张琪；杨玉梅；刘凤鸣
目的 探讨低盐培养对小鼠致密斑(mouse macula densa derived cells,MMDD1)细胞环氧化酶-2(cyclooxygenase,COX-2)表达和p44/42 激酶(ERK)、 AP-1活性的影响.方法 经脂质体转染含AP-1的报告质粒,采用瞬时表达方法检测AP-1转录活性;RT-PCR检测MMDD1细胞COX-2的表达;免疫印迹方法检测细胞内p-p44/42、C-JUN、C-FOS和COX-2蛋白的表达.用ELISA法检测上清液PGE2的含量.结果 低盐(LS)培养促进MMDD1细胞COX-2 mRNA和蛋白表达.培养后ERK的磷酸化程度显著上调,180 min达到高峰;ERK抑制剂PD-98059降低LS诱导的COX-2表达和PGE2分泌;LS培养促进C-JUN、C-FOS蛋白表达,激活AP-1的转录活性.AP-1抑制剂curcumin (20 μmol/L)下调LS诱导的AP-1活性、COX-2 mRNA和蛋白表达.结论 LS促进MMDD1细胞COX-2的表达,其作用可能与促进ERK的磷酸化、增加AP-1的活性有关.
作者：刘冬妍；李学旺；李航；李雪梅 刊期： 2007年第05期
目的 观察大鼠脑缺血再灌注后海马CA1区肌细胞促进因子(MEF) 2C磷酸化(激活)和蛋白水平的变化规律,并探讨其可能的分子机制.方法 采用SD大鼠四动脉结扎模型,用免疫印迹法检测蛋白表达,给药组大鼠在缺血前20 min脑室给药.结果 脑缺血再灌注可诱导MEF2C激活,6 h达高峰;其蛋白表达在再灌后期(3～5 d)明显下降.Caspase-3蛋白和激活的caspase-3 (17 ku) 水平在再灌后期均显著增加;Caspase-3特异性抑制剂Ac-DEVD-CHO可明显阻止再灌3 d 的MEF2C蛋白表达降低.P38激酶抑制剂SB202190不但抑制再灌注6 h 的MEF2C激活,而且也降低了再灌注3 d 的caspase-3激活;但胞外信号调节激酶 (ERK) 5的反义寡核苷酸未显著影响MEF2C的磷酸化水平.结论 P38/caspase-3依赖的MEF2C信号通路可能参与了大鼠脑缺血再灌注诱发的神经元凋亡过程.
作者：王瑞敏；张全光；武鹏；杨方；马文东 刊期： 2007年第05期
受损伤(创伤、休克或缺血)时心血管组织可释放三磷酸腺苷(ATP),而心脏和血管的细胞均表达嘌呤受体的亚型,表明嘌呤类物质可影响心血管功能.
作者：李桂林；戴群；梁尚栋；徐昌水；张春平；高云 刊期： 2007年第05期
沙棘总黄酮(total flavones of hippophae rhamnoides L., TFH),又名醋柳总黄酮,可从胡颓子科植物沙棘的果实中提取,是一种传统的蒙医用药.
作者：张琪；杨玉梅；刘凤鸣 刊期： 2007年第05期
目的 建立一个有效表达CD23的系统.方法 采用RT-PCR方法,从外周血淋巴细胞中扩增人的CD23 cDNA基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1B上,构建成pcDNA3.1/CD23 质粒表达载体;将pcDNA3.1/CD23质粒转染HEK293T细胞,通过流式细胞仪和Western blot检测CD23在细胞中的表达情况.结果 扩增的CD23 cDNA序列与文献报道的一致;通过构建表达载体和转染细胞实现了CD23 cDNA在293T细胞膜上的表达.转染效率达80%以上,并获得了较高水平的表达.结论 扩增CD23 cDNA基因,经过转染HEK293T细胞,实现了CD23在HEK293T细胞的高效表达.
作者：李秀锦；仲峰；付志强；范绍瑛；李轶；刘俊乐；仲飞 刊期： 2007年第05期
本文介绍了实验设计的核心内容,并针对人们在进行临床试验设计时,常违犯对照和均衡原则的事实,举出了很多常见的实例.通过对这些实例的辨析和释疑,有利于提高临床医生的实验设计质量.
作者：胡良平 刊期： 2007年第05期
目的 观察抗白介素5(IL-5)单克隆抗体对哮喘小鼠嗜酸性粒细胞(Eos)从骨髓到气道迁移的影响.方法 15只雄性C57BL/6小鼠.常规法复制哮喘,并在每次卵白蛋白(Ova)激发前2 h鼻腔内滴入抗IL-5单克隆抗体,同时设立阴性对照组,即以生理盐水代替Ova 和抗IL-5抗体.在末次抗原激发后12 h测定支气管肺泡灌洗液(BALF)、外周血(PB)和骨髓(BM)中炎症细胞数以及肺组织内Eos数.结果 Ova抗原激发后12 h小鼠的BALF、PB和BM及细支气管和肺组织中的Eos数显著增加(P＜0.01, P＜0.05).抗IL-5单克隆抗体则使上述变化显著减轻(P＜0.05,P＜0.01).结论 抗IL-5单克隆抗体能显著抑制哮喘小鼠嗜酸性粒细胞的迁移.
作者：江荣林；沈华浩；王绍斌；王萍莉；马伟斌 刊期： 2007年第05期
目的 检测SARS冠状病毒(SARS-CoV)S蛋白的功能性受体血管紧张素转换酶2 (ACE2)在大鼠内脏尤其在胰腺内、外分泌腺的表达.方法 麻醉Wistar大鼠后取胰、肺、肝、肾、心、肠、膀胱和脾8种组织,采用免疫组化和RT-PCR方法检测各组织ACE2的表达.结果 ACE2在组织中均有不同程度的表达,其中胰腺外分泌腺ACE2阳性细胞的吸光度值较内分泌腺显著增加 (P＜0.01).结论 ACE2在大鼠胰腺内、外分泌腺的表达可介导SARS-CoV侵入并损害胰腺,使胰岛素耗竭,引起血糖水平升高;同时ACE2在内脏组织的普遍表达为SARS-CoV的入侵提供了可能.
作者：郭丽敏；张雪莲；杨金奎 刊期： 2007年第05期
目的 研究细胞凋亡调控因子FAS、FASL、FADD和caspase-8基因在食管上皮癌变过程中的表达及其意义.方法 用免疫组化SP法检测食管黏膜中FAS、FASL、FADD和caspase-8的表达;原位杂交法检测食管黏膜中FADD mRNA和caspase-8 mRNA的表达.结果 从食管正常黏膜组织到不典型增生和食管癌组织,FAS蛋白表达率呈逐渐下降趋势,FASL蛋白表达率呈逐渐上升趋势,食管癌与正常组织之间差异明显(P＜0.05).高、中分化鳞癌中蛋白阳性表达率显著高于低分化鳞癌(P＜0.05).从食管正常黏膜组织到不典型增生和食管癌组织,FADD和caspase-8蛋白及RNA阳性表达率呈逐渐下降趋势,食管癌与正常黏膜组织之间差异明显(P＜0.01);caspase-8蛋白和mRNA在高、中分化鳞癌中的表达率高于低分化鳞癌(P＜0.05).结论 FAS与FASL的表达失衡与食管癌的发生、发展有密切关系,并与食管癌的分化和免疫逃避有关.FADD与caspase-8基因表达异常在食管癌的发生、发展中可能起着重要作用.
作者：许欣；彭林涛；刘丽华；王佩；左连富 刊期： 2007年第05期
目的 探讨高同型半胱氨酸(Hcy)血症中肝细胞固醇调节元件结合蛋白(SREBP-1C)与葡萄糖调节蛋白94(GRP-94)的表达变化,评价内质网应激蛋白对肝细胞脂质代谢的影响.方法 高蛋氨酸饮食诱导小鼠高Hcy血症,分析肝细胞内甘油三酯(TGE)、胆固醇(CHO)含量的变化,RT-PCR、Western blot分别检测内质网应激蛋白SREBP- 1 C和GRP- 94 mRNA及其蛋白表达.结果 高蛋氨酸饮食后小鼠各时点血浆Hcy及肝细胞内TGE、CHO含量均显著升高,而血浆TGE、CHO含量升高并不明显;小鼠肝细胞内质网应激蛋白SREBP- 1 C和GRP- 94 mRNA及其蛋白表达也显著升高(P＜0.05).结论 Hcy诱导的内质网应激可引起SREBP-1C、GRP-94的表达变化及内源性固醇调节通路失调.
作者：黄丹文；晏春根；朱东方；倪培华 刊期： 2007年第05期
目的 探讨自体外周血干细胞移植(APBSCT)治疗难治性免疫性血小板减少性紫癜(ITP)的疗效及移植后免疫重建.方法 对一例难治ITP患者进行APBSCT并观察临床疗效和免疫重建的过程.结果 经环磷酰胺(CY)+G-CSF动员,获得CD34+细胞4.7×106/kg.在TBI+CY预处理后,中性粒细胞、血小板分别在第11、12天植入,无严重并发症.移植后6个月开始淋巴细胞各亚群逐渐恢复,CD4+/CD8+比例仍倒置,记忆T细胞(CD4+CD45RO+)的恢复先于纯真T细胞(CD4+CD45RA+).随访至31个月时血小板始终大于100×109/L,疾病处于完全缓解中.结论 APBSCT可能是治疗难治性ITP的有效手段.
作者：张薇；周道斌；赵岩；冷晓梅；蒋颖；沈悌 刊期： 2007年第05期
NKG2D是免疫细胞表面的激活性受体,在机体的抗肿瘤免疫、抗感染免疫以及自身免疫病的发生中发挥重要作用.NKG2D识别肿瘤细胞表面的配体,激活效应细胞,产生有效的抗肿瘤免疫应答,是肿瘤免疫监视机制之一.近来研究发现白血病细胞表达多种NKG2D配体,参与白血病的免疫监视.本文就NKG2D及其配体对白血病免疫监视和免疫逃逸的作用作一综述.
作者：刘慧英；孙昭；赵春华 刊期： 2007年第05期
目的 探讨肾上腺节细胞神经瘤与嗜铬细胞瘤的临床特点,诊断、鉴别诊断及治疗.方法 回顾性分析1999-2005北京协和医院14例节细胞神经瘤及32例嗜铬细胞瘤患者的临床资料.节细胞神经瘤组男8例,女6例;年龄16～63岁;肿瘤直径2.5～15 cm.嗜铬细胞瘤组男14例,女18例;年龄19～74岁;肿瘤直径2～16 cm.全部患者均行手术治疗切除肿瘤并经病理证实.结果 节细胞神经瘤患者多无临床症状,查体时偶然发现肾上腺区占位;CT多表现为形态规则的圆形或类圆形低密度影,边界光滑,质地均一,增强扫描强化不明显;24 h尿儿茶酚胺在正常水平;131I-MIBG检测大部分阴性.嗜铬细胞瘤患者就诊时多有典型的阵发或持续性高血压症状;CT表现多为形态欠规则的实性、囊实性或单纯囊性占位,密度不均,增强后呈不规则明显强化;嗜铬细胞瘤内分泌功能活跃,24 h尿儿茶酚胺检查显著升高;131I-MIBG检测大部分呈阳性,浓聚区域与占位病变位置相同.结论 肾上腺节细胞神经瘤与嗜铬细胞瘤在临床表现、影像学、内分泌检查和131I-MIBG等均有显著差异.通过仔细询问病史,正确的实验室及辅助检查,术前基本能鉴别诊断.行开放或腹腔镜手术切除可取得良好的治疗效果.
作者：石冰冰；樊华；荣石；李永强；李汉忠 刊期： 2007年第05期
烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)是配体门控的离子通道受体家族成员,广泛分布于中枢神经、神经肌肉接头以及其他细胞表面.构成亚基不同和分布部位的差异表现为受体功能的多样性.早期研究发现,nAChR主要与神经电信号传导有关;近期研究认为它是胆碱能抗炎通路的关键受体.阐明这些功能的生理机制对重症肌无力、癫痫以及多器官衰竭等相关疾病有重要的临床意义.
作者：周国勇；胡森 刊期： 2007年第05期
目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在体外诱导人骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌样细胞分化中的作用,及其对MSCs增殖的影响.方法 用含5-氮杂胞苷(5-aza)的培养基(A组)、含bFGF的培养基(B组)、含5-aza+bFGF的培养基(C组)以及普通培养基(对照组)培养人骨髓MSCs.观察细胞形态的改变;免疫细胞化学法检测α-actin、cTnT和connexin-43的表达;RT-PCR法检测Nkx2.5 、GATA- 4 和cTnT的mRNA水平;MTT法检测MSCs的增殖.结果 A组和C组的部分细胞呈肌细胞样改变,表达蛋白α-actin,cTnT和connexin43;A组和C组的cTnT、Nkx2.5 和GATA- 4的mRNA水平明显高于对照组,B组的Nkx2.5 和GATA- 4 的mRNA水平明显高于对照组;B组细胞增殖明显高于对照组,A组和C组细胞增殖明显低于对照组,但C组明显高于A组.结论 bFGF能明显促进MSCs增殖,与5-aza合用能更好地诱导人MSCs向心肌样细胞分化.
作者：杨琳；陈连凤；沈悌 刊期： 2007年第05期
目的 观察磺脲类药物受体基因(sulfonylurea receptor SUR1 )第33号外显子上的一处错义突变(Ser1369Ala,TCC→GCC)与格列齐特降糖效果之间的关系.方法 选取2型糖尿病患者104人,口服格列齐特56天,监测空腹血浆葡萄糖、服糖后30 min及2 h血糖水平,检测Ser1369Ala多态性位点基因型,根据基因型不同建立相加模型、显性模型及隐性模型.分析降糖有效及无效者的基因型有无差异.结果 TT,TG和GG型组第1天与第57天空腹血浆葡萄糖、服糖后30 min及2 h血糖无明显下降;将TG型和GG型合并为一组与TT组比较第57天静脉空腹血糖显著下降(P＜0.05);将TT型和TG型合并为一组与GG型比较无差别.结论 携有SUR1基因的Ser1369Ala多态性位点G等位基因的人群对磺脲类药物比较敏感.
作者：杨毅；郭丽敏；杨金奎 刊期： 2007年第05期
目的 探讨男性性早熟的临床特点.方法 回顾性分析26例男性性早熟患儿的病因诊断、治疗和预后;比较生殖细胞瘤、下丘脑错构瘤和先天性肾上腺皮质增生症(CAH)3组不同病因引起的男性性早熟在临床特点和激素水平方面的差异.结果 26例男性性早熟中,CAH8例,生殖细胞瘤7例,下丘脑错构瘤5例,特发性性早熟3例,肾上腺腺瘤2例,脑膜脑炎后遗症1例.通过分析血清黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)等性激素水平、睾丸体积和病程长短等,结果显示3组之间有显著差异(P＜0.05).结论 本组男性性早熟的主要病因是CAH、颅内生殖细胞瘤和下丘脑错构瘤.及早明确诊断对治疗和预后至关重要.
作者：伍学焱；茅江峰；李乃适；朱惠娟；顾锋；陆召麟；金自孟；史轶蘩 刊期： 2007年第05期
目的 探讨内脏高敏感大鼠结肠电活动及运动的特点.方法 实验分对照组和模型组,模型组腹腔注射鸡卵清蛋白使大鼠内脏致敏.2周后,记录结肠快波、慢波及收缩波,观察消化间期移行性综合肌电IMC的周期、Ⅲ期持续时间、快波和慢波的波动频率及平均大振幅,记录结肠收缩波数目及收缩波指数.结果 模型组消化间期复合肌电的周期延长(P＜0.01),Ⅲ期持续时间延长(P＜0.01),快波的波动率加快(P＜0.05),平均大振幅增大(P＜0.01).慢波的波动频率加快(P＜0.05),平均大振幅增大(P＜0.01).收缩波数目增加(P＜0.05),收缩波指数增大(P＜0.05).结论 内脏高敏感大鼠结肠电活动及运动有明显异常.
作者：印媛君；吕宾；杨午鸣；柯庆；丁瑞峰 刊期： 2007年第05期
目的 探讨糖尿病地鼠巨噬细胞内胆固醇外流的改变,尤其是三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的功能变化以及与载脂蛋白AI(apoA-Ⅰ)的相互作用.方法 用金黄地鼠高脂及糖尿病模型,分离纯化腹腔巨噬细胞,用外源性apoA-Ⅰ及8-br-cAMP在体外干预巨噬细胞,测定干预前后巨噬细胞ABCA1表达和细胞内胆固醇含量的变化.结果 细胞内胆固醇含量在糖尿病组高于高脂组和正常对照组.apoA-Ⅰ和8-br-cAMP在体外均增加糖尿病组巨噬细胞ABCA1 mRNA的表达.apoA-Ⅰ使各组细胞内胆固醇外流均增加,且与孵育时间成正比,胆固醇外流量糖尿病组高于高脂组和正常对照组.结论 糖尿病鼠巨噬细胞内胆固醇大量沉积,可能与内源性apoA-Ⅰ量和功能的改变所引起的ABCA1介导的细胞内胆固醇外流受阻有关.
作者：朱颖；陈连凤；方全；严晓伟 刊期： 2007年第05期
目的 探讨P38丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,P38 MAPK)在小鼠脑低氧预适应形成过程中的作用.方法 用成年雄性BALB/c小鼠制备小鼠整体低氧预适应模型,小鼠随机分为正常对照(H0)、早期(H1～H4)和延迟性(H5～H6)低氧预适应等7组;应用Western bolt并结合Gel Doc凝胶成像系统,定量检测小鼠脑组织内P38 MAPK磷酸化水平和蛋白表达量.结果 与H0组小鼠相比,H2～H6组的海马和皮层及H3～H6组的下丘脑中P38 MAPK磷酸化水平明显增高 (P＜0.05,每组n=6);H1～H6组的皮层、海马和下丘脑中P38 MAPK蛋白表达量无明显变化.结论 P38 MAPK磷酸化激活而非蛋白表达量的变化可能参与了小鼠脑低氧预适应的发生、发展过程.
作者：卜祥宁；韩松；李俊发 刊期： 2007年第05期
基础医学与临床杂志
主管:北京市科学技术协会
主办：北京生理科学会
