失禁组的年龄、大尿流率、病程、前列腺体积、手术时间、术后留置尿管时间分别为(69.78±6.47)岁、(6.21±2.82) ml/s、(33.54±16.54)个月、(65.46±33.52) ml、(70.36±19.21) min、(6.81±0.46)d,与无尿失禁组的(70.05±4.82)岁、(5.62±2.63) ml/s、(35.20±17.50)个月、(62.65±35.23) ml、(68.21±17.86) min、(6.79±0.52)d比较差异均无统计学意义(t=0.289、1.457、0.633、0.531、0.781、0.260,P=0.773、0.146、0.528、0.596、0.435、0.795).随访发现,55例尿失禁患者中,真性尿失禁1例(1.82％)、急迫性尿失禁25例(45.45％)、压力性尿失禁29例(52.73％).结论 尿失禁是TURP常见的并发症,术前IPSS评分高及术中过度的切除前列腺组织是导致术后尿失禁的主要因素,临床上可通过术中对功能尿道的保护以及手术前后盆底肌锻炼减少尿失禁的发生.
作者：张道秀；顾朝辉；高宛生；王智勇；魏金星 刊期： 2018年第04期
目的 观察Notch3通过Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路介导基质金属蛋白酶(MMP)-2/MMP-9对肝癌侵袭转移的影响.方法 应用实时荧光定量聚合酶连反应(FQ-PCR)方法检测30例肝癌及癌旁组织中Notch3基因的表达.免疫组织化学检测Notch3蛋白在组织样本中的表达.培养肝癌QGY7701细胞,传代细胞培养,并分为3组:空白对照组(Control组)、脂质体转染组(si-NC组)和小干扰RNA (siRNA)-Notch3转染组(si-N3组).细胞划痕及Transwell小室研究各组细胞侵袭转移能力.Western blot检测Notch3、β-catenin和MMP-2、MMP-9蛋白的表达.结果 Notch3基因在肝癌组织中明显高表达,差异有统计学意义(P=0.006);免疫组织化学实验结果示Notch3蛋白在肝癌组织中呈阳性表达;细胞划痕实验示:在不同时间点,si-N3组迁移细胞数较Control组和si-NC组均较少,细胞迁移能力被抑制;Transwell细胞侵袭实验显示:si-N3组侵袭细胞数明显少于Control组和si-NC组[(75±8)个比(125 ±11)个比(118±10)个,P=0.001、0.002];Western blot检测发现下调Notch3后,β-catenin的表达增加,MMP-2、MMP-9的表达减弱.结论 Notch3在肝癌中被激活,Notch3可通过Wnt/β-catenin通路介导MMP-2/MMP-9,促进肝癌细胞侵袭和转移.
作者：杨永光；鲁才杰；刘丽娟；贺翊峰；张剑；林满洲；李明意 刊期： 2018年第04期
目的 检测膜突蛋白(Moesin)和胸苷激酶1(TK1)在大肠癌组织中的表达水平,分析其与大肠癌患者临床病理特征的关系.方法 应用免疫组织化学法检测75例大肠癌组织和大肠癌癌旁组织中Moesin和TK1表达水平.结果 大肠癌组织中Moesin阳性表达率明显高于癌旁组织(68.00％比21.33％,t=33.043,P=0.000),Moesin表达水平与与大肠癌组织学分化程度、TNM分期和淋巴结转移明显相关(t=4.733,P=0.030;t=5.171,P=0.023;t=8.549,P=0.004);大肠癌组织中TK1阳性表达率明显高于癌旁组织(80.00％比13.33％,t=66.964,P=0.000),TK1表达水平与大肠癌浸润深度、TNM分期和淋巴结转移明显相关(t=1.781,P=0.182;=4.383,P=0.036;t =7.748,P=0.005).结论 Moesin和TK1与大肠癌发生发展有关.
作者：林琳；陈日红；许庆文；黄哲；徐飞鹏；周才进；黄先进 刊期： 2018年第04期
目的 观察RNA干扰下调泛素样含PHD和环指域1(UHRF1)基因对人胃癌SGC-7901细胞生长、凋亡、侵袭转移和周期分布变化的影响.方法 合成针对UHRF1基因的小干扰RNA(siRNA)片段,转染至胃癌细胞株SGC-7901;实验分为3组:转染组(转染特异性siRNA)、阴性对照组(转染非特异性siRNA)、空白对照组;细胞转染24h后用实时定量聚合酶链反应(Real-timePCR)和Western blot检测转染前后UHRF1的mRNA和蛋白的表达水平变化;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖能力;Matrigel和Transwell小室实验检测细胞迁移侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡及周期分布.结果 转染后,胃癌细胞株SGC-7901 UHRF1 mRNA的相对表达量为0.22±0.02,低于阴性对照组(P=0.003)和空白对照组(P=0.001),UHRF1蛋白的相对表达量为0.17±0.01,低于阴性对照组(P =0.001)和空白对照组(P=0.000);细胞增殖能力显著降低(P=0.000);转染组细胞和非特异性阴性对照组侵袭细胞数分别为(117.3±4.2)个和(433.3±5.5)个(P=0.000),迁移细胞数分别为(123.0±3.6)个和(377.3±4.7)个(P=0.000),细胞的侵袭迁移能力显著减弱;转染组凋亡率为(16.36±0.84)％较阴性对照组(9.67±0.36)％、空白对照组(8.63±0.10)％明显增加(P=0.002);细胞周期分布改变显著,G0/G1期的细胞明显增多(P=0.010).结论 UHRF1能促进胃癌细胞株SGC-7901增殖,增强其迁移侵袭能力,抑制细胞凋亡.
作者：屈芫；王天明；严枫 刊期： 2018年第04期
目的 观察单因素抑制Hes1基因的表达对人神经干细胞诱导分化为γ-氨基丁酸(GABA)能神经元分化率的影响.方法 对人神经干细胞进行原代培养,传代(神经干细胞5～7d传代1次).取传至第2代的神经干细胞进行神经元巢蛋白免疫荧光鉴定,证明其为神经干细胞后进行GABA能神经元的诱导分化.采用完全随机分组原则将第二代神经干细胞分为对照组和实验组.对照组为含胎牛血清的普通诱导分化液,实验组除加入抑制Hes1基因的寡核苷酸链外,其余成分同对照组相同.待诱导分化结束后分别对实验组及对照组进行GABA能神经元免疫荧光染色鉴定.结果 诱导分化后第6天,约半数以上细胞开始分化并出现汇聚现象,重新消化接种,第14天镜下可见90％ ～ 95％细胞已贴壁完成分化.进行GABA能神经元免疫荧光染色鉴定,随机选取10个视野,实验组每个视野下在100个细胞中可见55 ～ 70个GABA阳性细胞,分化率可达(64.0±0.6)％,而对照组在同样情况下仅可见15 ～ 20个GABA阳性细胞,分化率仅为(16.6±0.6)％,两者比较差异有统计学意义.结论 抑制Hes1基因的表达可以显著提高入神经干细胞诱导分化为GABA能神经元的分化率.
作者：王伟；赵全军；刘爽；崔绍杰；史铁钧；王涛；王培新 刊期： 2018年第04期
目的 检测微小RNA(miRNA,miR)-187在原发性肝癌患者癌组织和癌旁组织中的表达,使用miR-187 mimics转染后观察其对Hep3b和HepG2两种细胞株增殖和迁移侵袭的影响.方法 收集74例原发性肝癌患者的癌组织和癌旁组织,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测miR-187的相对表达.使用噻唑蓝(MTT)法、划痕实验和Transwell小室侵袭实验观察miR-187mimics转染后其对Hep3b和HepG2两种细胞株增殖、迁移和侵袭的影响.结果 在癌组织与癌旁组织的比较中,癌组织[1.61(1.55,1.68)] miR-187表达水平明显高于癌旁组织[0.47(0.41,0.49)],差异有统计学有意义(P =0.028).肝癌细胞系Hep3B (4.1±0.6)和HepG2(2.5±0.4)的miR-187相对表达水平,明显高于肝正常细胞系THLE-2(1.0±0.1),差异有统计学意义(P =0.003,P=0.013).转染miR-187 mimic后36h和48h,HepG2和Hep3B均表现出明显的增殖能力(0.75±0.16和0.56±0.22)、迁移能力[(64.6±8.3)％和(58.4±6.2)％]和侵袭能力[(37.5±7.8)％和(71.2±5.0)％]的增强,且差异有统计学意义(P=0.011和P=0.020;P=0.009和P=0.016;P=0.004和P=0.008).结论 癌组织中的miR-187表达水平升高,通过机制研究结果显示,miR-187与肿瘤细胞株的增殖和迁移侵袭有关,miR-187的过表达能够明显增加HepG2和Hep3B细胞株的增殖和迁移侵袭能力.
作者：庄正陵；刘江涛；柳洪周；段俊虎；王永贵；丁俊辉；刘洋 刊期： 2018年第04期
目的 观察小干扰RNA(siRNA)特异性沉默人胃癌BGC-823细胞中缺氧诱导因子(HIF-1α、HIF-2α、HIF-1β)后葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达,探讨HIFs对胃癌细胞内GLUT1 、PKM2及VEGF的调控差异.方法 用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及Western blot法检测转染HIFs及Control小干扰RNA(siRNA)后细胞内GLUT1 、PKM2及VEGF的表达.结果 RNA干扰技术沉默HIF-1α后其mRNA、蛋白表达量分别为0.372 ±0.097、0.351 ±0.041,均低于空载体组(0.980 ±0.115、0.520 ±0.030)及空白对照组(1.000 ±0.000、0.478 ±0.062),差异均有统计学意义(F=50.358,P=0.000;F=10.931,P =0.010);RNA干扰技术沉默HIF-2α后其mRNA、蛋白表达量分别为0.391 ±0.091、0.293±0.031,均低于空载体组(1.037±0.090、0.427±0.026)及空白对照组(1.000±0.000、0.430±0.056),差异均有统计学意义(F=72.416,P =0.000;F =9.016,P =0.016);RNA干扰技术沉默HIF-1β后其mRNA、蛋白表达量分别为0.383 ±0.091、0.323 ±0.038,均低于空载体组(0.987 ±0.100、0.445 ±0.059)及空白对照组(1.000 ±0.000、0.457 ±0.040),差异均有统计学意义(F =78.273,P =0.000;F =7.636,P =0.022).转染HIFs(HIF-1α 、HIF-1β 、HIF-2α) siRNA后VEGF及GLUT1在mRNA(分别为0.721 ±0.067、0.833 ±0.059、0.493 ±0.067;0.711 ±0.057、0.826±0.054、0.793±0.068)及蛋白(分别为0.263±0.072、0.303±0.042、0.198±0.057;0.391±0.049、0.451 ±0.054、0.473±0.086),表达水平较空载组(mRNA:1.046±0.094、1.039±0.092;蛋白:0.391 ±0.064、0.690 ±0.066)及对照组(mRNA:1.000±0.000、1.000±0.000;蛋白:0.438±0.055、0.707±0.040)下降,差异均有统计学意义(VEGF mRNA:F=35.232,P=0.000;GLUT1 mRNA:F=15.364,P =0.000;VEGF蛋白:F=8.150,P=0.003,GLUT1蛋白:F=17.109,P=0.000),其中转染HIF-2α后VEGF表达下调明显,转染HIF-1α后GLUT1表达下调明显.转染HIF-1α后PKM2在mRNA(0.611±0.036)及蛋白(0.351 ±0.047)表达水平较空载体组(1.037±0.197、0.731±0.057)及对照组(1.000 ±0.000、0.737 ±0.043)均下降,差异均有统计学意义(F=12.480,P=0.007;F=60.403,P=0.000).转染HIF-2α后PKM2 mRNA (0.793±0.067)表达下降,差异均有统计学意义(F=12.480,P =0.007),蛋白无明显变化(0.675 ±0.030,F=1.211,P=0.373);而转染HIF-1β(mRNA:0.980 ±0.115,蛋白:0.641 ±0.076)后PKM2无明显下降(F=0.144,P =0.869;F=2.404,P =0.171).结论 研究结果提示HIF-1α、HIF-2α和HIF-1β均参与调控GLUT1、及VEGF的表达,HIF-1α参与调控PKM2,HIF-2α在转录水平可能调控PKM2的表达.
作者：曲颜丽；王海峰；唐勇 刊期： 2018年第04期
目的 通过3D打印脊柱骨盆模型及计算机软件辅助导航,介绍S3髂骨螺钉内固定的置钉入路及参数分析.方法 通过3D打印模型及计算机软件相关数据确定S3节段的置钉空间,并选取本次髂骨螺钉进针点位置.随机抽取已进行过骨盆三维CT重建扫描的男女成年患者图像各20份,选取本次已确定可以进钉的螺钉入点(O),以身体冠状面或骶骨水平横切面为水平切面(X),测量球形探针进针偏角小角度范围(A)、大角度范围(B)及佳进钉角度范围(Z),并测量本次进针点位置螺钉钉道长度及宽度.对应成人3D打印模型中证实本次新型置钉方式的准确性及安全性.结果 进针角度由小角度OA范围至大角度OB角度范围内,在窄横径超过7 mm的条件下,均可安全置入万向髂骨螺钉(平均长度80 ～ 90 mm)进行固定.进针角度范围:男性X-OA-OB平面[(47.1±1.9)°～(56.7±1.4)°],佳角度X-OZ范围[(52.3±1.1)°];女性X-OA-OB平面[(49.6±0.8)°～(59.9±1.1)°],佳角度X-OZ范围[(53.7±0.8)°].钉道长度范围:男性OA平面为(91.4±2.3) mm,OB平面为(89.5±4.6)mm,OZ平面范围为(94.2±2.1)mm;女性OA平面为(90.4±1.9) mm,OB平面为(85.6±2.3)mm,OZ平面范围为(96.4±1.7) mm.在佳置钉角度OZ,男性与女性比较,置钉角度(F =4.276,P =0.001)及置钉长度比较差异均有统计学意义(F =3.647,P=0.001);OA中,男性与女性的置钉偏角数值比较,差异有统计学意义(F=5.268,P=0.001),置钉长度数值比较差异无统计学意义(F=1.513,P=0.139).OB中,男性与女性比较,置钉角度(F=8.153,P=0.001)及置钉长度比较差异均有统计学意义(F=3.341,P=0.002).在相同的置钉平面上,不同性别的成人钉道尾向偏角数值差异无统计学意义(P＞0.05).结论 经S3侧块髂骨螺钉置钉均可安全有效置入髂骨螺钉,通过进针点O-Z方向的髂骨螺钉是理论上安全性及稳定性较好的脊柱骨盆固定术置入髂骨螺钉的位置角度.
作者：惠宝锋；王志杰；褚言琛；侯庆先；杨文玖；宫硕 刊期： 2018年第04期
目的 探讨脂肪非典型钙黏蛋白(FAT1)通过靶向调控缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)调节缺氧条件下胶质瘤细胞侵袭能力的作用机制.方法 选择我院收治的48例Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤患者的手术病理组织样本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测FAT1和HIF-1α表达水平并分析其相关性.以人胶质瘤细胞U87MG和GOS3作为研究对象,采用FQ-PCR技术检测正常氧气和缺氧条件下FAT1和HIF-1α表达.采用脂质体2000法将FAT1小干扰RNA(siRNA)、HIF-1α siRNA以及对照siRNA转染至U87MG和GOS3细胞株,检测正常氧气和缺氧条件下FAT1和HIF-1α表达,并采用Transwell小室技术检测U87MG和GOS3胶质瘤细胞的侵袭能力.结果 48例Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤患者病理组织FAT1和HIF-1α相对表达水平分别为4.07(0.72,13.42)和0.94(0.29,3.49),Spearman相关分析显示FAT1和HIF-1α相对表达水平明显相关(r=0.835,P=0.000).正常氧气浓度下GOS3细胞株FAT1(0.29±0.03)和HIF-1α(0.34 ±0.09)相对表达水平均显著低于U87MG细胞株的1.08 ±0.15、1.00 ±0.12,差异有统计学意义(t=8.945、7.621,P=0.010、0.002);缺氧条件下,U87MG和GOS3细胞株FAT1和HIF-1α相对表达水平均显著高于正常氧气浓度下(t=17.994、8.920、14.047、4.037,P=0.000、0.001、0.004、0.016);U87MG细胞株缺氧条件下FAT1 (4.38 ±0.28)和HIF-1α(2.76 ±0.32)相对表达水平均显著高于GOS3细胞株的1.69±0.17、0.83±0.19,差异有统计学意义(t=14.224、8.982,P=0.000、0.001).转染FAT1 siRNA后U87MG和GOS3细胞在正常氧气和缺氧条件下FAT1 (0.17 ±0.06、0.16 ±0.03、0.16±0.03、0.18 ±0.03)和HIF-1α(0.18 ±0.03、0.17 ±0.04、0.15 ±0.04、0.21 ±0.02)相对表达水平均显著降低,差异均有统计学意义(t=7.577、7.793、7.793、7.783、9.285、9.260、9.484、9.042,P=0.002、0.013、0.013、0.014、0.009、0.007、0.007、0.011);转染HIF-1αsiRNA后U87MG和GOS3细胞在正常氧条件下的FAT1 (0.16 ±0.04、0.28 ±0.03)以及正常氧气和缺氧条件下HIF-1α(0.15 ±0.03、0.16 ±0.02、0.15 ±0.03、0.17 ±0.02)相对表达水平显著降低,差异均有统计学意义(t=7.890、6.834、9.624、9.614、9.624、9.500,P=0.012、0.018、0.008、0.009、0.008、0.010);但缺氧条件下的FAT1 (4.27±0.41、2.72 ±0.25)相对表达水平显著高于正常氧,差异均有统计学意义(t=12.649、9.671,P=0.000、0.001).缺氧条件下,转染FAT1 siRNA、转染HIF1αsiRNA的U87MG细胞侵袭细胞数量[(23.2±4.2)、(21.5±3.1)个]显著低于正常氧条件[(57.6±8.1)、(58.7±7.6)个],差异有统计学意义(t=6.530、7.850,P=0.003、0.001).结论 高级别胶质瘤中FAT1和HIF-1α表达具有较强的相关性,缺氧条件下两者高表达,FAT1可通过靶向调控HIF-1α促进胶质瘤细胞侵袭.
作者：蒋广义；孙剑瑞；丁大领；庞长河；刘献志 刊期： 2018年第04期
目的 观察膜联蛋白A11(ANXA11)对人胃癌细胞株SGC7901 5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药性影响.方法 检测人胃癌细胞株SCG7901、BGC823的ANXA11表达.将ANXA11-小干扰RNA(siRNA)及阴性对照序列瞬时转染入SGC7901细胞,应用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测转染后各组细胞对不同剂量5-Fu(1、10、20、40、80 μg/ml)的药物敏感性改变.应用流式细胞术检测不同处理组凋亡率,应用定量聚合酶链反应(qPCR)、Western blot检测胸腺嘧啶脱氧核苷合成酶(TS)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)和bcl-2相关X蛋白(bax)表达的改变.结果 ANXA11 mRNA及蛋白表达量在SGC7901中显著高于BGC823(t=3.212,P=0.033;t=-10.768,P=0.000).转染组(转染ANXA11-siRNA)细胞的半数抑制剂量(IC50)及20％抑制剂量(IC20)值明显低于阴性、空白对照组(F =47.500,P=0.000;F =45.523,P=0.000).转染组、联合组凋亡率较阴性(转染NS-siRNA)、空白对照组(转染LipofectamineTM2000)显著升高(F=117.525,P=0.000),且联合组凋亡率较转染组明显升高(=9.004,P=0.000).转染组及联合组ANXA11蛋白表达较阴性、空白对照组显著降低(F=118.403,P=0.000).转染组及联合组bax的表达上调(F =35.608,P=0.000),而bcl-2、TS的表达降低(F=30.048,P=0.000;F=22.874,P=0.000).结论 抑制ANXA11表达能提高人胃癌细胞株SGC7901对5-Fu的敏感性,可能与抑制TS、bcl-2、上调bax的表达有关.
作者：贾楠；李勇；赵一杰；赵群；范立侨；檀碧波；刘羽 刊期： 2018年第04期
前梯度蛋白2 (AGR2)属于蛋白二硫键异构酶家族[1],自1998年被发现以来,大量研究结果显示其在乳腺癌、胰腺癌、胃癌等肿瘤中呈高表达,并且通过调控细胞周期相关蛋白的折叠、成熟和分泌过程,在恶性肿瘤的生长过程中扮演重要的角色[2].本研究旨在观察AGR2与血管内皮生长因子C(VEGF-C)在前列腺癌组织中的表达,探讨其与临床资料的关系.
作者：时景伟；陈欢；崔蕊；张华；高锋；孔庆阔；晋学飞 刊期： 2018年第04期
目的 大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在铁蓄积环境下培养,观察细胞增殖指标和成骨方向分化的影响.方法 无菌条件下取正常SD 4周龄雌性大鼠股骨髓腔细胞,经分离纯化后传代培养,并经流式细胞仪鉴定成功后,体外扩增后接种,由不同浓度枸櫞酸铁铵(FAC) (50、100、200 μmol/L)及成骨诱导培养基共同培养,以不加FAC为空白对照组,在第4、7、10、14天收集细胞,采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR),分别检测成骨细胞分化关键基因:成骨相关转录因子2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨桥蛋白(OPN)表达;在第14天茜素红染色并半定量检测钙结节形成情况;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测不同浓度FAC对BMSCs增殖的影响.结果 随着铁剂浓度的增加,大鼠BMSCs的增殖能力逐渐降低;BMSCs经成骨诱导14 d后,在铁剂影响下,形成的钙结节较空白对照组明显减少,但铁剂干预各组间无明显差异,半定量结果亦显示相同结果(对照组:2.357±0.160、50 μmol/L组:0.308±0.029、100 μmol/L组:0.281±0.031、200 μmol/L组:0.224±0.017,P=0.000);不同浓度的铁剂对BMSCs成骨分化的各个阶段基因都有不同程度的影响.在成骨早期,Runx2的表达在对照组、100 μmol/L和200μmol/L铁剂干预组有明显差异(对照组:1.000±0.229、100 μmol/L组:0.198±0.044、200 μmol/L组:0.149±0.009,P=0.001),且与浓度存在一致相关性;在成骨中期,不同浓度铁剂对ALP的表达都具有明显抑制(对照组:0.980±0.063、50 μmol/L组:0.018±0.001、100 μmol/L组:0.014±0.002、200 μmol/L组:0.008±0.001,P=0.001);在成骨晚期阶段,不同浓度铁剂较对照组对OPN有明显抑制表达作用(对照组:0.999±0.001、50 μmol/L组:0.170 ±0.072、100 umol/L组:0.142±0.008、200 μmol/L组:0.117 ±0.028,P =0.003).结论 铁蓄积培养环境可明显抑制BMSCs的增殖,同时抑制其向成骨细胞方向的分化,且有剂量依赖性.
作者：俞晨；杨帆；李健；陈斌；袁晔；高焱；李勇；费蓓蓓；徐又佳；彭笳宸 刊期： 2018年第04期
目的 观察膜联蛋白A9(ANXA9)在人结肠癌细胞株SW620增殖中发挥的作用,并探讨其机制.方法 实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法检测人结肠癌细胞株HT29、SW620、SW480、LoVo、SW1116中ANXA9的表达;应用40 nmol/L的ANXA9-小干扰RNA(siRNA)转染ANXA9表达强的SW620细胞株,抑制内源性ANXA9的表达;细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测转染对SW620细胞活性的影响;流式细胞术(FCM)检测转染ANXA9-siRNA对SW620细胞周期的影响;Real-time PCR和Western blot法检测增殖相关基因增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(Cyclin)D、Cyclin E、p21、p16的表达.结果 人结肠癌细胞株HT29、SW620、SW480、LoVo、SW1116中ANXA9 mRNA表达强度分别为0.027±0.004、0.041±0.005、0.028±0.003、0.033±0.003、0.025±0.005;ANXA9蛋白表达强度分别为0.287±0.076、1.246±0.103、0.326±0.040、0.387±0.097、0.295±0.064,其中SW620细胞ANXA9的mRNA和蛋白表达强(F=8.212,P=0.003;F=81.728,P=0.000).转染组、阴性对照组、空白组的ANXA9mRNA和蛋白的表达水平分别为0.209±0.016、0.317±0.104,0.957±0.070、0.647±0.155,1.031±0.171、0.727±0.145.转染后转染组的细胞ANXA9的mRNA和蛋白均明显低于对照组及空白组(F=54.072,P=0.000;F=7.601,P=0.023).CCK8结果显示,转染组、阴性对照组、空白组的细胞活性24h分别为0.605±0.024、0.612±0.022、0.628 ±0.027;48 h分别为0.810±0.049、1.196±0.118、1.308±0.070;72 h分别为1.145±0.070、1.531±0.062、1.454±0.081.转染组的细胞活性明显低于对照组及空白组(F =38.742,P=0.000;F=32.56,P=0.000).G0/G1、G2/M、S期的细胞比例在转染组为(66.870±3.850)％、(15.060±2.480)％、(18.080± 1.420)％;阴性对照组为(50.070±3.370)％、(32.520±2.500)％、(17.410±0.920)％;空白组为(48.740±2.170)％、(32.390±1.820)％、(19.210±0.390)％.转染组细胞的G0/G1期比例升高(F=29.752,P=0.001)、G2/M期的比例降低(F=57.860,P=0.000),S期细胞的比例无明显变化(F=1.568,P=0.284).转染组细胞Cyclin D1、Cyclin E1的mRNA和蛋白表达明显降低[mRNA:F=462.821、5.512,P=0.000、0.044;蛋白:F=15.148、8.300,P=0.005、0.019)],而p21的mRNA和蛋白表达明显增高[mRNA:F=6.472,P=0.032;蛋白:F=21.230,P=0.002].结论 ANXA9可能通过Cyclin D1、Cyclin E1、p21表达而参与了结肠癌细胞株SW620的增殖过程.
作者：卞红磊；于溯洋；张盛君；高鑫 刊期： 2018年第04期
目的 观察人脐带沃顿胶(WJ)对脑外伤小鼠的神经修复作用.方法 采用小鼠CCI脑外伤模型建立动物模型,将实验小鼠随机分为Veh和WJ移植组.术后3d,干湿称重法检测小鼠损伤侧脑含水量,酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-10的表达,碘化丙锭(PI)染色检测损伤附近区域坏死细胞数量;术后28 d,神经功能缺损评分评价小鼠运动功能,新物体识别实验检测小鼠认知功能,糖水偏好实验评价小鼠抑郁状况,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测神经元特异性相关蛋白和神经营养因子表达.结果 (1)WJ移植组小鼠脑含水量[(84.61±1.61)％]与Veh组比较[(11.06±2.24)％]明显降低,差异有统计学意义(t=4.935,P=0.001).(2)小鼠神经功能缺损评分结果显示WJ移植组术后第7、14、21、28天神经功能缺损评分[(11.80±1.30)、(10.60±1.14)、(9.40±1.14)和(8.20±1.30)分]与Veh组比较有统计学意义[(9.80±1.09)、(8.40±1.14)、(7.20±1.09)和(5.80±0.84)分,P =0.000].(3)小鼠新物体识别实验结果显示WJ移植组小鼠新物体辨别率为(65.57±1.543)％,高于Veh组[(50.03±1.704)％],差异有统计学意义(t=6.760,P=0.000).(4)糖水偏嗜实验表明WJ移植组和Veh组比较差异有统计学意义[(63.05±2.10)％和(48.62±1.80)％,t=4.935,P=0.001].(4)WJ移植组抑炎因子IL-10表达量[(659.39±14.40) pg/ml]明显高于Veh组[(554.39±15.54) pg/ml,t=4.957,P=0.008],而促炎因子TNF-α(755.90±16.89) ng/ml明显低于Veh组[(1 081.22±14.81) ng/ml,t=14.480,P=0.000].(5)WJ移植组神经元特异性相关蛋白微管相关蛋白-2(MAP-2)、双皮质蛋白(DCX)和神经营养因子脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)的表达(0.94±0.18、1.38±0.06、1.02±0.02和0.85±0.67)明显高于Veh组(0.41±0.03、0.81±0.04、0.52±0.03和0.23 ±0.03),差异有统计学意义(=2.900,P=0.044;t=8.007,P=0.001;t=13.060,P=0.000;=8.640,P=0.001).(6)对比Veh组[(321.60±17.98)个],WJ移植组的坏死细胞数量显著减少[(179.60±18.95)个],差异有统计学意义(t=5.435,P=0.001).结论 人脐带沃顿胶对脑外伤小鼠有神经修复作用.
作者：程田；刘雯雯；刘宏建；关方霞 刊期： 2018年第04期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
