吴天鹏；欧阳海；农谦
目的 探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂Trichostatin-A(TSA)诱导肿瘤细胞凋亡的机制.方法 显微镜下观察TSA作用24、48 h后,小鼠NIH3T3成纤维细胞、人乳腺癌MCF-7细胞的形态学变化,采用流式细胞学方法(FCM)检测细胞凋亡情况.利用Western blot方法检测细胞周期相关蛋白Rb蛋白和凋亡相关蛋白多聚ADP核糖聚合酶(PARP)降解片段的表达.结果 TSA作用后的NIH3T3细胞,生长变得缓慢,但细胞尚保持生长的活性.MCF-7细胞24、48 h的凋亡率分别为(36.4±1.5)%、(67.0±2.8)%,以48 h明显.TSA作用24、48、72 h后,两种细胞均出现不同程度的磷酸化Rb蛋白水平下降,MCF-7细胞中PARP发生明显的降解,48 h后降解明显,72 h达到大程度.结论 TSA可诱导MCF-7细胞凋亡,其机制可能通过改变肿瘤细胞校染色质的空间结构,以及阻滞细胞周期实现的.
作者：李琦；王理伟；魏玮；周翡；罗金红；于顺江 刊期： 2008年第04期
目的 观察SEB-scFv融合蛋白对人胃癌细胞的体外抑制作用.方法 噻唑蓝(MTT)法观察SEB-scFv融合蛋白对人胃癌细胞的增殖抑制作用;DNA ladder法观察融合蛋白对胃癌细胞凋亡的影响,电子显微镜法观察融合蛋白处理后胃癌细胞的形态变化;流式细胞仪分析胃癌细胞凋亡率.结果 胃癌细胞的增殖抑制率随SEB-scFv融合蛋白作用浓度的增加而逐渐增大,且对不表达MG7相关抗原的肿瘤细胞不表现杀伤效应.1.0、10 mg/L高浓度融合蛋白组DNA凝胶电泳呈现明显的梯状条带.被融合蛋白活化的免疫效应细胞攻击后的胃癌细胞表现出典型的凋亡特征性变化.融合蛋白0.1、1.0、10 mg/L组细胞G0/G1期前有明显的凋亡峰出现,三者凋亡率分别达到51.62%、54.21%和61.55%.而生理盐水组凋亡率仅为1.44%,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 SEB-scFv融合蛋白在效应细胞介导下,能对表达MG7相关抗原的胃癌细胞显示出有效的体外生长抑制作用,且在此过程中伴随有胃癌细胞的凋亡.
作者：舒晓刚；童强；卢晓明；陶凯雄；王国斌 刊期： 2008年第04期
我们通过实验观察不同纯度大鼠胰岛样本中干细胞标志物细胞角质蛋白(CK)-19的表达,探讨不同纯度胰岛样本中所携带的干细胞.一、材料与方法
作者：杨闯；王济明；杜成友；黄艳君；薛栋 刊期： 2008年第04期
目的 探讨阴茎海绵体勃起神经递质血管活性肠多肽(VIP)基因转导入糖尿病大鼠阴茎海绵体并表达多量VIP以增强勃起功能的可行性.方法 将构建的重组质粒pcDNA3/VIPcDNA注射入链尿佐菌素诱导的糖尿病大鼠阴茎海绵体,在注射3 d后测定阴茎海绵体内压(ICP),分别以正常空白、空白、单纯注射缓冲液和单纯注射pcDNA3载体对照.Dot blot法测定阴茎组织中VIP mRNA表达水平.结果 糖尿病大鼠阴茎海绵体注射重组质粒后3 d,电刺激海绵体神经,ICP较对照组明显升高(P＜0.05);阴茎组织VIP mRNA表达增多(P＜0.05).结论 成功将重组质粒pcDNA3/VIP cDNA转导入糖尿病阴茎海绵体,VIP mRNA表达增加能增强糖尿病大鼠阴茎海绵体的勃起功能.
作者：王华；沈周俊 刊期： 2008年第04期
目的 检测肿瘤内皮标记物(TEM-8)、血管皮皮生长因子(VEGF)-D在结、直肠癌中的表达及其意义.方法 用实时定量PCR方法分析30例结、直肠癌标本中TEM-8、VEGF-D的表达,并结合病理学分期,淋巴结转移等肿瘤特点进行分析.结果 VEGF-D在肿瘤组织中的表达较正常组织中升高(含量分别为0.006 72±0.003 05、0.000 41±0.000 23,P＜0.05),并与淋巴结转移相关(P＜0.05),而与肿瘤分期无明显相关性(P＞0.05),TEM-8在正常组织中基本无阳性表达,而在结、直肠癌组织中阳性表达率为90%,TEM-8与肿瘤分期(Dukes B,Dukes C样本中的含量分别为0.0278±0.0141、0.0375±0.0162,P＜0.05),淋巴结转移情况(在有淋巴结转移和无淋巴结转移的样本中的含量分别为0.0415±0.0137、0.021 30±0.005 84,P＜0.05).结论 TEM-8,VEGF-D均可作为结、直肠癌的标记物,并可反映淋巴结转移状况,TEM-8更可作为肿瘤特异性标记物.
作者：许毓敏；王文跃；贾振庚 刊期： 2008年第04期
我们应用人工合成的生物可降解性单纯型尿道内支架修复战伤性尿道狭窄,证实该材料及方法是可行的[1].本实验旨在将自体的尿道上皮细胞体外培养后,种植于单纯尿道内支架上,制备成附有自体尿道上皮细胞的复合型尿道内支架,为修复尿道损伤提供较实用有效的治疗方法.
作者：张秉鸿；符伟军；张旭；高江平；洪宝发；孟波；朱宁；崔福斋 刊期： 2008年第04期
目的 探讨臭氧氧化预处理通过诱导热休克蛋白70(HSP70)的合成,保护大鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用与机制.方法 建立原位大鼠单侧肾缺血再灌注动物模型,I/R前15 d经直肠吹人氧气和臭氧的混合气体5.0～5.5 ml(臭氧浓度50 mg/L,1 mg/kg体重,每日1次).全自动生化分析仪检测尿素氮(BUN)、肌酐(Cr),比色法测定血清的脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD).Western blot检测HSP70蛋白的含量;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测HSPT0的表达.结果 肾缺血再灌注24 h后,血清中BUN、Cr、MDA明显增高,肾组织内HSP70表达明显增强(P＜0.05),经臭氧氧化预处理后,血清中的BUN、Cr、MDA均降低,SOD升高;HSP70表达升高更加明显(P＜0.05).结论 臭氧氧化预处理可以诱导大鼠肾缺血再灌注组织中HSP70表达,减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤.
作者：陈志远；陈晖；刘修恒；詹炳炎；周江桥；祝恒成 刊期： 2008年第04期
目的 建立并鉴定表达人乳头瘤病毒16型(HPV 16)E7蛋白的实体瘤模型.方法 携带有野生型HPV 16 E7基因的重组质粒pcDNA3.1-E7用限制性内切酶及序列测定进行鉴定.采用脂质体将重组质粒pcDNA3.1-E7转染小鼠淋巴瘤细胞RMA,经G418筛选获得稳定转染细胞单克隆,并用RT-PCR方法检测稳定转染细胞HPV 16 E7 mRNA.将转染细胞接种于C57BL/6小鼠,肿瘤形成后,用Western blot分析检测E7蛋白在小鼠肿瘤组织中的表达.结果 酶切及测序证实目的 基因DNA序列、插入位点及方向均正确.RT-PCR检测显示HPV 16 E7能在RMA转染细胞中稳定表达.RMA转染细胞可在小鼠体内成瘤,且Western blot分析表明E7蛋白在小鼠肿瘤组织中的表达较体外高.结论 2.5 X 104 个RMA-E7细胞可在小鼠体内成瘤,并且体内E7蛋白表达比体外高,可能导致免疫耐受.
作者：郑启昌；胡少勃；宋自芳；汪谢丹 刊期： 2008年第04期
目的 探讨手术后败血症患者肝功能损害与一氧化氮产生的关系.方法 将20例接受腹部手术并在术后发生败血症的患者分成两组:存活组、死亡组.在发生败血症之前取血样.并在发生败血症后每隔3 d取1次血样,直到患者死亡或出院.分析稳定的NO基团代谢终产物(NOx)和动脉内KBR(AKBR)的关系.结果 术后发生败血症的患者中,7例死亡患者的血浆NOx水平比13例存活患者显著增高.死亡组患者的AKBR水平比存活组显著降低,这表明死亡组患者的肝功能受到损害.与之比较,死亡组血浆NOX水平比存活组显著增高.当AKBR的水平降到0.7以下时,NOX的水平开始升高.此外,血浆AKBR水平的变化程度受NOX水平的影响,这表明NO与肝脏细胞的线粒体功能障碍有一定关系.结论 NO的过量产生可能是导致术后败血症患者出现致命性代谢功能紊乱的原因之一.
作者：涂巍；胡松；赵嫚；曲文志；于作夫 刊期： 2008年第04期
目的 建立一种模拟外科临床实际,早期致死率低,用于脓毒症综合治疗研究的小鼠模型.方法 小鼠随机分为3组,即对照组、盲肠结扎穿孔(CLP)组和改良组.对照组行假手术;CLP组行盲肠结扎穿孔术;改良组通过CLP后8 h行盲肠切除和腹腔生理盐水冲洗建立脓毒症模型.观察各组动物出现死亡时间及24、48、72 h累计死亡率;术后4、12、24 h分别处死动物,检测外周血白细胞计数(VC-BC),血清内毒素、肿瘤坏死因子(TNF)水平及肺、肝病理.结果 改良组动物出现死亡时间较CLP组明显延迟,术后48、72 h累计死亡率虽明显低于CLP组(P＜0.05),但仍分别高达53.3%、80%;术后各时间点WBC较CLP组与假手术组明显升高(P＜0.05);血清内毒素和TNF-α水平明显高于假手术组,但低于CLP组;光镜下见肺泡间隔增宽,间质充血、水肿、大量炎性细胞浸润,肝细胞水肿伴散在点状坏死,肝窦扩张伴间质大量炎性细胞浸润.结论 该脓毒症改良模型具有良好的外科临床相关性,早期致死率低,可重复性好.
作者：郭振华；李力；刘巨超；张兰；徐迎新 刊期： 2008年第04期
本研究旨在探讨是否经脾脏移植微囊化胰岛素分泌细胞能够纠正糖尿病小鼠的高血糖状态,从而为糖尿病的细胞治疗选择新的移植部位奠定实验基础.一、材料和方法
作者：刘锐；代文杰；宋春芳；孙景云；周毅 刊期： 2008年第04期
目的 探讨经颈动脉神经干细胞(NSCs)移植治疗大鼠脑出血(ICH)后遗症的适宜移植时间窗和疗效.方法 48只Wistar大鼠脑出血模型,随机分为实验组和对照组.分别于脑出血后第2、7、14、21、28天经颈动脉行5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)体外标记的神经干细胞移植.对照组大鼠,仅接受颈动脉内注入等量DMEM培养液.每周测试大鼠行为功能评分;2个月后处死所有动物,行组织化学染色,观察神经干细胞在脑内的分布、分化,评定病灶体积大小.结果 与对照组比较,NSCs移植组大鼠行为功能改善明显(ANOVA,P＜0.05);脑出血第7天移植组在移植后第3周和ICH后第9周的行为功能评分显著优于其他时间移植组(SNK,P＜0.05).ICH后第7天和第14天移植组BrdU阳性细胞计数显著多于ICH后第2、21和第28天移植组.ICH后第2天移植的NSCs绝大部分分化为星形胶质细胞(84.5±7.6)%;而ICH后第21和28天移植的NSCs分化为神经元的比例明显增大(35.4±3.1)%、(37.2±4.1)%;然而,7～14 d移植组,分化为神经元的绝对数量显著高于其他治疗组(P＜0.01).结论 经皮颈动脉注射是一种可行的、微侵袭和高效的细胞移植方法.在脑出血后7～14 d期间进行神经干细胞移植,能显著提高细胞存活率和移植细胞分化为神经元,明显促进功能改善.
作者：李峰；刘玉光；朱树干；杨洪安；张源；吴承远 刊期： 2008年第04期
本实验旨在观察不同食管癌患者对药物的敏感性,为食管癌的临床化疗提供个体化用药的实验依据.一、材料与方法1.材料:选择济南军区总医院经手术切除的食管癌患者共58例,其中男35例,女23例,年龄(56.2±4.6)岁.
作者：卢兆桐；李明；邹志强；付质杰；李山成 刊期： 2008年第04期
我们从2004年3月至2006年2月将临床膝关节骨性关节炎(OA)患者512例,采用随机对照的方法,观察透明质酸钠与臭氧对膝骨关节病的疗效及不良反应.一、资料和方法
作者：王俊文；勘武生；焦竞 刊期： 2008年第04期
目的 观察微囊化罗非鱼肝细胞移植对急性肝衰大鼠的治疗作用.方法 D-氨基半乳糖制备的肝衰大鼠随机分为4组:微囊化组,裸肝细胞组、空微囊组及生理盐水组,腹腔内分别植入微囊化罗非鱼肝细胞、裸肝细胞、空微囊及生理盐水.比较各组间1周死亡率.移植后动态检测各组大鼠总胆红素,比较其差异,动态观察移植物的病理变化.结果 移植后1周内微囊化组的存活率较高(57.9%),与其他各组比较差异有统计学意义(P＜0.05).移植后48 h,微囊化组总胆红素(6.21±0.86)μmol/L明显较低,与其他各组差异有统计学意义(P＜0.01).移植后1周,微囊化组可以收集到形态完整,没有粘连的微囊,其内的肝细胞尚部分保持存活.结论 微囊化罗非鱼肝细胞移植能改善肝衰大鼠的肝功能、提高存活率.
作者：赵中辛；刘妍芳；周主青；张圣祥；杨永康；朱哲 刊期： 2008年第04期
目的 研究6种肿瘤.睾丸抗原(CT)基因在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测42例肾透明细胞癌患者癌组织(新鲜标本,T1期16例,12期12例,T3期10例,T4期4例;G1 10例,G2 18例,G3 14例)及其中14例患者癌旁组织的cTAGE-1、cTAGE-2、MAGE-A1、MAGE-A3、MAGE-A12及NY-ESO-1基因mRNA的表达.结果 42例肾透明细胞癌组织中100%(42/42)至少表达6种CT基因中一种,14例癌旁组织表达均阴性.肾透明细胞癌组织中MAGE-A12表达高,其次为MAGE-A3,MAGE-A1,cTAGE-1,cTAGE-2及NY-ESO-1,分别为71%(30/42),69%(29/42),67%(28/42),64%(27/42),60%(25/42)及48%(20/42).肿瘤不同分期、不同分级之间6种CT基因表达的差异均无统计学意义(Pearson x2检验法,P＞0.05).结论 CT基因在肾透明细胞癌中有较高表达,可望成为肾透明细胞癌特异性免疫治疗的靶基因.
作者：殷波；孔垂泽；张辉；许学文；宋永胜 刊期： 2008年第04期
目的 观察17β-雌二醇(E2)对大鼠前列腺平滑肌细胞(PSMC)增殖的影响.方法 取体重(253±28)g的雄性SD大鼠30只,无菌切取前列腺,应用酶消化法行原代细胞培养.取3～4代传代细胞,分别加入不同浓度E2(0.1～100)nmol/L处理72 h,应用流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡及其相关蛋白Cyclin D1,应用western blot法检测bcl-2和bax表达.结果 E2(1、10 nmol/L)促进PSMC从G1期向S期过渡,其S期细胞比率分别为(18.50±4.98)%、(21.16±4.83)%,显著高于对照组(12.39±2.64)%(P＜0.05),并伴随Cyclin D1蛋白表达显著增高.而高浓度E2(100 nmol/L)则抑制细胞增殖,其S期细胞比率为(7.98±1.92)%,显著低于对照组(P＜0.05),并伴随bax表达显著增加和细胞凋亡率显著升高.结论 低浓度E2能够上调CyclinD1表达加速G1期向S过渡从而促进大鼠PSMC增殖,高浓度E2则通过增加bax表达促进细胞凋亡.
作者：罗仪；李世文；沃飞；郑新民；胡礼泉；郑航；胡万里；陈婵 刊期： 2008年第04期
目的 观察不同剂量辛伐他汀对生殖激素水平的影响.方法 将健康sD大鼠雌性随机分为对照组25只,实验组100只分为A、B、C、D四个亚组,雄性随机分为对照组25只,实验组75只分为A、B、C三个亚组.实验组雌鼠每日分别给予HMG-COA还原酶抑制剂辛伐他汀1、6、10、60 mg/kg体重,实验组雄鼠每日分别给予HMG-COA还原酶抑制剂辛伐他汀1、6、10 mg/kg体重,用生理盐水溶解灌服.对照组每日仅用生理盐水灌服.持续8周后雌鼠检测卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、血清雌二醇(E2)、睾酮(T)的水平.雄鼠检测血清高密度脂蛋白(HDL)、血清低密度脂蛋白(LDL)、睾酮(T)的水平.结果 各实验组雄鼠HDL值较对照组明显升高(P＜0.01),LDL和T值则与对照组差异元统计学意义(P＞0.05),各实验组雌鼠的FSH值、LH值、E2值、T值与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 辛伐他汀能有效提高血管保护性脂蛋白HDL的水平而对维持生理作用的生殖激素影响不大,是一种有效、安全的降脂药.
作者：谢健；赖炜；何慧婵；邹钧；梁宇翔；马为；梁健健；卢好；钟惟德 刊期： 2008年第04期
我们对伴恶性心包积血的晚期肺癌老年患者施行经皮心包腔置管引流并注入药物治疗,取得了良好的临床疗效.一、资料与方法1.一般资料:恶性心包积血患者16例,其中男12例,女4例,年龄63～74(平均68)岁.大量心包积血7例,中量心包积血9例.KPS评分20～40分,平均28分.心包积血中均找到癌细胞.
作者：罗欣；曹忠良；温立新 刊期： 2008年第04期
目的 观察山莨菪碱对离体大鼠腹主动脉舒缩张力的作用,探讨其作用机制.方法 采用Wistar大鼠离体腹主动脉环(长4～5 mm的血管)灌流技术,观察山莨菪碱累积浓度(每5 min加入山莨菪碱,使营养液中山莨菪碱浓度分别达3×10-6,10-5,3×10-5,10-4,3×10-4 mol/L)对单剂量苯肾上腺素(PE)(10-5 mol/L)预处理的血管舒张作用的影响,及不同浓度山莨菪碱(10-6,10-5,10-4 mol/L)预孵对累积浓度PE(每5 min加入PE,使营养液中PE浓度分别达10-8,3×10-8,10-7,3×10-7,10-6,3×10-6 mol/L)收缩血管作用的影响,分别运用一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)(100 μmol/L)(对照组加入等容积的蒸馏水)和KATP通道阻断剂格列苯脲(Gly)(100 μmol/L)(两对照组分别加入等容积的蒸馏水及溶剂二甲基亚砜DMSO)处理血管环,观察对山莨菪碱舒张血管的抑制作用.结果 山莨菪碱累积浓度对单剂量PE预收缩内皮完整及去内皮血管环均有舒张作用,大舒张分别为(78.6±6.9)%和(65.76±11.39)%.程度相似,差异无统计学意义(P＞0.05).不同浓度山莨菪碱预孵对累积浓度PE收缩血管环作用呈浓度依赖性抑制,浓度越大,抑制作用越明显.用阻断剂L-NAME及Gly处理后,L-NAME可阻断山莨菪碱的舒张血管(内皮完整)作用(P＜0.05),而Gly对去内皮血管具阻断作用,但只在2 min时与对照组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 山莨菪碱具有内皮及平滑肌依赖性舒张血管作用,即通过内皮上一氧化氮-环鸟苷酸(NO-cGMP)及平滑肌上α受体发挥作用.山莨菪碱抑制血管收缩主要通过ATP依赖性K+通道发挥作用.
作者：王烈；郭敬；陈红；钟梅芳；黎成金 刊期： 2008年第04期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
