高志强；汪俊峰；陈德华；马雪松；唐哲
目的 观察小干扰RNA(siRNA)特异性沉默人胃癌BGC-823细胞中缺氧诱导因子(HIF-1α、HIF-2α、HIF-1β)后葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达,探讨HIFs对胃癌细胞内GLUT1 、PKM2及VEGF的调控差异.方法 用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及Western blot法检测转染HIFs及Control小干扰RNA(siRNA)后细胞内GLUT1 、PKM2及VEGF的表达.结果 RNA干扰技术沉默HIF-1α后其mRNA、蛋白表达量分别为0.372 ±0.097、0.351 ±0.041,均低于空载体组(0.980 ±0.115、0.520 ±0.030)及空白对照组(1.000 ±0.000、0.478 ±0.062),差异均有统计学意义(F=50.358,P=0.000;F=10.931,P =0.010);RNA干扰技术沉默HIF-2α后其mRNA、蛋白表达量分别为0.391 ±0.091、0.293±0.031,均低于空载体组(1.037±0.090、0.427±0.026)及空白对照组(1.000±0.000、0.430±0.056),差异均有统计学意义(F=72.416,P =0.000;F =9.016,P =0.016);RNA干扰技术沉默HIF-1β后其mRNA、蛋白表达量分别为0.383 ±0.091、0.323 ±0.038,均低于空载体组(0.987 ±0.100、0.445 ±0.059)及空白对照组(1.000 ±0.000、0.457 ±0.040),差异均有统计学意义(F =78.273,P =0.000;F =7.636,P =0.022).转染HIFs(HIF-1α 、HIF-1β 、HIF-2α) siRNA后VEGF及GLUT1在mRNA(分别为0.721 ±0.067、0.833 ±0.059、0.493 ±0.067;0.711 ±0.057、0.826±0.054、0.793±0.068)及蛋白(分别为0.263±0.072、0.303±0.042、0.198±0.057;0.391±0.049、0.451 ±0.054、0.473±0.086),表达水平较空载组(mRNA:1.046±0.094、1.039±0.092;蛋白:0.391 ±0.064、0.690 ±0.066)及对照组(mRNA:1.000±0.000、1.000±0.000;蛋白:0.438±0.055、0.707±0.040)下降,差异均有统计学意义(VEGF mRNA:F=35.232,P=0.000;GLUT1 mRNA:F=15.364,P =0.000;VEGF蛋白:F=8.150,P=0.003,GLUT1蛋白:F=17.109,P=0.000),其中转染HIF-2α后VEGF表达下调明显,转染HIF-1α后GLUT1表达下调明显.转染HIF-1α后PKM2在mRNA(0.611±0.036)及蛋白(0.351 ±0.047)表达水平较空载体组(1.037±0.197、0.731±0.057)及对照组(1.000 ±0.000、0.737 ±0.043)均下降,差异均有统计学意义(F=12.480,P=0.007;F=60.403,P=0.000).转染HIF-2α后PKM2 mRNA (0.793±0.067)表达下降,差异均有统计学意义(F=12.480,P =0.007),蛋白无明显变化(0.675 ±0.030,F=1.211,P=0.373);而转染HIF-1β(mRNA:0.980 ±0.115,蛋白:0.641 ±0.076)后PKM2无明显下降(F=0.144,P =0.869;F=2.404,P =0.171).结论 研究结果提示HIF-1α、HIF-2α和HIF-1β均参与调控GLUT1、及VEGF的表达,HIF-1α参与调控PKM2,HIF-2α在转录水平可能调控PKM2的表达.
作者：曲颜丽；王海峰；唐勇 刊期： 2018年第04期
目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-203通过SNAI2对胃癌细胞SGC7901侵袭和凋亡的影响.方法 (1)脂质体转染将miR-203 mimics转入胃癌细胞SGC7901,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测转染效果,Transwell实验和流式细胞术检测细胞侵袭和凋亡.(2)Real-timePCR和Western blot检测转染miR-203 mimics后在胃癌细胞中SNAI2的表达水平.(3)小干扰RNA(siRNA)干扰胃癌细胞SGC7901中SNAI2的表达水平,Western blot验证敲减效果,并检测敲减SNAI2后细胞侵袭和凋亡.(4)转染miR-203 mimics后,脂质体转染SNAI2表达质粒,检测细胞侵袭和凋亡情况.结果 (1)胃癌细胞SGC7901转染miR-203 mimics后,miR-203的表达水平为6.34±0.73,对照组的表达水平为1.26±0.21,两组比较差异有统计学意义(t=1.528,P=0.024).(2)转染miR-203 mimics组穿透滤膜的细胞数明显少于对照组穿膜细胞数,两组比较差异有统计学意义(=1.781,P=0.016).(3)流式细胞术结果显示,对照组细胞凋亡率为(7.27±1.37)％,转染miR-203 mimics组胃癌细胞SGC7901的凋亡明显增加,为(38.62±6.27)％,两组比较差异有统计学意义(x2 =7.373,P =0.009).(4)转染SNAI2后,miR-203对胃癌细胞SGC7901的促凋亡作用被反转,转染SNAI2组的细胞凋亡率降低为(14.03±3.60)％,和miR-203 mimics组比较,差异有统计学意义(x2 =4.162,P =0.036).(5)与对照组比较,siRNA抑制SNAI2后,SGC7901细胞的凋亡明显增加,为(47.92±7.14)％,两组比较差异有统计学意义(x2=10.373,P=0.004).结论 miR-203能够通过靶向调控SNAI2而降低胃癌细胞SGC7901的侵袭能力并促进其凋亡.
作者：张伟强；杨文革；丁立腾 刊期： 2018年第04期
目的 探讨红景天苷对人骨肉瘤143B细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制.方法 杜尔伯科改良伊格尔培养基(DMEM,含10％血清及1％双抗)培养骨肉瘤143B细胞,实验分组为对照组、30、60 μmol/L红景天苷处理组.噻唑蓝(MTT)实验检测各组24、36、72 h的细胞增殖活性;处理24 h后,采用Transwell法检测3组细胞的侵袭能力;处理24 h后采用划痕实验检测各组细胞迁移能力,计算细胞迁移率.3组细胞在处理24 h后,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的mRNA相对表达水平变化,Western blot实验检测各组细胞MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平.透射电镜检测处理24 h后的细胞自噬体.结果 处理24 h后,60 μmol/L组(0.038±0.002)和30μmol/L组(0.054 ±0.002)143B细胞吸光度值低于对照组(0.074±0.004,t2.659,P=0.016;t=1.993,P=0.039).处理48、72 h后,与对照组比较,浓度为30、60 μmol/L的红景天苷组143B细胞吸光度值同样分别低于对照组,呈剂量依赖和时间依赖性.60 μmol/L[(48.7±8.2)个]和30 μmol/L[(76.8±12.8)个]红景天苷组143B细胞跨膜数目分别少于对照组[(94.5±11.9)个,t=8.056,P=0.000;t=2.472,P=0.038].60 μmol/L[(52.9±6.8)％]和30 μmol/L[(82.6±3.7)％]红景天苷组143B细胞迁移率分别低于对照组[(98.7±0.3)％,t=12.576,P=0.000;t2 =9.794,P=0.000].60 μmol/L和30 μmol/L红景天苷处理组MMP-2、MMP-9的蛋白和mRNA相对表达量分别低于对照组.60 μmol/L红景天苷实验组自噬体形成数目[(2.6±0.5)个]多于对照组[(1.3±0.4)个,t=3.517,P=0.025].结论 红景天苷抑制了骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭,其机制可能与诱导自噬及抑制MMP家族蛋白表达相关.
作者：赵迎春；陶海；郭卫春 刊期： 2018年第04期
目的 观察大黄素对肺动脉平滑肌细胞的增殖和迁移抑制作用.方法 采用原代人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC),常规培养、建立缺氧细胞模型,采用不同浓度(0、5、10、15、20 μmol/L)大黄素分别处理于缺氧环境下培养12、24、48、72 h后,噻唑蓝(MTT)和Transwell侵袭实验检测缺氧肺动脉细胞增殖及迁移.用Westemblot法测定大黄素对缺氧HPASMC p38蛋白的表达.结果 大黄素对缺氧HPASMC的增殖及迁移呈浓度及时间依赖性抑制.浓度为20 μmol/L时效果显著,其12、24、48、72 h抑制率依次为(53.46±1.81)％、(61.32±2.69)％、(76.34±3.05)％、(84.43±3.18)％.Transwell实验组(5、10、15、20μmol/L)大黄素干预后细胞迁移数依次为(68.90±8.49)、(46.10±5.63)、(27.56±5.38)、(12.61±3.68)个与对照组[(88.59±8.56)个]比较明显减少.与对照组比较,实验组p38蛋白的表达均减少(P=0.001).结论 大黄素可明显抑制缺氧环境下人肺动脉平滑肌细胞的增殖及迁移,并下调其p38蛋白表达水平.
作者：李海燕；李鲲；冯旭；王康；覃家锦 刊期： 2018年第04期
胶质瘤相关癌基因同源蛋白2(GLI2)是Hedgehog(Hh)信号通路中重要的转录因子.本研究旨在观察GLI2在膀胱癌组织中的表达,探讨其作用机制.一、材料与方法1.材料与方法:77例病理检查证实为膀胱尿路上皮癌的患者.人膀胱癌细胞株T24购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心.我们利用小干扰RNA(siRNA)下调GLI2的表达,并进行进一步的细胞实验.2.统计学方法:计量资料和计数资料分别采用t检验和x2检验.使用Stata 12.0统计软件分析,以P＜0.05为差异有统计学意义.
作者：孙立江；徐升；官丰菊；李斌；董大海；骆磊；张桂铭 刊期： 2018年第04期
目的 探讨塞来昔布(celecoxib)对肺腺癌手术应激所致非小细胞肺癌细胞A549的抗失巢凋亡的影响及其分子作用机制.方法 采用多聚2-羟乙基甲基丙烯酸酯(poly-HEMA)覆盖细胞培养板培养A549细胞,分别设立对照组、前列腺素E2(PGE2)处理组、PGE2联合塞来昔布处理组,处理48 h后应用流式细胞术检测各组中细胞发生失巢凋亡情况.采用Western blot方法检测各组细胞的丝裂原细胞外激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)通路和磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路激活以及下游凋亡相关蛋白Mcl-1和Bim的表达.应用BALB/c小鼠开胸手术模拟手术应激,进行尾静脉注射A549细胞建立肺转移动物模型.将小鼠分成对照组、手术组和手术+塞来昔布组(完全随机化分组),4周后处死小鼠并观察肺转移,同时采用免疫组织化学方法检测转移产生的肺结节中Mcl-1和Bim的表达.结果 流式细胞术检测结果表明poly-HEMA培养的A549细胞凋亡率为(41.0±2.4)％,而PGE2处理组的凋亡率为(22.8±3.2)％,与对照组比较差异有统计学意义(P=0.012),PGE2联合塞来昔布处理组的凋亡率为(36.6±2.4)％与PGE2组比较,差异有统计学意义(P=0.034).Westem blot结果显示,PGE2能激活MEK/ERK1/2通路,上调ERK1/2的磷酸化水平,并降低Bim的表达,而塞来昔布能明显抑制PGE2的作用.另外PGE2对PI3K/Akt通路无明显作用,但塞来昔布可以抑制该通路,并下调Akt的磷酸化水平,抑制Mcl-1的表达.体内实验中,手术组的肺结节数明显多于对照组,而塞来昔布组肺结节数与手术组比较明显减少,免疫组织化学检测肺结节中的Mcl-1和Bim蛋白的表达水平,结果与体外实验一致.结论 PGE2是手术应激中产生的主要细胞因子,PGE2具有明显的体外抗失巢凋亡作用,且塞来昔布在体内外皆能通过抑制MEK/ERK1/2通路和PI3K/Akt通路来升高促凋亡蛋白Bim的表达和降低抗凋亡蛋白Mcl-1的表达,从而达到促进失巢凋亡,减少肺癌细胞转移的作用.
作者：王雅静；施润；游庆军；王安彭；夏文杰；许林；张帅；蒋峰 刊期： 2018年第04期
目的 以转移性前列腺癌患者为研究对象,探讨基于循环肿瘤细胞(CTCs)的前列腺癌相关基因标志物,用于转移性前列腺癌的诊断.方法 通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术对人前列腺癌细胞(LNCap)中人激肽释放酶相关酶2(KLK2)、人激肽释放酶相关酶3(KLK3)、叉头框蛋白A1(FOXA1)、粒状头样转录因子2(GRHL2)及同源盒B13 (HOXB13)5个基因的表达进行检测,建立多基因表达的联合检测的方法.采集30例转移性前列腺癌患者和20例健康志愿者的血液样本,利用血液样本和前列腺癌细胞对检测方法的一致性、重复性、线性和灵敏度方面进行了评估.通过比较患者血液样本中CTCs计数和基因表达结果,确定前列腺癌相关标志基因表达水平对于患者预后的意义.结果 该联合检测方法中各基因表达水平与单基因表达水平具有一致性;5个基因表达量在LNCap RNA不同稀释浓度(1 pg～1 μg)的对数范围内呈现较明显的线性关系:KLK2(0.995)、KLK3 (1.000)、FOXA1 (0.992)、GRHL2 (0.999)、HOXB13 (1.000);各基因检测浓度范围分别是KLK2(5 pg ～1 μg)、KLK3(1 pg～1 μg)、FOXA1(10 pg ～1 μg)、GRHL2(100 pg～1 μg)、HOXB13(100 pg ～1 μg);患者血液样本中CTCs计数和基因表达结果对比显示两者具有相关性,即CTCs计数越高的患者,其基因表达阳性率也越高.结论 KLK2、KLK3、FOXA1、GRHL2及HOXB13 5个基因表达水平的联合检测方法具有操作更简单便捷的技术优势和较好的准确性和灵敏度.
作者：张靖；宁松毅；何明芳；谢婧婧；胡建鹏；崔飞伦 刊期： 2018年第04期
目的 观察单因素抑制Hes1基因的表达对人神经干细胞诱导分化为γ-氨基丁酸(GABA)能神经元分化率的影响.方法 对人神经干细胞进行原代培养,传代(神经干细胞5～7d传代1次).取传至第2代的神经干细胞进行神经元巢蛋白免疫荧光鉴定,证明其为神经干细胞后进行GABA能神经元的诱导分化.采用完全随机分组原则将第二代神经干细胞分为对照组和实验组.对照组为含胎牛血清的普通诱导分化液,实验组除加入抑制Hes1基因的寡核苷酸链外,其余成分同对照组相同.待诱导分化结束后分别对实验组及对照组进行GABA能神经元免疫荧光染色鉴定.结果 诱导分化后第6天,约半数以上细胞开始分化并出现汇聚现象,重新消化接种,第14天镜下可见90％ ～ 95％细胞已贴壁完成分化.进行GABA能神经元免疫荧光染色鉴定,随机选取10个视野,实验组每个视野下在100个细胞中可见55 ～ 70个GABA阳性细胞,分化率可达(64.0±0.6)％,而对照组在同样情况下仅可见15 ～ 20个GABA阳性细胞,分化率仅为(16.6±0.6)％,两者比较差异有统计学意义.结论 抑制Hes1基因的表达可以显著提高入神经干细胞诱导分化为GABA能神经元的分化率.
作者：王伟；赵全军；刘爽；崔绍杰；史铁钧；王涛；王培新 刊期： 2018年第04期
目的 观察肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)联合顺铂对荷PC-9肺癌小鼠肿瘤生长的影响.方法 将60只荷PC-9肺癌肿瘤的裸鼠随机分为对照组、TRAIL组、顺铂组和联合治疗组,每组15只,TRAIL组经腹腔注射TRAIL 10 mg/kg,顺铂组经腹腔注射顺铂1.5 mg/kg,联合治疗组经腹腔分别注射TRAIL 10 mg/kg和顺铂1.5 mg/kg,对照组经腹腔注射等体积的生理盐水.所有小鼠每隔1d给药1次,连续治疗30d,测定每组小鼠肿瘤的生长情况和体重的变化.并采用原位缺口末端标记法(TUNEL)染色法分析4组小鼠肿瘤组织中细胞的凋亡水平.采用Western blot分析4组小鼠肿瘤组织细胞中p53、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3等凋亡相关蛋白的表达水平.结果 与对照组比较,TRAIL组、顺铂组和联合治疗组小鼠肿瘤生长受到显著抑制(P=0.030、0.026、0.009),而联合治疗组小鼠肿瘤生长速度明显缓于TRAIL组和顺铂组(P=0.036、0.018).与对照组比较,顺铂组和联合治疗组小鼠体重明显下降(P=0.030、0.038),而TRAIL组小鼠体重变化差异无统计学意义(P =0.070).与对照组比较,TRAIL组、顺铂组和联合治疗组小鼠肿瘤组织中细胞凋亡比例明显增加(P=0.023、0.034、0.027).与顺铂组比较,TRAIL组和联合治疗组小鼠肿瘤组织细胞凋亡比例明显增加(P =0.028、0.013).Western blot结果显示与对照组比较,TRAIL组、顺铂组和联合治疗组p53和Caspase-3表达水平明显增加,而联合治疗组增加水平更加显著(P=0.018).结论 TRAIL联合顺铂能显著抑制荷PC-9小鼠肿瘤的生长,这一现象是通过促进肿瘤细胞凋亡相关基因表达,进而促进肿瘤细胞凋亡来实现的.
作者：张春敭；齐宇；吴恺；张岩；赵松 刊期： 2018年第04期
随着骨科手术中金属植入物使用的增多,术后伴有金属植入物的CT检查也逐渐增多,而CT扫描会产生严重的伪影,干扰临床诊疗.为了解决这一问题,近年来大量研究分别从工程学和医学角度提出不同的方法和理论来减少金属伪影.工程学方面主要包括改变CT机的型号与性能,如应用双能CT (DECT)、锥状束CT(CBCT)等代替传统的螺旋CT.医学方面主要有改变CT电子管电压、扫描范围(FOV)、扫描层厚等参数,应用CT后处理软件与算法(如O-MAR技术)等.本综述将从以上两个大的角度,详细阐述近年来国内外在CT金属去伪影方面相关研究的进展,并据此为骨科金属植入物CT去伪影扫描方法提供参考.
作者：张客松；韩青；单悦展；邹运；陈炳鹏；王金成 刊期： 2018年第04期
目的 探讨干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白2抗体(IFIT2)在人胃癌进展中的作用及机制.方法 通过使用RNA干扰(RNAi)技术构建IFIT2稳定下调表达的人胃癌细胞株SGC-7901及AGS,聚合酶链反应(PCR)和Western blot分别在RNA水平和蛋白水平验证两株细胞株LV-IFIT2-短发卡RNA(shRNA)组的IFIT2的表达水平,进一步研究IFIT2在人胃癌细胞株中的生物学功能.结果 Real-time PCR检测结果显示,SGC-7901以及AGS细胞系中LV-IFIT2-shRNA组IFIT2mRNA表达水平均显著低于LV-NC组(SGC-7901:0.426 ±0.140比1.000±0.157,P=0.004;AGS:0.232±0.090比1.000±0.194,P=0.003);蛋白质印迹检测结果显示,SGC-7901以及AGS细胞系中LV-IFIT2-shRNA组的IFH2的蛋白表达水平均显著低于LV-NC组(SGC-7901:0.344 ±0.041比1.000±0.062,P=0.002;AGS:0.091±0.001比1.000±0.106,P=0.000).对稳定转染LV-IFIT2-shRNA及LV-NC的人胃癌细胞系SGC-7901和AGS进行CCK-8增殖实验、划痕实验、Transwell实验和细胞周期测定.在培养的48、72 h shRNA组的吸光度值显著高于LV-NC组,提示下调IFIT2的表达可以显著抑制人胃癌细胞系SGC-7901和AGS的增殖能力(SGC-7901:48 h:0.348±0.031比0.276 ±0.026,P =0.013;72 h:0.523±0.042比0.411±0.027,P =0.004;AGS:48 h:0.454±0.034比0.362±0.038,P=0.011;72 h:0.696±0.053比0.553±0.030,P=0.003);划痕实验显示SGC-7901和AGS细胞IFIT2干扰组的迁移能力明显高于NC组的迁移能力,提示IFIT2表达的降低可明显增强SGC-7901和AGS细胞的迁移能力(SGC-7901:0.640±0.029比0.447±0.056,P=0.006;AGS:0.444±0.036比0.166±0.034,P=0.001);Transwell侵袭实验中,LV-IFIT2-shRNA组的结晶紫染色迁移细胞数明显多于LV-NC组,表明SGC-7901和AGS细胞下调IFIT2表达后的侵袭能力提高(SGC-7901:299.3±45.6比162.3 ±25.9,P=0.011;AGS:404.0±44.5比235.0±30.0,P =0.003);流式细胞术分析细胞周期显示,LV-IFIT2-shRNA组的S期细胞比例高于LV-NC组,提示人胃癌细胞系中IFIT2的敲除可显著影响细胞周期.结论 IFIT2表达降低可促进胃癌进展,并可预测患者的不良预后.
作者：翟文斯；陈陆俊；郑晓；胡文蔚；吴晨；王琦；卢斌峰；蒋敬庭 刊期： 2018年第04期
目的 观察胃癌细胞中缺氧对N-myc下游调节基因4(NDRG4)功能的影响.方法 建立胃癌细胞缺氧模型,Transwell和划痕实验分析缺氧对胃癌细胞转移潜能的作用,同时通过Western blot和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析缺氧诱导的NDRG4蛋白表达上调在缺氧促胃癌进展中的潜在功能.另外通过细胞增殖实验、克隆形成实验、Transwell和划痕实验分析常氧下NDRG4过表达对胃癌细胞恶性表型的作用.结果 缺氧诱导24h可明显增强胃癌细胞的转移潜能,BGC-823的侵袭细胞数由常氧下的(48.20±11.76)个上升至(174.20±9.04)个,而MGC-803侵袭细胞数也由常氧下的(28.75 ±2.50)个上升至(229.00±34.22)个,差异均有统计学意义(均P=0.000).划痕实验结果也表明,常氧下BGC-823和MGC-803细胞的划痕愈合率分别为(15.69±0.04)％和(11.90 ±0.04)％,而缺氧诱导后的BGC-823和MGC-803细胞的划痕愈合率分别为(25.00±0.02)％和(32.03±0.04)％,且差异均有统计学意义(P=0.025、0.006).此过程伴随NDRG4蛋白表达水平的上升,NDRG4在缺氧应激下的表达上调或参与了胃癌进展;然而常氧状态下NDRG4过表达却能显著抑制胃癌细胞增殖,降低其克隆形成能力,并能有效抑制其转移.结论 缺氧诱导上调NDRG4或在缺氧促胃癌进展过程中发挥积极作用,不同氧浓度状态下NDRG4功能变化或与缺氧刺激下NDRG4异常积聚及功能性蛋白修饰相关.
作者：洪莲莲；吴盈利；陈香浏；雷兰；凌志强 刊期： 2018年第04期
目的 探讨中低位直肠癌术后预防性肠造口不能回纳的危险因素.方法 分析我院315例中低位直肠癌住院病例.x2检验分析造口类型与临床病理变量之间的关系.用Kaplan-Meier生存曲线分析永久性造口的预测因素.用Cox比例风险回归法对危险因素进行评估.结果 在315例患者中,127例行预防性造口,其中116例行末端回肠袢式造口,11例行结肠造口.其中94例回肠造口术后予回纳,造口到回纳间隔时间的中位值为6.3个月;3例造口关闭后重新造口,25例患者回肠预防性造口成为永久性造口.随访2年,回肠造口不可回纳的累计发生率为14％.单因素分析显示,浸润深度、淋巴结转移、远处转移、括约肌间切除、吻合口手工缝合和术前放化疗与永久性造口相关,而多因素分析显示远处转移、浸润深度、术前放化疗是预防性肠造口不能回纳的危险因素.结论 直肠癌远处转移或局部复发是影响造口回纳的重要因素,而肿瘤距肛门缘的距离、淋巴结转移的数量、吻合的方式均对造口回纳影响较小.
作者：王庆涛；甄劲雄；黄海洋 刊期： 2018年第04期
目的 观察乳腺癌耐药蛋白(BCRP)在肝癌组织的表达与临床病理特征的关系及其表达的抑制对肝癌细胞增殖凋亡的影响.方法 通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝癌组织中BCRP表达,并分析其与临床病理特征的关系;通过LipofectamineTM2000脂质体介导法将BCRP-小干扰RNA(siRNA)转染人肝癌SMMC-7721细胞,通过噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪及Western blot分别检测转染48 h后细胞的增殖、凋亡及BCRP、细胞核增殖抗原(Ki-67)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、Notch1、Hes1的蛋白表达.结果 BCRP在肝癌组织中的表达与肝癌患者的性别、年龄、肿瘤大小无明显相关,与病理分级、临床分期及肿瘤是否发生转移明显相关;BCRP-siRNA转染后SMMC-7721细胞中BCRP在转录及翻译水平的表达均受到抑制;BCRP-siRNA组细胞增殖(0.287±0.022)及Ki-67(0.142±0.018) 、Notch1 (0.162±0.021)、Hes1 (0.111±0.015)蛋白表达均显著低于Control组(0.411±0.026、0.258±0.026、0.462 ±0.032、0.241±0.023;P增殖=0.001,PKi-67 =0.001,PNotch1=0.000,PHes1=0.001),细胞凋亡率[(14.63±0.88)％]及bax蛋白表达(0.324±0.034)均显著高于Control组[(1.32±0.15)％,0.106±0.012;P凋亡=0.000,Pbax=0.000].结论 肝癌中BCRP的表达与病理分级、临床分期及肿瘤是否发生转移相关,抑制其表达可降低肝癌细胞的增殖及诱导细胞的凋亡,其机制与调节Ki-67 、bax表达及Notch1信号通路有关.
作者：高志强；汪俊峰；陈德华；马雪松；唐哲 刊期： 2018年第04期
前梯度蛋白2 (AGR2)属于蛋白二硫键异构酶家族[1],自1998年被发现以来,大量研究结果显示其在乳腺癌、胰腺癌、胃癌等肿瘤中呈高表达,并且通过调控细胞周期相关蛋白的折叠、成熟和分泌过程,在恶性肿瘤的生长过程中扮演重要的角色[2].本研究旨在观察AGR2与血管内皮生长因子C(VEGF-C)在前列腺癌组织中的表达,探讨其与临床资料的关系.
作者：时景伟；陈欢；崔蕊；张华；高锋；孔庆阔；晋学飞 刊期： 2018年第04期
目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)影响肺腺癌细胞侵袭迁移,以及对上皮-间充质转化(EMT)和自噬的影响.方法 Transwell检测体外TGF-β1对肺腺癌细胞A549和SK-LU-1迁移与侵袭能力的影响;免疫荧光检测TGF-β1引起的A549细胞自噬水平变化;Western blot实验检测在A549细胞中TGF-β1对EMT标志分子及自噬调控基因表达的影响.结果 在A549和SK-LU-1细胞中,sh-TGF-β1干扰效率约为60％,GV358-TGF-β1过表达组过表达效率均在4倍以上;迁移实验结果显示,A549细胞中,随机干扰对照组(shNC组)迁移率为1.02±0.06,TGF-β1过表达组为5.14±0.43(t=16.440,P=0.004);SK-LU-1细胞中,shNC组迁移率为1.04±0.08,TGF-β1过表达组为4.92±0.48(t=13.810,P=0.005),差异均有统计学意义;侵袭实验结果显示,A549细胞中,随机干扰对照组(shNC组)侵袭率为0.96±0.07,TGF-β1过表达组为4.28 ±0.51(t=11.170,P =0.007);SK-LU-1细胞中,shNC组侵袭率为1.03±0.05,TGF-β1过表达组为4.11±0.36(t=10.410,P=0.009),差异均有统计学意义;免疫荧光实验结果可见,与对照组比较,TGF-β1过表达组点状分布的自噬小体数目明显增多(t=22.340,P=0.000),荧光强度显著增强;Westem blot实验结果显示,TGF-β1过表达组E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达量明显减少,波形蛋白(Vimentin)、Twist、Snail的表达显著增加;自噬相关蛋白Beclin1表达上调,磷酸化的雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)表达上调;而TGF-β1干扰组的结果则与过表达组相反.结论 在肺腺癌细胞中,TGF-β1阳性表达诱导的自噬和EMT可能与其增强肺腺癌细胞侵袭迁移能力相关.
作者：柳惠斌；郭骏；蒲艳；张萌萌；宋建忠；王强 刊期： 2018年第04期
骨水泥渗漏是经皮椎体成形术(PVP)中常见的并发症[1-2].实验已经证实采用小空腔技术能够降低骨水泥渗漏的发生[2].本研究旨在探讨新型活检钳及小空腔技术在椎体成形术中的临床应用.一、资料与方法1.一般资料:2017年1月至2018年1月,符合本研究纳入标准的椎体压缩性骨折患者46例,其中男19例,女27例,年龄(68.13±8.19)岁.T10 5例,T11 10例,T12 14例,L1 12例,L2 5例.采用随机数字表法进行随机分组:A组(n=23):行传统椎体成形术治疗椎体压缩骨折,B组(n=23):PVP中应用新型活检钳及小空腔技术治疗椎体压缩骨折.上海凯利泰公司生产的PVP部分手术器械.自行研发的新型活检钳:工作长度230 mm、大直径1.8mm、钳头大直径2 mm、齿长5 mm、槽深1.5 mm、张开角度45°.
作者：赵云；齐向北；李旭；高翔；王坤龙 刊期： 2018年第04期
随着肿瘤学、免疫学以及分子生物学等相关学科的迅速发展和交叉渗透,肿瘤免疫治疗的研究突飞猛进.免疫治疗成为继手术、放射治疗和化学治疗之后又一种重要的治疗胃肠道恶性肿瘤的手段.新型的免疫治疗技术得到迅速发展,为晚期胃肠道恶性肿瘤患者带来新的希望.化学治疗联合免疫治疗有望成为晚期胃肠道恶性肿瘤治疗的新模式.同时如何客观评价免疫治疗疗效也成为研究热点.
作者：陶凯雄；吴轲 刊期： 2018年第04期
目的 建立骨折模型,观察抑制表皮生长因子受体信号通路对大鼠股骨骨折愈合的作用.方法 选择80只雄性4周龄SD大鼠,建立股骨骨折模型,随机分为两组:实验组予以表皮生长因子受体信号通路抑制剂吉非替尼[100 mg/(kg·d)],对照组予以等剂量的甲基纤维素;术后7、14、21、28、42 d行X线检查并获股骨标本,运用Lane and Sandhu X线评分评价骨愈合情况,Image J软件测量骨痂直径大小;通过病理切片行固绿染色观察骨折愈合情况;显微CT(Micro-CT)检测及生物力学检测比较两组骨愈合的差异.结果 X线评分在骨折后第7天(t=2.234,P=0.031)、第14天(t =2.133,P=0.040)、第21天(t=2.869,P=0.008)实验组均优于对照组,骨痂大直径在第7天(t =2.874,P=0.006)、第14天(t=2.609,P=0.015)、第21天(t=2.256,P=0.033)实验组均小于对照组,第28 、42天差异无统计学意义;苏木素-伊红(HE)染色显示,第7、14、21天实验组骨痂组织特别是软骨痂大于对照组,实验组骨折愈合进程较对照组快;Micro-CT检测显示实验组BV(骨体积)骨折后第14天(t=3.317,P=0.016)、第21天(t=3.025,P=0.023)高于对照组,BV/TV(骨体积分数)第14天(t=2.967,P=0.025)、第21天(t=2.465,P=0.049)、第28天(t=3.607,P=0.011)高于对照组,Tb.N(骨小梁数量)第14天(t=3.436,P=0.014)、第21天(t=3.830,P=0.009)、第28天(t=2.872,P=0.028)高于对照组,Tb.Th(骨小梁厚度)第14天(t=3.137,P=0.020)、第21天(=2.607,P=0.040)、第28天(t=2.6932,P=0.036)高于对照组,TB.Sp(骨小梁间隔)第21天(t=2.488,P=0.047)高于对照组;生物力学检测示骨折后21 d大载荷(t=10.846,P =0.000)、刚度(t=3.868,P=0.018)优于对照组,28 d时大载荷(t=3.753,P=0.020)、42 d时破坏能量(t=2.927,P=0.043)大于对照组.结论 抑制表皮生长因子受体信号通路对大鼠股骨骨折愈合有促进作用.
作者：袁功武；兰生辉；刘曦明 刊期： 2018年第04期
目的 检测膜突蛋白(Moesin)和胸苷激酶1(TK1)在大肠癌组织中的表达水平,分析其与大肠癌患者临床病理特征的关系.方法 应用免疫组织化学法检测75例大肠癌组织和大肠癌癌旁组织中Moesin和TK1表达水平.结果 大肠癌组织中Moesin阳性表达率明显高于癌旁组织(68.00％比21.33％,t=33.043,P=0.000),Moesin表达水平与与大肠癌组织学分化程度、TNM分期和淋巴结转移明显相关(t=4.733,P=0.030;t=5.171,P=0.023;t=8.549,P=0.004);大肠癌组织中TK1阳性表达率明显高于癌旁组织(80.00％比13.33％,t=66.964,P=0.000),TK1表达水平与大肠癌浸润深度、TNM分期和淋巴结转移明显相关(t=1.781,P=0.182;=4.383,P=0.036;t =7.748,P=0.005).结论 Moesin和TK1与大肠癌发生发展有关.
作者：林琳；陈日红；许庆文；黄哲；徐飞鹏；周才进；黄先进 刊期： 2018年第04期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
