梁庆元；王小健；苏云星；范亚龙
我们通过体外对C6胶质瘤细胞和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)进行共培养,模拟体内肿瘤细胞与血管内皮细胞相互作用的环境,检测整合素β1在这两种细胞上转录和表达的变化,观察局部环境因素对整合素β1表达的影响.
作者：张金锋；郭赛雄；陈凤珍 刊期： 2008年第04期
目的 观察大鼠骨髓来源的树突状细胞(DC)对同种异体肝移植大鼠免疫耐受的影响.方法 用不同细胞因子诱导培养大鼠骨髓来源的成熟DC(mDC)和不成熟DC(imDC),采用形态学观察、表型分析和功能学实验对培养细胞进行鉴定,构建Wistar大鼠和SD大鼠肝移植模型,并于移植前5 d注射到受体大鼠内,研究它们对移植后大鼠肝脏病理及存活时间的影响情况.结果 DC细胞形态不规则,大多数细胞表面有细长树枝状突起,mDC和imDC表面均表达表面分子OX62,而表面分子CD86在imDC表面低表达,在mDC表面高表达.imDC和mDC与淋巴细胞相互作用,发现imDC对淋巴细胞的增殖无明显作用,相反mDC对淋巴细胞的增殖有明显的促进作用.注射imDC的受体大鼠的存活时间显著长于注射mDC的受体大鼠,注射mDC的肝移植大鼠在移植后较早且出现较强的急性排斥反应,而注射mDC的大鼠在移植后16 d才开始出现轻度急性排斥反应.结论 建立了在体外大量扩增大鼠骨髓来源DC的方法,imDC能显著延长受体大鼠肝移植的存活时间.
作者：陈丽红；刘景丰；邱明链；方航荣；黄爱民 刊期： 2008年第04期
目的 建立并鉴定表达人乳头瘤病毒16型(HPV 16)E7蛋白的实体瘤模型.方法 携带有野生型HPV 16 E7基因的重组质粒pcDNA3.1-E7用限制性内切酶及序列测定进行鉴定.采用脂质体将重组质粒pcDNA3.1-E7转染小鼠淋巴瘤细胞RMA,经G418筛选获得稳定转染细胞单克隆,并用RT-PCR方法检测稳定转染细胞HPV 16 E7 mRNA.将转染细胞接种于C57BL/6小鼠,肿瘤形成后,用Western blot分析检测E7蛋白在小鼠肿瘤组织中的表达.结果 酶切及测序证实目的 基因DNA序列、插入位点及方向均正确.RT-PCR检测显示HPV 16 E7能在RMA转染细胞中稳定表达.RMA转染细胞可在小鼠体内成瘤,且Western blot分析表明E7蛋白在小鼠肿瘤组织中的表达较体外高.结论 2.5 X 104 个RMA-E7细胞可在小鼠体内成瘤,并且体内E7蛋白表达比体外高,可能导致免疫耐受.
作者：郑启昌；胡少勃；宋自芳；汪谢丹 刊期： 2008年第04期
目的 观察胰岛素样生长因子(IGF)-1基因转染的脂肪间充质干细胞(ADSCs)向软骨细胞分化的效果.方法 原代培养兔ADSCs,免疫荧光法检测细胞表面抗原CD44、CIM9;脂质体介导人IGF-1基因转染兔ADSCs联合低浓度血清培养基向软骨细胞分化诱导,RT-PCR及Western blot方法检测IGF-1的表达,MMT法绘制细胞增殖曲线、甲苯胺蓝染色软骨结节、免疫组织化学检测Ⅱ型胶原的表达.结果 脂肪间充质干细胞CD44、CD109表达阳性,基因转染后细胞IGF-1表达阳性,细胞增殖速度增快,出现软骨结节,Ⅱ型胶原表达增高.结论 从脂肪组织中能够分离出增殖旺盛的ADSCs,IGF-1在ADSCs内获得稳定表达,细胞增殖能力增强,促进其向软骨细胞分化.
作者：原泉；程扬；李建军；安春厚 刊期： 2008年第04期
目的 观察17β-雌二醇(E2)对大鼠前列腺平滑肌细胞(PSMC)增殖的影响.方法 取体重(253±28)g的雄性SD大鼠30只,无菌切取前列腺,应用酶消化法行原代细胞培养.取3～4代传代细胞,分别加入不同浓度E2(0.1～100)nmol/L处理72 h,应用流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡及其相关蛋白Cyclin D1,应用western blot法检测bcl-2和bax表达.结果 E2(1、10 nmol/L)促进PSMC从G1期向S期过渡,其S期细胞比率分别为(18.50±4.98)%、(21.16±4.83)%,显著高于对照组(12.39±2.64)%(P＜0.05),并伴随Cyclin D1蛋白表达显著增高.而高浓度E2(100 nmol/L)则抑制细胞增殖,其S期细胞比率为(7.98±1.92)%,显著低于对照组(P＜0.05),并伴随bax表达显著增加和细胞凋亡率显著升高.结论 低浓度E2能够上调CyclinD1表达加速G1期向S过渡从而促进大鼠PSMC增殖,高浓度E2则通过增加bax表达促进细胞凋亡.
作者：罗仪；李世文；沃飞；郑新民；胡礼泉；郑航；胡万里；陈婵 刊期： 2008年第04期
目的 探讨Sema6D及其受体PlexinA1在胃癌中的表达及它们与肿瘤细胞增殖和血管生成的关系.方法 应用逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测20例胃癌患者的癌组织及相应胃切缘正常胃黏膜Sema6D及其受体PlexinA1的mRNA和蛋白表达;免疫组织化学方法检测50例胃癌组织和20例胃正常黏膜中Sema6D、PlexinA1、肿瘤细胞增殖指数(Ki-67)和第Ⅷ因子(微血管密度MVD)的表达.结果 PT-PCR和Western blot示胃癌组织中的Sema6D mRNA和蛋白的表达明显高于胃正常黏膜[(0.24±0.06)比(0.19±0.07),P＜0.05,和(0.45±0.16)比(0.29±0.08),P＜0.01];同时PlexinA1 mRNA和蛋白的表达亦明显高于胃正常黏膜[(0.71±0.37)比(0.60±0.25),P＜0.05,和(0.47±0.16)比(0.21±0.08),P＜0.01].肿瘤细胞增殖指数(Ki-67)随着Sema6D和PlexinA1表达的增高而增高(r=0.5996,P＜0.01和r=0.5024,P＜0.05);胃癌组织中MVD与Sema6D和PlexinA1存在明显正相关(r=0.5759,P＜0.01和r=0.7286,P＜0.01).结论 Sema6D及其受体PlexinA1在胃癌发生发展中发挥重要作用,与促进肿瘤细胞增殖和调节血管生成有关.
作者：赵向阳；陈凛；许倩；李玉红；徐迎新 刊期： 2008年第04期
目的 观察SEB-scFv融合蛋白对人胃癌细胞的体外抑制作用.方法 噻唑蓝(MTT)法观察SEB-scFv融合蛋白对人胃癌细胞的增殖抑制作用;DNA ladder法观察融合蛋白对胃癌细胞凋亡的影响,电子显微镜法观察融合蛋白处理后胃癌细胞的形态变化;流式细胞仪分析胃癌细胞凋亡率.结果 胃癌细胞的增殖抑制率随SEB-scFv融合蛋白作用浓度的增加而逐渐增大,且对不表达MG7相关抗原的肿瘤细胞不表现杀伤效应.1.0、10 mg/L高浓度融合蛋白组DNA凝胶电泳呈现明显的梯状条带.被融合蛋白活化的免疫效应细胞攻击后的胃癌细胞表现出典型的凋亡特征性变化.融合蛋白0.1、1.0、10 mg/L组细胞G0/G1期前有明显的凋亡峰出现,三者凋亡率分别达到51.62%、54.21%和61.55%.而生理盐水组凋亡率仅为1.44%,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 SEB-scFv融合蛋白在效应细胞介导下,能对表达MG7相关抗原的胃癌细胞显示出有效的体外生长抑制作用,且在此过程中伴随有胃癌细胞的凋亡.
作者：舒晓刚；童强；卢晓明；陶凯雄；王国斌 刊期： 2008年第04期
Burne-Taney等[1]研究表明造成肾脏缺血组织损伤的T淋巴细胞功能减退起到了类似缺血预处理样作用,提出T淋巴细胞中可能存在对肾脏缺血再灌注损伤(IRI)起保护作用的亚群,其中造成缺血组织损伤的免疫细胞主要是表达CD28+的CD4+T细胞、NKT细胞等,而起保护作用的T细胞亚群尚不清楚.我们在建立大鼠肾脏热IRI模型的基础上通过对外周血免疫抑制性细胞CD8+CD28-T的检测探讨其在肾脏缺血预处理(IP)中的作用.
作者：李令勋；苏泽轩；梁忠平；陈厚名 刊期： 2008年第04期
目的 观察RNA干扰技术沉默Cyr61基因表达对人脑胶质瘤U251细胞生物学行为的影响.方法 针对Cyr61 mRNA的序列设计合成小干扰RNA(siRNA)的DNA模板,构建pRNAT-Cyr61重组质粒,转染人脑胶质瘤U251细胞;RT-PCR和Western blot检测其对U251细胞内源性Cyr61表达的影响;用噻唑蓝(MTT)比色法观察U251细胞体外增殖活性的变化;用Transwell 小室法检测U251细胞体外侵袭能力的改变;流式细胞仪检测U251细胞凋亡并用透射电镜观察凋亡后的细胞形态学变化.结果 pRNAT-Cyr61重组质粒在mRNA及蛋白水平分别显著抑制Cyi61基因表达,抑制率分别高达到74.87%和78.23%;U251细胞的体外生长抑制率高达68.15%,侵袭细胞数下降至(46.00±2.82)个;U251细胞凋亡率高达53.16%.结论 pRNAT-Cyt61可抑制Cyr61在人脑胶质瘤U251细胞中的表达,并抑制细胞的增殖活性和侵袭能力,促进细胞凋亡.
作者：付锴；袁先厚；江普查；文志华 刊期： 2008年第04期
我们从2004年3月至2006年2月将临床膝关节骨性关节炎(OA)患者512例,采用随机对照的方法,观察透明质酸钠与臭氧对膝骨关节病的疗效及不良反应.一、资料和方法
作者：王俊文；勘武生；焦竞 刊期： 2008年第04期
丙泊酚复合舒芬太尼靶控输注(TCI)静脉麻醉时,两者的药效呈现协同作用[1].我们通过采用丙泊酚-舒芬太尼效应室TCI静脉麻醉,观察不同舒芬太尼效应室浓度(Ce)对诱导期患者意识消失(LOC)及血流动力学反应的影响.
作者：常向阳；王立中；姚明 刊期： 2008年第04期
垂体腺瘤约占颅内肿瘤的10%～15%,而其中侵袭性垂体腺瘤又占垂体腺瘤的5%～85%.相对一般垂体腺瘤而言,侵袭性垂体瘤常侵犯海绵窦、蝶窦、鞍上、斜坡等周围结构,无法做到彻底切除,且易复发[1].我们对人垂体腺瘤细胞进行了体外原代培养,利用无血清培养技术得到了纯化的垂体腺瘤细胞.
作者：寿雪飞；李士其；沈明；苏建光；夏鹰；汪洋 刊期： 2008年第04期
从组织微环境讲,人脑胶质瘤异种原位的动物脑内模型更能模拟人脑肿瘤的生物学特性及临床特征[1].我们采用呈典型侵袭性生长和表皮生长因子受体(EGFR)过表达的人脑多形性胶质母细胞瘤组织来建立裸小鼠原位移植瘤模型,然后行鼠间肿瘤传代移植,并对其生物学特性进行探讨.
作者：刁艺；黄强；董军；李如军；兰青 刊期： 2008年第04期
目的 观察不同剂量辛伐他汀对生殖激素水平的影响.方法 将健康sD大鼠雌性随机分为对照组25只,实验组100只分为A、B、C、D四个亚组,雄性随机分为对照组25只,实验组75只分为A、B、C三个亚组.实验组雌鼠每日分别给予HMG-COA还原酶抑制剂辛伐他汀1、6、10、60 mg/kg体重,实验组雄鼠每日分别给予HMG-COA还原酶抑制剂辛伐他汀1、6、10 mg/kg体重,用生理盐水溶解灌服.对照组每日仅用生理盐水灌服.持续8周后雌鼠检测卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、血清雌二醇(E2)、睾酮(T)的水平.雄鼠检测血清高密度脂蛋白(HDL)、血清低密度脂蛋白(LDL)、睾酮(T)的水平.结果 各实验组雄鼠HDL值较对照组明显升高(P＜0.01),LDL和T值则与对照组差异元统计学意义(P＞0.05),各实验组雌鼠的FSH值、LH值、E2值、T值与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 辛伐他汀能有效提高血管保护性脂蛋白HDL的水平而对维持生理作用的生殖激素影响不大,是一种有效、安全的降脂药.
作者：谢健；赖炜；何慧婵；邹钧；梁宇翔；马为；梁健健；卢好；钟惟德 刊期： 2008年第04期
缺氧诱导因子-1(HIF-1)是缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种转录因子,它通过对下游靶基因的调控,使细胞对缺氧产生适应性反应[1].有研究结果显示,脑组织缺血缺氧可导致脑缺血半暗带HIF-1α的表达增加,并诱导血管内皮生长因子(VEGF)过量表达,刺激血管新生,改善局部血供,减轻缺血后的脑损伤[2]1.本研究旨在观察去骨瓣减压术对局灶性脑缺血大鼠梗死灶周HIF-1α、VEGF表达的影响,探讨该手术脑保护作用的可能机制.
作者：冀建文；吴建梁；李彤；于利洁；扈玉华；邵恩得 刊期： 2008年第04期
目的 探讨二种分别携带神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)反义RNA重组腺相关病毒载体(rAAV-AsnNOS和rAAV-AsiNOS)在脑缺血时抑制神经细胞凋亡的作用机制.方法 运用MACO法建立脑缺血模型,闭塞1 h后分别经右侧颈内动脉缓慢注入重组病毒载体(rAAV-AsnNOS、rAAV-AsiNOS和rAAV-LacZ),继续闭塞大脑中动脉,每只转染病毒滴度为1×1010个病毒颗粒/ml,并于分别缺血早期(缺血5 h)和缺血晚期(缺血25 h)时处死模型,流式细胞术(FCM)检测硝基酪氨酸(NT)阳性细胞百分比和细胞凋亡率,逆转录反应系统(RTPCR)分析nNOS、iNOS,p38MAPK,Caspase-3 mRNA的表达.结果 在脑缺血早期,rAAV-AsnNOS组的NT阳性百分比、凋亡率以及nNOS、p38MAPK、Caspase-3 mRNA表达量较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV-AsiNOS组的低均降低,差异有统计学意义;在脑缺血晚期,rAAV-AsiNOS组的NT阳性百分率、凋亡率以及nNOS、p38MAPK、Caspase-3 mRNA表达量较对照组、rAAV-LaeZ组和rAAV-AsiNOS组低,差异有统计学意义.结论 在体内缺血动物模型中,rAAV-AsnNOS和rAAV-AsiNOS重组病毒载体能够分别在缺血早期和晚期通过抑制NOS表达,从而抑制p38MAPK和Caspase-3基因的表达,抑制缺血后神经细胞凋亡的发生.
作者：石松生；杨卫忠；陈春美；王春华；易海波；陈晓斌；蔡冬生；杨意堃 刊期： 2008年第04期
目的 建立分离肝癌细胞系MHCC97细胞中对罗丹明123染料具有不同排斥能力细胞亚群的方法,并探讨其在肝癌干细胞和异质性研究中的意义.方法 利用流式细胞分选术(FCM)并结合不同浓度的罗丹明123(Rho123)染料,分析和分选肝癌细胞系MHCC97细胞中具有不同染料排斥能力的肝癌细胞亚群,再通过细胞生长的测定、软琼脂克隆形成以及免疫组织化学检测和裸鼠成瘤实验等方法,以比较不同肝癌细胞亚群的差异.结果 根据不同染料排斥能力可以将肝癌细胞系MHCC97细胞分为Rholow和Rhohigh2个亚群,2个亚群在增殖能力、克隆形成率以及甲胎蛋白(AFP)和角蛋白-19(CK-19)表达以及裸鼠成瘤实验上差异有统计学意义,Rholow亚群具有干细胞特性.结论 罗丹明123结合FCM可以富集具有干细胞特性的Rholow亚群,同时为进一步揭示肝癌异质性机制奠定基础.
作者：千年松；李韧；于衡超；曹云新；张福琴；窦科峰 刊期： 2008年第04期
目的 检测肿瘤内皮标记物(TEM-8)、血管皮皮生长因子(VEGF)-D在结、直肠癌中的表达及其意义.方法 用实时定量PCR方法分析30例结、直肠癌标本中TEM-8、VEGF-D的表达,并结合病理学分期,淋巴结转移等肿瘤特点进行分析.结果 VEGF-D在肿瘤组织中的表达较正常组织中升高(含量分别为0.006 72±0.003 05、0.000 41±0.000 23,P＜0.05),并与淋巴结转移相关(P＜0.05),而与肿瘤分期无明显相关性(P＞0.05),TEM-8在正常组织中基本无阳性表达,而在结、直肠癌组织中阳性表达率为90%,TEM-8与肿瘤分期(Dukes B,Dukes C样本中的含量分别为0.0278±0.0141、0.0375±0.0162,P＜0.05),淋巴结转移情况(在有淋巴结转移和无淋巴结转移的样本中的含量分别为0.0415±0.0137、0.021 30±0.005 84,P＜0.05).结论 TEM-8,VEGF-D均可作为结、直肠癌的标记物,并可反映淋巴结转移状况,TEM-8更可作为肿瘤特异性标记物.
作者：许毓敏；王文跃；贾振庚 刊期： 2008年第04期
目的 运用基因芯片技术获取正常成人脑组织与人脑胶质瘤中差异表达的基因,并对其中1条基因进行初步研究.方法 抽提正常成人脑组织与人脑胶质瘤组织中的mRNA来制备探针,经杂交、洗涤后,通过计算机观察两者表达谱的差异情况,对681F05克隆子进行Northern blot,原位杂交和生物信息学分析.结果 通过4次基因芯片筛选,获得15条与胶质瘤相关的新基因,经northern blot证实681F05基因在人正常脑组织中低表达,而在人脑胶质瘤中高表达.原位杂交得到相同的结果.BLASTn和BLASTx分析显示,它们编码蛋白与线虫Cyp-10蛋白同源性分别为52%和72%.cDNA序列分析发现这两上克隆是同一个基因(命名为cyclophilin-like gene (PPll3))的两个不同的剪切体(PPIL3a和PPll3b).结论 基因芯片筛选正常脑组织与人脑胶质瘤差异表达的基因具有样品用量少,高质量,高速度,高敏感等特性.681F05基因可能是与人脑胶质瘤形成有关的一条全长新基因.
作者：祁震宇；惠国桢；李瑶；顾少华；谢毅 刊期： 2008年第04期
我们通过实验观察不同纯度大鼠胰岛样本中干细胞标志物细胞角质蛋白(CK)-19的表达,探讨不同纯度胰岛样本中所携带的干细胞.一、材料与方法
作者：杨闯；王济明；杜成友；黄艳君；薛栋 刊期： 2008年第04期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
