张道秀；顾朝辉；高宛生；王智勇；魏金星
目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对胃癌细胞SGC-7901、BGC-823迁移和侵袭的影响及机制.方法 采用Transwell小室将BMSCs与胃癌细胞共培养的方式,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路相关蛋白的表达.结果 与BMSCs(-)组比较,BMSCs(±)组胃癌细胞活力、迁移能力、侵袭能力均显著降低;在胃癌细胞SGC-7901中,MMP-2、MMP-9、PI3K以及磷酸化Akt(p-Akt)表达量分别为0.92 ±0.06、0.68±0.08、0.58 ±0.03、0.29±0.02,较对照组显著下调(P=0.000、0.012、0.031、0.027);在胃癌细胞BGC-823中,MMP-2、MMP-9、PI3K以及p-Akt表达量分别为0.50±0.05、0.26 ±0.04、0.31 ±0.02、0.13 ±0.03,较对照组均显著下调(P=0.018、0.023、0.029、0.016).结论 BMSCs可能通过阻断PI3 K/Akt信号通路抑制胃癌细胞的迁移及侵袭.
作者：张琳；李良庆；郑建涛 刊期： 2018年第04期
目的 观察CAPZA1在胰腺癌组织中的表达及与预后的关系,探讨CAPZA1调控胰腺细胞的侵袭转移的作用及机制.方法 采用免疫组织化学法检测CAPZA1和上皮-间充质转化(EMT)标志物在胰腺癌组织中的表达,统计分析胰腺癌患者的预后情况.Western blot、实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测胰腺癌细胞中CAPZA1和EMT标志物的表达.Transwell、细胞计数试剂盒(CCK-8)检测胰腺癌细胞的迁移、侵袭和增殖.结果 CAPZA1表达水平与胰腺癌的生物学特性及患者的预后呈负相关.CAPZA1的表达水平与胰腺癌的侵袭转移潜能呈负相关,抑制CAPZA1的表达可促进胰腺癌的侵袭转移(192.0±13.8比153.0±17.1,P=0.004),而过表达CAPZA1可抑制胰腺癌的侵袭转移(107.0±18.5比153.0±17.1,P=0.004).过表达CAPZA1可以上调EMT标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin,0.76±0.09比0.57 ±0.14,P=0.034)而抑制N-钙黏蛋白(N-cadherin,0.53 ±0.12比0.74±0.10,P=0.017)和波形蛋白(Vimentin,0.56±0.20比0.93±0.19,P=0.017)的表达.结论 CAPZA1可通过调控肌动蛋白骨架的装配,从而抑制胰腺癌细胞EMT,降低胰腺癌细胞的侵袭能力.
作者：翟东升；黄强；谭庆丰 刊期： 2018年第04期
骨水泥渗漏是经皮椎体成形术(PVP)中常见的并发症[1-2].实验已经证实采用小空腔技术能够降低骨水泥渗漏的发生[2].本研究旨在探讨新型活检钳及小空腔技术在椎体成形术中的临床应用.一、资料与方法1.一般资料:2017年1月至2018年1月,符合本研究纳入标准的椎体压缩性骨折患者46例,其中男19例,女27例,年龄(68.13±8.19)岁.T10 5例,T11 10例,T12 14例,L1 12例,L2 5例.采用随机数字表法进行随机分组:A组(n=23):行传统椎体成形术治疗椎体压缩骨折,B组(n=23):PVP中应用新型活检钳及小空腔技术治疗椎体压缩骨折.上海凯利泰公司生产的PVP部分手术器械.自行研发的新型活检钳:工作长度230 mm、大直径1.8mm、钳头大直径2 mm、齿长5 mm、槽深1.5 mm、张开角度45°.
作者：赵云；齐向北；李旭；高翔；王坤龙 刊期： 2018年第04期
目的 检测胃癌及癌旁组织中M2型丙酮酸激酶(PKM2)和张力蛋白同源物基因(PTEN)的差异表达,探讨PKM2表达水平及PTEN表达水平与胃癌临床病理特征之间的关系.方法 应用免疫组织化学方法检测88例胃癌组织和癌旁组织中PKM2和PTEN表达,结合相关临床资料进行分析.结果 PKM2在胃癌组织的阳性表达率为71.59％ (63/88),明显高于癌旁组织阳性表达率[30.68％ (27/88)],两者比较差异有统计学意义(t=29.470,P=0.000),PKM2表达水平与胃癌TNM分期、淋巴结转移呈明显相关(分别为t=4.130,P=0.040;t=5.840,P=0.020);PTEN在胃癌组织的阳性表达率为39.77％(35/88),明显低于胃癌癌旁组织阳性表达率[92.05％(81/88)],两者差异有统计学意义(t=53.510,P=0.000),PTEN表达水平与胃癌TNM分期、组织学分化程度、淋巴结转移呈明显相关(分别为t=5.550,P=0.020;t =4.330,P=0.040;t =5.840,P=0.020).结论 PKM2和PTEN的表达水平可能与胃癌的发生、发展及淋巴结转移明显相关.
作者：黄哲；蔡朋株；林琳；徐飞鹏；许庆文 刊期： 2018年第04期
目的 观察乳腺癌耐药蛋白(BCRP)在肝癌组织的表达与临床病理特征的关系及其表达的抑制对肝癌细胞增殖凋亡的影响.方法 通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝癌组织中BCRP表达,并分析其与临床病理特征的关系;通过LipofectamineTM2000脂质体介导法将BCRP-小干扰RNA(siRNA)转染人肝癌SMMC-7721细胞,通过噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪及Western blot分别检测转染48 h后细胞的增殖、凋亡及BCRP、细胞核增殖抗原(Ki-67)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、Notch1、Hes1的蛋白表达.结果 BCRP在肝癌组织中的表达与肝癌患者的性别、年龄、肿瘤大小无明显相关,与病理分级、临床分期及肿瘤是否发生转移明显相关;BCRP-siRNA转染后SMMC-7721细胞中BCRP在转录及翻译水平的表达均受到抑制;BCRP-siRNA组细胞增殖(0.287±0.022)及Ki-67(0.142±0.018) 、Notch1 (0.162±0.021)、Hes1 (0.111±0.015)蛋白表达均显著低于Control组(0.411±0.026、0.258±0.026、0.462 ±0.032、0.241±0.023;P增殖=0.001,PKi-67 =0.001,PNotch1=0.000,PHes1=0.001),细胞凋亡率[(14.63±0.88)％]及bax蛋白表达(0.324±0.034)均显著高于Control组[(1.32±0.15)％,0.106±0.012;P凋亡=0.000,Pbax=0.000].结论 肝癌中BCRP的表达与病理分级、临床分期及肿瘤是否发生转移相关,抑制其表达可降低肝癌细胞的增殖及诱导细胞的凋亡,其机制与调节Ki-67 、bax表达及Notch1信号通路有关.
作者：高志强；汪俊峰；陈德华；马雪松；唐哲 刊期： 2018年第04期
目的 探讨纳米磁性药物载体2,2'-联吡啶(2,2'-dipyridyl)磁性白蛋白纳米粒(MNA-DPD)的制备工艺并分析其物理性能.方法 应用化学反应制备纳米级的磁流体(Fe3O4),用热处理法将人血浆蛋白质和2,2'-联吡啶分散在磁流体中,在高速超声搅拌下加热,使蛋白质稳定,得到蛋白质包覆的生物相容性MNA-DPD.进一步分析MNA-DPD磁响应性、磁特性、靶向性和分散性.结果 成功制备稳定的纳米级的MNA-DPD,其平均粒径(D)=131.3 nm.物理性能分析结果显示,制备出的MNA-DPD具有良好的磁响应性、磁特性、靶向性、分散性.结论 用热处理法可以制备纳米级、具有良好磁响应性、磁特性、靶向性、分散性的MNA-DPD.
作者：桂铮；于耀宇；汪子文；卢学刚；郭栋；朱明；李臻；水少峰；韩新巍 刊期： 2018年第04期
目的 探讨脂肪非典型钙黏蛋白(FAT1)通过靶向调控缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)调节缺氧条件下胶质瘤细胞侵袭能力的作用机制.方法 选择我院收治的48例Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤患者的手术病理组织样本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测FAT1和HIF-1α表达水平并分析其相关性.以人胶质瘤细胞U87MG和GOS3作为研究对象,采用FQ-PCR技术检测正常氧气和缺氧条件下FAT1和HIF-1α表达.采用脂质体2000法将FAT1小干扰RNA(siRNA)、HIF-1α siRNA以及对照siRNA转染至U87MG和GOS3细胞株,检测正常氧气和缺氧条件下FAT1和HIF-1α表达,并采用Transwell小室技术检测U87MG和GOS3胶质瘤细胞的侵袭能力.结果 48例Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤患者病理组织FAT1和HIF-1α相对表达水平分别为4.07(0.72,13.42)和0.94(0.29,3.49),Spearman相关分析显示FAT1和HIF-1α相对表达水平明显相关(r=0.835,P=0.000).正常氧气浓度下GOS3细胞株FAT1(0.29±0.03)和HIF-1α(0.34 ±0.09)相对表达水平均显著低于U87MG细胞株的1.08 ±0.15、1.00 ±0.12,差异有统计学意义(t=8.945、7.621,P=0.010、0.002);缺氧条件下,U87MG和GOS3细胞株FAT1和HIF-1α相对表达水平均显著高于正常氧气浓度下(t=17.994、8.920、14.047、4.037,P=0.000、0.001、0.004、0.016);U87MG细胞株缺氧条件下FAT1 (4.38 ±0.28)和HIF-1α(2.76 ±0.32)相对表达水平均显著高于GOS3细胞株的1.69±0.17、0.83±0.19,差异有统计学意义(t=14.224、8.982,P=0.000、0.001).转染FAT1 siRNA后U87MG和GOS3细胞在正常氧气和缺氧条件下FAT1 (0.17 ±0.06、0.16 ±0.03、0.16±0.03、0.18 ±0.03)和HIF-1α(0.18 ±0.03、0.17 ±0.04、0.15 ±0.04、0.21 ±0.02)相对表达水平均显著降低,差异均有统计学意义(t=7.577、7.793、7.793、7.783、9.285、9.260、9.484、9.042,P=0.002、0.013、0.013、0.014、0.009、0.007、0.007、0.011);转染HIF-1αsiRNA后U87MG和GOS3细胞在正常氧条件下的FAT1 (0.16 ±0.04、0.28 ±0.03)以及正常氧气和缺氧条件下HIF-1α(0.15 ±0.03、0.16 ±0.02、0.15 ±0.03、0.17 ±0.02)相对表达水平显著降低,差异均有统计学意义(t=7.890、6.834、9.624、9.614、9.624、9.500,P=0.012、0.018、0.008、0.009、0.008、0.010);但缺氧条件下的FAT1 (4.27±0.41、2.72 ±0.25)相对表达水平显著高于正常氧,差异均有统计学意义(t=12.649、9.671,P=0.000、0.001).缺氧条件下,转染FAT1 siRNA、转染HIF1αsiRNA的U87MG细胞侵袭细胞数量[(23.2±4.2)、(21.5±3.1)个]显著低于正常氧条件[(57.6±8.1)、(58.7±7.6)个],差异有统计学意义(t=6.530、7.850,P=0.003、0.001).结论 高级别胶质瘤中FAT1和HIF-1α表达具有较强的相关性,缺氧条件下两者高表达,FAT1可通过靶向调控HIF-1α促进胶质瘤细胞侵袭.
作者：蒋广义；孙剑瑞；丁大领；庞长河；刘献志 刊期： 2018年第04期
目的 探讨塞来昔布(celecoxib)对肺腺癌手术应激所致非小细胞肺癌细胞A549的抗失巢凋亡的影响及其分子作用机制.方法 采用多聚2-羟乙基甲基丙烯酸酯(poly-HEMA)覆盖细胞培养板培养A549细胞,分别设立对照组、前列腺素E2(PGE2)处理组、PGE2联合塞来昔布处理组,处理48 h后应用流式细胞术检测各组中细胞发生失巢凋亡情况.采用Western blot方法检测各组细胞的丝裂原细胞外激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)通路和磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路激活以及下游凋亡相关蛋白Mcl-1和Bim的表达.应用BALB/c小鼠开胸手术模拟手术应激,进行尾静脉注射A549细胞建立肺转移动物模型.将小鼠分成对照组、手术组和手术+塞来昔布组(完全随机化分组),4周后处死小鼠并观察肺转移,同时采用免疫组织化学方法检测转移产生的肺结节中Mcl-1和Bim的表达.结果 流式细胞术检测结果表明poly-HEMA培养的A549细胞凋亡率为(41.0±2.4)％,而PGE2处理组的凋亡率为(22.8±3.2)％,与对照组比较差异有统计学意义(P=0.012),PGE2联合塞来昔布处理组的凋亡率为(36.6±2.4)％与PGE2组比较,差异有统计学意义(P=0.034).Westem blot结果显示,PGE2能激活MEK/ERK1/2通路,上调ERK1/2的磷酸化水平,并降低Bim的表达,而塞来昔布能明显抑制PGE2的作用.另外PGE2对PI3K/Akt通路无明显作用,但塞来昔布可以抑制该通路,并下调Akt的磷酸化水平,抑制Mcl-1的表达.体内实验中,手术组的肺结节数明显多于对照组,而塞来昔布组肺结节数与手术组比较明显减少,免疫组织化学检测肺结节中的Mcl-1和Bim蛋白的表达水平,结果与体外实验一致.结论 PGE2是手术应激中产生的主要细胞因子,PGE2具有明显的体外抗失巢凋亡作用,且塞来昔布在体内外皆能通过抑制MEK/ERK1/2通路和PI3K/Akt通路来升高促凋亡蛋白Bim的表达和降低抗凋亡蛋白Mcl-1的表达,从而达到促进失巢凋亡,减少肺癌细胞转移的作用.
作者：王雅静；施润；游庆军；王安彭；夏文杰；许林；张帅；蒋峰 刊期： 2018年第04期
目的 检测儿童类风湿关节炎亚型(S-JIA、JIA少关节型)外周血Nod样受体家族包含pyrin结构域蛋白-3(NLRP-3)mRNA基因表达差异,探讨NLRP-3 mRNA表达水平差异与患儿临床表现特征的相关性.方法 收集28例初治类风湿关节炎(S-JIA13例,JIA少关节型15例)住院患儿及20例同期正常体检患儿的外周血标本,提取标本总RNA,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测外周血标本中NLRP-3 mRNA表达的差异.结果 在外周血中NLRP-3 mRNA在S-JIA组的相对表达量为0.0667 ±0.0044,高于JIA少关节型组(0.0107±0.001 5)及正常对照组(0.021 3 ±0.003 2),差异有统计学意义(F=5.491,P=0.010);正常对照组与JIA少关节型组之间比较时,差异无统计学意义(F=1.745,P=0.105).结论 NLRP-3 mRNA水平升高,是导致S-JIA产生炎性反应的重要影响因素之一.
作者：向明丽；刘秋亮；刘玉峰；张素琴；丁婧 刊期： 2018年第04期
随着骨科手术中金属植入物使用的增多,术后伴有金属植入物的CT检查也逐渐增多,而CT扫描会产生严重的伪影,干扰临床诊疗.为了解决这一问题,近年来大量研究分别从工程学和医学角度提出不同的方法和理论来减少金属伪影.工程学方面主要包括改变CT机的型号与性能,如应用双能CT (DECT)、锥状束CT(CBCT)等代替传统的螺旋CT.医学方面主要有改变CT电子管电压、扫描范围(FOV)、扫描层厚等参数,应用CT后处理软件与算法(如O-MAR技术)等.本综述将从以上两个大的角度,详细阐述近年来国内外在CT金属去伪影方面相关研究的进展,并据此为骨科金属植入物CT去伪影扫描方法提供参考.
作者：张客松；韩青；单悦展；邹运；陈炳鹏；王金成 刊期： 2018年第04期
目的 观察小干扰RNA(siRNA)特异性沉默人胃癌BGC-823细胞中缺氧诱导因子(HIF-1α、HIF-2α、HIF-1β)后葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达,探讨HIFs对胃癌细胞内GLUT1 、PKM2及VEGF的调控差异.方法 用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及Western blot法检测转染HIFs及Control小干扰RNA(siRNA)后细胞内GLUT1 、PKM2及VEGF的表达.结果 RNA干扰技术沉默HIF-1α后其mRNA、蛋白表达量分别为0.372 ±0.097、0.351 ±0.041,均低于空载体组(0.980 ±0.115、0.520 ±0.030)及空白对照组(1.000 ±0.000、0.478 ±0.062),差异均有统计学意义(F=50.358,P=0.000;F=10.931,P =0.010);RNA干扰技术沉默HIF-2α后其mRNA、蛋白表达量分别为0.391 ±0.091、0.293±0.031,均低于空载体组(1.037±0.090、0.427±0.026)及空白对照组(1.000±0.000、0.430±0.056),差异均有统计学意义(F=72.416,P =0.000;F =9.016,P =0.016);RNA干扰技术沉默HIF-1β后其mRNA、蛋白表达量分别为0.383 ±0.091、0.323 ±0.038,均低于空载体组(0.987 ±0.100、0.445 ±0.059)及空白对照组(1.000 ±0.000、0.457 ±0.040),差异均有统计学意义(F =78.273,P =0.000;F =7.636,P =0.022).转染HIFs(HIF-1α 、HIF-1β 、HIF-2α) siRNA后VEGF及GLUT1在mRNA(分别为0.721 ±0.067、0.833 ±0.059、0.493 ±0.067;0.711 ±0.057、0.826±0.054、0.793±0.068)及蛋白(分别为0.263±0.072、0.303±0.042、0.198±0.057;0.391±0.049、0.451 ±0.054、0.473±0.086),表达水平较空载组(mRNA:1.046±0.094、1.039±0.092;蛋白:0.391 ±0.064、0.690 ±0.066)及对照组(mRNA:1.000±0.000、1.000±0.000;蛋白:0.438±0.055、0.707±0.040)下降,差异均有统计学意义(VEGF mRNA:F=35.232,P=0.000;GLUT1 mRNA:F=15.364,P =0.000;VEGF蛋白:F=8.150,P=0.003,GLUT1蛋白:F=17.109,P=0.000),其中转染HIF-2α后VEGF表达下调明显,转染HIF-1α后GLUT1表达下调明显.转染HIF-1α后PKM2在mRNA(0.611±0.036)及蛋白(0.351 ±0.047)表达水平较空载体组(1.037±0.197、0.731±0.057)及对照组(1.000 ±0.000、0.737 ±0.043)均下降,差异均有统计学意义(F=12.480,P=0.007;F=60.403,P=0.000).转染HIF-2α后PKM2 mRNA (0.793±0.067)表达下降,差异均有统计学意义(F=12.480,P =0.007),蛋白无明显变化(0.675 ±0.030,F=1.211,P=0.373);而转染HIF-1β(mRNA:0.980 ±0.115,蛋白:0.641 ±0.076)后PKM2无明显下降(F=0.144,P =0.869;F=2.404,P =0.171).结论 研究结果提示HIF-1α、HIF-2α和HIF-1β均参与调控GLUT1、及VEGF的表达,HIF-1α参与调控PKM2,HIF-2α在转录水平可能调控PKM2的表达.
作者：曲颜丽；王海峰；唐勇 刊期： 2018年第04期
富勒烯(Fullerene)及其衍生物自被发现以来,以其独特的结构和无可比拟的理化性质,在生物医学研究中得到了广泛应用.富勒烯的生物学特性主要体现在对自由基的吸附清除作用和强抗氧化性,被赞誉为“自由基海绵”.诸多研究结果表明,活性氧自由基(ROS)调节了细胞增殖、分化、凋亡等细胞功能.在骨科领域,ROS则与细胞成骨分化、骨性关节炎关节软骨退变、类风湿关节炎炎症的介导、骨坏死、骨质疏松、椎间盘退变等疾病发生机制密切相关.富勒烯及其衍生物通过影响ROS水平,间接达到不同的生物学目的.现从生理和疾病产生的机制入手,就富勒烯C60及其衍生物在骨组织干细胞工程、非化脓性关节炎、骨质破坏、椎间盘退变及其诱发腰痛等方面的研究进展进行综述.
作者：马宏道；刘宏建；杨新林；金莉；崔全军；尚国伟 刊期： 2018年第04期
目的 观察血小板凝血酶蛋白1 (THBS1)表达下调对肺腺癌A549细胞的细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期的影响.方法 采用Western blot法检测肺腺癌细胞株A549、H1299、H358、H1975、PC9、PG49及Calu3中THBS1蛋白的表达水平,脂质体将THBS1小干扰RNA(siRNA)和对照siRNA分别转染至THBS1蛋白表达水平高的A549细胞,Western blot检验转染THBS1 siRNA组、对照组和未转染组细胞中THBS1蛋白的表达,然后采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测各组细胞的增殖,采用流式细胞术分析各组细胞的细胞凋亡及细胞周期分布.结果 不同肺腺癌细胞株中THBS1蛋白的表达水平不同,其中A549细胞(1.120±0.087)表达高(F=358.087,P=0.000).与未转染组A549细胞和对照组比较:转染THBS1 siRNA组中A549细胞中THBS1蛋白表达量(0.053±0.023)显著降低(P =0.000),细胞增殖能力减弱(P=0.000),细胞的凋亡率[转染THBS1siRNA组早期、中晚期及总凋亡率分别为(17.00±1.33)％、(3.70±0.56)％和(20.71±0.78)％升高(F值分别为115.899、14.418和167.329,P值分别为0.000、0.005和0.000],G0/G1期细胞百分比(68.43±2.26)％显著升高(F =46.521,P=0.000),S期细胞百分比(22.33±2.15)％降低(F=16.621,P=0.004),G2/M期细胞百分比(9.23±2.35)％降低(F=9.282,P=0.015),以上差异均有统计学意义.结论 沉默THBS1基因,降低肺腺癌A549细胞中THBS1蛋白表达可以减弱细胞的增殖能力,促进细胞凋亡并抑制细胞周期进程.
作者：高献争；左士宇；王晓慧；刁长英；李晟磊 刊期： 2018年第04期
目的 大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在铁蓄积环境下培养,观察细胞增殖指标和成骨方向分化的影响.方法 无菌条件下取正常SD 4周龄雌性大鼠股骨髓腔细胞,经分离纯化后传代培养,并经流式细胞仪鉴定成功后,体外扩增后接种,由不同浓度枸櫞酸铁铵(FAC) (50、100、200 μmol/L)及成骨诱导培养基共同培养,以不加FAC为空白对照组,在第4、7、10、14天收集细胞,采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR),分别检测成骨细胞分化关键基因:成骨相关转录因子2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨桥蛋白(OPN)表达;在第14天茜素红染色并半定量检测钙结节形成情况;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测不同浓度FAC对BMSCs增殖的影响.结果 随着铁剂浓度的增加,大鼠BMSCs的增殖能力逐渐降低;BMSCs经成骨诱导14 d后,在铁剂影响下,形成的钙结节较空白对照组明显减少,但铁剂干预各组间无明显差异,半定量结果亦显示相同结果(对照组:2.357±0.160、50 μmol/L组:0.308±0.029、100 μmol/L组:0.281±0.031、200 μmol/L组:0.224±0.017,P=0.000);不同浓度的铁剂对BMSCs成骨分化的各个阶段基因都有不同程度的影响.在成骨早期,Runx2的表达在对照组、100 μmol/L和200μmol/L铁剂干预组有明显差异(对照组:1.000±0.229、100 μmol/L组:0.198±0.044、200 μmol/L组:0.149±0.009,P=0.001),且与浓度存在一致相关性;在成骨中期,不同浓度铁剂对ALP的表达都具有明显抑制(对照组:0.980±0.063、50 μmol/L组:0.018±0.001、100 μmol/L组:0.014±0.002、200 μmol/L组:0.008±0.001,P=0.001);在成骨晚期阶段,不同浓度铁剂较对照组对OPN有明显抑制表达作用(对照组:0.999±0.001、50 μmol/L组:0.170 ±0.072、100 umol/L组:0.142±0.008、200 μmol/L组:0.117 ±0.028,P =0.003).结论 铁蓄积培养环境可明显抑制BMSCs的增殖,同时抑制其向成骨细胞方向的分化,且有剂量依赖性.
作者：俞晨；杨帆；李健；陈斌；袁晔；高焱；李勇；费蓓蓓；徐又佳；彭笳宸 刊期： 2018年第04期
目的 探讨转录延伸样因子7(TCEAL7)对低分化人胃癌细胞株BGC823侵袭、迁移的影响及其机制.方法 应用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法检测TCELA7 mRNA和蛋白在BGC823和正常胃黏膜细胞株GES-1中的表达;构建TCEAL7真核表达载体GFP-TCEAL7并转染BGC823细胞48 h,检测转染效果;噻唑蓝(MTT)法检测GFP-TCEAL7转染对BGC823细胞活性的影响;划痕实验、Transwell小室实验检测细胞侵袭、迁移;应用Real-time PCR和Western blot法检测转染GFP-TCEAL7转染对BGC823细胞侵袭、迁移基因表达水平的影响.结果 Real-time PCR和Western blot法显示,BGC823的TCEAL7表达(mRNA:0.280±0.048,蛋白:0.181±0.038)明显低于GES-1(mRNA:0.474±0.062,蛋白:0.346±0.057;t=-6.061,P=0.000;t=-5.900,P=0.000).GFP-TCEAL7转染后胃癌BGC823细胞TCEAL7的mRNA及蛋白表达(1.886±0.326、1.007±0.262)比对照组(0.302±0.053、0.172±0.030)显著上调(t=11.748,P =0.000:t=7.756,P=0.000).MTT结果显示,转染了GFP-TCEAL7的BGC823细胞活性(0.672±0.083)比对照组(1.242±0.215)显著减弱(t=-6.058,P =0.000).划痕实验、Transwell小室实验显示转染了GFP-TCEAL7的BGC823细胞迁移能力[转染组(53.945 ±9.952)％,对照组(81.017±7.208)％]和侵袭能力(转染组76.333±12.420,对照组121.167±11.771)均明显降低(t=-5.396,P =0.000;t=-6.418,P=0.000).Real-time PCR和Western blot法显示转染GFP-TCEAL7的BGC823细胞基质金属蛋白酶(MMP)-7 、MMP-9的mRNA和蛋白表达水平下降,组织基质金属蛋白酶抑制剂-1 (TIMP1)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达明显增高.结论 过表达TCEAL7可抑制BGC823细胞的侵袭、迁移.
作者：梁巍；耿玮；范亚男；叶智斌；高明；张立晓 刊期： 2018年第04期
前梯度蛋白2 (AGR2)属于蛋白二硫键异构酶家族[1],自1998年被发现以来,大量研究结果显示其在乳腺癌、胰腺癌、胃癌等肿瘤中呈高表达,并且通过调控细胞周期相关蛋白的折叠、成熟和分泌过程,在恶性肿瘤的生长过程中扮演重要的角色[2].本研究旨在观察AGR2与血管内皮生长因子C(VEGF-C)在前列腺癌组织中的表达,探讨其与临床资料的关系.
作者：时景伟；陈欢；崔蕊；张华；高锋；孔庆阔；晋学飞 刊期： 2018年第04期
目的 探讨中低位直肠癌术后预防性肠造口不能回纳的危险因素.方法 分析我院315例中低位直肠癌住院病例.x2检验分析造口类型与临床病理变量之间的关系.用Kaplan-Meier生存曲线分析永久性造口的预测因素.用Cox比例风险回归法对危险因素进行评估.结果 在315例患者中,127例行预防性造口,其中116例行末端回肠袢式造口,11例行结肠造口.其中94例回肠造口术后予回纳,造口到回纳间隔时间的中位值为6.3个月;3例造口关闭后重新造口,25例患者回肠预防性造口成为永久性造口.随访2年,回肠造口不可回纳的累计发生率为14％.单因素分析显示,浸润深度、淋巴结转移、远处转移、括约肌间切除、吻合口手工缝合和术前放化疗与永久性造口相关,而多因素分析显示远处转移、浸润深度、术前放化疗是预防性肠造口不能回纳的危险因素.结论 直肠癌远处转移或局部复发是影响造口回纳的重要因素,而肿瘤距肛门缘的距离、淋巴结转移的数量、吻合的方式均对造口回纳影响较小.
作者：王庆涛；甄劲雄；黄海洋 刊期： 2018年第04期
目的 观察膜联蛋白A9(ANXA9)在人结肠癌细胞株SW620增殖中发挥的作用,并探讨其机制.方法 实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法检测人结肠癌细胞株HT29、SW620、SW480、LoVo、SW1116中ANXA9的表达;应用40 nmol/L的ANXA9-小干扰RNA(siRNA)转染ANXA9表达强的SW620细胞株,抑制内源性ANXA9的表达;细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测转染对SW620细胞活性的影响;流式细胞术(FCM)检测转染ANXA9-siRNA对SW620细胞周期的影响;Real-time PCR和Western blot法检测增殖相关基因增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(Cyclin)D、Cyclin E、p21、p16的表达.结果 人结肠癌细胞株HT29、SW620、SW480、LoVo、SW1116中ANXA9 mRNA表达强度分别为0.027±0.004、0.041±0.005、0.028±0.003、0.033±0.003、0.025±0.005;ANXA9蛋白表达强度分别为0.287±0.076、1.246±0.103、0.326±0.040、0.387±0.097、0.295±0.064,其中SW620细胞ANXA9的mRNA和蛋白表达强(F=8.212,P=0.003;F=81.728,P=0.000).转染组、阴性对照组、空白组的ANXA9mRNA和蛋白的表达水平分别为0.209±0.016、0.317±0.104,0.957±0.070、0.647±0.155,1.031±0.171、0.727±0.145.转染后转染组的细胞ANXA9的mRNA和蛋白均明显低于对照组及空白组(F=54.072,P=0.000;F=7.601,P=0.023).CCK8结果显示,转染组、阴性对照组、空白组的细胞活性24h分别为0.605±0.024、0.612±0.022、0.628 ±0.027;48 h分别为0.810±0.049、1.196±0.118、1.308±0.070;72 h分别为1.145±0.070、1.531±0.062、1.454±0.081.转染组的细胞活性明显低于对照组及空白组(F =38.742,P=0.000;F=32.56,P=0.000).G0/G1、G2/M、S期的细胞比例在转染组为(66.870±3.850)％、(15.060±2.480)％、(18.080± 1.420)％;阴性对照组为(50.070±3.370)％、(32.520±2.500)％、(17.410±0.920)％;空白组为(48.740±2.170)％、(32.390±1.820)％、(19.210±0.390)％.转染组细胞的G0/G1期比例升高(F=29.752,P=0.001)、G2/M期的比例降低(F=57.860,P=0.000),S期细胞的比例无明显变化(F=1.568,P=0.284).转染组细胞Cyclin D1、Cyclin E1的mRNA和蛋白表达明显降低[mRNA:F=462.821、5.512,P=0.000、0.044;蛋白:F=15.148、8.300,P=0.005、0.019)],而p21的mRNA和蛋白表达明显增高[mRNA:F=6.472,P=0.032;蛋白:F=21.230,P=0.002].结论 ANXA9可能通过Cyclin D1、Cyclin E1、p21表达而参与了结肠癌细胞株SW620的增殖过程.
作者：卞红磊；于溯洋；张盛君；高鑫 刊期： 2018年第04期
胶质瘤相关癌基因同源蛋白2(GLI2)是Hedgehog(Hh)信号通路中重要的转录因子.本研究旨在观察GLI2在膀胱癌组织中的表达,探讨其作用机制.一、材料与方法1.材料与方法:77例病理检查证实为膀胱尿路上皮癌的患者.人膀胱癌细胞株T24购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心.我们利用小干扰RNA(siRNA)下调GLI2的表达,并进行进一步的细胞实验.2.统计学方法:计量资料和计数资料分别采用t检验和x2检验.使用Stata 12.0统计软件分析,以P＜0.05为差异有统计学意义.
作者：孙立江；徐升；官丰菊；李斌；董大海；骆磊；张桂铭 刊期： 2018年第04期
目的 探讨仙龙颗粒对于血清中肝素结合性表皮生长因子(HBEGF)、高尔基磷酸化蛋白2(GOLPH2)分子表达的调控效果及仙龙颗粒的抗癌机制.方法 选择250只SD大鼠予以致癌剂构建肝癌大鼠模型,将其平均分成5组各50只,分别为阳性对照组[静脉注射顺铂(DDP),60 mg/m2]、低剂量组(喂养仙龙颗粒水溶液,1.0 g/ml)、中剂量组(喂养仙龙颗粒水溶液,2.0g/ml)、高剂量组(喂养仙龙颗粒水溶液,6.0 g/ml)、阴性对照组(喂养蒸馏水),另取50只健康SD大鼠作空白组.对各组的大鼠进行肝脏肿瘤切除术,在手术前1周、手术后第6、12、24、36周分别按各组要求给药并每组处死1只SD大鼠作肝脏病理检查,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测剩余生存大鼠血液中的HBEGF、GOLPH2水平,统计HBEGF、GOLPH2阳性表达率.结果 死亡率方面,低剂量组术前1周为4.0％,术后36周为37.0％;中剂量组术前1周为2.0％,术后36周为2.4％;高剂量组术前1周为0.0％,术后36周为14.0％;GOLPH2阳性率,低剂量组术前1周为62.0％,术后36周为22.2％ (x2=9.577,P=0.002);中剂量组术前1周为64.0％,术后36周为7.1％(x2=28.941,P=0.000);高剂量组术前1周为20.0％,术后36周为38.2％(x2=7.092,P=0.008);HBEGF阳性率,低剂量组术前1周为58.0％,术后36周为22.0％(x2=7.666,P=0.006);中剂量组术前1周为62.0％,术后36周为16.7％ (x2=17.525,P=0.000);高剂量组术前1周为56.0％,术后36周为29.4％ (x2 =4.752,P=0.029).不同剂量的仙龙颗粒均能显著降低大鼠的死亡率、血清中HBEGF、GOLPH2的阳性率,但低剂量组、高剂量组的效果不及中剂量组.结论 仙龙颗粒可下调肝癌大鼠血清中HBEGF、GOLPH2的表达,从而抑制癌细胞增殖及促进其凋亡,达到抗癌、延长存活时间的效果.
作者：陈卓；李明晶；郭环宇；景年财 刊期： 2018年第04期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
