张学能；李叶红；王艳波；朱朝辉；刑诗安；邬喻
目的 采用免疫组织化学方法研究不同时期胚胎皮肤中的干细胞,分析皮肤干细胞的形态、分布特点及发育过程中在胎儿皮肤中的迁徙、增殖分化特征,探讨皮肤干细胞与皮肤发生发育的关系.方法 不同发育时期胎儿皮肤,取材、固定、制成石蜡切片,SP法检测整合素-β1、角蛋白19(K19)、K14、K10和PCNA的表达.结果 胚胎发育期可见整合素-β1阳性的细胞在基底层散在分布.随胎龄增加,整合素-β1表达减弱,表达范围减小.同时,胚胎发育的不同阶段K19均在表皮基底层强烈表达.表皮分层期后,K14阳性细胞从基底层向上延伸至亚基底层.而K10作为表皮终末分化细胞的标志,主要分布在表皮的中层和外层.此外,在毛囊发育过程中,胎皮表皮嵴的细胞相互聚集成团,形成毛囊初级原基,表达整合素-β1、K19、K14及PCNA为阳性.随着毛囊的形成、成熟,皮肤干细胞主要聚集在与表皮相延续的外根鞘、毛囊隆突部及毛母质,表达整合素-β1、K19、K14和PCNA为阳性.结论 (1)皮肤的发生、发育与角蛋白的程序性改变密切相关;(2)毛囊的发生、发育受到毛乳头的诱导作用.毛囊成熟期后,皮肤干细胞主要迁移至与表皮相延续的外根鞘、毛囊隆突部及毛母质等处.此外,还发现毛乳头及其周围组织内分布着单核样细胞表达整合素-β1、K19和K14为阳性.
作者：邬彩虹；孙晓艳；付小兵；韩伊林 刊期： 2007年第09期
目的 探讨P-gP、GST-π、Topo Ⅱ在脑胶质瘤中表达的相互关系以及其临床意义.方法 采用免疫组织化学技术链霉卵白素-过氧化物酶连结法(SP法)检测101例原发性脑胶质瘤组织中P-gP、GST-π和Topo Ⅱ在不同病理分级间(WHO Ⅰ级24例;Ⅱ级34例;Ⅲ级28例;Ⅳ级15例)的表达水平,评估三者间关系和临床意义.结果 P-gP、GST-π和Topo Ⅱ阳性表达率分别为62.4%、64.3%、59.4%.P-gP及GST-π表达水平在高级别(Ⅲ-Ⅳ级)胶质瘤显著高于低级别(Ⅰ～Ⅱ级)(P＜0.05);Topo Ⅱ表达水平在高级别胶质瘤则显著低于低级别(P＜0.05).各多药耐药因子共表达的比率分别为:P-gp+GST-π:44.6%,P-gp+Topo Ⅱ:19.8%,GST-π+Topo Ⅱ:17.8%;P-gp+Topo Ⅱ+GST-π:4.95%,两个或以上MDR基因产物共表达率为87.2%,显著高于单一基因产物表达率:P-gp(5.9%),GST-π(0.9%)及Topo Ⅱ(1.9%)(P＜0.05).Topo Ⅱ阳性表达与P-gp、GST-π阳性表达呈显著负相关(P＜0.01).P-gp阳性表达与GST-π阳性表达呈显著正相关(P＜0.01).结论 原发性脑胶质瘤的多药耐药现象是由多个耐药因子共同参与作用的结果,多药耐药的发生在肿瘤细胞的病理分级间差异有统计学意义;同时检测三种耐药因子有助于优化临床化疗方案,提高化疗效果.
作者：梅文忠；何理盛；陈锦峰 刊期： 2007年第09期
目的 观察紧密连接蛋白ZO-1在实验性兔脊髓空洞前状态中的表达及变化规律.方法 通过Kaolin枕大池注射,建立兔脊髓空洞模型,分别在术后第1、3、7、14、21天,应用Evansblue法、免疫组织化学和Western blot测定60只(实验组40只,对照组20只)中国白兔血脊髓屏障功能、上颈髓中ZO-1表达含量,并探讨其内在相关性.结果 与对照组比较,实验组动物脊髓组织中Evansblue含量在术后第3天开始增高(2.79±0.42)mg/L,7 d达到高峰(3.53±0.45)mg/L,持续到14 d(3.45±0.35)mg/L,21 d好转(3.36±0.27)mg/L.Western blot结果显示,ZO-1表达含量在第3天开始减弱(195.32±23.50),第7天(126.28±27.40)、14 d(119.36±18.70)表达弱,21 d(165.70±21.20)部分恢复.同时免疫组织化学测定ZO-1表达变化趋势和Western blot结果一致.统计学分析表明,ZO-1表达与Evansblue含量在空洞前状态中的时相变化具有明显相关性(r=-0.9502,P＜0.01).结论 ZO-1的表达强度变化趋势与实验性兔脊髓空洞前状态中的血脊髓屏障功能破坏程度变化相一致,ZO-1表达下降是形成实验性脊髓空洞前状态病理改变的重要因素.
作者：李建峰；孙国柱；张庆俊 刊期： 2007年第09期
目的 检测Caspase家族中Caspase-3在膀胱移形细胞癌(BTCC)组织及正常膀胱组织中的表达,探讨Caspase-3的表达在膀胱癌发生发展中的意义.方法 采用免疫组织化学和实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-QPCR)方法对30例膀胱癌和15例正常膀胱组织中Caspase-3的表达进行检测.结果 免疫染色标本中,在正常膀胱组织和膀胱癌中Caspase-3的阳性表达率分别为80%和30%,两者差异有统计学意义(P＜0.05).Caspase-3在膀胱癌组织中的△△CT值是正常膀胱组织的1.9274(1.1248～2.5413)倍,但病理分级之间和临床分期之间均差异无统计学意义.结论 Caspase-3表达下调导致细胞凋亡减少,可能在膀胱癌的发生发展过程中起重要作用.
作者：张学能；李叶红；王艳波；朱朝辉；刑诗安；邬喻 刊期： 2007年第09期
目的 观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂对肝星状细胞增殖的影响,探讨其抗肝纤维化的可能作用机制.方法 利用胶原酶原位灌注梯密度离心方法分离大鼠肝星状细胞(HSC),利用噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞技术检测曲格列酮、15-脱氧-前列腺素J2(15-d-PGJ2)对HSC增殖及细胞周期的作用.结果 MTT检测表明曲格列酮、15-d-PGJ2在5～100μmol/L浓度范围内可显著抑制HSC的增殖,与对照组比较P＜0.01;流式细胞检测表明25、50μmol/L的曲格列酮可显著降低HSC S期细胞数量,降低细胞增殖指数,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PPARγ激动剂通过影响HSC的增殖而发挥其抗肝纤维化作用.
作者：刘菲；熊伍军；刘雁冰；赵中辛 刊期： 2007年第09期
目的 观察坐骨神经切断后大鼠脊髓中p27kip1和Skp2的表达变化.方法 将成年SD大鼠随机分为正常对照组和实验组.对实验组实行坐骨神经切断术.用Western blot和免疫组织化学技术检测脊髓中p27kip1和Skp2的表达变化.结果 Western blot结果表明坐骨神经切断后脊髓中p27kip1表达持续下降,Skp2表达上凋.免疫组织化学结合免疫荧光双标技术显示,在正常组和实验组,p27kip1和Skp2在脊髓神经元和胶质细胞均有表达.在腹角神经元,损伤后p27kip1免疫染色减弱,Skp2增强.坐骨神经损伤前后脊髓腹角p27kip1和Skp2阳性细胞数目改变呈负相关(r=-0.6892,P＜0.01).结论 坐骨神经损伤可影响脊髓中p27kip1和Skp2的表达水平及亚细胞定位,两者改变呈负相关.
作者：赵剑；史淑贤；程纯；陈梦玲；秦婧；高尚锋；沈爱国 刊期： 2007年第09期
目的 观察核因子(NF)-κB、细胞间黏附分子(ICAM)-1和炎症细胞因子在急性胰腺炎(AP)肝损伤中的作用.方法 36只SD大鼠随机分为AP组、假手术组(SO组),通过胰胆管逆行注射3.5%牛磺胆酸钠溶液制作大鼠AP模型.术后3、6、12 h胰腺组织光镜检查;肝组织光镜、电镜观察;检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT);放射免疫法(RIA)测定血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6;酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL-10;实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测肝组织TNF-α mRNA、IL-6 mRNA;肝组织Envision法免疫组织化学测定NF-κB、ICAM-1.结果 病理学证实建立AP组,出现肝损伤的病理形态变化;与SO组比较,AP组的血清ALT以及TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10水平显著增高(P＜0.05),其中血TNF-α水平在3 h升高、6 h达高水平,血IL-6在AP 3 h明显升高,下降缓慢.AP 6、12 h组肝NF-κB活化,AP各组间肝NF-κB活性表达差异均有统计学意义(x2=15.048,P＜0.05),ICAM-1无表达.AP 3～12 h内,AP组肝TNF-α mRNA在3 h明显升高、6 h高表达;AP组的肝IL-6 mRNA则在3 h已增加、3 h后缓慢下降,均显著高于各自时段的SO组(P＜0.05).结论 AP发生后,肝脏NF-κB活化,可能介导肝TNF-αmRNA、IL-6 mRNA的表达来参与肝损伤,ICAM-1对AP早期肝损伤无明显作用.
作者：万涛；卓阳；贺亚东；滕龙；方周溪；朱冠保 刊期： 2007年第09期
目的 观察亚低温条件下离体大鼠肝细胞悬浮培养后的完整性和功能.方法 离体肝细胞悬浮于添加有葡萄糖和牛血清白蛋白(BSA)的碳酸氢盐缓冲介质内30℃下孵育48 h,期间及其后测定细胞的完整性和功能指标.结果 30℃条件下离体0、24及48 h内白蛋白合成及Ⅰ相药物生物转化能力差异无统计学意义(P＞0.05),流式细胞仪活细胞计数和台盼蓝清除率显示细胞完整性差异无统计学意义(P＞0.05).结论 肝细胞混悬液内的离体肝细胞在亚低温条件下能够保持较高活力,为制备应用于生物人工肝的离体肝细胞混悬液提供了可行性.
作者：叶启发；袁金忠；明英姿；熊力；牛英 刊期： 2007年第09期
目的 观察吡啡尼酮对大鼠异位气管移植物局部纤维化和气道闭塞的抑制作用及其对缺氧诱导因子(HIF)-1α表达的影响.方法 建立大鼠同种异体异位气管移植模型,受体鼠随机分为同基因移植组、异基因移植未治疗组和吡啡尼酮组,吡啡尼酮组给予吡啡尼酮(每日600mg/kg体重);其他组不给任何药物.移植后第28天处死受体鼠并取出移植物进行病理学、免疫组织化学及原位杂交检测.结果 未处理组气管移植物可观察到各种程度类似于闭塞性细支气管炎(OB)的病理改变.与未处理组比较,吡啡尼酮组标本局部纤维化程度[(42.45±19.09)%比(91.55±12.15)%]及Ⅰ型胶原1.86±0.12比4.51±0.48、Ⅲ型胶原2.55±0.37比10.60±1.26、HIF-1α4.48±0.43比9.34±0.62、转化生长因子(TGF)-β5.00±0.49比12.86±0.96和结缔组织生长因子(CTGF)4.33±0.64比11.83±0.96的表达明显受到抑制(P＜0.01).结论 吡啡尼酮在大鼠异位气管移植模型中可能通过抑制HIF-1α的表达而抑制了OB的进展.
作者：徐进志；李野；张同；姜哲；夏求明 刊期： 2007年第09期
目的 研究合成短肽S247对呼吸机相关性肺损伤凋亡的影响,探索其在肺损伤中的防护作用.方法 30只清洁级雄性SD大鼠随机分为3组:对照组(C组)、肺损伤组(Ⅰ组)和S247治疗组(S组),每组10只,大潮气量损伤性通气4 h建立呼吸机相关性肺损伤模型(呼吸参数:Vt=40 ml/kg体重,呼吸频率=80次/min,FiO2=21%),光镜下观察肺病理改变,测定肺湿/干比;收集肺泡灌洗液(BALF),考马思亮兰法测BALF中总蛋白含量,光境下行WBC计数,免疫组织化学检查肺组织Fas、Caspase-3蛋白的表达水平,TUNEL法检测肺组织细胞凋亡情况.结果 Ⅰ组肺病理改变明显,各组肺湿/干比、BALF中总蛋白含量、WBC计数差异都有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01),Ⅰ组Fas、Caspase-3蛋白的表达水平(0.359±0.055;0.152±0.007)显著增高(P＜0.01),凋亡指数(60.000±7.461)明显增加(P＜0.01);在用S247后,Fas、Caspase-3蛋白的表达水平(0.240±0.062;0.146±0.004)显著下降(P＜0.05),凋亡指数(47.857±3.716)有所减少(P＜0.05).结论 S247能通过抑制细胞凋亡,有效降低呼吸机相关性肺损伤的程度.
作者：武庆平；王立奎；姚尚龙 刊期： 2007年第09期
目的 检测单核苷酸多态性(SNP)位点Arg399Gln在散发性结直肠癌患者和非癌对照组中的分布情况,分析其与散发性结直肠癌及其临床病理特征的相关性.方法 从178例肿瘤组织和非癌对照组的180例血样中提取DNA,采用Taqman探针技术检测Arg399Gln多态性表型,并用统计软件计算各基因型的比值比(OR)和95%可信区间(95%CI).结果 肿瘤组与对照组就XRCC1 Arg399Gln多态性的基因表型差异有统计学意义(P＜0.05);年龄不超过60岁的患者和超过60岁的患者在该位点的基因型差异有统计学意义(P＜0.05);以399Arg/Arg基因型为参照,在年龄超过50岁的人群中(OR=0.64,95%CI 0.50～0.83,P＜0.05)和男性人群中(OR=0.64,95%CI 0.51～0.79,P＜0.05)携带至少一个Gln等位基因可致罹患散发性结直肠癌的风险显著降低;XRCC1 399SNP与患者性别及散发性结直肠癌的发生部位、Dukes分期、浸润深度、淋巴结转移以及病理分型均无显著相关性(P均＞0.05).结论 XRCC1 399SNP可能通过改变DNA的损伤修复功能,成为散发性结直肠癌的易感因素.
作者：任卓；樊军卫；周崇治；裘国强；贺林；彭志海 刊期： 2007年第09期
我们通过本实验用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮细胞生长因子(EGF)诱导、无血清悬浮培养技术进行培养,获得的细胞具有多向分化潜能、表达干细胞抗原、能自我复制,也具备干细胞的特征.
作者：李进；李涛；康皓；陈振兵；陈燕花；洪光祥 刊期： 2007年第09期
急性脊髓损伤(ASCI)后,神经细胞死亡的方式不仅仅是坏死,同时细胞凋亡广泛存在[1,2].本研究旨在探讨Fas、Caspase-3基因与细胞凋亡的关系及在脊髓损伤发生发展中的作用.
作者：高万旭；程爱国；王相利 刊期： 2007年第09期
目的 探讨应用聚合酶链反应(PCR)检测慢性非细菌性前列腺炎(CPPS)患者前列腺液(EPS)中细菌基因,并与CPPS患者的临床治疗效果做相关性分析.方法 以16SrRNA基因为靶序列,设计引物及寡核苷酸探针,采用PCR法检测标准菌株及135例CPPS患者前列腺液中细菌基因.所有CPPS患者均应用抗生素和中成药规范治疗,每2周为1疗程,每2周复查EPS常规1次,必要时适当调整药物.治疗3个月时,进行疗效评估.结果 135例CPPS患者中16SrRNA检测结果阳性为78例,阳性率为57.78%.16SrRNA阳性组患者有效率84.6%,阴性组有效率52.6%;16SrRNA阳性组患者疗效明显优于阴性组.结论 大部分CPPS患者的前列腺液中可以检测到细菌的16SrRNA基因,提示细菌感染在CPPS的发病中有重要作用.
作者：陈修德；赵勇；金讯波；夏庆华；蒋绍博；熊晖 刊期： 2007年第09期
神经干细胞(NSCs)是一种具有自我更新及多向分化潜能的细胞,在胚胎及成体动物的中枢神经系统中都有存在.NSCs的发现不仅改变了人们对神经系统及其发育的固有观念,也深刻影响了对神经系统损伤及修复的认识.自其发现至今的数十年间,该项研究的发展已经有了长足的进步.然而目前我们对NSCs的研究成果并不足以使我们完整地刻画出这一细胞的形象,大量不得而知的细节限制了其在临床的应用,更多的研究停留在动物实验的阶段.现阶段对NSCs的研究集中在3个方面:细胞本身及其分化和细胞分泌产物的研究;受体对NSCs的反应;细胞移植后活体检测新技术的探索.这3个方面的研究对于跨学科合作有着更加强烈和深入的要求.在这里,谨对该研究领域所存在的一些问题进行总结,对未来的发展趋势做出展望.
作者：安沂华；张涵 刊期： 2007年第09期
目的 观察大剂量甲波尼松龙对脊髓空洞前状态蛋白激酶C(PKC)活性变化的影响.方法 用新西兰兔96只制作模型,随机分为Kaolin组、MP干预组,其中后者用大剂量甲波尼松龙(30 mg/kg体重)干预.术后1、3、7、14、21 d用光镜、干湿重法和底物磷酸化法观察两组动物上颈髓病理学演变、脊髓含水量以及胞膜、胞质PKC活性.结果 与Kaolin组比较,MP干预组动物上颈髓水肿程度减轻,高峰延迟,脊髓含水量显著降低,以3 d的含水量(68.66±0.37)%和Tarlov评分(5.00±0.00)改善为明显,同时胞膜和胞质PKC活性明显下降,以7 d[(5.76±0.45)/(3.41±0.54)pmol·mg-1·min-1]和14 d[(6.21±0.40)/(3.77±0.31)pmol·mg-1·min-1]为显著,下降达50%.结论 大剂量甲波尼松龙通过抑制脊髓空洞前状态PKC移位激活、降低PKC活性发挥对空洞前状态脊髓缺血、水肿的保护作用.
作者：孙国柱；张庆俊；赵宗茂；张更申；靳洪波 刊期： 2007年第09期
有研究表明,转染野生型p53基因可以提高恶性胶质瘤的放射治疗敏感性,p53联合伽玛刀(单次大剂量)治疗胶质瘤的研究报道尚少,本实验对此进行了研究.
作者：李彦和；徐德生；浦佩玉；康春生；董伦；贾强；张志远；王广秀；刘晓民 刊期： 2007年第09期
目的 建立一种不开颅的光化学诱导兔脑皮层梗死模型,以期为脑梗死疾病提供更为为仿真的实验研究手段.方法 兔30只,制备去除外板和板障而保留内板、直径为5 mm的颅骨骨洞,耳缘静脉注射荧光剂后应用LG-150B冷光源照射骨洞处30 min,24 h后进行5分制临床评价,48 h后处死取脑,常规病理切片.结果 模型制作成功率96.3%,病理切片显示梗死灶典型,可见组织片状坏死.结论 此模型建立方法方便可行,损伤小,维持了模型动物颅内环境的稳定,能更好地体现临床上脑梗死疾病的真实情况.
作者：游宇；赵振伟；王梁；白卉；马钰；董秀珍；高国栋 刊期： 2007年第09期
原发性肝细胞癌是我国常见的恶性肿瘤之一[1],在肝癌肝细胞损伤的情况下,可导致血浆脂质和脂蛋白结构的改变[2].载脂蛋白M(ApoM)是由Xu于近年发现并从乳糜微粒中分离及克隆的一种高密度载脂蛋白[3].本研究旨在检测肝癌患者血浆中ApoM的水平,并对ApoM和其他脂质成分进行相关性分析.
作者：蒋敬庭；张晓膺；吴昌平；Ning XU；秦锡虎；罗光华；陆明洋；郑璐；邓海峰；李敏；徐斌；鲁常青；王赫；季枚；石亮荣；Peter Nilsson-Ehle 刊期： 2007年第09期
目的 观察C6脑胶质瘤血-瘤屏障(BTB)通透性及超微结构,探讨BTB通透性增高的主要途径.方法 建立SD大鼠C6脑胶质瘤模型,以肿瘤中心、肿瘤边缘、邻近肿瘤脑组织(BAT)、远隔肿瘤脑组织(BDT)和正常脑组织(NBT)为研究点,经免疫组织化学半定量分析内源性白蛋白血管外渗,外源性硝酸镧(La3+)和辣根过氧化物酶(HRP)示踪电镜观察脑血管内皮细胞(BMECs)紧密连接(TJs)和胞饮的改变.结果 C6胶质瘤间质呈中-强度白蛋白阳性反应,BAT弱阳性,BDT与NBT阴性(P＜0.05);光镜示肿瘤区HRP在血管腔及管壁周围弥散分布,而非肿瘤区限于血管腔;电镜示肿瘤区La3+/HRP通过TJs渗至脑间质裂隙内,BAT有La3+/HRP渗至局部基膜(BM),而NBT/BDT完全封闭于管腔内;BM呈线状连续型,管腔内无瘤细胞;肿瘤BMECs胞质内吞饮囊泡数显著高于非肿瘤组(P＜0.05),但两者均几乎无充填HRP的囊泡(P＞0.05).结论 TJs开放是C6胶质瘤BTB通透性增高的结构基础和主要原因,胞饮作用甚微;C6胶质瘤诱导的屏障功能破坏随至肿瘤距离的增加而减弱;胶质瘤细胞仍具有部分诱导形成BBB的能力.
作者：吴波；黄光富；游潮；郭付有 刊期： 2007年第09期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
