学术投稿

党参根组织RNA提取的研究与优化

曹玲亚;王东;曹秋芬;高建平

关键词:党参, 总RNA提取, 改良Trizol法
摘要:目的:建立党参根组织高质量总RNA的提取方法.方法:针对党参根组织多糖含量高的特点,比较了CTAB-LiCl,CTAB-PVP,改良Trizol法3种总RNA的提取方法.结果:CTAB-LiCl法无法提取得到总RNA,CTAB-PVP法提取的总RNA有多糖等杂质污染,改良Trizol法提取的总RNA无DNA及其它杂质污染,党参根组织的产量为120.8 μg·g-1,A260/A280在1.8 ~2.0间,A260/A230大于2.0.结论:改良Trizol法操作简单,提取时间短,提取的RNA可以用于后续分子生物学研究.
中华中医药学刊杂志相关文献
  • 中药丁姜和胃膏神阙穴贴敷治疗妊娠恶阻疗效及对胃电图的影响

    目的:观察中药丁姜和胃膏神阙穴贴敷治疗妊娠恶阻60例的临床疗效及对胃电图的影响.方法:将60例妊娠恶阻患者随机分为治疗组和对照组,治疗组30例采用丁姜和胃膏神阙穴贴敷联合常规静脉输液治疗,对照组采用常规静脉输液治疗.结果:治疗后,治疗组的治愈率优于对照组(P<0.05),并且胃窦部的胃电频率及波幅接近正常人(P<0.05).结论:丁姜和胃膏神阙穴贴敷具有明显的降逆止呕作用,疗效确切,易于接受.

    作者:李红彩;于源源;苏利英 刊期: 2014年第03期

  • 不同通络中药对糖尿病大鼠坐骨神经中NF-κB活性的影响

    目的:以蛋白印记技术观察糖尿病大鼠坐骨神经中转录因子NF-κB的蛋白表达.方法:148只雄性Wistar大鼠,以STZ诱导糖尿病模型,随机分为正常组、模型组、辛味通络组、藤类通络组、虫类通络组.于治疗后2周、4周、8周处死大鼠取坐骨神经备蛋白印记观察用.结果:造模组NF-κB水平明显高于同期正常组(P<0.01),与同期模型组比较,通络中药组均能降低NF-κB的表达(P<0.01),同期治疗组之间无显著性差异.结论:不同通络中药随着疗程延长均具有延缓神经病变进程的作用,可能与调节NF-κB信号系统有关.

    作者:冷锦红;于世家 刊期: 2014年第03期

  • 门奇静脉断流术后患者应用丹参注射液观察血中氧自由基水平的变化

    目的:探讨门奇静脉断流术后的患者结合丹参注射液的应用对OFR系统的影响.方法:肝硬化门脉高压症(PHT)患者37例,肝功能均为A级;正常对照组10例,门奇静脉断流术组18例,门奇静脉断流术结合丹参注射液治疗组19例.术前、术后第3d、10 d晨空腹抽静脉血应用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD),硫代巴比妥酸(TBA)法测定丙二醛(MDA).结果:肝硬化PHT患者术前血清SOD活性二组均较对照组显著降低(P<0.01),而MDA则显著升高(P<0.01).术后3d、10 d手术组和丹参治疗组SOD活性仍明显低于对照组(P<0.01),而与术前组比术后10 dSOD活性升高有意义(P<0.05).术后3d、10d手术组和丹参治疗组MDA含量均高于对照组,术后10天的MDA含量与术前组比降低显著(P<0.05).术后10天SOD活性、MDA含量变化率比术后3d的大,丹参治疗组SOD活性、MDA含量变化率也较手术组明显.结论:SOD、MDA的变化在肝硬化PHT的形成过程中可能起重要作用;而门奇静脉断流术后治疗时间的延长上述各参数的变化趋于明显且门奇静脉断流术能逆转上述各参数的变化,而丹参注射液的联合应用又进一步降低MDA、升高SOD,随着丹参治疗时间的延长各参数的变化率也明显加大.

    作者:姚常柏;张丽红;秦晔;吴硕东;夏振龙 刊期: 2014年第03期

  • 理论创新是科学进步的里程碑

    传统中医药学是一门自然科学,已经历了数千年的发展和进步,其进步的标志不在于一方一药的发现,而在于历代医家通过自己的临床实践发前人之未发而总结起来的各家学说及某些新理论.迄今为止,公认的中医学各家学说有七大派.认为人体体质学是自明清以来形成的一个学派.能否被公认,还要等待历史的审定,是不以个人的意志为转移的.此外,扼要地介绍了提出来的新理论,主要有:“人体新系”猜想,“天地人三才医学”模式,“天人同构”论,“整体制约”论,调控情绪的“三棱镜理论”,“心肾为先天之本,肺脾为后天之本”等.其他新概念,新名词难计其数了.

    作者:匡调元 刊期: 2014年第03期

  • 从系统生物学探讨microRNA在肝癌证候中的研究

    肝癌是常见的恶性肿瘤之一.近年来对肝癌的研究,无论是中西医领域都取得了许多重要进展.主要综述中医肝癌证候目前在蛋白质组学、基因组学和代谢组学的研究现状,以及按照肝癌发生发展机制中的关键生物学事件来归纳介绍microRNA在肝癌中的研究进展,从系统生物学的角度来探讨microRNA在中医肝癌证候研究中的意义.

    作者:曹海明;武哲丽 刊期: 2014年第03期

  • 益气化痰散结方联合XELOX化疗方案治疗晚期复发性结肠癌的临床研究

    目的:探讨益气化痰散结方联合XELOX化疗方案治疗晚期复发性结肠癌的临床疗效.方法:将60例晚期复发性结肠癌患者随机分成对照组和治疗组各30例,对照组予XELOX方案化疗:奥沙利铂130 mg/m2,静滴,第1d;希罗达1000 mg/m2,口服,每日2次,第1~14 d;治疗组在化疗的同时内服益气化痰散结方,均21 d为1个周期.3周期后对临床近期疗效、疾病无进展生存期(PFS)、不良反应及生活质量进行评估.结果:两组治疗后,治疗组和对照组的有效率分别为56.7%,50.0%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗组的中位PFS为(254.00±6.25)d,对照组的中位PFS为(217.00±7.38)d,治疗组优于对照组(P<0.05);治疗组与对照组血液学毒性主要表现为白细胞减少,发生率分别为53.3%和70.0%;恶心呕吐的发生率分别为40.0%,56.7%,治疗组明显低于对照组,两组比较有显著差异(P<0.05).两组患者在治疗后生活质量评分均有明显升高,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05),两组治疗后比较差异亦有统计学意义(P<0.05).结论:与单纯化疗相比较,益气化痰散结方与化疗联合能进一步延长晚期结肠癌患者疾病无进展生存期,改善生活质量,并降低化疗毒副反应.

    作者:黄伶;郭俊华 刊期: 2014年第03期

  • 痰热清与头孢美唑联合治疗老年肺部感染疗效分析

    目的:探讨痰热清与头孢美唑联合治疗老年肺部感染的临床疗效.方法:本研究于2011年2月-2013年2月通过随机、对照、前瞻的临床研究,将在温州医科大学附属第二医院住院接受治疗的64例老年肺部感染患者按照随机数字表法随机分为研究组和对照组,其中研究组采用痰热清与头孢美唑联合治疗,而对照组则仅采用头孢美唑单独治疗,比较两组患者的临床治疗效果、临床症状缓解时间、体温及x线摄片恢复正常时间.结果:研究组患者中显效13例,有效16例,治疗的总有效率达90.62%;对照组患者中显效10例,有效14例,治疗的总有效率为75.00%;经统计分析发现研究组的总有效率(90.62%)明显高于对照组(75.00%),且差异具有统计学意义(x2=4.02,P<0.05).研究组患者的症状缓解时间、体温及x线胸片恢复正常时间均较对照组明显缩短,且差异具有统计学意义(t =6.78、4.89、5.22,P<O.05).研究组的不良反应总发生率(9.38%)与对照组(12.50%)相比较无明显差异(x2 =0.16,P>0.05).结论:痰热清与头孢美唑联合治疗老年肺部感染的总有效率明显优于单独采用头孢美唑,且可以明显缩短临床症状缓解时间、体温恢复正常时间及X线胸片恢复正常时间,安全可靠,值得临床推广应用.

    作者:周光耀;金玲湘;林巍;诸葛璐;潘陈为;郑毅 刊期: 2014年第03期

  • 导黄补血丸对缺铁性贫血和饮食失调致贫血的实验研究

    目的:通过复制缺铁性贫血和饮食失调致贫血的动物模型,观察导黄补血丸治疗贫血的作用,为临床验方的推广以及临床用药提供依据.方法:选取断乳大鼠,给予低铁饲料结合定期少量放血的方法建立缺铁性贫血大鼠模型,检测血中红细胞、血红蛋白,取血清测定血清铁以及血清总铁结合力;采取隔日禁食(不禁水)的方法,复制饮食失调致小鼠贫血的模型,检测血中红细胞、血红蛋白.结果:导黄补血丸能够升高缺铁性贫血小鼠的血红蛋白和血清铁的含量,降低血清总铁结合力,增加血清铁饱和度;导黄补血丸能够升高饮食失调致贫血小鼠的红细胞和血红蛋白含量.结论:导黄补血丸对缺铁性贫血和饮食失调导致的贫血具有较好的治疗作用.

    作者:马国平;朱萱萱;倪文澎;邱召娟;周杰 刊期: 2014年第03期

  • 桔梗皂苷-D对大鼠肝纤维化的干预作用及部分机制研究

    目的:研究桔梗皂苷-D (PD)对大鼠肝纤维化的干预作用及作用机制.方法:将大鼠随机分为5组,除对照组外,其余各组每周2次皮下注射四氯化碳(CCL4)溶液诱导肝纤维化模型,次日PD低剂量组、PD中剂量组、PD高剂量组分别给予PD 10、25、50mg·kg-1 ·d-1灌胃持续给药治疗,对照组和模型组以等量0.9%氯化钠溶液代替.给药12周后,处死大鼠采集样本,检测各组大鼠血清ALT、AST、TNF-α、血清肝纤维指标(HA、LN、PⅢP、C-Ⅳ)水平;肝组织转化生长因子-β1 (TGF-β1)、骨形成蛋白-7(BMP-7)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA的表达量;HE和天狼猩红染色观察肝组织病理学变化.结果:与模型组比较:PD各组能显著降低大鼠血清ALT、TNF-α、HA及肝组织TGF-β1mRNA水平,显著升高肝组织BMP-7mRNA水平(P<0.05);PD中剂量组和高剂量组能显著降低大鼠血清AST、LN及肝组织α-SMA mRNA水平(P<0.05);PD高剂量组能显著降低大鼠血清PⅢP、C-Ⅳ水平(P<0.05);肝组织纤维化程度明显改善.结论:PD具有抗肝纤维作用,并可能是通过降低TGF-β1和调高BMP-7的表达、抑制肝星状细胞的细胞增殖和活化,以达到抗纤维化的作用.

    作者:魏建波;刘琴;赵秋枫 刊期: 2014年第03期

  • 细胞因子在支气管哮喘发病机制中的作用及中医药对其的影响

    支气管哮喘的发病机制尚未完全阐明,许多研究发现,多种细胞信号分子及其信号通路在哮喘气道重建形成中起着重要作用.中医注重“整体调节、扶正固本、平衡阴阳”的总原则,对支气管哮喘具有良好的治疗作用.将近年来关于细胞因子,如TGF-β1、MMP-9、TIMP-1、NGF、NF-κB、IL、IFN-γ、TNF-α等在哮喘发病机制中作用及中医药对其影响的研究进行了概述,以期为探索哮喘的有效中医治法提供一定的依据,为进一步研究提供一定的思路.

    作者:陈理君;许朝霞;李学良 刊期: 2014年第03期

  • 白细胞介素4基因多态性与大鱼际掌纹特应征的相关性研究

    目的:探讨白细胞介素4(interleukin 4,IL-4)基因多态性与青岛地区汉族成人哮喘患者大鱼际掌纹特应征的相关性.方法:引入计算机识别系统,实现大鱼际掌纹特应征客观量化分级,采用SNaPshot方法检测研究对象IL-4基因启动子区rs2243250和rs2243283两个位点的基因多态性.结果:大鱼际掌纹特应征和哮喘之间呈显著性相关(P<0.001),但IL-4基因rs2243250和rs2243283基因型频率的3种遗传模型在掌纹阴性组与掌纹阳性组间差异无统计学意义(P>0.05),该基因单倍型频率在掌纹阴性组和掌纹阳性组间差异亦无统计学意义(P>0.05).结论:大鱼际掌纹特应征和青岛地区汉族成人哮喘之间具有显著相关性,但IL-4基因rs2243250和rs2243283两个位点的基因多态性与哮喘患者的大鱼际掌纹特应征无相关关系.

    作者:周兆山;吉中强;朱习军;王燕青;薛卫林;陶红卫;姜文青;梁文华 刊期: 2014年第03期

  • 名老中医治疗多囊卵巢综合征经验总结

    多囊卵巢综合征是妇科常见的内分泌紊乱性疾病,亦为疑难疾病,主要从病因病机、治法方药等方面总结了朱南孙、蔡小荪、夏桂成、肖承惊、沈绍功、尤昭玲、周仲瑛等7位名老中医治疗多囊卵巢综合征的临证经验,为该病的临床治疗提供参考.

    作者:刘颖华;王颖;郝松莉;侯丽辉 刊期: 2014年第03期

  • 祛瘀清热颗粒对血瘀模型家兔血液流变学的影响

    目的:研究祛瘀清热颗粒对血瘀模型家兔血液流变学的影响,探讨其活血化瘀功效.方法:采用家兔耳缘静脉注射高分子右旋糖酐复制家兔血瘀模型,观察祛瘀清热颗粒对家兔血液流变学各指标的影响.结果:祛瘀清热颗粒能显著降低血瘀模型家兔的全血黏度、全血还原黏度、红细胞聚集指数、红细胞电泳时间和卡松黏度等血液流变学指标.结论:祛瘀清热颗粒可显著改善血瘀模型家兔的血液流变学指标,具有良好的活血化瘀功效.

    作者:吴巧凤;郝云云;严云良 刊期: 2014年第03期

  • 类风湿Ⅰ号丸增加高度活动类风湿关节炎脾气亏虚、湿热阻络证疗效的临床观察

    目的:通过规范的临床研究,系统观察类风湿Ⅰ号丸联合免疫抑制剂甲氨蝶呤(MTX)、来氟米特(LEF)、雷公藤多苷片(TWP)对高度活动类风湿关节炎脾气亏虚、湿热阻络证的治疗,评估临床疗效.方法:将138例高度活动类风湿关节炎,中医辨证为脾气亏虚、湿热阻络证患者随机分为两组,两组均口服同剂量、同疗程MTX、LEF、TWP,治疗组加服类风湿Ⅰ号丸,观察两组治疗后各项疗效评价指标的改善情况,并记录不良反应.结果:治疗24周后两组均有明显疗效,但治疗组左右手握力、关节疼痛数、关节肿胀数、受试者疼痛VAS评分、研究者疾病总体状况VAS评分及RF优于对照组(P<0.05);治疗组晨僵时间,ESR、CRP、CCP,ACR50、ACR70及DAS28有效率明显优于对照组(P<0.01).结论:类风湿Ⅰ号丸联合MTX、LEF、TWP对高度活动类风湿关节炎有显著疗效,可迅速缓解症状,改善炎症指标.

    作者:任璇璇;宋欣伟;郑燕;关天容;戴巧定;张彦 刊期: 2014年第03期

  • 高效液相色谱法同时测定艾迪注射液中3种活性成分的含量

    目的:建立同时测定艾迪注射液中人参皂苷Rg1、紫丁香苷、黄芪甲苷含量的分析方法.方法:色谱柱为安捷伦EclipseXDB C18柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm);蒸发光散射检测器;流动相为水-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 mL·min-1,柱温为40℃.结果:紫丁香苷在15.06~ 150.62 mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9994);平均回收率为97.49%,RSD=1.25%,人参皂苷Rg1在25.03~250.31 mg·L-1,范围内线性关系良好(r=0.9997);平均回收率为97.48%,RSD=1.03%,黄芪甲苷在10.06~100.62 mg·L-1内,呈良好的线性关系(r=0.9996);平均回收率为96.62%,RSD =0.91%.结论:该方法简便、准确,重复性好,为艾迪注射液的质量控制提供了方法.

    作者:徐晓卫;潘柔和;胡思一 刊期: 2014年第03期

  • 复方黄芪首乌合剂对代谢综合征大鼠肾组织Nephrin和Podocin的调节作用

    目的:观察复方黄芪首乌合剂对代谢综合征大鼠早期足细胞损伤的保护作用及其机制.方法:采用高糖高脂饲料喂养法建立实验性代谢综合征大鼠模型,以复方黄芪首乌合剂(高、中、低剂量组)灌胃治疗,8周末收集尿标本检测24h尿蛋白(24 hPro)、尿微量白蛋白(MA)和尿白蛋白肌酐比值(albumin to creatinine ratio,ACR);免疫组织化学法检测肾皮质Nephrin和Podocin的蛋白表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾皮质Nephrin和Podocin mRNA的表达;电镜下观察肾脏基底膜和足细胞的变化.结果:造模大鼠24 hPro、MA和ACR较正常对照组明显增加(P<0.01);肾小球基底膜显著增厚,足细胞与对照组大鼠比较明显减少,足突排列紊乱,足突融合;肾皮质Podocin、Nephrin蛋白和mRNA表达明显低于正常对照组(P<0.05).经复方黄芪首乌合剂治疗8周后,24 hPro、MA、ACR均明显减少(P<0.05);肾小球基底膜病变减轻,细胞外基质增多减轻,足细胞数目增多,足细胞融合减轻;肾皮质Podocin、Nephrin蛋白和mRNA表达分别较模型组显著增加(P<0.05).结论:复方黄芪首乌合剂对代谢综合征大鼠肾脏足细胞损伤有保护作用,其作用机制可能与其参与调节代谢综合征大鼠肾组织Nephrin和Podocin的蛋白和mRNA表达有关.

    作者:王军;程晓霞;朱晓玲;王永钧 刊期: 2014年第03期

  • 中药及天然植物防晒作用研究进展

    目的:综述目前中药及天然植物防晒作用的研究进展,为中药和天然植物防晒剂的应用开发研究提供参考.方法:检索近年来有关中药和天然植物防晒的研究文献,按照防晒波段的不同将其进行分类、总结.结论:针对不同的紫外线波段有选择性的选择中药和天然植物防晒剂,对防晒剂的应用开发具有重要的指导意义.

    作者:张婷婷;张琰;刘梅;杨蒙蒙 刊期: 2014年第03期

  • 聚乙二醇化葛根素的药效学实验研究

    目的:对聚乙二醇(PEG)化葛根素前药(mPEG5000-Pur)体内药效学进行初步评价,为开发新型无溶血不良反应的葛根素制剂奠定基础.方法:采用垂体后叶素诱导大鼠急性心肌缺血模型,观察mPEG5000-Pur对心肌的保护作用;采用氯仿诱导小鼠心律失常模型,观察mPEG5000-Pur抗心律失常的作用.结果:葛根素PEG化后增强了对大鼠缺血心肌的保护作用;并且PEG化也可增强葛根素的抗小鼠心律失常作用,但是药效不呈剂量依赖性.结论:葛根素经PEG化后仍然保持了抗心肌缺血和抗心律失常的作用,且药效均优于相应剂量葛根素注射液组,这可能与PEG化后对葛根素体内组织分布改善有关.

    作者:余美荣;蒋福升;钱朝东;丁滨;高承贤;陈铌铍;丁志山 刊期: 2014年第03期

  • 茉莉根醇浸膏镇痛作用的实验研究

    目的:研究茉莉根醇浸膏对小鼠的镇痛作用.方法:采用醋酸扭体法、热板法、热水浴法、尾根加压法进行茉莉根醇浸膏对小鼠的镇痛实验研究.结果:茉莉根醇浸膏可明显抑制ip0.6%冰醋酸诱发的小鼠扭体反应,大抑制率为44.38%;药物对热板模型小鼠痛阈无显著影响;药物高剂量能显著提高热水浴刺激的小鼠痛阈(P<0.05);药物可明显提高小鼠尾根受机械刺激的痛阈(P<0.01).结论:茉莉根醇浸膏对小鼠扭体实验、小鼠尾根加压实验及小鼠热水浴甩尾实验均显示较好的镇痛作用,但对热板实验无镇痛作用.

    作者:毛磊;张玲;刘奇;丁艺雪;张如松;赵维良 刊期: 2014年第03期

  • 基于MicroRNA研究针灸调节溃疡性结肠炎作用机制的思考

    综述近年来MicroRNA及相关靶基因在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)中的研究现状.MicroRNA在UC结肠黏膜和外周血中具有特异性,可作为诊断和预后的生物学标志物;MicroRNA及其靶基因与UC发生发展密切相关,可用于揭示UC发病机制,并提出构建针灸调节UC作用机制的MicroRNA-靶基因调控网络,从基因表达与功能调控层面为针灸治疗UC作用机制提供新的思路.

    作者:窦传字;张淑静;王毅;吴璐一;包春辉;赵继梦;丰晓溟;胡智海;周次利 刊期: 2014年第03期

中华中医药学刊杂志

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主管:中华人民共和国国家中医药管理局

主办:中华中医药学会 ,辽宁中医药大学