姚荣彦；韩永卿；缪时英；王琳芳；宋伟
目的 探讨内质网应激(ERS)致雌激素受体阴性(ER-)人乳腺癌MDA-MB-231细胞系凋亡及钙激活中性蛋白酶2 (calpain2)在凋亡效应中的作用.方法 实验设空白对照组(DMEM)、对照组(DMEM+ DMSO)和实验组,用不同浓度衣霉素(TM)诱导乳腺癌细胞不同时间,MTT法和流式细胞术检测细胞增殖抑制率及凋亡率;Western blot法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达量,以GRP78表达高点确定ERS模型建立,检测凋亡相关蛋白caspase4和CHOP表达以及calpain及其内源性抑制酶calpastatin的表达,用ERS抑制剂(4-PBA)和calpain抑制剂(calpeptin)分别预处理细胞2h,观察对上述效应的影响.结果 9、12和18μmol/L TM诱导ERS对该细胞增殖有明显抑制效应,抑制率分别为33.88％±1.32％、5t.51％ ±8.85％和55.77％ ±2.61％,细胞凋亡率分别为9μmol/L TM组16.70％±0.46％和12μmol/L TM组28.1％±1.09％,与对照组相比有明显差异(P＜0.05);9μmol/L TM诱导细胞24 h的GRP78表达上调高(P＜0.01);ERS还可明显上调caspase4、CHOP和calpain表达,下调calpastatin表达(P＜0.01或P＜0.05),上述效应均能被4-PBA和calpeptin减弱或阻断(P＜0.05).结论 ERS可诱导MDA-MB-231细胞凋亡,calpain2参与调控凋亡发生.
作者：秦奕男；李丹丹；朱筑霞 刊期： 2016年第07期
目的 通过体外实验探讨过表达SEMA3G对人胰腺癌细胞PANC-1细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响.方法 将携带SEMA3G的慢病毒载体转染人胰腺癌PANC-1细胞系,利用real-time PCR和Western blot分别检测mRNA和蛋白质水平.CCK-8法检测细胞增殖,transwell实验检测细胞侵袭和细胞划痕试验检测细胞的迁移.结果 成功建立稳定转染SEMA3G胰腺癌PANC-1细胞系.SEMA3G病毒感染组与空白对照组和阴性对照组相比细胞的增殖能力显著降低(P＜0.05),SEMA3G病毒感染组的细胞侵袭和迁移能力明显低于两组对照组(P＜0.05).结论 SEMA3G慢病毒载体能有效过表达人胰腺癌PANC-1细胞中内源性SEMA3G蛋白,进而抑制细胞增殖、侵袭和迁移.
作者：高增法；高效；吴永娜；白仲添；张磊；李汛 刊期： 2016年第07期
目的 探讨围术期不同时机应用主动保温策略对剖宫产患者麻醉后寒战反应发生率的影响.方法 选择拟行剖宫产术患者60例,随机分为对照组(A组)、预保温组(B组)、预保温联合术中保温组(C组)和术中保温组(D组);对照组常规被动保温,其他组采用充气式保温毯进行主动保温;预保温组在麻醉前给予15 min以上的主动保温,联合保温组术前采用预保温联合麻醉后术中保温,术中保温组仅在麻醉后进行保温;记录各组患者体温变化、寒战反应发生率及寒战分级情况.结果 4组患者麻醉后核心体温均随时间降低,C组体温下降(0.39±0.26)℃,显著低于其他3组下降值(P＜0.01);4组寒战发生率分别为60.0％、13.3％、6.7％和6.7％,B、C、D组与A组相比,寒战发生率显著降低(P＜0.01).结论 采用主动充气式保温系统在不同时期的保温策略均可以有效降低剖宫产患者寒战发生率,且预保温联合术中保温效果佳.
作者：宋瑞月；易杰；黄宇光 刊期： 2016年第07期
目的 探讨3D腹腔镜肾上腺嗜铬细胞瘤/副神经节瘤切除术的有效性和安全性.方法 分析北京协和医院2013年1月至2015年11月成功实施的3D腹腔镜肾上腺嗜铬细胞瘤/副神经节瘤切除术35例,术前行内分泌、影像学及核医学等检查,并服用2～4周α受体拈抗剂.对照组为2003年2月至2010年2月,北京协和医院实施的2D腹腔镜肾上腺嗜铬细胞瘤/副神经节瘤切除术,共211例(P＜0.05).结果 手术全部成功,2组肿瘤直径、术中出血量和住院时间无显著差异.3D组手术时间显著低于2D组(P＜0.05).肾上腺嗜铬细胞瘤24例、副神经节瘤11例.3D组随访3月到30月,无复发和转移.结论 与传统腹腔镜手术相比,3D腹腔镜成像系统在空间定位及深度感觉上有明显优势,手术安全可靠并且显著缩短手术时间.
作者：文进；李汉忠；纪志刚 刊期： 2016年第07期
目的 用高通量蛋白质芯片技术筛选多发性硬化(Multiple Sclerosis,MS)患者血清中可能存在的自身抗体,为筛选新的疾病辅助性诊断的指标奠定基础.方法 15例MS患者作为疾病组,选取同样数量MS阴性并无其他自身免疫疾病的性别和年龄相匹配的健康人15位作为健康对照组.两组组内随机分为3个小组,血清充分混匀后,采用高通量蛋白质芯片法检测MS患者血清中可能存在的自身抗体.结果 通过高通量蛋白质芯片技术检测及与对照组分析比对,共筛出MS患者血清27种自身抗体.其中阳性率较高为SLC16A4、NOL3和DTX1,提示其可能是MS患者血清中特异性自身抗体的靶蛋白.阳性蛋白数量上,MS组高于HC组.功能聚类结果显示,自身抗体主要针对神经相关的蛋白质.结论 采用高通量蛋白质芯片技术,可以较为有效筛选出 MS血清中的自身抗体的靶抗原,为进一步验证MS相关自身抗体的功能及作用机制奠定了基础.
作者：周瑜；蔡孟华；何维；张建民 刊期： 2016年第07期
目的 验证TRIM69蛋白是否能够抑制HeLa和HEK293T细胞系内活化型caspase7(cleaved caspase7)和剪切型PARP(cleaved PARP)的蛋白水平.方法 构建含人源TRIM69的真核表达质粒,转染HeLa细胞和HEK293T细胞,筛选稳定表达TRIM69的细胞系,通过紫外线照射和凋亡诱导剂依托泊苷(etoposide)刺激处理,Western blot检测细胞内TRIM69蛋白、活化型caspase7和剪切型PARP蛋白水平的变化.结果 紫外线照射和依托泊苷刺激后,与对照组相比,TRIM69过表达的细胞内活化型caspase7和剪切型PARP的蛋白水平均下降(P＜0.05).结论 TRIM69蛋白的表达可抑制紫外线或依托泊苷刺激时HeLa和HEK293T细胞内凋亡相关蛋白活化型easpase7和剪切型PARP的蛋白水平.
作者：姚荣彦；韩永卿；缪时英；王琳芳；宋伟 刊期： 2016年第07期
目的 探讨长期六价铬接触对居民的外周血红细胞(RBC)参数及尿铬的影响.方法 以锦州某有50年六价铬污染历史的铁合金厂为中心,采取整群随机抽样方法,选取附近村庄的135名居民进行健康调查,并采集其空腹外周静脉血和晨尿用于检测、分析.结果 对不同外周血红细胞参数与居民尿铬水平进行稳健回归分析,调整性别、年龄、BMI,吸烟和饮酒等因素后,随着尿铬浓度增加,RBC数量下降(β=-0.09,P＜0.01),而MCH(β =1.71,P＜0.01)、MCV(β =0.29,P＜0.05)上升.进一步分层分析发现,MCV在不同性别间及≤60岁的人群中与尿铬水平存在关联(P＜0.05).RBC在女性中与尿铬水平有关联(P＜0.05),而MCHC在男性中有关联(P＜0.05).结论 长期暴露于六价铬污染对当地居民的外周血红细胞参数产生了一定的影响.RBC随尿铬浓度升高而减少,而MCH与MCV水平呈现随尿铬升高而增大的现象.
作者：陈洁瑛；魏岚萍；柳晓琳；程晓萍；许群 刊期： 2016年第07期
miRNA相关的单核苷酸多态性可以影响肿瘤的发展、治疗效果和临床结局.因此,作为生物标志物,miRNA相关的单核苷酸多态性可以用来评估个体对肿瘤的易感性,预测患者的临床结局,进而,为肿瘤的临床治疗提供新的策略.
作者：孙长杰；邱长春；刘吉成 刊期： 2016年第07期
目的 探讨miR-96和转移抑制因子1(MTSS1)在前列腺癌(PCa)组织中的表达及其临床意义.方法 收集PCa患者标本89例,癌旁组织作为正常对照,分别用原位杂交及免疫组化检测PCa组织及癌旁组织中miR-96和MTSS1的表达水平,并对二者进行相关性分析.结果 89例PCa组织中miR-96阳性表达率为87.64％,显著高于癌旁组织(P＜0.01);而MTSS1蛋白阳性表达率为16.85％,显著低于癌旁组织(P＜0.01);miR-96的表达随着Gleason评分和临床分期演进而增加(P＜0.05),有骨转移的miR-96的表达高于无骨转移组(P＜0.05);MTSS1的表达随着Gleason评分和临床分期演进而下调,且有骨转移的MTSS1的表达显著低于无骨转移组(P＜0.01);miR-96表达与MTSS1的表达呈显著负相关(P＜0.01).结论 miR-96与MTSS1可能是PCa骨转移的重要生物学标志.
作者：吴兴成；周毅；郑国洋；肖雨 刊期： 2016年第07期
目的 研究大鼠左心室前壁(相当于心肌发生梗死的梗死区和边缘区)是否存在转移核糖核酸来源的小片段RNA(tRFs)的表达.方法 分离出大鼠左心室前壁(相当于心肌发生梗死的梗死区和边缘区)的心肌组织并提取总RNA.使用Illumina技术对小片段RNA进行测序,以获的该两个区域的50 nt以下小片段RNA的序列及表达量信息.利用Fstax和Bowtie软件,及Perl语言编程对长度为30 ～ 36 nt部分的小片段RNA进行注释,并比较两个区域tRF表达量差异.结果 大鼠心脏左心室前壁(相当于心肌发生梗死的梗死区和边缘区)的心肌组织存在tRF表达,而来源于tRNA的tRFs分别占总小片段RNA的9.15％和7.30％.且两个区域的经鉴别的28中tRFs种类及表达量十分接近.无论是相当于梗死区还是相当于边缘区的心肌组织,GlyGCC和ValCAC两个tRNA来源的tRFs占了所有tRFs的84.73％和84.66％.每一种tRNA来源的tRFs在两个区域间的表达差异小于4％.结论 生理状态下心肌组织存在tRF表达,相当于心肌发生梗死的梗死区和边缘区的心肌tRFs表达谱是十分接近的.
作者：许甘霖；齐绪峰；蔡冬青 刊期： 2016年第07期
目的 探讨FOS相关抗原-1(Fra1)特异性小分子抑制剂JQ1对肿瘤相关巨噬细胞表型以及小鼠乳腺癌生长和转移的影响.方法 CCK8检测JQ1的细胞毒性;Western blot检测RAW264.7细胞Fra1蛋白水平;RT-qPCR和流式细胞术检测JQ1处理巨噬细胞后M1/M2相关表型分子的变化;Transwell细胞迁移实验检测JQ1处理后的RAW264.7细胞对4T1乳腺癌细胞系迁移能力的影响;小鼠荷瘤实验检测JQ1联合紫杉醇对小鼠乳腺癌的治疗效果.结果 JQ1能够抑制巨噬细胞Fra1蛋白表达和向M2型极化,降低巨噬细胞促进乳腺癌细胞迁移的能力(P＜0.05);JQ1联合紫杉醇治疗明显降低小鼠乳腺癌的原位生长和肺转移(P＜0.05).结论 JQ1通过抑制巨噬细胞Fra1蛋白表达来抑制巨噬细胞向M2型极化,降低肿瘤细胞迁移能力,进而减少小鼠乳腺癌肿瘤原位生长和肺转移.
作者：吴鹏；郭建；王威；刘妍；赫慧文；陈翀；罗云萍 刊期： 2016年第07期
糖尿病神经病理性疼痛和皮肤瘙痒症是糖尿病常见的并发症.但是神经病理性疼痛和皮肤瘙痒症发病机制仍不清楚.本文讨论神经病理性疼痛和瘙痒可能的发病机制,包括高血糖引起的代谢紊乱、微血管病变、自身免疫等.
作者：赵欣；申乐；许力；黄宇光 刊期： 2016年第07期
PAX6是PAX基因家族重要成员,在进化上高度保守,编码的转录因子在转录调控过程中发挥重要作用,参与胚胎发育、肿瘤发生等多种重要生物学过程.研究发现PAX6在肺癌、乳腺癌、胰腺癌、前列腺癌和胶质瘤的发生发展中扮演重要角色,它能调控cdc2、cyclin D1、P21、P27、MMP-2/9和VEGFA等靶基因表达,调控细胞增殖、凋亡、周期、侵袭和血管生成,其调控和功能的异常与肿瘤的发生发展密切相关.PAX6有望成为肿瘤治疗的潜在靶点.
作者：任佳琦；袁宁潞；闫冬；田谱；徐苗 刊期： 2016年第07期
目的 探讨非肌肉肌球蛋白重链(MYH9)在肝癌组织中的表达及通过沉默MYH9基因对肝癌细胞系SMMC-7721的增殖及凋亡的影响.方法 收集50组人肝癌组织及癌旁组织,选用人肝癌细胞系SMMC-7721和HepG2及人正常肝细胞系LO2,免疫组织化学方法及Western blot检测肝癌组织及癌旁组织中MYH9蛋白的表达,Western blot检测SMMC-7721、HepG2及L02中MYH9蛋白的表达;将MYH9 siRNA转染SMMC-7721,CKK8法及流式细胞术检测沉默MYH9对肝癌细胞增殖及细胞凋亡的影响.结果 MYH9蛋白在肝癌组织中的表达明显高于癌旁(P ＜0.05);MYH9蛋白在SMMC-7721及HepG2中的表达均明显高于L02(P＜0.05);沉默MYH9基因可抑制细胞增殖(P＜0.001),促进细胞凋亡(P＜0.05).结论 MYH9蛋白在肝癌组织的表达显著高于癌旁组织;MYH9低表达能有效抑制肝癌细胞的增殖,促进其凋亡.
作者：蒋宁；周宝勇；廖锐；谢雨潇；范凯；彭聪；杜成友 刊期： 2016年第07期
目的 探讨Rab27B在胃癌细胞系MKN-45增殖和凋亡中的作用.方法 构建Lv-Rab27B-EGFP表达载体并转染细胞作为实验组,以Lv-EGFP空载体转染细胞作为对照组,正常MKN-45作为空白组,CCK8测定细胞的增殖,流式细胞术检测细胞的周期和凋亡,Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bc1-2和caspase3的表达.结果 与阴性对照组和空白组细胞比较,实验组细胞的增殖受到抑制(P＜0.05),细胞周期显示有丝分裂受阻于G1期,出现凋亡增多(P＜0.05).与对照组比较,实验组细胞促凋亡蛋白Bax表达量增加(P＜0.05),抑凋亡蛋白Bc1-2表达量显著下降(P＜0.05),caspase3蛋白也明显升高(P＜0.05).结论 Rab27B过表达可以调节细胞周期而抑制人胃癌细胞系MKN-45增殖,要通过上调Bax和caspase3蛋白,以及下调Bc1-2蛋白表达来促进细胞凋亡.
作者：李小山；李国利；冯晓灵；刘丹；马强；何雪莲 刊期： 2016年第07期
目的 探讨IgE高亲和力受体FcεR1在高脂饮食(HFD)诱导的小鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)中的作用.方法 选取野生型(WT)雄鼠和IgE高亲和力受体FcεR1敲除(FcεR1-/-)雄鼠各10只,均给予HFD诱导NAFLD模型,每周固定时间称取小鼠体质量.12周后处死小鼠,称取小鼠体质量,收取血及肝组织并检测肝功能相关指标.结果 FcεR1-/-小鼠与WT小鼠相比,体质量增加的同时(P＜0.05),肝脏体重比增高(P＜0.05),血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(CHOL)及肝组织TG均升高(P＜0.01),肝组织Ⅲ型胶原(collagen Ⅲ)mRNA表达升高(P＜0.01),NAFLD症状严重.结论 IgE高亲和力受体FcεR1可能具有保护NAFLD诱导肝损伤的作用,其机制可能是通过降低体质量和改善脂质代谢实现的.
作者：崔杏杏；李瑶；任梦；张孝国；张琨；陈士俊；王婧 刊期： 2016年第07期
循环肿瘤DNA (ctDNA)检测是一种新兴技术,在胶质瘤的早期诊断、疗效监测以及个体化治疗方案制定中有重要意义.异柠檬酸脱氢酶(IDH)基因突变、表皮生长因子受体vⅢ(EGFRvⅢ)基因突变、06-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)启动子甲基化、染色体杂合性缺失(LOH)是近期胶质瘤ctDNA的研究热点.
作者：郭晓鹏；高路；汪强；幸兵 刊期： 2016年第07期
目的 探讨胶质瘤相关癌基因2(Gli2)对肝癌细胞SMMC-7721体外血管生成作用及机制.方法 设干扰组、对照组和空白组;构建靶向Gli2的shRNA重组慢病毒和阴性对照慢病毒,转染到SMMC-7721细胞,RT-qPCR和Western blot检测沉默效率;用体外血管生成实验检测血管生成能力;用ELISA检测SMMC-7721细胞上清液中VEGF-A、MMP-2分泌水平;用RT-qPCR、Western blot检测细胞内VEGF-A、MMP-2的表达差异.结果 shRNA慢病毒转染率为90％左右,干扰组与对照组和空白组相比Gli2表达降低(P＜0.05);血管生成能力减弱(P＜0.05);上清液中VEGF-A含量下降(P＜0.05);细胞中VEGF-A、MMP-2表达明显降低(P＜0.05).结论 沉默Gli2的表达能够抑制肝癌细胞SMMC-7721血管生成,其机制可能与VEGF-A、MMP-2的下调有关.
作者：李建水；吴斌；严舒；邓大炜；曾丽娟 刊期： 2016年第07期
目的 分析细胞中与PIH1D1相互作用的蛋白.方法 构建稳定表达FLAG-HA双标签标记的PIH1D1蛋白的HEK293T细胞株,利用FLAG-HA串联亲和纯化(TAP)双标签纯化实验,对目的条带进行质谱分析.结果 成功构建稳定表达FLAG-HA双标签标记的PIH1D1细胞株.通过质谱分析得到了PIH1D1相互作用的蛋白数据,包括细胞质内RNA PolⅡ组装复合物成员RPAP3、UXT、PFD2和PFD6等,凋亡复合物成员MONAD/WDR92等,钙调蛋白信号通路中的PIP和CALM1以及代谢通路中的PKM和LCN1等.结论 PIH1D1与细胞中RPAP3、UXT、PFD2、PFD6、MONAD/WDR92、PIP、CALM1、PKM和LCN1等相互作用,提示PIH1D1可能参与细胞中RNApol Ⅱ组装、细胞凋亡、钙调蛋白通路等多种生理过程.
作者：章元；张业 刊期： 2016年第07期
目的 探讨miR-150对糖尿病肾病小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)中趋化因子受体4(CXCR4)蛋白表达的影响.方法 提取糖尿病肾病(DN)小鼠与正常小鼠MSCs,通过成骨、成脂诱导及表面分子的特征鉴定MSCs;通过RT-PCR检测DN小鼠与正常小鼠MSCs中miR-150的表达情况;Western blot检测CXCR4和基质细胞衍生因子-l(SDF-1)蛋白的表达;Transwell实验检测细胞迁移能力.结果 MSCs诱导分化为脂肪细胞和骨细胞,并且其CD29(97.6％±2.2％)和CD90(99.1％±0.6％)表达阳性,CD45呈阴性表达(17.3％±4.5％),符合干细胞特性.miR-150在DN组MSCs中呈低表达(P＜0.05),在正常小鼠MSCs中,抑制miR-150表达后,CXCR4蛋白表达明显增加;过表达miR-150后,CXCR4及SDF-1的表达显著降低(P＜0.05).结论 DN组MSCs中miR-150表达异常可能是其表达迁移相关蛋白异常的重要原因.
作者：武天慧；彭睿；孙艳；文利；易红；李爱玲；彭惠民；张政 刊期： 2016年第07期
基础医学与临床杂志
主管:北京市科学技术协会
主办：北京生理科学会
