张彦;张立德;王超凡;朱艳菊;张芳;孙科峰;尤春来;贾冬
目的:利用蛋白芯片技术和生物信息学方法从膝骨性关节炎患者血清中筛选标志蛋白质.方法:采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(surfaced enhanced laser desorption/ionization time of flight mass spec-troscopy)和弱阳离子交换(CM10)蛋白芯片对30例肝肾亏虚型膝骨性关节炎患者、35例气滞血瘀型膝骨性关节炎患者血清和40例健康者血清的蛋白质谱图进行了检测,获得的蛋白质谱采用Ciphergen公司的Biomarker Wiz-ard和Biomarker Paaern软件分析.结果:肝肾亏虚型膝骨性关节炎患者与健康者血清蛋白质谱相比有18个显著差异蛋白质(P<0.01),其中13个蛋白质在患者血清中高表达,5个蛋白质在患者血清中低表达.气滞血瘀型膝骨性关节炎患者与健康者相比有20个显著差异蛋白质(P<0.01),其中6个蛋白质在患者血清中高表达,14个蛋白质低表达.肝肾亏虚型膝骨性关节炎患者与气滞血瘀型膝骨性关节炎患者相比有5个显著性差异蛋白(P<0.01).结论:实验证明利用蛋白质组学和生物信息学方法可以从血清中筛选出膝骨性关节炎中医证型相关的标志蛋白质,而且蛋白质芯片技术对于发现和筛选血清中的膝骨性关节炎标志蛋白质是一种有效、快速的工具.
作者:王海宝 刊期: 2009年第05期
用高效液相色谱法测定了大风丸中芍药苷的含量,方法快速、灵敏、准确,可作为大风丸的质量控制方法.
作者:刘会民 刊期: 2009年第05期
目的:建立自体髓核移植致大鼠非压迫腰椎间盘髓核突出神经根性疼痛模型,以阿斯匹林为阳性对照药物,运用透射电镜观察方法探讨优化活血利水方对移植髓核、神经根超微结构的影响.方法:40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、中药组、阿斯匹林组,建立大鼠自体髓核移植致腰5神经根性痛模型,造模后1周起各组分别予生理盐水1.82mL、生理盐水1.82mL、中药汤剂1.82mL、阿斯匹林1.82mL(0.1g·kg-1·d-1),每日1次,连续用药4周.给药后第3、7天测大鼠左后肢机械刺激痛阚值、第31天取移植髓核和左侧L5神经根作组织病理学电镜观察.结果:术后3、7天模型组、西药组及中药组大鼠左后肢的机械刺激痛阈比术前显著降低.超微结构显示:对照组组织结构正常,模型组明显异常,西药组及中药组显著优于模型组,中药组略优于西药组.结论:优化活血利水方可减轻髓核和神经根病理损害程度.
作者:邰东旭;王哲;房凌桥;郝红党;柴继严;房景奎 刊期: 2009年第05期
目的:观察心衰Ⅰ号配方颗粒剂(简称:心衰Ⅰ号)对慢性心力衰竭(简称:心衰)大鼠神经内分泌相关指标的影响.方法:结扎大鼠左冠状动脉主干制成心衰模型.造模成功4周后随机分组,并开始灌胃给药.分别予心衰Ⅰ号大剂量、小剂量、卡托普利、蒸馏水等治疗观察,连续给药4周后观察以上药物等对心衰大鼠肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)、心房钠尿肽(ANP)、内皮素(ET)的影响.结果:心衰Ⅰ号和卡托普利均可降低心衰大鼠血浆RAAS和ET(P<0.05~0.01),其中以心衰Ⅰ号大剂量组下降为显著.
作者:李七一;朱波;司晓晨;夏卫军;赵惠;韩旭 刊期: 2009年第05期
目的:通过观察黄芪甲苷对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞(CFB)Ⅰ型胶原合成的影响,探讨其抗心肌纤维化的作用机制.方法:差速贴壁法提取原代CFB,采用ELISA法检测Ⅰ型胶原合成,RT-PCR法半定量检测Ⅰ胶原mRNA表达.结果:AngⅡ10-7 mol/L有促进Ⅰ型胶原mRNA表达及心肌成纤维细胞分泌Ⅰ型胶原的作用,与空白对照组比较,有显著性差异;Losartan10-6 mol/L可降低AngⅡ引起的Ⅰ型胶原mRNA表达及分泌增加,两者比较有显著性差异;黄芪甲苷100 μg/mL有降低AngⅡ引起Ⅰ型胶原mRNA表达及分泌增加的趋势,但无统计学意义,P>0.05.结论:AngⅡ可直接促进CFB分泌Ⅰ型胶原,并能显著增加Ⅰ型胶原mRNA的表达;黄芪甲苷对AngⅡ诱导的Ⅰ型胶原mRNA表达及分泌增加未见明显抑制作用.提示,黄芪甲苷抗心肌纤维化作用的产生可能不是通过直接抑制AngⅡ诱导的Ⅰ型胶原的合成增加来实现的.
作者:张冬梅;秦英;牛福玲;朱陵群;王硕仁 刊期: 2009年第05期
基于现代社会情志致病的普遍发生,对情志致病的机制进行探讨,旨在为制定有效的预防和治疗策略提供帮助.并认为体质虚弱是情志致病的内在根本,外界刺激是情志致病的诱发因素,情志异常是情志致病的中心环节.
作者:杨巧芳;孟庆刚 刊期: 2009年第05期
目的:利用体外抗氧化模型,定量比较丹参药材中的主要水溶性成分丹参素、原儿茶醛、咖啡酸和丹酚酸B的体外清除超氧阴离子能力的强弱,并探讨其抗氧化能力产生的构效关系和量效关系,为寻找丹参治疗心血管疾病主要活性成分提供依据.方法:本实验采用黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶反应,根据公式计算对超氧阴离子(O-2)的清除率,建立量效关系曲线,通过量效曲线算出清除率为50%时样品的浓度(IC50)值,IC50值反映了样品对超氧阴离子(O-2)的清除能力.结果:4种酚性化合物清除超氧阴离子的IC50值大小顺序为:丹参素>咖啡酸>原儿茶醛>丹酚酸B,表明丹酚酸B的作用强,丹参素钠、原儿茶醛和咖啡酸的作用相近.结论:丹酚酸B可能是丹参通过清除氧自由基治疗心血管痰病的重要活性成分.
作者:夏鑫华;刘梅;张志敏;武志娟;潘素滢 刊期: 2009年第05期
目的:观察血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在大鼠酒精性肝病(ALD)形成中的动态变化及中药三七对其的影响.方法:110只雄性SD大鼠随机分为正常组30只,模型组35只,三七高剂量组、三七低剂量组和硫普罗宁组各15只,连续14周白酒-玉米油-吡唑混合液灌胃建立ALD模型,造模同时三七高、低剂量组和硫普罗宁组分别灌服1.2g·kg-1·d-1、0.6g·kg-1·d-1的三七粉及0.1g·kg-1·d-1的硫普罗宁;4周末、8周末、14周末正常组分别随机处死大鼠10只,模型组分别随机处死大鼠8只用于肝脏病理变化的动态观察;14周末处死剩余所有大鼠,光镜观察肝组织脂肪变、炎症及纤维化程度,酶法测定血清ALT、AST水平,脂酶法测定血脂(TG、CHOL、HDL-C、LDL-C),ELISA法测定血清TNF-α水平.结果:与同期正常组相比,各时间点模型组大鼠肝组织脂肪变及炎症程度计分明显增高(P<0.01);14周末血清TNF-α水平明显增加(P<0.01);大鼠血清TNF-α水平与肝脂肪变及炎症程度均明显正相关(r分别为0.65、0.77,P<0.01);实验结束时模型组大鼠血清ALT、AST及CHOL、HDL-C水平较正常组明显增高(P<0.01).三七高、低剂量组及硫普罗宁组大鼠肝组织脂肪变及炎症程度、血清ALT、AST水平和血清TNF-α水平较模型组明显减轻或降低(P<0.01或0.05),对血脂未见明显影响(P>0.05).结论:用白酒-玉米油-吡唑混合液灌胃14周能成功复制大鼠ALD模型;血清TNF-α水平在大鼠ALD形成过程中逐步增加并主要与炎症程度相关;三七可明显减轻ALD大鼠肝组织脂肪变和炎症程度,降低血清TNF-α水平,后者可能是三七有效防治ALD的机制之一.
作者:荀运浩;陈芝芸;施军平;石伟珍;过建春 刊期: 2009年第05期
目的:研究冠心合剂对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响.方法:进行HUVECs原代培养,取第4~6代进行实验,随机分为6组:对照组、模型组、氟伐他汀组、冠心合剂小剂量组、冠心合剂中剂量组、冠心合剂大剂量组.Ox-LDL刺激HUVEC 6h后,大鼠药物血清与HUVECs共培养48h,Elisa法检测细胞上清液ICAM-1、VCAM-1的表达.结果:冠心合剂可明显降低ox-LDL诱导的HUVECs ICAM-1和VCAM-1表达水平.结论:冠心合剂抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制可能与其抗黏附作用进而保护血管内皮细胞功能密切相关.
作者:祝光礼;魏丽萍;方伟;陈启兰;王丽萍 刊期: 2009年第05期
目的:采用均匀设计法确定牡丹皮显微常数测定的实验条件,对不同产地、不同等级的牡丹皮进行显微特征常数的测定.方法:采用容量分析法对牡丹皮进行显微特征常数值的测定.结果:完成了8个样品的显微特征常数的测定工作,并对牡丹皮中化学成分与显微特征常数进行了相关性研究.结论:采用均匀设计法优化出的实验条件是科学合理的,不同产地不同规格的牡丹皮显微特征常数有差别.
作者:李娜;李斌;刘歆韵;康廷国 刊期: 2009年第05期
目的:研究陇中损伤散对兔激素性股骨头坏死模型的治疗效果及其作用机理.方法:成年青紫蓝兔75只,随机分为6组:正常组、模型组、健骨生丸组、陇中损伤散高、中、低剂量组.采用内毒素加激素诱导的方法建立早期激素性股骨头坏死模型.造模后2周,各组动物给予相应的药物或生理盐水灌胃.用药后2、4、8周心脏采血.第8周末处死动物,取双侧股骨头进行病理组织观察,血浆ET与NO、血浆TXB2与6-keto-PGF1α含量的变化.结果:病理学观察显示:与N组比较,M组骨组织形态学出现典型的坏死表现;各治疗组坏死程度较M组显著降低,特别是SH组尤为明显.与M组比较,第8周SH组和SM组ET水平明显降低(P<0.01),而NO水平明显增高(P<0.05).与M组比较,第2到8周SH组和SM组血浆TXB2含量明显下降,而6-keto-PGF1α含量明显上升,且第8周两者都基本接近正常值水平(P<0.05或P<0.01).SH组和SM组的T/K比值较M组有显著减小,用药后第2到8周,相应各组指标M组与N组比较差异显著(P<0.05或P<0.01),Y组与M组比较也有显著性差异(P<0.05或P<0.01).结论:陇中损伤散具有治疗早期激素性股骨头坏死的作用,其机理可能是部分改善血管内皮功能受损状态,降低血液黏稠度,降低骨内压,改善微循环.
作者:李盛华;周明旺;潘文;姚正凯;宋渊 刊期: 2009年第05期
目的:通过对有关穴位埋线文献的分析,探讨穴位埋线在临床治疗中的应用状况及发展变化趋势.方法:收集1978-2006年在国内中文医学期刊公开发表的穴位埋线文章518篇,提取相关信息,建立穴位埋线文献信息表,进行统计分析.结果:穴位埋线临床适应症随着医学的发展及社会的需求的变化出现了新的趋势.在治疗消化系统、神经精神系统痰病方面存在优势.结论:穴位埋线在新世纪应有更广泛的用途,但需要进行临床改进.
作者:左芳;楼婷 刊期: 2009年第05期
目的:比较北细辛、汉城细辛、华细辛的煎剂、散剂、95%乙醇提取物和挥发油部分镇痛作用.方法:采用醋酸扭体法、热板法观察其镇痛作用.结果:3种细辛的散剂、煎剂、95%乙醇提取物和挥发油部分均能明显降低小鼠的扭体次数,提高小鼠痛阈值.结论:3种细辛的不同提取部位均有止痛作用,从起效量看煎剂<散剂<95%乙醇提取物<挥发油部分;从作用机理上看,扭体法的起效量要小于热板法.
作者:张彦;张立德;王超凡;朱艳菊;张芳;孙科峰;尤春来;贾冬 刊期: 2009年第05期
目的:研究不同治则中药复方对胆汁淤积性肝纤维化大鼠uPA-纤溶酶-MMP级联反应纤溶途径的调控作用.方法:SD雄性大鼠60只随机分为假手术组和造模组,造模组1周后随机分为模型组、二至丸组、失笑散组及合方组.各治疗组分别给予相应药物灌胃,模型组和假手术组给予等量生理盐水灌胃,4周末处死大鼠.观察一般情况、肝功能(ALT、AST、ALP、TBil)、肝组织病理、Western印迹法检测肝组织uPA蛋白表达、ELISA法检测肝组织MMP-2、MMP-9的表达.结果:与模型组比较,3个复方均能降低胆汁淤积性肝纤维化大鼠血清ALP、ALT、AST水平(P<0.01),失笑散及合方能降低TBil(P<0.01);合方改善ALP、ALT优于两个复方.3个复方均能不同程度地减轻模型大鼠肝纤维化程度(P<0.01),合方优于两个复方.3个复方均能显著提高胆汁淤积性肝纤维化大鼠uPA、MMP-2、MMP-9的表达(P<0.01),合方对上述环节的调控优于两个复方.结论:不同治则中药复方均能改善胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝功能,减轻纤维化程度,合方作用优于两个复方,其机制可能与通过上调uPA、MMP-2、MMP-9,从而调控uPA-纤溶酶-MMP级联反应纤溶途径有关.
作者:陈珺明;安德明;柳涛;邢练军;郑培永;季光 刊期: 2009年第05期
目的:探讨清肝活血方及其拆方对酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)大鼠血浆内毒素水平及KC活化状态的影响.方法:雄性Wistar大鼠100只,SPF级,随机分成空白组、CCl4组各10只,余80只为造模组,采用复合因素复制ALD模型6周.空白组予等量生理盐水对照.CCl4组予微量CCl4腹腔注射2次/周.造模4周后将模型组随机分成4组,清肝活血方及其拆方组各15只,余为模型组.予等效剂量清肝活血方及拆方灌胃2周.检测血清ALT、AST水平;留取肝脏标本进行HE染色;采用偶氮显色法检测血浆内毒素水平;免疫组织化学染色检测肝组织CD68表达.结果采用SPSS12.0统计软件进行单因素方差分析及两两比较.结果:(1)清肝活血方及其拆方均可明显改善ALD大鼠肝脏脂肪变及肝脏炎症程度,清肝活血方>活血方>清肝方,清肝活血方优于清肝方.(2)清肝活血方能显著降低模型大鼠血清ALT水平,清肝方和活血方无明显作用;清肝方、活血方、清肝活血方均可明显降低ALD大鼠血清AST水平,组间比较无显著差异.(3)清肝活血方及其拆方均能降低模型大鼠血浆内毒素水平,组间比较无显著差异.(4)清肝活血方及其拆方均可抑制模型大鼠KC活化,活血方优于清肝活血方,清肝活血方优于清肝方.结论:清肝活血方及其拆方发挥对ALD的防治作用,其作用机理可能与降低血浆内毒素水平和抑制KC的活化有关.
作者:吴涛;柳涛;郑培永;邢练军;季光 刊期: 2009年第05期
目的:建立防风通圣丸中大黄素、大黄酚的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱(HPLC)法测定防风通圣丸中大黄素、大黄酚的含量.采用C18反相键合硅胶柱,以甲醇-0.1%磷酸(80:20)溶液为流动相,检测波长为254nm,流速为1.0mL/min.结果:大黄素对照品进样量在0.0237~0.1184 μg内呈线性关系,r=0.9998,平均回收率98.548%,RSD为1.90%.大黄酚对照品进样量在0.0318~0.1590 μg内呈线性关系,r=0.9998,平均回收率99.508%,RSD为1.52%.结论:高效液相色谱(HPLC)法测定防风通圣丸中大黄素、大黄酚的含量具有操作简便,灵敏度高,重现性好等特点,可作为防风通圣丸的质量控制方法.
作者:单玉;白鹏 刊期: 2009年第05期
目的:动态观察电针水沟穴对高血压性脑出血大鼠神经功能和血脑屏障的影响,探讨电针治疗高血压性脑出血的作用靶点.方法:SHR大鼠基础上,以胶原酶加肝素脑内尾状核注射的方法建立高血压性脑出血模型,电针水沟穴治疗,采用Bederson神经缺损体征评分法和伊文斯蓝法进行各组大鼠神经缺损行为体征的评价和血脑屏障通透性的检测,并以模型组、假手术组和对照组加以对照.结果:高血压性脑出血模型组大鼠神经缺损行为体征积分和脑组织伊文斯蓝的含量显著增高(与对照组、假手术组比较,P<0.01),电针治疗组大鼠神经缺损行为体征积分显著减少(与模型组比较,从1天起,P<0.01),脑组织伊文斯蓝的含量显著降低(与模型组比较,P<0.05~0.01).结论:电针可以有效减低高血压性脑出血大鼠血脑屏障通透性,从而减少血管源性水肿对脑组织的损害,促进高血压性脑出血大鼠神经功能的恢复.
作者:徐佳;袁凌松;周爽;李白羽;龚张斌;杨丽坤 刊期: 2009年第05期
目的:探讨中药复方柔肝抑纤饮联合二至丸在抗大鼠肝窦毛细血管化方面与单独使用柔肝抑纤饮有无差别,明确联合二至丸后对原方有无增效、协同作用,并阐明其机制.方法:建立大鼠DMN肝纤维化模型,随机分4组:A组(正常组)、B组(模型组)、C组(柔肝抑纤饮组)、D组(柔肝抑纤饮+二至丸组),分别灌服相应药物.检测血清HA、col-Ⅳ,行胶原染色(Masson),免疫组化染色观察并测定肝组织CD44、vWF、MMP-2、MMP-9的表达,电镜观察窦周隙超微结构.结果:D组与C组在降低HA含量、Masson染色百分比以及改善CD44和MMP-9免疫组化染色阳性面积均值等方面均明显优于B组(P<0.05,P<0.01),但D组与C组比较未见显著性差异(P>0.05).D组在降低col-Ⅳ、MMP-2和vWF免疫组化染色阳性面积均值等方面,作用明显优于C组(P<0.05);电镜观察发现,D组肝窦内皮失窗孔和内皮下连续性基底膜的形成等病变也相对较轻.结论:联合二至丸能使柔肝抑纤饮抗肝窦毛细血管化的作用得以增强,提高疗效.
作者:张永;韩宁;尹常健 刊期: 2009年第05期
目的:探讨猫爪草皂苷(Radix ranunculus temate saponins,RRTS)对人结肠癌LoVo细胞的增殖和凋亡作用及作用机制.方法:按猫爪草皂苷浓度分为1、10、100、500μg·mL-14个处理组和对照组(未加猫爪草皂苷),处理LoVo细胞不同时间后,倒置显微镜现察细胞形态;采用MTT法检测细胞增殖的抑制情况;流式细胞仪(FCM)分析细胞周期和凋亡率.结果:与对照组比较,猫爪草皂苷处理组可使细胞明显变圆、体积缩小、脱壁细胞增多;MTT法检测显示,猫爪草皂苷处理组随着浓度的增加和作用时间延长,对LoVo细胞的增殖抑制作用增强,并呈时间、剂量依赖性(P<0.001);随着浓度的增加凋亡率增加,药物组与对照组比较差异有显著性(P<0.001);流式细胞仪细胞周期分析图可看出细胞阻滞在C1期,随着给药浓度的增加,细胞凋亡峰(AP峰)越来越明显(图1);激光共聚焦扫描技术观察显示,细胞经皂苷作用4h、8h、12h后,线粒体膜电位下降(P<0.05).结论:猫爪草皂苷可导致人结肠癌LoVo细胞线粒体膜电位下降,具有明显抑制增殖和诱导凋亡作用.
作者:周清安;余海滨 刊期: 2009年第05期
目的:探讨姜黄煎对大鼠血管损伤后核转录因子-κB(NF-κB)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素6(IL-6)的表达影响.方法:模拟PCI术,采用ELISA法检测144只大鼠血清NF-κB与TNF-α和IL-6水平含量.其中姜黄煎干预组36只,生理盐水干预组36只,并与36只假手术组和36只健康组作为对照.结果:模拟血管急性损伤组血清NF-κB与TNF-α和IL-6含量明显高于对照组(P<0.05).假手术组血清NNF-κB与TNF-α和IL-6水平含量高于健康组,但差异不明显(P>0.05).姜黄煎组血清NF-κB与TNF-α和IL-6水平含量明显低于各对照组.结论:NF-κB与TNF-α和IL-6可能参与了再狭窄的病生理变化.检测患者血清NF-κB与TNF-α和IL-6水平含量可能有助于评估血管损伤后再狭窄病变的程度及转归.姜黄煎对大鼠NF-κB与TNF-α和IL-6水平具有下调作用.
作者:王志伏;昌艳艳;董川 刊期: 2009年第05期