崔云华；周爽；吴焕淦；王晓梅；谭琳蓥；刘慧荣
背景:成骨细胞分泌的核核因子kκ B受体活化素配体的主要作用为保持破骨细胞的分化和活性,抑制破骨细胞的凋亡.目的:观察脂联素对成骨细胞核因子kκ B受体活化素配体表达的影响,拟进一步探讨其对破骨细胞生成的作用.设计、时间及地点:单一样本观察,于2005-08/2006-03在中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所完成.材料:外科手术中弃之5份取正常成人(35～55岁)髂前上棘松质骨由供者自愿提供;人重组脂联素蛋白购自Calbiochem公司.方法;正常成人髂前上棘松质骨体外培养成骨细胞.分别用0,3,10和30 mg/L脂联素干预人成骨细胞48 h.成骨细胞和CD14+外周血单核细胞共培养14 d,用30 mg/L脂联素干预14 d,以25μg/L 巨噬细胞集落刺激因子+50 μg/L核因子k B受体活化素配体干预14 d作为诱导破骨细胞阳性对照.主要观察指标:分别采用荧光定量聚合酶链反应和酶联接免疫吸附剂测定的方法检测核因子k B受体活化素配体的表达;并用脂联素蛋白干预成骨细胞与外周血单核细胞共同培养系统,观察对破骨细胞生成的作用.结果:①脂联素呈剂量和时间依赖性促进人成骨细胞核因子κ B受体活化素配体的表达.②脂联素呈时间和剂量依赖性促进人成骨细胞可溶性破骨细胞异化因子蛋白的分泌.③脂联素干预成骨细胞与CD14+外周血单核细胞共同培养系统可诱导破骨细胞生成.结论:脂联索可通过诱导成骨细胞核因子κ B受体活化素配体表达,诱导破骨细胞生成.
作者：杨玲凤；谢辉；袁凌清；罗湘杭 刊期： 2008年第24期
背景:组织工程骨的血管化是构建过程中的关键环节.目的:动态观察带蒂筋膜瓣包裹组织工程骨的血管化过程,以及其修复大段骨缺损的一般规律.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-10/2006--04在南方医科大学南方医院创伤骨科实验室完成.材料:6月龄健康新西兰大白兔12只双侧髂骨抽取骨髓分离骨髓基质干细胞诱导分化成骨细胞.圆柱状(3×15)mm多孔β-磷酸三钙为法国贝奥路公司产品.方法:将成骨细胞与β-磷酸三钙复合培养7 d后细胞量达到1×109 L-1为组织工程骨,实验组兔左侧前肢内侧剥离带蒂筋膜瓣(2×1.5)cm包裹圆柱状组织工程骨植入1.5锄桡骨缺损处,对照组于同一只兔右侧桡骨1.5 cm骨缺损处植入未包裹组织工程骨.主要观察指标:植入后2,4,6,8,12周进行大体观察、组织学、放射学、骨密度和放射性核素骨显像检测.结果:①从第4周以后各时间点实验组修复效果均优于对照组,X射线相对阻射值定量分析实验组的评分高于对照组(P<0.05),骨密度值高于对照组(P<0.05),放射性强度高于对照组(P<0.05).②从第4周以后各个观察点实验组在血管化程度、新骨形成量、材料降解速度、骨缺损修复时间、骨修复改建质量都优于对照组.结论:采用蒂筋膜瓣包裹组织工程骨修复骨缺损,4周后,在血管化程度、新骨形成量、材料降解速度及骨缺损修复时间方面均优于无筋膜包裹的组织工程骨,提示早期的快速血管化直接影响到骨缺损修复的全过程.
作者：刘勇；裴国献；江汕；梁双武；赵培冉 刊期： 2008年第24期
目的:大强度运动不利于人体脂蛋白的改善,只有低强度、长时间的有氧运动能有效地改善脂蛋白水平,防止疾病的发生.实验观察白藜芦醇对大强度运动训练大鼠血浆脂质过氧化水平和血脂含量的影响.方法:实验于2004-03/06在陕西师范大学运动人体科学实验室完成.①实验动物:选择雄性SD大鼠30只,随机分为对照组、运动组、白藜芦醇+运动组,每组10只.实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求.②实验方法:运动组大鼠于动物跑台上进行8周的大强度运动训练,每天训练30 min,每周6天,坡度为0,跑速每周递增,分别为15 m/min,22 m/min,27 m/min,31 m/min,35 m/min,38 m/min,40 m/min,42 m/min.白藜芦醇+运动组每天按50 mg/kg体质量的剂量灌喂白藜芦醇,其他两组灌喂同剂量的牛理盐水.末次训练结束后,禁食8 h,乙醚麻醉,股动脉取血,肝素抗凝,制备血浆.③实验评估:测定血浆中超氧化物歧化酶活性、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量,三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇,低密度脂蛋白胆固醇含量.结果:30只大鼠均进入结果分析.运动组、白藜芦醇+运动组大鼠血浆丙二醛、低密度脂蛋白胆固醇水平较运动组分别下降47.7%(P<0.01)和15.0%(P<0.05),血浆谷胱甘肽过氧化物酶、高密度脂蛋白胆固醇水平较运动组分别升高10.1%(P<0.05)和16.6%(P<0.05).结论:白藜芦醇对大强度运动所引起的抗氧化能力下降和脂质代谢紊乱有明显的改善作用.
作者：张琳；武胜奇；熊正英；邓树勋 刊期： 2008年第24期
目的:程序性细胞死亡分子5作为一个重要的凋亡正调控分子,在许多疾病的发生发展过程中起着重要的作用,但有关其在类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞中的作用研究甚少.实验拟验证程序性细胞死亡分子5在类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞中的表达水平及细胞定位分布,探讨程序性细胞死亡分子5在类风湿关节炎发病中的可能作用.方法:实验于2005-06/2006-10在北京大学人民医院关节病诊疗研究中心完成.①实验材料:滑膜均取材于北京大学人民医院关节病诊疗研究中心行人工全膝关节表面置换术的类风湿关节炎或骨关节炎患者.所有患者均参照美国风湿病学会标准确诊.术前获得患者知情同意,并经北京大学人民医院伦理委员会批准.②实验方法:原代培养并传代分离获得型别均一的成纤维样滑膜细胞,提取细胞RNA和蛋白.③实验评估:实时定量聚合酶链反应及蛋白免疫印迹检测类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞和骨关节炎成纤维样滑膜细胞中程序性细胞死亡分子5 mRNA和蛋白的表达水平:制备细胞爬片采用免疫组织化学技术分析程序性细胞死亡分子5在成纤维样滑膜细胞中的定位分布特征.结果:①相对于骨关节炎,分离培养的类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞中程序性细胞死亡分子5在mRNA和蛋白水平上表达下调.②类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞中程序性细胞死亡分子5的下调与抗凋亡分子Bcl-2的上调是协调一致的.③程序性细胞死亡分子5蛋白主要定位于体外培养的成纤维样滑膜细胞的胞浆中.结论:程序性细胞死亡分子5可能参与类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞对凋亡刺激信号所产生的凋亡抑制过程,在类风湿关节炎的病理演变过程中可能具有抑制凋亡的作用.
作者：李云鹏；吕厚山；王宁；关振鹏 刊期： 2008年第24期
目的:为寻找一种操作简便、结果稳定可靠的组织处理及切片染色技术,尝试应用组织切片手工显微切割后快速提取DNA的方法,观察提取的DNA质、量是否能满足后续分子水平研究的需要.方法:实验于2004-07/2007-07在广东医学院病理学实验室完成.取广东医学院附属医院病理科提供的子宫颈癌石蜡包埋组织切片,将切片贴于载玻片长时间完全脱蜡后,用苏木精对细胞核进行淡染,再在倒转置显微镜下进行显微切割,将切割下的组织放入装有提取缓冲液的EP管中,整个过程不需更换EP管,不经过复杂的酚一氯仿抽提,采用细胞裂解并蛋白酶K消化的方法,快速、简便提取DNA.结果:经分光光度计检测提取的DNA浓度为0.14～5.25 g/L,A260A280值在1.6-1.8i PCR检测扩增出了预期长度为231 bp的目的片段.结论:手工组织显微切割后快速DNA提取法可以提供足量浓度的DNA,PCR反应模板结果稳定可靠,可满足后续分子水平研究的需要.
作者：唐泽立；罗泊涛；苏维勇；胡新荣；郑晓娟 刊期： 2008年第24期
背景:细胞外基质在肾间质的积聚是肾小管间质纤维化的主要特征.肾小管上皮细胞一肌成纤维细胞转分化在肾间质纤维化发病机制中起了重要作用.目的:从细胞水平观察阿魏酸钠对转化生长因子β1诱导的大鼠肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化及细胞外基质主要成分Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和纤维粘连蛋白的影响.设计:以细胞为观察对象,随机对照实验.单位:四川大学华西医院肾脏科.材料:大鼠肾小管上皮细胞株NRK52E来源于American Type Culture Collection(ATCC),由澳大利亚Monash医学中心肾内科实验室提供,本实验所用细胞株为第36代.阿魏酸钠为白色晶体,可溶于水,纯度>98.0%,由成都亨达药业有限公司提供.实验时终浓度分别125,250,500μmol/L.兔抗大鼠α平滑肌肌动蛋白多克隆抗体为武汉博士德产品;EUSA试剂盒为上海森雄公司产品;人重组转化生长因子β1为R&D公司产品:DNA Engine OpticonTM实时荧光定量聚合酶链反应仪为MJResearch产品.方法:将体外培养的细胞株NRK52E分为5组;空白对照组:仅加入含血清的DMEM培养基;转化生长因子β1刺激组:培养液中加入终质量浓度为5ng/L的转化生长因子β1;阿魏酸钠低、中、高浓度组:培养液中加入终质量浓度为5 ng/L转化生长因子β1和125,250,500μmol/L的阿魏酸钠.主要观察指标:应用相差显微镜、实时荧光定量聚合酶链反应、酶联免疫吸附法观察阿魏酸钠对转化生长因子β1诱导的NRK52E细胞转分化的作用及对细胞外基质主要成分胶原Ⅰ胶原Ⅲ和纤维粘连蛋白的影响.结果:①NRK52E细胞形态:与空白对照组相比,转化生长因子β1刺激组细胞在培养3 d后,细胞株NRK52E从原有典型的铺路石样上皮细胞形态转变为长梭形类似成纤维细胞的形态.阿魏酸钠3个浓度组细胞受转化生长因子β1的刺激而出现的形态学改变得到不同程度的改善,并呈剂量依赖性.②α-平滑肌肌动蛋白mRNA表达:转化生长因子β15 ng/L诱导6 h后α-平滑肌肌动蛋白mRNA较空白对照组上升,在72 h达高峰;经过不同剂量阿魏酸钠干预72 h后α-平滑肌肌动蛋白mRNA显著下调并呈剂量依赖性(P<0.05).③细胞外基质变化:经转化生长因子β15 ng/L诱导72h后,细胞培养上清中Ⅰ型胶原,Ⅲ型胶原和纤维粘连蛋白含量明显增加(P<0.05).经过不同剂量的阿魏酸钠干预后,不同程度地抑制了转化生长因子β1促Ⅰ型胶原、Ⅲ犁胶原和纤维粘连蛋白增多的作用,并呈剂量依赖性(P<0.05).结论:转化生长因子β1可以诱导大鼠肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化,刺激细胞外基质成分Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和纤维粘连蛋白的升高.阿魏酸钠可剂量依赖性地抑制转化生长因子β1所导致的肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化作用.
作者：谢席胜；左川；米绪华；李会娟；付平 刊期： 2008年第24期
目的:了解中国文化背景下心理治疗师的自我表露特征.方法:调查于2006-10/12进行.选取中国东北、华北、华南、华中、西南、东南各地区21个省市从事心理咨询工作的治疗师为调查对象，要求年龄在20～69岁，进行个体心理治疗并且有至少2年实践经验.采用自编治疗师自我表露调查问卷进行调查，通过E-mail发送问卷，问卷由15道题目组成，其中人口统计学相关题目6道，治疗师自我表露特征的题目共9道，调查心理治疗师自我表露的倾向、内容、方式、原因、影响因素，及其与性别、理论取向间的关系.结果:实际发放问卷390份，回收问卷191份，回收率为49％，其中有效问卷182份，有效回收问卷率为47％.①大部分心理治疗师在治疗中主动运用了自我表露技术，且性别差异显著，男性比女性治疗师主动.②治疗师表露多的是对来访者的情感体验，表露少的是个人的优势或弱点.③大多数治疗师以探索的方式应对自我表露情境.④来访者问题类型和严重程度、治疗阶段、治疗联盟的品质足影响咨询师自我表露的主要因素.⑤治疗师自我表露的主要目的是增加来访者转变观念和选择的意识.⑥与刚开始从业相比较，大部分治疗师的自我表露减少了.结论:无论是在主动，还是在被动自我表露情况下，中国治疗师均显示出了较高的表露倾向，治疗师对不同表露内容的使用频率不同，作为一项治疗技术，治疗师的自我表露是积极而富有成效的.
作者：徐露凝；李林英 刊期： 2008年第24期
背景:目前制备慢性支气管炎模型的方法主要有二氧化硫吸入法、脂多糖注入法,两种方法均不能直接反映吸烟与慢性支气管炎的关系.目的:建立小鼠熏烟致慢性支气管炎模型并探讨成模机制.设计、时间及地点:随机分组设计、对照动物实验,于2005-09/2006--01在广东医学院药理学教研室实验室完成.材料:选择健康4周龄昆明种小鼠40只,按随机数字表法分为2组,正常对照组和熏烟模型组,每组20只.方法:以单一烟丝为刺激物制备慢性支气管炎模型.熏烟模型组置于自制熏烟箱中进行熏烟,4次/d,0.5 h/次,连续60d.每次熏烟燃烧3g烟丝,烟雾用换气扇抽入熏烟箱.正常对照组小鼠不熏烟,后.次熏烟后24h麻醉后处死小鼠.主要观察指标:左肺组织苏木精-伊红染色行组织形态学观察,支气管肺泡灌洗液蛋白含量检测并进行白细胞计数和分类;血浆和肺组织匀浆超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量和总抗氧化能力检测.结果:40只小鼠均进入结果分析.与正常对照组比较,熏烟模型组小鼠支气管壁炎性细胞浸润.分泌物增多;肺泡灌洗液中蛋白含量、白细胞总数显著增加(P<0.01),血浆和肺组织匀浆中超氧化物歧化酶活性、总抗氧化能力降低,丙二醛含量增加(P<0.05).结论:成功建立了小鼠熏烟致慢性支气管炎模型,成模机制可能与氧化应激过强有关.
作者：覃冬云；吴铁；廖芸芸；王勤；陈志东 刊期： 2008年第24期
人体组织和器官的结构是其功能的基础.人体皮肤丢失的同时也丧失了其相应的功能.当皮肤缺失面积相当大时,用自体皮来封闭皮肤缺损创面就存在皮源不足的问题.而组织工程研究的进展,使应用人工皮肤来修复皮肤缺损成为可能.为了使研制出的组织工程皮肤的功能与正常皮肤接近其至相同,在结构上,也应使它们尽可能地接近与相似.本文就表皮替代物、真皮替代物、复合人工皮肤的构建及其特性和应用作一综述.相信随着多学科的发展和基础与临床研究的深入,制备的组织工程皮肤替代物在结构与特性上将更接近正常皮肤.
作者：陈剑平；刘德伍；毛远桂 刊期： 2008年第24期
目的:基因重组腺病毒具有较高的转染率,且宿主范围广.实验拟构建携带人血管内皮细胞生长因子165基因的重组腺病毒载体(Ad.VEGF165),为后续基因转染、微囊化基因工程细胞及其动物模型研究提供实验基础.方法:实验于2007-01/05在解放军第二军医大学长海医院胸心外科研究所实验室完成(国家级重点实验室).①实验材料:pAxCAwt.VEGF165由长海医院胸心外科研究所惠赠.②实验方法:采用脂质体转染法,将pAxCAwt.VEGF165与DNA-TPC共转染人胚肾293细胞,扩增后获得载人血管内皮细胞生长因子165基因的复制缺陷犁重组腺病毒.⑧实验评估:应用聚合酶链反应及酶切证实重组腺病毒中的目的基因.并根据50%组织培养感染剂量法计算病毒滴度.结果:①重组腺病毒Ad.VEGF165的构建:采用脂质体法可使pAxCAwt.VEGF165与DNA-TIC有效转染人胚肾293细胞,扩增出载人血管内皮细胞生长因子165基因的复制缺陷型重组腺病毒.②重组腺病毒Ad.VEGFl65的鉴定:聚合酶链反应的产物进行Nco I酶切鉴定,可得到597 bp、146 bp 2个片段,与GeneTool软件理论上计算的结果完全一致,计算病毒滴度为2.2×1015pfa/L.结论:采用pAxCAwt.VEGF165与DNA-TPC系统经脂质体转染法成功构建的复制缺陷的重组腺病毒Ad.VEGF165滴度高、毒性低、效率高、体外转染安全.
作者：韩焱福；宋建星；刘军 刊期： 2008年第24期
目的:观察针刀治疗结合康复运动训练对膝关节骨性关节炎患者的治疗效果,并采用随机对照分组与单纯针刀治疗相比较.方法:选择2005-01/2007-05 在海军总医院康复理疗科就诊的膝关节骨性关节炎患者52例,均自愿参加观察.按随机数字表法分为两组,对照组24例,治疗组28例.前者采用针刀治疗并配合药物.治疗组在针刀治疗基础上,配合运动康复训练(直腿抬高法、屈伸髋膝法、坐位摆腿法),在3个动作基础上适当加阻力锻炼,以后可逐渐增加运动量及锻炼时间.根据患者个人的心脏功能水平,制定出系统、有针对性的康复运动处方.运动共持续6周,分3个阶段进行.运动频度为1次/d,60 min/次,5次/周.评定两组患者治疗前及治疗3个疗程后患膝关节症状及功能恢复情况,包括疼痛、步行能力、膝关节活动度、膝不稳定感、肿胀、上下楼梯及绞锁等项目.结果:纳入膝关节骨性关节炎患者52例,全部进入结果分析.对照组患者经过3个疗程治疗后,疼痛、膝不稳定感、步行能力、膝关节活动度、上下楼梯能力均较治疗前改善,但肿胀、绞锁治疗前后变化差异无显著性(P>0.05).治疗组患者经过3个疗程康复运动处方锻炼后,疼痛、步行能力、膝关节活动度、上下楼梯能力,膝不稳定感,肿胀均较治疗前显著改善(P均<0.01);但绞锁治疗前后变化差异无显著性.两组患者经过3个疗程的不同处理,除绞锁症状外,治疗组患者的膝关节症状及功能较对照组明显改善,两组变化差异有显著性意义(P均<0.05).结论:在常规针刀治疗后结合康复运动训练可以显著改善膝关节骨性关节炎患者的关节功能,优于单纯针刀治疗.
作者：陈裔英；沈红星；付本升 刊期： 2008年第24期
背景:抗骨增生胶囊在治疗骨关节疾病方面有很好的疗效,基础研究多集中于颈椎病等骨关节疾病上.目的:拟观察抗骨增牛胶囊含药血清对白细胞介索1β引起的软骨细胞增殖凋亡及基质金属蛋白酶分泌的影响.设计、时间及地点:分组对照体外细胞学实验,于2007-03/09在河北医科大学解剖教研室细胞培养中心完成.材料:新生1周sD大鼠,用于培养软骨细胞;体质量200 g左右SD大鼠10只,以中药水溶液灌胃后定时取血制备含药血清.方法:采用胶原酶NB4消化法从大鼠关节软骨中分离出软骨细胞并进行原代和传代培养,实验分为3组:空白血清组:90%L-DMEM+10%空白血清,每口给予同等量的生理盐水;白细胞介索1β组(90%DMEM+10%空白血清+自细胞介素1β);中药血清+白细胞介素1β组(90%DMEM+10%中约血清+白细胞介素1β).白细胞介素1β加入量为5μg/L,培养72 h.将实验用细胞消化传代后制成单细胞悬液,以1×108L-1的密度接种于96孔培养板,100μL/孔,每组6孔.主要观察指标:倒置显微镜下观察中药含药血清对软骨细胞增殖的影响:四甲基偶氮唑盐比色法检测其各孔吸光度变化;流式细胞仪分析凋亡细胞百分率;基质金属蛋白酶13 Elisa试剂盒检测不同组基质金属蛋白酶13分泌情况.结果:在正常培养基条件下,细胞形态均匀,死亡脱落细胞较少.空白血清组软骨细胞的增殖速度缓慢,细胞较稀疏.白细胞介索1β组细胞明显稀疏,部分细胞胞浆中窄泡增多,细胞核形态不规则.在中药血清培养基作用下,软骨细胞增殖的速度较白细胞介素1 B组快,胞体显著增大,细胞核形态规则.白细胞介素1β组细胞增殖数量减少,凋亡细胞百分率增加,其培养的细胞上清液中基质金属蛋白酶13含量升高,抗骨增生胶囊含药血清可对抗白细胞介素1β对软骨细胞的影响.结论:体外条件下,抗骨增生胶囊含药血清能够抑制白细胞介素1β诱导的软骨细胞凋亡:降低基质金属蛋白酶13水平.
作者：宋永周；刘会玲；崔慧先；郭威；李莎 刊期： 2008年第24期
目的:建立胰腺自主神经间接刺激的2型糖尿病动物模型,观察模型大鼠糖代谢、胰岛索水平及胰腺病理的变化.方法:实验于2005-05/2007-05在青岛大学医学附属医院动物实验室完成.①硅胶模型制作:特制的硅胶片.15 mm×1mm×1mm大小,质量(60±3)mg,消毒备用.②分组处理:10周龄雄性SD大鼠52只随机分为4组,左、右侧模型组及双侧模型组各14只,对照组10只.左、右侧模型组分别在左、右T8-12椎间关节神经根处植入硅胶模型,双侧模型组在双侧T8～12椎间关节神经根处植入硅胶模型术,对照组进行背肌切开暴露椎间关节手术,不植入模型.③观察指标:各组大鼠术后45 d字腹血糖、糖耐量、胰岛素、胰腺病理,并观察术后0,28,45 d体质量变化.结果:8只手术过程中死亡,44只进入结果分析.①糖代谢特征:造模后45 d,左侧模型组、双侧模型组血糖明显高于对照组(P<0.05),3个模型组胰岛素水平明显低于对照组(P<0.01).②糖耐星结果;造模后45 d,3个模型组的空腹血糖、服糖30,60,120 min后血糖均明显高于对照组(P<0.05),3组之间差异无显著性意义(尸>O.05).③体质量变化:3个模型组术后28,45 d体质量明显低于对照组(P<0,05).④胰腺病理:模型组大鼠胰岛β细胞内颗粒减少.结论:间接刺激大鼠自主神经会影响大鼠的糖代谢、胰岛素水平及胰腺组织形态,可用于2型糖尿病动物模型的制作.
作者：于兆华；于尉杰；陈福香；王琳 刊期： 2008年第24期
目的:骨形态发生蛋白2是目前研究为广泛、诱导成骨活性强的骨形态发生蛋白之一.实验拟构建绿色荧光蛋白标记的人骨形态发生蛋白2(human Bone Morphogenetic Protein-2,hBMP2)真核表达载体,为在真核细胞的高效表达和基因治疗打下基础.方法:实验于2006-03/2007-03在天津医科大学卫生部激素与发育重点实验室完成.①实验材料:含完整人骨形态发生蛋白2基因片段的pcDNA3.1/CT-hBMP2质粒由李曦铭博士惠赠;双顺反子真核表达载体pSELECT-GFPzeo-MCS(Invivogen公司),Zeo(Invivogen公司):pTA2R-T Easy(鼎国生物技术有限公司).②实验过程及评估:以重组质粒pcDNA3.1/CT-hBMP2为模板,结合已设计好的特异性引物,采用聚合酶链反应方法亚克隆出人骨形态发生蛋白2目的片段,将该片段分别与克隆载体pTA2-T-easy和双顺反子真核表达载体pSELECT-GFPzeo-MCS连接,转化入感受态DH5α细胞中,通过筛选得到含有绿色荧光蛋白的蘑组表达载体pSELECT-GFPzeo-hBMP2,并进行测序鉴定.结果:①聚合酶链反应获得长度约1 216 bp的目的片段,与预期片段相符.②经与克隆载体pTA2-T-easy和真核表达载体pSELECT-GFPzeo-MCS连接,筛选及序列分析后,证实所插入目的片段与GenBank检索的骨形态发生蛋白2cDNA序列(NM-001200)100%匹配.结论:成功构建含双顺反子绿色荧光蛋白人骨形态发生蛋白2真核表达载体.
作者：苗军；刘春蓉；黄鸿超；夏群；石可松 刊期： 2008年第24期
背景:大多数证据支持关节炎症时滑膜表面形成血管翳与血管内皮细胞生长因子及其基质金属蛋白酶有关.目的:实验拟验证不同剂量内皮抑素对佐剂性关节炎模型大鼠血管内皮细胞生长因子、基质金属蛋白酶3及基质金属蛋白酶9表达的影响.设计、时间及地点:对比观察实验,于2007-01106在桂林医学院完成.材料:清洁级雄性Wistar大鼠40只,鼠龄6～8周,体质量146～153 g,建立佐剂性关节炎大鼠模型,内皮抑索为烟台麦得津生物工程股份有限公司产品.方法:造模后第6天选出右后足和两前足关节炎指数之和≥6的30只大鼠,随机数字表法分为4组.模型对照组以10mL/(kg·d)生理盐水14 d灌服,小剂量内皮抑素治疗组以终浓度2.5 mg/(kg·d)加2～4 mL生理盐水14 d灌服,大剂量内皮抑素治疗组以终浓度10 mg/(kg·d)加2～4mL生理盐水14 d灌服,不加干预的10只正常Wistar大鼠作为正常对照组,每组大鼠均10只.主要观察指标:模型组动物停止灌服后第6天应用酶联免疫吸附法检测各组血清血管内皮细胞生长因子、基质金属蛋白酶3及基质会属蛋白酶9的表达:滑膜炎症的组织病理学评分:关节炎症评分和关节X射线评分.结果:①小剂量和大剂量内皮抑素治疗组人鼠关节滑膜无明显肿胀等炎症表现,模型对照组关节滑膜增厚的炎症现象明显,3组关节滑膜组织病理学评分比较差异有显著性意义(P<0.01).②与模型对照组相比,正常对照组、小剂量及大剂量内皮抑素治疗组血管内皮细胞生长因子、基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶9表达均降低(P<0.01),且下降幅度与内皮抑素的浓度呈正相关.结论:内皮抑素能下调佐剂性关节炎滑膜细胞血管内皮细胞生长因子、基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶9的水平.
作者：周润华；莫汉有；朱姗姗；杨敏；覃央 刊期： 2008年第24期
目的:根据肥胖的定义,建立肥胖评价标准应该参照体内多余能量堆积程度能否破坏健康和引发相关疾病这一依据.实验试图找出能量代谢指标与不同肥胖评价方法测试结果之问的相关关系,探索以能量指标为参照依据不同方法评价肥胖的合理性.方法:于2002-11采用多阶段随机抽样方法,随机选取西安市3个城区,每个城区再随机选取2个社区,每个社区中再随机抽取居住5年或以上的常住女性居民120名,剔除有明显严重急、慢性疾患和肥胖遗传史者70名及无效问卷者93人,共557名纳入分析,年龄50～60岁,平均年龄(54.1±2.6)岁.按国民体质监测工作手册的测试要求,采用3种测量方法测试能量指标与形态指标.分别为ZW法,即采用张薇体密度推算公式来计算体脂率;BIA法,采用日本TANITA公司提供的人体组成分析仪用生物电阻抗技术来测定体脂率;体质量指数法,是按<中国成人体质监测标准>进行测量身高和体质量,计算体质量指数.ZW法和BIA法评价成年女子肥胖的标准为体脂率/>30%.体质量指数法为体质量指数≥28 kg/m2为肥胖.结果:①不同肥胖评价方法测试结果与能量摄入和能量消耗均呈中度相关关系,与剩余能量呈显著相关,相关系数均在0.77以上.②不同肥胖评价方法测试结果与剩余能量的关系曲线图大致趋势一致,随剩余能量的增加,各方法测试结果也不断增加,尤其是BIA法体脂率与剩余能量指标的一致程度好.结论:不同肥胖评价方法与能量代谢指标密切相关,可以以能量指标为参照依据评价方法的合理性.
作者：李米环；李国强 刊期： 2008年第24期
目的:以往关于运动训练对组织抗氧化能力影响的研究主要集中在耐力训练,在此基础上,进一步观察大鼠在不同功能状态下骨骼肌抗氧化能力与运动训练的关系,认识生物体对运动训练所产生的适应性变化机制.方法:实验于2003-04/06在曲阜师范大学体育科学学院生理实验室完成.①分组干预:选取雄性Wistar大鼠56只,随机分为对照组和训练组2组各28只,训练组进行8周的跑台训练,对照组不干预.然后两组分别在塑料桶中进行2 d适应性游泳,第3天,两组大鼠分别于安静状态、定量负荷运动后、力竭运动后即刻、力竭运动24 h后麻醉处死,每个时相点7只大鼠.②观察指标:观察不同功能状态下大鼠骨骼肌中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性以及总抗氧能力变化.结果:56只大鼠进入结果分析.①在安静状态、力竭运动24 h后,对照组骨骼肌中超氧化物歧化酶的活性、总抗氧能力、谷胱甘肽过氧化物酶活性都明显低于训练组(P<0.05).②定量负荷运动后,对照组骨骼肌中总抗氧能力明显低于训练组(P<0.05),而骨骼肌中超氧化物歧化酶的活件明显高于训练组(P<0.05).③力竭运动后训练组骨骼肌中超氧化物歧化酶的活性、总抗氧能力都明显高于对照组(P<0.05).结论:运动训练能提高大鼠安静状态下骨骼肌中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性以及总抗氧化能力可因,抑制因力竭运动导致的超氧化物歧化酶活性、总抗氧能力的下降.
作者：李涛 刊期： 2008年第24期
背景:以往构建慢性疲劳动物模型多采用悬吊、束缚、游泳、跑台等复合性物理因素.目的:以睡眠剥夺与负重力竭游泳复合为慢性疲劳因素,构建慢性疲劳人鼠模型并观察其血液生化指标的变化.设计、时间及地点:2007-03/06在南方医科大学中医症候实验室完成的随机对照动物观察.材料:SPF级健康雄性SD大鼠40只,取8只进行预实验确定观察时间点为造模第1,4,13天,剩余32只随机分为正常对照组8只、模型组24只.方法:模型组大鼠建立慢性疲劳模型,即放入水深1.5 cm的盒子中剥夺睡眠20h,按其体质量5%负重后再于水深50cm的玻璃缸内进行力竭游泳训练,以沉入水中10 s无法浮出水面判定达到力竭状态.正常对照组不给予任何刺激,自然饲养.主要观察指标:造模第1,4,13天各取8只模型鼠麻醉后腹主动脉采血,离心取上清检测血液生化指标的变化.结果:与正常对照组比较,造模第1天仅尿素氮水平升高,尚未引起血液生化指标的明显改变,大鼠处于急性应激状态;造模第2～4天进入适应阶段,门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、尿素氮等肝.肾功能指标发生异常(P<0.01),大鼠尚可承受该运动强度:造模第5-13天,肝肾功能、C-反应蛋白、血糖、血脂及血清离子等常规血液生化指标几乎均发生异常(P<0.01),大鼠机体受到严重损伤.结论:随造模时间的延长,慢性疲劳大鼠血液生化指标呈逐渐恶化状态,机体损伤趋势加重.
作者：李晓勇；靳文；孙晓敏；赵晓山；杨红玲；罗仁 刊期： 2008年第24期
背景:研究证实,艾灸有可能通过细胞因子调节环氧合酶2及前列腺素E2表达、影响细胞凋亡.目的:实验拟观察环氧合酶2、Bcl-2、Bax的表达及前列腺素E2的含量与溃疡性结肠炎的关系,探讨灸疗的影响作用并比较隔药灸和温和灸治疗作用的差异.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-04/2007-03在上海中医药大学实验动物中心和国家中医药管理局针灸免疫实验室完成.材料:SPF级雄性SD大鼠40只,体质量(140±20)g,采用免疫学方法加局部刺激制备溃疡性结肠炎大鼠模型.方法:40只大鼠随机数字表法分为正常组、模型组、隔药灸组、温和灸组,每组10只.正常组:不做任何治疗.模型组:只作与各治疗组相同的抓取固定.温和灸组:选取天枢、气海穴悬灸,每次每穴灸10min.隔药灸组:选取天枢、气海穴隔药灸,每次每穴灸2壮.疗程:1次/d,共灸14次.主要观察指标:免疫组织化学法检测溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中环氧合酶2、Bcl-2、Bax的表达;放射免疫法测定溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中前列腺素E2的含量.结果:纳入SD大鼠40只,造模过程有1只大鼠死亡,解剖见结肠明显扩张,未见穿孔,39只进入结果分析.模型组大鼠结肠组织环氧合酶2、Bcl-2的表达及前列腺素E2的含量高于正常组(P<0.01);而Bax的表达低于正常大鼠(P<0.01).经过灸治后,与模型组比较,隔药灸组和温和灸组环氧合酶2、Bcl-2的表达及前列腺素E2的含量均显著降低(P<0.01);隔药灸组Bax的表达上调(P<0.05).结论:灸疗干预可调节溃疡性结肠炎大鼠结肠组织环氧合酶2、Bax、Bcl-2的表达并降低前列腺素E2的含量,隔药灸的作用优于温和灸.
作者：崔云华；周爽；吴焕淦；王晓梅；谭琳蓥；刘慧荣 刊期： 2008年第24期
背景:研究表明脂多糖对子宫内膜细胞具有损伤作用.目的:通过噻唑蓝和流式细胞术观察黄芩昔对脂多糖诱导的子宫内膜细胞活性、周期和凋亡率的影响.设计、时间及地点:以细胞为对象的分组对比观察实验,于2005-11/2007-03在湖南中医药大学完成.材料:子宫内膜组织标本3例,来自中南大学湘雅医学院第三附属医院和湖南省妇幼保健医院因不孕症行诊断性刮宫术,或子宫肌瘤行子宫全切除的患者;黄芩提取物由长沙艾菌生物科技开发有限公司提供.黄芩苷含量≥90%,由湖南中医药大学药学院药物制剂室制备黄芩苷药物,原液浓度为80 g/L.方法:体外培养人子宫内膜细胞.将细胞随机分为空白组、黄芩苷组(8,0.8,0.08,0.008 p/L).根据细胞活性好的黄芩苷浓度以下实验将细胞随机分为空白组、脂多糖组、脂多糖+黄芩苷组(0.08 g/L).主要观察指标:①采用噻唑蓝法检测黄芩苷对子宫内膜细胞活性的影响.②采用流式细胞术检测黄芩苷对脂多糖诱导子宫内膜细胞凋亡率及周期的影响.结果:①噻唑蓝法检测显示黄芩苷组除0.008g/L外,其余各浓度对子宫内膜细胞活性均有抑制作用,选择0.08g/L进行后续实验.②流式细胞术检测显示黄芩苷干预后G0/G1和G2/M期细胞百分比较脂多糖组明显降低,S期明显增高,细胞凋亡率明显降低.结论:黄芩苷可以使G0/G,期细胞被诱导进入S期,从而促进细胞的增殖,降低了脂多糖诱导的细胞凋亡.
作者：秦莉花；李晟；王小云；王若光；李春梅；刘小丽 刊期： 2008年第24期
中国组织工程研究杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
