夏家红；谢艾妮；徐磊；张凯伦
目的观察大鼠局灶性脑缺血/再灌注后脑梗死体积的变化和葡萄糖转运体1(GLUT1)在缺血半影区的表达情况以及人参皂甙Rb1对其的影响.方法雄性成年SD大鼠42只,随机分成3组:假手术组、对照组和人参皂甙Rb1干预组.用线栓法复制大脑中动脉阻塞(MACO)模型,在脑缺血1 h再灌注5 h时取材,用氯化三苯基四唑氮(TTC)染色后,全自动图像分析系统进行图像分析脑梗死体积比;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定GLUT1 mRNA水平的变化;用免疫组织化学半定量测定GLUT1蛋白水平的变化.结果假手术组、对照组和人参皂甙Rb1干预组的梗死体积百分比分别为0、(0.04±0.01)%和(0.02±0.01)%;3组半影区的GLUT1 mRNA水平分别是(0.23±0.14)、(0.55±0.04)和(0.79±0.19);蛋白表达的PU值分别为(5.1±1.2)、(13.1±1.7)和(19.0±1.9).结论人参皂甙Rb1明显缩小缺血再灌注损伤后脑梗死的体积,Rb1通过上调半影区GLUT1表达以维持脑组织的能量供给可能是其发挥脑保护作用的机制之一.
作者：李方成；陶宗玉；刘安民；李军亮；吴中华；林吉惠 刊期： 2005年第02期
目的研究抗凋亡基因bag-1和bcl-2在结肠癌组织中的表达及其意义,并探讨两者间的关系.方法应用免疫组织化学链霉亲合素-生物素-过氧化物酶复合物法(SABC法)对64例结肠癌组织及10例正常结肠组织中bag-1和bcl-2基因的表达进行检测.结果 bag-1和bcl-2在结肠癌中的表达与结肠癌病理类型、肿瘤直径、浸润深度及有无淋巴结转移无关,但bag-1与病理分级、远处转移、Dukes分期及预后密切相关(P<0.05),而bcl-2与这几项临床病理因素无明显相关性(P>0.05);bag-1和bcl-2在结肠癌的发生发展过程中呈正相关(r=0.475). 结论结肠癌组织中有不同水平bag-1和bcl-2蛋白的高表达,它们可作为结肠癌早期筛选的一项指标,并对疾病的预后有着重要意义.
作者：王国斌；孙念峰；黄庆先 刊期： 2005年第02期
目的研究门静脉高压症时肠系膜血管热休克蛋白90(HSP90)的表达,并对其表达定位.方法 SD大鼠分为实验组和假手术组,用门静脉部分结扎法制作门静脉高压模型.4周后取肠系膜血管组织,采用免疫组织化学技术、免疫印迹(Western blot)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法在蛋白及mRNA水平测定门静脉高压大鼠肠系膜血管HSP90的表达.结果门静脉高压大鼠肠系膜血管HSP90的表达增强,且保持在蛋白及mRNA水平上的一致.HSP90不仅在血管内膜而且还在血管平滑肌层有明显的表达.结论 HSP90可能参与了门静脉高压内脏血管病变的形成,从而为进一步揭示门静脉高压内脏血管病变的发病机制提供了新的思路.
作者：艾建华；杨镇 刊期： 2005年第02期
目的探讨基因重组可溶性补体受体I型(sCR1)对大鼠急性脊髓损伤组织补体固有成分C9及补体调节因子Clusterin表达的影响.方法采用改良Allen重物打击法制成SD大鼠急性脊髓损伤模型,观察sCR1组与生理盐水(NS)组在伤后12 h、1、3、7、14 d时间点脊髓损伤组织中C9和Clusterin表达的部位及时程,并采用斜板实验评定两组大鼠的下肢运动功能,比较组间差异.结果 sCR1组及NS组在伤后各个时间点脊髓损伤组织中C9、Clusterin表达增强,并存在动态变化过程.sCR1组在伤后各个时间点C9表达均明显轻于NS组(P<0.01);sCR1组在伤后12 h、1、3 d时间点Clusterin表达明显轻于NS组(分别为P<0.01、P<0.01、P<0.05),伤后7、14 d两组间差异无统计学意义.sCR1组在伤后3、7、14 d时间点大鼠下肢运动功能明显优于NS组(分别为P<0.05、P<0.01、P<0.01).结论基因重组sCR1可显著抑制大鼠急性脊髓损伤组织C9和Clusterin的表达,可通过抑制补体系统激活机制减轻继发性脊髓损伤.
作者：李良满；朱悦；范广宇 刊期： 2005年第02期
我们采用光镜和电镜的方法对门静脉高压症患者的内脏血管进行观察,探讨门静脉高压症和内脏高动力循环以及内脏血管病变之间的相互关系,现将结果报道如下.
作者：李涛；杨镇 刊期： 2005年第02期
目的改进鼠肌卫星细胞体外培养方法,得到更高纯度的肌卫星细胞.方法采用成年Wistar大鼠,将两步消化法加以改进,采用Ficoll分离和差速贴壁法两步纯化得到更高纯度的肌卫星细胞.所得细胞采用免疫组织化学方法加以鉴定.结果此方法肌卫星细胞纯化率可达到98%.细胞增殖快,生长良好.结论本实验成功建立了卫星细胞纯化方法,适用于心外科及相关科室开展细胞移植和基因治疗方面的研究.
作者：夏家红；谢艾妮；徐磊；张凯伦 刊期： 2005年第02期
目的研究大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)表达脑源性神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)以及BMSC移植对脊髓损伤的治疗作用.方法取大鼠骨髓培养BMSC并传代,进行CD44、CD45和CD71免疫细胞化学染色鉴定.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测BMSC中BDNF和NGF mRNA的表达.用NYU方法建立大鼠脊髓损伤模型,将15 000个BMSC注射到损伤脊髓中.1～5周后进行BBB运动功能评分,观察BMSC在脊髓中的迁移,进行NF、GFAP和Gal-C免疫荧光检测.结果 BMSC贴壁生长,免疫细胞染色CD44(+)、CD45(-)和CD71(+),表达BDNF和NGF mRNA.移植BMSC后脊髓损伤的大鼠运动功能改善,5周后BBB评分从对照组的(11.6±1.7)分提高到(15.4±2.2)分.BMSC在脊髓内向头、尾两侧迁移约5 mm,未检测出向神经细胞诱导转化.结论 BMSC表达神经营养因子BDNF和NGF,移植后能促进大鼠脊髓损伤的运动功能恢复.
作者：吴永超；郑启新；谢宗平；王运涛；郝杰；刘晓帆 刊期： 2005年第02期
目的建立临床成人骨髓基质干细胞(MSCs)体外培养、定向诱导分化为软骨细胞的途径.方法抽取成人骨髓,Percoll密度梯度离心法进行体外培养,贴壁细胞传代,取第3代细胞在培养基中添加软骨分化诱导剂地塞米松、维生素C和不同剂量转化生长因子-β(TGF-β),培养16 d后,在倒置显微镜观察细胞形态,甲苯胺蓝染色蛋白多糖,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫细胞化学(SABC法)检测Ⅱ型胶原表达,诱导后MSCs与新型材料聚乳酸和羟基乙醇共聚物(PLGA)复合.结果 Percoll密度梯度离心法培养可获得均一的MSCs;5、10 ng TGF-β诱导分化的MSCs生长迅速,呈典型的软骨细胞形态,甲苯胺蓝染色阳性,Ⅱ型胶原表达阳性,MSCs对材料PLGA黏附力强.结论可以从成人骨髓中培养出MSCs,并可定向诱导分化为软骨细胞,5～10 ng TGF-β为佳诱导剂量,成人MSCs可用作临床自体软骨组织工程种子细胞.
作者：滕勇；胡蕴玉；王臻；李旭升；白建萍；彭磊；王军；吕荣 刊期： 2005年第02期
目的以大鼠迟发性脑血管痉挛模型为基础研究诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)在迟发性血管痉挛发展中的作用.方法 32只雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组枕大池二次注血诱导迟发性脑血管痉挛,对照组枕大池注射生理盐水.第8天行脑血管造影,枕大池抽取脑脊液测一氧化氮(NO)浓度.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和免疫组织化学法测定并评价iNOS mRNA和蛋白质在基底动脉、大脑中动脉和皮质中的表达.结果颅内动脉血管减影提示对照组颈内动脉颅内段、大脑中动脉(MCA)明显变细,大脑中动脉中段直径(MD)与镫骨动脉中段直径(SD)之比衡量大脑中动脉的管径显示实验组MCA管径较对照组MCA管径减少30%.对照组脑脊液中NO浓度为(11.70±2.62) μmol/L,实验组脑脊液中NO的浓度为(55.67±12.84) μmol/L.iNOS mRNA和蛋白质表达于基底动脉、大脑中动脉和皮质,其中基底动脉表达强.结论 iNOS作为迟发性脑血管痉挛发展中的关键因素参与血管壁的迟发性损伤.
作者：吴惺；陈彦克；马廉亭；袁先厚 刊期： 2005年第02期
目的建立高低不同转移特性人成骨肉瘤MG-63亚克隆细胞系,为研究成骨肉瘤转移机制提供较好的实验模型.方法通过体外培养和裸鼠体内移植,初步分离并建立了2个亚克隆细胞系A1和A2,并利用细胞电泳、细胞增殖、琼脂克隆形成、体外侵袭实验、裸鼠体内异位和原位移植对两者的生物学特性进行比较、分析和鉴定.结果 A1和A2的电泳率、琼脂克隆形成能力、体外侵袭能力、自发性肺转移率分别为(1.08±0.12) μm,(0.64±0.13)μm;21.0±2.3,9.5±2.9;186.0±16.7,84.0±12.6;100.00%,6.67%,A1均明显高于A2,两者的差异有统计学意义(P＜0.01).结论高低不同转移特性的人成骨肉瘤MG-63亚克隆细胞系的建立,能为成骨肉瘤转移机制的研究提供较理想的实验模型.
作者：石晓兵；陈安民；蔡贤华 刊期： 2005年第02期
脊髓损伤以往被认为是不可能治愈的疾病,但是近年来有关脊髓损伤的病理生理的研究加深了对脊髓损伤修复相关因素的认识,细胞生物学和分子生物学的发展为脊髓损伤的治疗提供了新的手段,这些都为脊髓损伤的治疗带来了希望,其中细胞移植和基因治疗是两种有前途的方法,也是目前研究的热门课题和方向.
作者：郑启新；吴永超 刊期： 2005年第02期
目的探讨LRIG1基因抑制恶性胶质瘤细胞侵袭、浸润的分子机制.方法应用脂质体介导的基因转染技术将p3XFLAG-CMV9-LRIG1质粒转染入人神经胶质瘤H4细胞系,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测转染前、后LRIG1和表皮生长因子受体(EGFR)基因mRNA和蛋白表达水平,用Boyden小室体外侵袭试验观察H4细胞通过人工重组基底膜能力的变化.结果转染p3XFLAG-CMV9-LRIG1质粒后,H4神经胶质瘤细胞的LRIG1 mRNA和蛋白表达均较对照组明显增强(P<0.01);而EGFR mRNA和蛋白表达均较对照组明显减弱(P<0.01).LRIG1质粒转染的H4细胞穿过人工重组基底膜的相对百分率为(13.3±1.8)%,明显低于未处理组和转染空载体组的穿膜细胞百分率(24.7±1.8)%,(24.0±1.5)%(P=0.008和P=0.010).结论 EGFR的过表达促进了胶质瘤的侵袭、浸润;LRIG1通过抑制EGFR逆转了恶性胶质瘤侵袭、浸润.
作者：叶飞；郭东升；易伟；牛洪泉；舒凯；万锋；卢运萍；雷霆 刊期： 2005年第02期
目的探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶/丙氧鸟苷(HSV-TK/GCV)系统对膀胱癌细胞BIU87的杀伤作用及对凋亡基因的影响.方法脂质体将TK基因成功转入BIU87,噻唑蓝(MTT)法、TUNEL法、流式细胞仪(FCM)分别检测GCV对其生长影响及凋亡率和细胞周期变化;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测bcl-2、bax、bak、Caspase-3 mRNA表达变化,比色法测定Caspase-3活性变化.结果作用5 d 1 mg/L GCV能杀死67%的细胞,100 mg/L GCV达到大杀伤率杀死97%的细胞;GCV诱导细胞凋亡,细胞周期阻滞在S和G2期;bcl-2表达降低,bax表达升高,Caspase-3表达及活性升高.结论 HSV-TK/GCV系统可有效杀伤膀胱癌细胞并引起细胞凋亡,细胞周期阻滞、bcl-2和bax表达变化、Caspase-3活化是引起凋亡发生的重要因素.
作者：毛晓鹏；丘少鹏；曹开源；袁广卿；陈显景；徐林 刊期： 2005年第02期
目的研究化疗药物阿霉素(ADM)对肿瘤细胞Fas凋亡基因的调控,并探讨其致凋亡机制.方法逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)比较经ADM处理前后肿瘤细胞胃癌ADM细胞系SGC-7901、MGC-803和肺癌细胞系A-549的Fas mRNA的表达水平,同时观察其对抗Fas抗体的敏感性,并用流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡率.结果所有3种肿瘤细胞在ADM作用下Fas表达水平显著增强,差异有统计学意义(P<0.05),同时肿瘤细胞凋亡率明显增加(凋亡率分别为40.3%、43.6%、54.4%).ADM能增加肿瘤细胞对Fas抗体的敏感性.结论 ADM上调肿瘤细胞Fas的表达,ADM与Fas抗体联合应用将增强肿瘤细胞的凋亡率,有一定的抗肿瘤临床应用前景.
作者：郑世营；张晓膺；赵军；葛锦峰；王志刚 刊期： 2005年第02期
目的观察自体微小颗粒骨复合骨髓基质细胞(MSC)或成骨细胞移植修复大鼠颅骨缺损的治疗效果.方法制作大鼠颅骨缺损动物模型,培养同种异体新生大鼠的骨髓基质细胞及成骨细胞,复合自体颗粒骨植入骨缺损区,X线摄片观察骨愈合情况;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测骨钙素、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达水平.结果植入微小颗粒骨复合成骨细胞组颅骨缺损愈合快,骨钙素、TGF-β1表达出现早,与另两组差异有统计学意义(P<0.05).植入微小颗粒骨复合骨髓基质细胞组颅骨缺损愈合时间居中,骨钙素、TGF-β 1表达早于单纯微小颗粒骨组(P<0.05).结论微小颗粒骨复合细胞移植修复颅骨缺损,细胞因子表达早,缺损愈合明显加快,具有较好的治疗效果.
作者：麻松；阎景龙；王新涛；杨显生 刊期： 2005年第02期
目的观察丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)在外源性一氧化碳(CO)抗大鼠肢体缺血再灌注(IR)所致肺损伤中的作用.方法健康SD大鼠,随机分为4组(每组n=8):对照组(Control)、Control+CO、IR和IR+CO组.复制大鼠双后肢缺血及再灌注后肺损伤模型.IR+CO和Control+CO组在再灌注前1 h或相应时间点置含CO的空气中,其余两组呼吸空气.观察大鼠肺组织学、肺组织中中性粒细胞(PMN)数目、肺组织湿重和干重之比(W/D)、丙二醛(MDA)含量以及动物生存情况变化.应用Western blotting检测肺组织中三种磷化MAPKs,即细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun 氨基末端激酶(JNK)和p38表达的变化.结果与Contorl组相比,IR组动物死亡率、肺组织PMN数目、W/D、MDA含量以及磷酸化ERK、JNK和p38表达均显著增高;与IR组相比,IR+CO组IR组动物死亡率、肺组织中PMN数目、W/D和MDA含量均显著降低、肺损伤减轻,p38表达显著增高,JNK表达显著降低,ERK表达无显著变化.结论 MAPKs信号通路参与了外源性CO抗大鼠肢体IR所致肺损伤作用的分子机制.
作者：周君琳；凌亦凌；鲁士宝；关立；刘清河；王志伟；黄欣莉 刊期： 2005年第02期
目的观察神经生长因子(NGF)对6-羟基多巴胺(6-OHDA)引起的大鼠去交感神经保护作用.方法经腹腔为大鼠注射6-OHDA(80 mg/kg体重),制作化学性交感神经末梢损伤模型后,立即肌肉注射NGF 200～1 600 BU/kg体重×10 d,每天1次.采用高效液相色谱-电化学检测器(HPLC-ECD)法测定两侧颌下腺中去甲肾上腺素(NE)的含量.结果 6-OHDA可使大鼠颌下腺中的NE的含量下降36.6%(P<0.05),NGF可防止神经损伤大鼠颌下腺NE的含量下降,并有较好的剂量-效应关系,400 BU/kg体重即可使NE维持至正常水平.结论 NGF肌肉注射对6-OHDA引起的大鼠化学性交感神经末梢损伤有良好的保护作用.
作者：刘振旗；孙辉生；高成杰；贾锐；杨静 刊期： 2005年第02期
目的用邻苯二甲酸二丁酯(DBP)诱导建立尿道下裂大鼠模型并在分子水平研究其导致尿道下裂的作用机制.方法将孕鼠在怀孕第12～19天用DBP(500 mg/kg体重)连续每天灌胃建立仔代雄鼠尿道下裂模型,并将孕鼠在第19天行破宫产取仔代雄鼠的睾丸组织,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法检测睾酮合成过程中限速酶细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、3β羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)和细胞色素P450 17α-羟化酶(P450c17)的mRNA含量水平,与正常对照组进行比较.结果 DBP诱导的尿道下裂组胎鼠睾丸组织中P450scc、3β-HSD和P450c17的基因表达水平较正常对照组均有不同程度的下降,两组间差异比较均有统计学意义(P<0.05).结论 DBP通过在性发育期干扰仔代雄鼠睾丸组织中睾酮的生物合成途径,降低了睾酮水平,导致大鼠出生后尿道下裂的出现.
作者：张炜；袁琳；吴婷；贺厚光；龚永光；王心如 刊期： 2005年第02期
近年来,我们在肛肠科门诊及住院患者的治疗中选择性的应用龙珠软膏外敷及换药,临床收到满意效果,现报道如下[1,2].一、资料与方法1.研究对象:本组病例300人,年龄16～69岁,平均43.56岁;门诊治疗245人,肛肠术后住院治疗55人;其中混合痔68例、炎性外痔47例、血栓性外痔36例、静脉曲张性外痔29例、肛裂42例、肛周脓肿23例、术后换药用药5例.患者症状表现为肛门肿痛、便血、坠胀:体征为肛门局部有肿物、炎性水肿、血栓,肛管部有裂损、出血,以及术后肛缘、肛管不同大小的创面等.
作者：王立柱；梅笑呤；陈甡 刊期： 2005年第02期
目的选择和克隆人前列腺癌(PCa)和前列腺增生(BPH)的相关基因.方法根据当前前列腺癌与前列腺增生临床常规使用的肿瘤标记物和国内外基因表达谱的研究成果,选定了7个PCa上调表达,2个PCa下调表达基因和1个内参基因,采用聚合酶链反应 (PCR)从正常人外周血DNA中扩增出上述10个基因的探针片段,并克隆至pGEM-T质粒中.重组质粒经PCR鉴定、EcoR I单酶切或PSt I和Nco I双酶切鉴定,产物电泳检测.结果检测结果表明已经成功地将10个基因的探针序列克隆入pGEM-T质粒载体中.结论前列腺癌和前列腺增生相关基因质粒构建与探针制备为临床前列腺癌的血清学诊断及与前列腺增生症的鉴别提供了实验基础.
作者：钟惟德；何慧婵；刘文华；江福能；戴奇山；李俊玲；彭志强；谢克基；魏鸿蔼；刘良式 刊期： 2005年第02期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
