学术投稿

C6脑胶质瘤血-瘤屏障通透性与超微结构研究

吴波;黄光富;游潮;郭付有

关键词:胶质瘤, 血脑屏障, 通透性, 超微结构
摘要:目的 观察C6脑胶质瘤血-瘤屏障(BTB)通透性及超微结构,探讨BTB通透性增高的主要途径.方法 建立SD大鼠C6脑胶质瘤模型,以肿瘤中心、肿瘤边缘、邻近肿瘤脑组织(BAT)、远隔肿瘤脑组织(BDT)和正常脑组织(NBT)为研究点,经免疫组织化学半定量分析内源性白蛋白血管外渗,外源性硝酸镧(La3+)和辣根过氧化物酶(HRP)示踪电镜观察脑血管内皮细胞(BMECs)紧密连接(TJs)和胞饮的改变.结果 C6胶质瘤间质呈中-强度白蛋白阳性反应,BAT弱阳性,BDT与NBT阴性(P<0.05);光镜示肿瘤区HRP在血管腔及管壁周围弥散分布,而非肿瘤区限于血管腔;电镜示肿瘤区La3+/HRP通过TJs渗至脑间质裂隙内,BAT有La3+/HRP渗至局部基膜(BM),而NBT/BDT完全封闭于管腔内;BM呈线状连续型,管腔内无瘤细胞;肿瘤BMECs胞质内吞饮囊泡数显著高于非肿瘤组(P<0.05),但两者均几乎无充填HRP的囊泡(P>0.05).结论 TJs开放是C6胶质瘤BTB通透性增高的结构基础和主要原因,胞饮作用甚微;C6胶质瘤诱导的屏障功能破坏随至肿瘤距离的增加而减弱;胶质瘤细胞仍具有部分诱导形成BBB的能力.
中华实验外科杂志相关文献
  • Caspase-3在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义

    目的 检测Caspase家族中Caspase-3在膀胱移形细胞癌(BTCC)组织及正常膀胱组织中的表达,探讨Caspase-3的表达在膀胱癌发生发展中的意义.方法 采用免疫组织化学和实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-QPCR)方法对30例膀胱癌和15例正常膀胱组织中Caspase-3的表达进行检测.结果 免疫染色标本中,在正常膀胱组织和膀胱癌中Caspase-3的阳性表达率分别为80%和30%,两者差异有统计学意义(P<0.05).Caspase-3在膀胱癌组织中的△△CT值是正常膀胱组织的1.9274(1.1248~2.5413)倍,但病理分级之间和临床分期之间均差异无统计学意义.结论 Caspase-3表达下调导致细胞凋亡减少,可能在膀胱癌的发生发展过程中起重要作用.

    作者:张学能;李叶红;王艳波;朱朝辉;刑诗安;邬喻 刊期: 2007年第09期

  • 碱性成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子联合诱导培养肌源性干细胞

    我们通过本实验用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮细胞生长因子(EGF)诱导、无血清悬浮培养技术进行培养,获得的细胞具有多向分化潜能、表达干细胞抗原、能自我复制,也具备干细胞的特征.

    作者:李进;李涛;康皓;陈振兵;陈燕花;洪光祥 刊期: 2007年第09期

  • X射线损伤修复交叉互补基因1的单核苷酸多态性与散发性结直肠癌易感性相关

    目的 检测单核苷酸多态性(SNP)位点Arg399Gln在散发性结直肠癌患者和非癌对照组中的分布情况,分析其与散发性结直肠癌及其临床病理特征的相关性.方法 从178例肿瘤组织和非癌对照组的180例血样中提取DNA,采用Taqman探针技术检测Arg399Gln多态性表型,并用统计软件计算各基因型的比值比(OR)和95%可信区间(95%CI).结果 肿瘤组与对照组就XRCC1 Arg399Gln多态性的基因表型差异有统计学意义(P<0.05);年龄不超过60岁的患者和超过60岁的患者在该位点的基因型差异有统计学意义(P<0.05);以399Arg/Arg基因型为参照,在年龄超过50岁的人群中(OR=0.64,95%CI 0.50~0.83,P<0.05)和男性人群中(OR=0.64,95%CI 0.51~0.79,P<0.05)携带至少一个Gln等位基因可致罹患散发性结直肠癌的风险显著降低;XRCC1 399SNP与患者性别及散发性结直肠癌的发生部位、Dukes分期、浸润深度、淋巴结转移以及病理分型均无显著相关性(P均>0.05).结论 XRCC1 399SNP可能通过改变DNA的损伤修复功能,成为散发性结直肠癌的易感因素.

    作者:任卓;樊军卫;周崇治;裘国强;贺林;彭志海 刊期: 2007年第09期

  • 紧密连接蛋白ZO-1在兔脊髓空洞前状态中的表达

    目的 观察紧密连接蛋白ZO-1在实验性兔脊髓空洞前状态中的表达及变化规律.方法 通过Kaolin枕大池注射,建立兔脊髓空洞模型,分别在术后第1、3、7、14、21天,应用Evansblue法、免疫组织化学和Western blot测定60只(实验组40只,对照组20只)中国白兔血脊髓屏障功能、上颈髓中ZO-1表达含量,并探讨其内在相关性.结果 与对照组比较,实验组动物脊髓组织中Evansblue含量在术后第3天开始增高(2.79±0.42)mg/L,7 d达到高峰(3.53±0.45)mg/L,持续到14 d(3.45±0.35)mg/L,21 d好转(3.36±0.27)mg/L.Western blot结果显示,ZO-1表达含量在第3天开始减弱(195.32±23.50),第7天(126.28±27.40)、14 d(119.36±18.70)表达弱,21 d(165.70±21.20)部分恢复.同时免疫组织化学测定ZO-1表达变化趋势和Western blot结果一致.统计学分析表明,ZO-1表达与Evansblue含量在空洞前状态中的时相变化具有明显相关性(r=-0.9502,P<0.01).结论 ZO-1的表达强度变化趋势与实验性兔脊髓空洞前状态中的血脊髓屏障功能破坏程度变化相一致,ZO-1表达下降是形成实验性脊髓空洞前状态病理改变的重要因素.

    作者:李建峰;孙国柱;张庆俊 刊期: 2007年第09期

  • 分级阻断肾素-血管紧张素系统对大鼠急性胰腺炎的影响及其机制

    目的 探讨分级阻断大鼠胰组织肾素-血管紧张素系统对急性胰腺炎的影响及其机制.方法 用雨蛙肽诱导大鼠急性胰腺炎模型,观察卡托普利、沙拉新及洛沙坦对大鼠胰湿重比、病理学评分、血浆AMY、MPO、MDA、NO、SOD、TNF-α及Ang-Ⅱ,胰组织MPO、MDA、NO、SOD、TNF-α及Ang-Ⅱ,免疫组织化学ABC法染色胰组织AT1、AT2的影响.结果 单用卡托普利、沙拉新、洛沙坦能降低急性胰腺炎血浆AMY、MPO、MDA、NO、TNF-α及Ang-Ⅱ,水平,升高SOD水平;降低胰组织MPO、MDA、NO、TNF-α、Ang-Ⅱ及AT1、AT2水平,升高SOD水平;但联合给药并没有进一步改善急性胰腺炎的所有指标.结论 ACE抑制剂、非选择性Ang-Ⅱ受体拮抗剂及特异性AT1阻断剂能改善急性胰腺炎时胰组织损伤程度,但联合应用无协同效果,其可能机制是阻断RAS对胰组织的胰酶过度释放、微循环障碍、氧自由基损伤、炎症介质瀑布样效应有关.

    作者:胡占良;张新宇;姜明山;韩德恩 刊期: 2007年第09期

  • 遗传高钙尿结石大鼠肾组织钙敏感受体mRNA异常表达及其意义

    目的 观察肾钙敏感受体(CaSR)在特发性高钙尿症(IH)发病中的作用.方法 雄性遗传性高钙尿结石(GHS)大鼠和正常野生型SD大鼠各6只,相同的饮食和饲养条件下,检测各组大鼠血Ca2+、P5+、1,25(OH)2D3和连续2个24h尿Ca2+的水平,使用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾组织钙敏感受体mRNA表达,PCR产物纯化后进行DNA直接测序.结果 两组大鼠血Ca2+、P5+、1,25-(OH)2D3水平相似,均在正常范围内,而GHS组平均24 h尿Ca2+排泄量为正常对照(NC)组的3.36倍[分别为(2.66±0.64)、(0.79±0.06)mg/d],两组比较差异有统计学意义(t=5.82,P<0.01);GHS组CaSR mRNA平均相对吸光度(A)值为1.354±0.108,NC组为0.602±0.218,差异有统计学意义(t=6.19,P<0.01);CaSR基因第7外显子区域cDNA测序结果与Genebank(Accession:NM-016996)公布的碱基序列比较,GHS组有4只大鼠存在第3072位碱基G/A替换,使第1024位谷氨酸(Glu)变为赖氨酸(Lys),其余2只和NC组均与Genebank公布的碱基序列一致.结论 肾组织CaSR mRNA高表达及其第7外显子Glu1024Lys替换可能是特发性高钙尿症发病的分子机制之一.

    作者:王少刚;席启林;叶章群;胡东亮;白剑;陈志强;杨为民;刘继红 刊期: 2007年第09期

  • 小型猪二尖瓣植入模型建立及远期观察

    新型人工心脏瓣膜的研制及改进,动物体内植入是临床前评估不可少的重要环节[1,2],家猪的解剖及凝血特性与人相近,但体重增长过快为其不足,容易造成人工瓣膜失功及瓣周漏而影响其用于体内植入的远期评估[3].为了新型人工机械瓣膜体内植入远期评估研究的需要,本研究旨在建立小型猪人工二尖瓣植入远期存活模型.

    作者:李德闽;张利东;申翼;王常田;任斌辉;牛冬梅;景华;黄楠 刊期: 2007年第09期

  • 活性皮肤替代物实验研究进展

    战、烧伤创面覆盖和修复问题成为战伤救治和后期康复的重点问题,而战、烧伤实验研究在创伤和创面修复上做了许多卓有意义的工作,其中目前研究热点就是以组织工程方法构建的活性皮肤替代物(living skin replacement)等研究.组织工程是一个新兴的前沿学科,其基本方法是:取少量组织,在体外分离、培养细胞,将一定量的培养细胞接种到具有一定空间结构的三维支架材料上继续培养,或将其植入体内,通过细胞生长繁殖,形成具有一定结构和功能的组织或器官.目前皮肤组织工程在其中居领先地位,迄今,已应用组织工程学方法研制出多种活性皮肤替代物并应用于临床.

    作者:王钰;李恒宇;夏照帆 刊期: 2007年第09期

  • 胃肠道间质瘤中MDm2和p53蛋白的表达与预后的关系

    目的 探讨MDm2和p53在胃肠道间质瘤(GISTs)中的表达及相关性.方法 采用免疫组织化学PV6000法检测52例GISTs中MDm2和p53的表达.结果 MDm2蛋白和p53蛋白阳性率分别为19.2%、48.1%,MDm2表达与肿瘤大小、发生部位、分级及病理性核分裂像有关(P<0.05).MDm2阳性组和阴性组5年生存率分别为40.0%和78.6%(P<0.05);p53蛋白阳性表达与肿瘤大小、部位、分级、病理性核分裂像和细胞密集程度有关,p53蛋白阳性组和阴性组5年生存率分别为56.0%和85.2%(P<0.05).结论 MDm2、p53表达与GISTs预后有关,可以作为GISTs预后的分子标记物.

    作者:梁建芳;吴人亮;徐钧;郑绘霞;王宏坤 刊期: 2007年第09期

  • 外伤性癫痫的细胞因子水平测定及其临床意义

    目的 探讨外伤性癫痫的血清白细胞介素(IL)-2、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平及意义.方法 应用放射免疫法检测56例外伤性癫痫患者的血清IL-2、IL-6、TNF-α水平,同时检测对照组45例.结果 外伤性癫痫血清IL-2、IL-6、TNF-α水平明显高于对照组(P<0.01).结论 IL-2、IL-6、TNF-α水平升高可能为外伤性癫痫的发病机制之一.

    作者:陈海;唐洲平;林志雄 刊期: 2007年第09期

  • 皮肤干细胞在胎皮中分布的免疫组织化学研究

    目的 采用免疫组织化学方法研究不同时期胚胎皮肤中的干细胞,分析皮肤干细胞的形态、分布特点及发育过程中在胎儿皮肤中的迁徙、增殖分化特征,探讨皮肤干细胞与皮肤发生发育的关系.方法 不同发育时期胎儿皮肤,取材、固定、制成石蜡切片,SP法检测整合素-β1、角蛋白19(K19)、K14、K10和PCNA的表达.结果 胚胎发育期可见整合素-β1阳性的细胞在基底层散在分布.随胎龄增加,整合素-β1表达减弱,表达范围减小.同时,胚胎发育的不同阶段K19均在表皮基底层强烈表达.表皮分层期后,K14阳性细胞从基底层向上延伸至亚基底层.而K10作为表皮终末分化细胞的标志,主要分布在表皮的中层和外层.此外,在毛囊发育过程中,胎皮表皮嵴的细胞相互聚集成团,形成毛囊初级原基,表达整合素-β1、K19、K14及PCNA为阳性.随着毛囊的形成、成熟,皮肤干细胞主要聚集在与表皮相延续的外根鞘、毛囊隆突部及毛母质,表达整合素-β1、K19、K14和PCNA为阳性.结论 (1)皮肤的发生、发育与角蛋白的程序性改变密切相关;(2)毛囊的发生、发育受到毛乳头的诱导作用.毛囊成熟期后,皮肤干细胞主要迁移至与表皮相延续的外根鞘、毛囊隆突部及毛母质等处.此外,还发现毛乳头及其周围组织内分布着单核样细胞表达整合素-β1、K19和K14为阳性.

    作者:邬彩虹;孙晓艳;付小兵;韩伊林 刊期: 2007年第09期

  • 不开颅光化学诱导兔脑皮层梗死模型的建立

    目的 建立一种不开颅的光化学诱导兔脑皮层梗死模型,以期为脑梗死疾病提供更为为仿真的实验研究手段.方法 兔30只,制备去除外板和板障而保留内板、直径为5 mm的颅骨骨洞,耳缘静脉注射荧光剂后应用LG-150B冷光源照射骨洞处30 min,24 h后进行5分制临床评价,48 h后处死取脑,常规病理切片.结果 模型制作成功率96.3%,病理切片显示梗死灶典型,可见组织片状坏死.结论 此模型建立方法方便可行,损伤小,维持了模型动物颅内环境的稳定,能更好地体现临床上脑梗死疾病的真实情况.

    作者:游宇;赵振伟;王梁;白卉;马钰;董秀珍;高国栋 刊期: 2007年第09期

  • 脊髓干细胞移植对脊髓损伤后缺氧诱导因子-1α和Caspase-3表达及神经细胞凋亡的影响

    有研究表明,神经干细胞(NSCs)移植可有助于脊髓功能的恢复[1].本实验旨在观察脊髓源性神经干细胞移植后对缺氧诱导因子(HIF)-1α和Caspase-3在脊髓损伤后表达和神经细胞凋亡的影响.

    作者:訾英;卢志远;李哲;王虹;徐斌;刘军 刊期: 2007年第09期

  • 合成短肽S247对呼吸机所致肺损伤中肺上皮细胞凋亡的影响

    目的 研究合成短肽S247对呼吸机相关性肺损伤凋亡的影响,探索其在肺损伤中的防护作用.方法 30只清洁级雄性SD大鼠随机分为3组:对照组(C组)、肺损伤组(Ⅰ组)和S247治疗组(S组),每组10只,大潮气量损伤性通气4 h建立呼吸机相关性肺损伤模型(呼吸参数:Vt=40 ml/kg体重,呼吸频率=80次/min,FiO2=21%),光镜下观察肺病理改变,测定肺湿/干比;收集肺泡灌洗液(BALF),考马思亮兰法测BALF中总蛋白含量,光境下行WBC计数,免疫组织化学检查肺组织Fas、Caspase-3蛋白的表达水平,TUNEL法检测肺组织细胞凋亡情况.结果 Ⅰ组肺病理改变明显,各组肺湿/干比、BALF中总蛋白含量、WBC计数差异都有统计学意义(P<0.05或P<0.01),Ⅰ组Fas、Caspase-3蛋白的表达水平(0.359±0.055;0.152±0.007)显著增高(P<0.01),凋亡指数(60.000±7.461)明显增加(P<0.01);在用S247后,Fas、Caspase-3蛋白的表达水平(0.240±0.062;0.146±0.004)显著下降(P<0.05),凋亡指数(47.857±3.716)有所减少(P<0.05).结论 S247能通过抑制细胞凋亡,有效降低呼吸机相关性肺损伤的程度.

    作者:武庆平;王立奎;姚尚龙 刊期: 2007年第09期

  • 过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂对肝星状细胞增殖的影响

    目的 观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂对肝星状细胞增殖的影响,探讨其抗肝纤维化的可能作用机制.方法 利用胶原酶原位灌注梯密度离心方法分离大鼠肝星状细胞(HSC),利用噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞技术检测曲格列酮、15-脱氧-前列腺素J2(15-d-PGJ2)对HSC增殖及细胞周期的作用.结果 MTT检测表明曲格列酮、15-d-PGJ2在5~100μmol/L浓度范围内可显著抑制HSC的增殖,与对照组比较P<0.01;流式细胞检测表明25、50μmol/L的曲格列酮可显著降低HSC S期细胞数量,降低细胞增殖指数,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 PPARγ激动剂通过影响HSC的增殖而发挥其抗肝纤维化作用.

    作者:刘菲;熊伍军;刘雁冰;赵中辛 刊期: 2007年第09期

  • PC-Chi涂层微弹簧圈的研制及栓塞动脉瘤的研究

    目的 将高磷酰胆碱基团接枝的壳聚糖(PC-Chi)涂在微弹簧圈(MC)上,研究评价应用多孔复合膜微弹簧圈骨架系统(PC-Chi-MC)栓塞动脉瘤的治疗效果.方法 体外研究PC-Chi与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的细胞相容性,以平行板流动装置使切应力分别为5和40 Pa,流动作用时间24 h,测定流体切应力对PC-Chi的HUVEC黏附性的影响;将Chi、PC-Chi分别涂层在MC的表面,以强力拉伸机测定多孔复合膜MC骨架系统的拉伸强度和弹性模量.将MC和PC-Chi-MC分别栓塞在侧壁型动脉瘤腔中,3个月后观察内皮细胞覆盖动脉瘤颈的情况.结果 PC-Chi与HUVEC的细胞相容性很好,细胞增殖超过了普通细胞培养板的性能(67.43%);在40 Pa切应力条件下PC-Chi表面培养内皮细胞24 h,细胞的形态尚未发生明显改变,20 mm以下位移时PC-Chi-MC与MC的应力变化差异无统计学意义(P>0.05);以Pc-Chi-MC栓塞的动脉瘤瘤颈处有较多的内皮细胞覆盖,表现出良好的治疗效果.结论 应用PC-Chi-MC栓塞AN可以使内皮细胞尽早在瘤颈部位生长、愈合,这种情况有可能减少栓塞后动脉瘤的再通、复发,从而增强动脉瘤栓塞后的长期疗效.

    作者:徐锋;王启弘;朱剑虹;周良辅 刊期: 2007年第09期

  • 肝癌患者血浆载脂蛋白M水平的检测

    原发性肝细胞癌是我国常见的恶性肿瘤之一[1],在肝癌肝细胞损伤的情况下,可导致血浆脂质和脂蛋白结构的改变[2].载脂蛋白M(ApoM)是由Xu于近年发现并从乳糜微粒中分离及克隆的一种高密度载脂蛋白[3].本研究旨在检测肝癌患者血浆中ApoM的水平,并对ApoM和其他脂质成分进行相关性分析.

    作者:蒋敬庭;张晓膺;吴昌平;Ning XU;秦锡虎;罗光华;陆明洋;郑璐;邓海峰;李敏;徐斌;鲁常青;王赫;季枚;石亮荣;Peter Nilsson-Ehle 刊期: 2007年第09期

  • p27kip1和Skp2在大鼠坐骨神经切断后脊髓中的表达

    目的 观察坐骨神经切断后大鼠脊髓中p27kip1和Skp2的表达变化.方法 将成年SD大鼠随机分为正常对照组和实验组.对实验组实行坐骨神经切断术.用Western blot和免疫组织化学技术检测脊髓中p27kip1和Skp2的表达变化.结果 Western blot结果表明坐骨神经切断后脊髓中p27kip1表达持续下降,Skp2表达上凋.免疫组织化学结合免疫荧光双标技术显示,在正常组和实验组,p27kip1和Skp2在脊髓神经元和胶质细胞均有表达.在腹角神经元,损伤后p27kip1免疫染色减弱,Skp2增强.坐骨神经损伤前后脊髓腹角p27kip1和Skp2阳性细胞数目改变呈负相关(r=-0.6892,P<0.01).结论 坐骨神经损伤可影响脊髓中p27kip1和Skp2的表达水平及亚细胞定位,两者改变呈负相关.

    作者:赵剑;史淑贤;程纯;陈梦玲;秦婧;高尚锋;沈爱国 刊期: 2007年第09期

  • ADAm23基因的研究现状与展望

    恶性肿瘤的浸润与转移是有多种因素参与、多步骤、多阶段和多基因改变共同作用的结果,其中包括细胞-细胞间、细胞-基质间黏附性的改变[1].具有调节该功能的ADAm23基因由Sagane等[2]于1998年在神经系统中首次克隆得出,随后的一系列研究证实了该基因的存在,并对其结构、功能、分布和表达情况都有了更深的认识.现就ADAm23基因的研究现状做一综述.

    作者:于洪亮;王夫景;杨维良 刊期: 2007年第09期

  • C6脑胶质瘤血-瘤屏障通透性与超微结构研究

    目的 观察C6脑胶质瘤血-瘤屏障(BTB)通透性及超微结构,探讨BTB通透性增高的主要途径.方法 建立SD大鼠C6脑胶质瘤模型,以肿瘤中心、肿瘤边缘、邻近肿瘤脑组织(BAT)、远隔肿瘤脑组织(BDT)和正常脑组织(NBT)为研究点,经免疫组织化学半定量分析内源性白蛋白血管外渗,外源性硝酸镧(La3+)和辣根过氧化物酶(HRP)示踪电镜观察脑血管内皮细胞(BMECs)紧密连接(TJs)和胞饮的改变.结果 C6胶质瘤间质呈中-强度白蛋白阳性反应,BAT弱阳性,BDT与NBT阴性(P<0.05);光镜示肿瘤区HRP在血管腔及管壁周围弥散分布,而非肿瘤区限于血管腔;电镜示肿瘤区La3+/HRP通过TJs渗至脑间质裂隙内,BAT有La3+/HRP渗至局部基膜(BM),而NBT/BDT完全封闭于管腔内;BM呈线状连续型,管腔内无瘤细胞;肿瘤BMECs胞质内吞饮囊泡数显著高于非肿瘤组(P<0.05),但两者均几乎无充填HRP的囊泡(P>0.05).结论 TJs开放是C6胶质瘤BTB通透性增高的结构基础和主要原因,胞饮作用甚微;C6胶质瘤诱导的屏障功能破坏随至肿瘤距离的增加而减弱;胶质瘤细胞仍具有部分诱导形成BBB的能力.

    作者:吴波;黄光富;游潮;郭付有 刊期: 2007年第09期

中华实验外科杂志

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