舒宁波；王亚旭；曾令海；谢凯；张灵敏；毕德利
目的 检测细胞外基质金属蛋白酶(MMP)诱导因子CD147和MMP-9在胆囊癌及癌前病变组织中的表达,探讨两者与胆囊癌的发生、发展及预后的关系.方法 应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测CD 147和MMP-9在42例胆囊癌、18例胆囊上皮中重度不典型增生、13例胆囊上皮轻度不典型增生、15例胆囊腺瘤及15例慢性胆囊炎组织中的表达.结果 胆囊癌组织中CD147和MMP-9的表达量(83.33％、88.10％)高于轻度不典型增生(38.46％、30.77％)、胆囊腺瘤(20.00％、26.67％)及慢性胆囊炎组织(6.67％、20.00％)(P＜0.01),与中重度不典型增生组织(61.11％、66.67％)比较差异无统计学意义(P＞0.05).CD147和MMP-9的阳性表达与胆囊癌的分化程度、临床分期、淋巴结转移明显相关(P＜0.05).胆囊癌中CD147和MMP-9的阳性表达呈正相关(r=0.427,P＜0.01).CD147和MMP-9表达阴性的患者术后生存期高于表达阳性的患者.结论 CD147和MMP-9的表达在胆囊黏膜的癌变、癌细胞的浸润、转移及预后过程中起到重要作用.
作者：王芳红；庞志刚；黄涛；刘超；尚闯；刘新江 刊期： 2013年第03期
目的 探讨共刺激分子B7-1和B7-2在大鼠肝脏低温灌注和复流模型中的表达及其免疫学意义.方法 将30只大鼠随机分为3组:A组(低温灌注20 min再复流24h)、B组(低温灌注30 min再复流24 h)、C组(假手术组).分别取模型之肝脏,应用逆转录聚合酶链反应(PT-PCR)检测B7-1和B7-2在3组肝脏组织中mRNA表达.结果 B7-1和B7-2 mRNA在C组以极低水平表达(0.226±0.053,0.339±0.049),而在A组、B组表达却明显增多(P＜0.01),且B组明显高于A组(B7-1:0.475±0.079比0.367±0.052,B7-2:0.666±0.039比0.595±0.050；P＜ 0.01).结论 低温灌注和复流之肝脏通过上调B7-1和B7-2的表达来增加肝脏的免疫原性.
作者：米曰堂；李蕊；马带；翟慧 刊期： 2013年第03期
目的 探讨周期性应力下大鼠髓核细胞中整合素的表达和意义.方法 体外分离培养大鼠髓核细胞,接种于玻片上,随机分为对照组和加压组.加压组在0～ 200 kPa,0.1 Hz的周期性应力下培养6h.使用荧光实时定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测两组细胞中整合素不同亚基、Ⅱ型胶原和蛋白多糖的基因表达.结果 加压组Ⅱ型胶原和蛋白多糖的基因表达明显增加,分别为对照组的5.04和4.52倍,同时整合素α1亚基的表达为对照组的1.71倍(P＜0.05).结论 周期性压力对髓核细胞的代谢具有促进作用,整合素α1亚基在压力传导中起信号传递作用.
作者：高共鸣；徐南伟；蒋羽清；卢耀军；农鲁明；周栋 刊期： 2013年第03期
目的 观察表达Survivin基因小发卡RNA(shRNA)和内皮抑素基因(mE)的双调控双功效的肿瘤特异性溶瘤腺病毒在体内外实验中对肝癌的抗癌活性.方法 以重组的双调控双功效的肿瘤特异性溶瘤腺病毒感染肝癌细胞,Western blot鉴定肝癌细胞基因的蛋白表达,噻唑蓝(MTT)实验检测癌细胞增殖活性；建立肝癌裸鼠移植瘤模型,给予溶瘤腺病毒治疗,观察对移植瘤生长的抑制作用.结果 Western blot实验显示,CNHK500-shRNA-mE病毒增殖能够介导目的基因高效表达,有效抑制Survivin的表达；CNHK500-shRNA-mE感染肝癌细胞后,对肝癌细胞有特异性杀伤作用,在感染强度(MOI)=2时,CNHK.500-shRNA-mE感染组癌细胞存活率下降到50％以下,而对照病毒CNHK500-shRNA、CNHK500-mE、Ad-mE感染组癌细胞存活率均在80％左右；裸鼠SMMC-7721移植瘤模型经病毒治疗后,与对照组比较,CNHK500-shRNA-mE、CNHK500-shRNA、CNHK500-mE、Ad-mE的抑瘤率分别为77.41％ (P＜ 0.01)、59.27％ (P＜ 0.05)、35.96％ (P＜ 0.01)和25.94％ (P＜ 0.05),以CNHK500-shRNA-mE抑瘤作用强；CNHK500-shRNA-mE介导mE和shRNA高效表达,不但能够抑制间质肿瘤血管新生[对照组血管密度(MVD)=35.6±6.2,CNHK500-shRNA-mE组MVD=11.5 ±3.8,P＜0.01],而且大量诱导癌细胞凋亡[对照组凋亡率为(5.2±1.5)％,CNHK500-shRNA-mE组凋亡率为(26.3±7.5)％,P＜0.01].结论 携带shRNA和mE的双功效溶瘤腺病毒CNHK500-shRNA-mE比任一单功效腺病毒具有更强的肿瘤抑制作用.
作者：孙立臣；潘旭波；周先亭；宋占文；苏长青 刊期： 2013年第03期
目的 观察5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人结肠癌细胞(SW480)株增殖凋亡的影响并探讨其机制.方法 以2.5、5.0、10.0μmol/L的5-Aza-CdR作用于SW480细胞72 h后,采用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率；甲基化测序聚合酶链反应(BSP)检测Disable-2 (DAB2)胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤基序(CpG)岛的甲基化状态；逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测DAB2mRNA的表达；激光共聚焦显微镜检测DAB2蛋白的表达.结果 (1)5-Aza-CdR对SW480细胞生长有抑制作用,用药处理后细胞凋亡率分别为(12.89±0.59)％、(16.74±1.80)％、(33.02±3.30)％,(P＜0.01)；(2) 5-Aza-CdR处理前甲基化程度为89.09％,处理后依次为70.00％、55.45％、10.91％,启动子甲基化水平明显降低(P＜0.01)；(3)5-Aza-CdR处理前RT-PCR可以少量扩增出DAB2 mRNA特异性条带(平均灰度比值为0.266±0.013),5-Aza-CdR处理后可见DAB2 mRNA转录水平增加,且mRNA水平与药物的浓度呈正相关,平均灰度比值2.5 μmol/L组为0.363±0.009,5.0 μmol/L组为0.490±0.021；10.0 μmol/L组为0.753±0.028(P＜0.01)；(4) 5-Aza-CdR处理前有少量DAB2蛋白表达于细胞质及细胞核中(荧光强度为:94.50±13.39),予以5-Aza-CdR处理之后DAB2的表达量增加(荧光强度为:123.75±15.19,P＜0.01).结论 5-Aza-CdR能诱导结肠癌SW480细胞株凋亡的作用,其机制可能是5-Aza-CdR能逆转SW480细胞DAB2启动子CpG岛的异常甲基化,诱导mRNA转录和蛋白的表达.
作者：舒宁波；王亚旭；曾令海；谢凯；张灵敏；毕德利 刊期： 2013年第03期
目的 探讨Notch信号通路与磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3 K/Akt)信号通路在膀胱癌中的作用及其机制.方法 分别通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot法检测Notch信号通路与PI3 K/Akt信号通路的关键因子在36对膀胱癌及癌旁组织中的表达,然后采用Notch信号通路抑制剂(2S)-N-N-(3,5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰-2-苯基甘氨酸叔丁酯(DAPT)及PI3K信号通路抑制剂LY 294002分别抑制以上通路,采用MTS法观察2条信号通路对膀胱癌细胞5637与T24增殖的影响,后检测抑制Notch信号通路后Akt的表达变化,观察2条信号通路是否存在相互作用关系.细胞实验各重复3次.结果 Notch信号通路与PI3K信号通路在膀胱癌中呈活化状态.与瘤旁组织比较,肿瘤组织中Notch1受体升高(2.60±0.37)倍,Hes1升高(1.80±0.24)倍(P＜0.05),磷酸化Akt蛋白表达升高.再者,分别抑制2条信号通路后均抑制膀胱癌细胞的增殖.抑制Notch信号通路后Hes1下降(3.60±0.53)倍,第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)表达下降(2.30±0.24)倍(P＜0.05),磷酸化Akt蛋白表达也显著下调.结论 Notch信号通路可能通过调节PI3K信号通路在膀胱癌中起促癌作用.
作者：朱庆国；朱伟 刊期： 2013年第03期
目的 观察足底注射NaHS诱发疼痛大鼠脊髓背角N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体2B亚基(NR2B)的表达变化,探讨其疼痛形成的机制.方法 雄性SD大鼠30只,体质量180 ～ 200 g,随机分为3组:对照组(C组)、H2S组(S组)和氯胺酮组(K组),S组和K组每天经足底给予NaHSl nmol(0.1 ml),C组给予等体积生理盐水,持续5d(1次/天),然后K组每天肌肉注射盐酸氯胺酮注射液10 mg/kg(0.2 ml),S组和C组则给予同体积生理盐水,连续7d(1次/天).分别于足底给药前1 d(Tc)、第1次足底给药后20 min(T1)、第5次足底给药后20 min(T2)、第7天肌肉注射给药后20 min(T3)测定机械缩足阈值(PWT),并于后1次PWT测定完成后取脊髓组织,分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western blot法测定脊髓背角NR2B mRNA及蛋白表达水平.结果 S组T1、T2、T3 PWT分别为(2.72±1.17)、(1.48±0.57)、(2.40±0.89)g,与C组比较明显降低(P＜0.05),S组NR2B mRNA及NR2B蛋白表达分别为0.75±0.07、1.36±0.08,与C组比较明显增多(P＜0.05)；K组在T3时PWT为(8.89±1.09)g,与S组比较显著升高(P＜0.05),NR2B受体mRNA及NR2B受体蛋白表达分别为0.55±0.05、1.02±0.06,与S组比较显著减少(P＜0.05).结论 脊髓背角NR2B的表达上调可能是H2S诱发的持续性疼痛的机制之一,而氯胺酮则可抑制其表达而发挥一定镇痛作用.
作者：赵晓南；段卫东；吴川；刘朋；刘飞飞；王秀丽 刊期： 2013年第03期
目的 探讨甲状腺乳头状癌与女性激素的相关性及其临床意义.方法 取新鲜的甲状腺乳头状癌组织标本53例,再用免疫酶组织化学方法检测雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)在甲状腺乳头状癌中的表达,分析受体表达与肿瘤生物学特征的关系.结果 在甲状腺乳头状癌中ER、PR的表达率分别为28.30％、54.17％,ER表达和肿瘤侵出甲状腺包膜、淋巴结转移、肿瘤分期无明显相关(P＞0.05),ER与患者年龄呈负相关(P＜0.05).PR表达和患者年龄无明显相关(P＞0.05),但是PR表达和肿瘤侵出甲状腺包膜以及淋巴结转移以及肿瘤分期明显相关(P＜0.05).结论 甲状腺乳头状癌与女性激素明显相关,其中PR的表达与肿瘤侵出甲状腺包膜和淋巴结转移相关.
作者：康旭；刘跃武；曹斌校；王晓亮；张璐 刊期： 2013年第03期
目的 比较组氨酸-色氨酸-酮戊二酸(HTK)液和含血停搏液对体外循环(CPB)后未成熟心脏内皮激活和炎性反应的影响.方法 14头乳猪随机分为HTK液组(H组)和含血停搏液组(B组),建立CPB模型,停机2h测定冠状动脉和心肌组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、血管内皮生长因子(VEGF)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-2的含量.结果 冠状动脉eNOS和VEGF的含量,H组分别为(0.74±0.29) U/g和(6.71±0.87) ng/g,B组分别为(0.51±0.23) U/g和(7.96±1.39) ng/g(P ＞0.05)；心肌组织iNOS、TNF-α、IL-1β和IL-2的含量,H组分别为(0.28±0.12) IU/g、(3.01±0.87)、(1.55±0.48)、(2.45±0.92) pg/mg,B组分别为(0.20±0.10) IU/g、(2.90±0.77)、(1.37±0.53)、(2.29±0.89) pg/mg(P ＞0.05).结论 与含血停搏液比较,HTK液能保持eNOS、VEGF在冠状动脉内皮的表达,不增加心肌组织iNOS和早期炎性因子的表达.
作者：陈燕；孙鹏；王会颖；吴信；李文雷；晏馥霞；薛庆华；李守军；刘晋萍 刊期： 2013年第03期
目的 观察柴胡对肝星状细胞c-fos和c-jun基因表达的影响.方法 在培养的肝星状细胞株中分别加入不同浓度的柴胡(终质量浓度1.0、0.5 g/L)；于8、24、48、72 h4个时间点分别收集细胞,提取肝星状细胞总RNA；用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定c-fos和c-jun的基因表达水平.结果 柴胡两组HSC-T细胞c-fos基因表达水平在8 h(0.36±0.11、0.51±0.12)、24h(0.27±0.09、0.43±0.10)、48 h(0.23 ±0.04、0.32±0.07)、72 h(0.13±0.03、0.24±0.04)4个时间点均明显低于对照组(0.63±0.13、0.50±0.12、0.43±0.06、0.32 ±0.04)；c-jun基因表达水平在8h(0.44±0.11、0.68±0.13)、24 h(0.40±0.09、0.60±0.11)、48 h(0.26±0.08、0.43±0.11)、72 h(0.20±0.04、0.33±0.06)4个时间点也均明显低于对照组(0.93±0.13、0.80±0.12、0.63±0.10、0.46±0.07)；随剂量加大,HSC-T细胞c-fos、c-jun基因表达水平逐渐降低；两组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 柴胡对肝星状细胞c-fos和c-jun基因表达有明显的下调作用.
作者：王爱民；阴赪宏；贾树杰；马红；耿焱；王宝恩 刊期： 2013年第03期
目的 探讨姜黄素、伊立替康对大肠癌Lovo细胞的单药作用、协同作用及联合给药方式.方法 不同浓度姜黄素和伊立替康、不同联合给药方式、不同作用时间作用于Lovo细胞,噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞仪分别检测Lovo细胞增殖、凋亡率.结果 姜黄素、伊立替康均呈时间、剂量依赖性抑制Lovo细胞增殖.混合给药中联合用药组Lovo细胞凋亡率比单药组显著增加(P＜0.01)；贯序给药中2个实验组Lovo细胞凋亡率比对照组显著增加(P＜0.05)；贯序给药Lovo细胞凋亡率显著高于混合给药(P＜0.05).结论 姜黄素及伊立替康呈时间、剂量依赖抑制Lovo细胞增殖,两者具有协同作用,贯序给药比混合给药更有效提高两者对Lovo细胞抑制作用.
作者：王家智；陈小伍；朱达坚；剧永乐 刊期： 2013年第03期
目的 探讨叶酸修饰的负载索拉非尼及超顺磁性氧化铁(SPIO)的磁性纳米胶束的制备及其在体外对人肝癌细胞HepG2的靶向性、增殖抑制及促凋亡作用.方法 制备由叶酸修饰及无叶酸修饰的负载索拉非尼的磁性纳米胶束,将不同浓度(10.0000、5.0000、2.5000、1.2500、0.6250、0.3125 μmol/L)的纳米胶束分别与人肝癌细胞HepG2共孵育1h,以普鲁士蓝染色观察其靶向性,以噻唑蓝(MTT)法测定HepG2的增殖,以流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 叶酸靶向纳米胶束与HepG2细胞共孵育后行普鲁士蓝染色显示细胞内存在大量铁,非叶酸靶向纳米胶束及体外竞争抑制实验普鲁士蓝染色显示细胞内铁浓度极低；MTT法显示叶酸靶向药物组对HepG2细胞的总平均抑制率为38.13％,非叶酸靶向药物组为22.54％,两者差异有统计学意义(P＜0.05)；流式细胞术显示叶酸靶向药物组的平均细胞凋亡率为17.01％,非叶酸靶向药物组为11.04％,而对照组为7.89％,叶酸靶向药物组的细胞凋亡率较非叶酸靶向药物组升高更为明显,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 叶酸修饰的负载索拉非尼的磁性纳米胶束在体外对人肝癌细胞HepG2具有良好的靶向性、增殖抑制及促凋亡作用.
作者：马靖；张磊；巩发明；张芳；张培东 刊期： 2013年第03期
目的 构建微小RNA (miR)-21的真核表达载体pEZX-eGFP-microRNA-21.将构建成功的pEZX-eGFP-microRNA-21瞬时转染至甲状腺乳头状癌细胞株TPC-1中,探讨转染前后细胞蛋白程序性细胞凋亡4(PDCD4)蛋白的表达差异及其机制.方法 人工合成microRNA-21基因序列,构建成重组质粒pEZX-eGFP-microRNA-21并转染TPC-1细胞.将TPC-1细胞分为转染组、空载组、空白组,每组20个复孔.实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)、Western blot分别检测转染后miR-21及PDCD4蛋白在各组细胞中的表达.结果 经酶切和测序分析鉴定后证明重组质粒pEZX-eGFP-microRNA-21构建成功.转染组TPC-1细胞miR-21的表达水平明显高于对照组:加尾法、茎环法中分别是对照组的6.39倍(P＜0.01)、7.58倍(P＜0.01).Western blot显示转染组细胞PDCD4表达量明显降低(0.24±0.03,P＜0.05).结论 成功构建miR-21基因真核表达载体pEZX-eGFP-microRNA-21.miR-21在甲状腺乳头状癌细胞TPC-1中高表达可能导致PDCD4蛋白低表达.
作者：刘洋；卢秀波；耿祖仕；贾勐；申林林 刊期： 2013年第03期
目的 探讨唑来膦酸诱导结肠癌HCT116细胞凋亡的线粒体途径.方法 分别采用浓度25μmol/L和50 μmol/L的唑来膦酸孵育HCT116细胞48 h,流式细胞仪分析凋亡细胞比例；将标志线粒体膜电位的染料JC-1与唑来膦酸作用24、48、72 h的HCT116细胞避光孵育15 min,荧光显微镜和流式细胞仪观察其红色荧光强度的变化；Western blot分析唑来膦酸作用后48、72 h细胞线粒体和胞质细胞色素C(Cyclin C)含量的改变,细胞线粒体和细胞质Cyclin C的改变.结果 HCT 116细胞和唑来膦酸25μmol/L和50 μmol/L作用48 h后,出现凋亡,凋亡比例分别为(11.6±0.5)％、(49.2±3.4)％(P＜0.01)；唑来膦酸浓度25 μmol/L时,24、48、72 h后JC-1被激发出红色荧光的细胞比例为(96.49±2.10)％、(86.13±3.20)％、(74.23 ±5.30)％ (P ＜0.01)；Western blot显示唑来膦酸作用下,Cyclin C从线粒体内释放至细胞质.结论 线粒体途径是唑来膦酸介导的结肠癌HCT116细胞凋亡的信号途径之一.
作者：高翔；江波；张婷；邹士涛；吴小红；游庆军；华东 刊期： 2013年第03期
目的 观察持续高表达CXC趋化因子受体-4(CXCR4)慢病毒颗粒在细胞迁移的作用.方法 从大鼠大脑组织提取总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)得到大鼠cDNA文库,以cDNA为模板,经过PCR获得CXCR4基因,测序正确后连接到pCDH1-MCS-EF1-copGFP(慢病毒载体质粒),与第3代慢病毒其余辅助质粒pMDLG/pRRE、pRsv-Rev及pVSV-G按照1∶4∶ 1∶1共转染293T细胞包装慢病毒,超离慢病毒,测定病毒滴度,感染Hela细胞72h与14 d后,分别观察Hela细胞荧光,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)测定Hela细胞表达大鼠CXCR4 mRNA含量,Transwell小室观察细胞迁移.结果 测序CXCR4基因序列正确,并成功连接到pCDH1-MCS-EF1-copGFP,利用第3代慢病毒包装系统成功包装慢病毒,经超离慢病毒颗粒,流式细胞仪测定慢病毒滴度为7.89×105,持续观察Hela细胞荧光强度,Real-time PCR检测结果示Hela细胞表达大鼠CXCR4 mRNA水平显著升高(72 h为78.29倍,至14 d为58.93倍),Transwell小室观察到高表达CXCR4的慢病毒颗粒感染组细胞迁移多(P＜0.05).结论 高效感染力并持续高表达CXCR4的慢病毒颗粒可持续促进细胞迁移,并有基质细胞衍生因子-1 α(SDF-1o)浓度依赖性.
作者：王奇；冯世庆；孔晓红；刘畅；张彬；张亮；张衍军 刊期： 2013年第03期
肾缺血再灌注损伤(IRI)是临床常见的病理生理变化,常见于器官移植、急性失血等过程.Hepcidin是来源于肝脏的一种体内铁稳态调节剂,其表达与机体贫血、缺氧和炎性反应有关.缺血性肾衰、肾移植术后均存在肾脏缺血再灌注过程,从而产生缺氧、失血和炎性反应.我们通过观察对大鼠肾缺血再灌注损伤后肝脏Hepcidin的表达变化,以及和血清Hepcidin、白细胞介素(IL)-6、血肌酐(Cr)等指标的相关分析,探讨Hepcidin在肾缺血再灌注损伤中的临床意义.
作者：薛冬；何小舟；周萃星；许贤林；徐宁 刊期： 2013年第03期
目的 观察不同浓度雷公藤甲素作用于人肝癌细胞株HepG2细胞,检测其体外生长增殖抑制率、细胞凋亡率及细胞内Ca2+浓度的变化,探讨其诱导肝癌细胞凋亡的机制.方法 应用不同浓度的雷公藤甲素(12.5、25、50、100 μg/L)处理HepG2细胞,用噻唑蓝(MTT)比色法测定不同作用时间细胞增长抑制率；流式细胞仪(FCM)膜联蛋白V/碘化丙锭(Annexin V/PI)双染色法检测细胞凋亡率的变化；采用荧光探针技术(Fluo-3)和激光共聚焦显微镜,测定细胞内Ca2+浓度的变化.结果(1)雷公藤甲素(12.5、25.0、50.0、100.0 μg/L)对人肝癌细胞HepG2增殖有抑制作用(P＜0.05),抑制率与药物浓度、作用时间呈正相关；(2)雷公藤甲素(12.5、25.0、50.0、100.0 μg/L)能够诱导人肝癌细胞HepG2发生凋亡,随药物作用时间的延长、药物浓度的增高,细胞凋亡率逐渐增高；(3)作用时间为24、48 h时,细胞内Ca2+荧光强度与药物浓度、作用时间呈正相关,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01),而作用时间至72 h时,荧光强度逐渐减弱甚至恢复至正常水平(P＞0.05).结论 雷公藤甲素能够抑制人肝癌细胞HepG2的生长增殖,其效应呈时间、剂量依赖性；且能诱导HepG2凋亡,其诱导凋亡分子机制可能与细胞内Ca2+浓度变化有关.
作者：魏剑锋；叶超平；林贝安；刘逢生；王文清 刊期： 2013年第03期
目的 观察微小RNA-143(miR-143)对肾细胞癌细胞株A498增殖及凋亡的影响.方法 化学合成miR-143模拟物(miR-143 mimics)及阴性对照转染对照序列,用LipofectamineTM 2000脂质体瞬时转染miR-143模拟物及阴性对照转染对照序列至肾细胞癌株A498中,miR-143 mimics和转染对照序列浓度为60 nmol/L,实验分为3组:miR-143 mimics转染组、阴性对照转染组(NC组)、空白对照组(Opti-MEMI无血清培养基培养的A498细胞).采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和流式细胞技术等方法检测转染后不同分组肾癌细胞株生长、增殖与凋亡的变化.结果 与对照组比较,CCK-8检测结果表明miR-143 mimics转染组细胞增殖抑制明显,且抑制效应于转染48 h后呈现.流式细胞术检测结果显示miR-143 mimics转染组细胞凋亡率增加[(9.10±2.31)％],显著高于阴性对照转染组[(4.23±1.52)％]与空白对照组[(3.43±1.61)％],组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 miR-143模拟物可抑制肾癌细胞的增殖,诱导肾癌细胞凋亡,具有明显的肿瘤抑制效应.
作者：刘会锋；闫泽晨；顾朝辉；贾占奎；唐晓龙；刘耀雷；杨锦建 刊期： 2013年第03期
目的 观察腺病毒介导的骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和骨形态发生蛋白-7(BMP-7)基因联合转染对大鼠脂肪来源干细胞成骨分化的影响.方法 分别构建携带绿色荧光蛋白的BMP-2重组腺病毒表达质粒及携带红色荧光蛋白的BMP-7的重组腺病毒表达质粒,包装、生产携带BMP-2和BMP-7的腺病毒.分离并培养大鼠脂肪来源干细胞(ADSCs),分别以Ad-BMP-2转染ADSCs、Ad-BMP-7转染ADSCs和Ad-BMP-2、Ad-BMP-7共转染ADSCs,另设未转染ADSCs作为对照.转染后在荧光显微镜下观察4组细胞中重组蛋白的表达.应用Western blot检测转染后14 d4组细胞骨钙素(OCN)和Ⅰ型胶原的蛋白表达,并检测各组碱性磷酸酶(ALP)的活性.结果 荧光显微镜下观察BMP-2和BMP-7可以高效稳定表达,骨钙素(OCN)和Ⅰ型胶原的表达明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05),并且联合转染组高.Ad-BMP-2及Ad-BMP-7转染细胞的ALP活性升高,联合转染组的ALP活性明显高于其他组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 腺病毒介导BMP-2和BMP-7基因共转染可促进ADSCs向成骨方向分化.
作者：王庆；陈光兴；郭林；段小军；杨柳 刊期： 2013年第03期
目的 检测非转移性细胞蛋白1基因(NME1基因)在前列腺癌组织中的表达,探讨NME1在前列腺癌中的分子机制和临床意义.方法 应用基因芯片筛选出在前列腺癌与前列腺增生组织特异性表达的基因NME1,运用蛋白组学检测前列腺癌组织标本54例、癌旁组织29例、组织中NME1基因结合蛋白差异表达程度.免疫组织化学结合NME1免疫组织化学评分对前列腺癌患者的临床病理参数进行分析.结果 通过基因芯片筛选,可见NME1在前列腺癌组织中表达上调,达2.24倍(P＜0.01).双向差异凝胶电泳(2D-DIGE)技术亦发现相对于癌旁组织NME1基因结合蛋白在前列腺癌组织中表达上调,达2.36倍(P＜0.01).通过免疫组织化学染色,可见NME1在前列腺癌组织中的表达明显强于癌旁组织(P＜0.01),在前列腺癌并转移组织中的表达亦明显强于原位前列腺癌组织(P＜0.01).NME1表达与前列腺癌患者血清前列腺特异抗原(PSA)水平(P＜0.05)、Gleason评分(P＜0.01)和肿瘤TNM分期(P＜0.05)、是否转移(P＜0.01)呈正相关,而与患者年龄无明显相关(P＞0.05).NME1阳性的前列腺癌患者预后不良(Log Rank=11.117,P＜0.01).结论 NME1低表达与肿瘤的恶性程度相关,NME1缺失可能导致恶性肿瘤细胞迅速生长,可结合血清PSA水平对前列腺癌疑似患者进行早期诊断及初步判断肿瘤恶性程度.
作者：伍信阳；毕学成；何慧婵；江福能；冯自卫；付欣；邓业瀚；钟惟德 刊期： 2013年第03期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
