学术投稿

低氧预适应小鼠脑组织内P38 MAPK磷酸化水平增高

卜祥宁;韩松;李俊发

关键词:脑低氧预适应, p38MAPK, 磷酸化水平, 蛋白表达量, 脑组织
摘要:目的 探讨P38丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,P38 MAPK)在小鼠脑低氧预适应形成过程中的作用.方法 用成年雄性BALB/c小鼠制备小鼠整体低氧预适应模型,小鼠随机分为正常对照(H0)、早期(H1~H4)和延迟性(H5~H6)低氧预适应等7组;应用Western bolt并结合Gel Doc凝胶成像系统,定量检测小鼠脑组织内P38 MAPK磷酸化水平和蛋白表达量.结果 与H0组小鼠相比,H2~H6组的海马和皮层及H3~H6组的下丘脑中P38 MAPK磷酸化水平明显增高 (P<0.05,每组n=6);H1~H6组的皮层、海马和下丘脑中P38 MAPK蛋白表达量无明显变化.结论 P38 MAPK磷酸化激活而非蛋白表达量的变化可能参与了小鼠脑低氧预适应的发生、发展过程.
基础医学与临床杂志相关文献
  • 低盐通过激活ERK和AP-1通路诱导小鼠致密斑细胞系COX-2的表达

    目的 探讨低盐培养对小鼠致密斑(mouse macula densa derived cells,MMDD1)细胞环氧化酶-2(cyclooxygenase,COX-2)表达和p44/42 激酶(ERK)、 AP-1活性的影响.方法 经脂质体转染含AP-1的报告质粒,采用瞬时表达方法检测AP-1转录活性;RT-PCR检测MMDD1细胞COX-2的表达;免疫印迹方法检测细胞内p-p44/42、C-JUN、C-FOS和COX-2蛋白的表达.用ELISA法检测上清液PGE2的含量.结果 低盐(LS)培养促进MMDD1细胞COX-2 mRNA和蛋白表达.培养后ERK的磷酸化程度显著上调,180 min达到高峰;ERK抑制剂PD-98059降低LS诱导的COX-2表达和PGE2分泌;LS培养促进C-JUN、C-FOS蛋白表达,激活AP-1的转录活性.AP-1抑制剂curcumin (20 μmol/L)下调LS诱导的AP-1活性、COX-2 mRNA和蛋白表达.结论 LS促进MMDD1细胞COX-2的表达,其作用可能与促进ERK的磷酸化、增加AP-1的活性有关.

    作者:刘冬妍;李学旺;李航;李雪梅 刊期: 2007年第05期

  • 肾上腺节细胞神经瘤与嗜铬细胞瘤的临床鉴别诊断及治疗

    目的 探讨肾上腺节细胞神经瘤与嗜铬细胞瘤的临床特点,诊断、鉴别诊断及治疗.方法 回顾性分析1999-2005北京协和医院14例节细胞神经瘤及32例嗜铬细胞瘤患者的临床资料.节细胞神经瘤组男8例,女6例;年龄16~63岁;肿瘤直径2.5~15 cm.嗜铬细胞瘤组男14例,女18例;年龄19~74岁;肿瘤直径2~16 cm.全部患者均行手术治疗切除肿瘤并经病理证实.结果 节细胞神经瘤患者多无临床症状,查体时偶然发现肾上腺区占位;CT多表现为形态规则的圆形或类圆形低密度影,边界光滑,质地均一,增强扫描强化不明显;24 h尿儿茶酚胺在正常水平;131I-MIBG检测大部分阴性.嗜铬细胞瘤患者就诊时多有典型的阵发或持续性高血压症状;CT表现多为形态欠规则的实性、囊实性或单纯囊性占位,密度不均,增强后呈不规则明显强化;嗜铬细胞瘤内分泌功能活跃,24 h尿儿茶酚胺检查显著升高;131I-MIBG检测大部分呈阳性,浓聚区域与占位病变位置相同.结论 肾上腺节细胞神经瘤与嗜铬细胞瘤在临床表现、影像学、内分泌检查和131I-MIBG等均有显著差异.通过仔细询问病史,正确的实验室及辅助检查,术前基本能鉴别诊断.行开放或腹腔镜手术切除可取得良好的治疗效果.

    作者:石冰冰;樊华;荣石;李永强;李汉忠 刊期: 2007年第05期

  • 实验设计错误辨析与释疑

    本文介绍了实验设计的核心内容,并针对人们在进行临床试验设计时,常违犯对照和均衡原则的事实,举出了很多常见的实例.通过对这些实例的辨析和释疑,有利于提高临床医生的实验设计质量.

    作者:胡良平 刊期: 2007年第05期

  • 血管紧张素转换酶2在大鼠胰腺组织中的表达

    目的 检测SARS冠状病毒(SARS-CoV)S蛋白的功能性受体血管紧张素转换酶2 (ACE2)在大鼠内脏尤其在胰腺内、外分泌腺的表达.方法 麻醉Wistar大鼠后取胰、肺、肝、肾、心、肠、膀胱和脾8种组织,采用免疫组化和RT-PCR方法检测各组织ACE2的表达.结果 ACE2在组织中均有不同程度的表达,其中胰腺外分泌腺ACE2阳性细胞的吸光度值较内分泌腺显著增加 (P<0.01).结论 ACE2在大鼠胰腺内、外分泌腺的表达可介导SARS-CoV侵入并损害胰腺,使胰岛素耗竭,引起血糖水平升高;同时ACE2在内脏组织的普遍表达为SARS-CoV的入侵提供了可能.

    作者:郭丽敏;张雪莲;杨金奎 刊期: 2007年第05期

  • 沙棘总黄酮改变心肌缺血大鼠的蛋白质组谱

    沙棘总黄酮(total flavones of hippophae rhamnoides L., TFH),又名醋柳总黄酮,可从胡颓子科植物沙棘的果实中提取,是一种传统的蒙医用药.

    作者:张琪;杨玉梅;刘凤鸣 刊期: 2007年第05期

  • 5-氮胞苷诱导体外培养的胚胎干细胞向心肌样细胞分化

    目的 研究5-氮胞苷(5-aza)体外诱导胚胎干细胞分化为心肌细胞的可行性.方法 将P19细胞接种于培养板中或铺有琼脂的培养板中,5μmol/L 5-aza培养7d后用不含5-aza的培养基继续培养.倒置显微镜观察细胞跳动情况,用免疫细胞化学、RT-PCR检测及电镜观察等方法鉴定细胞分化.结果 5-aza暴露结合悬浮培养可诱导P19细胞分化为有节律跳动的心肌细胞.分化的细胞表达心肌特异的GATA-4、α-MHC mRNA及α-sarcomeric actin、cTnT蛋白,同时透射电镜观察到细胞质内有明显的肌丝.结论 5-aza在体外可诱导胚胎干细胞向心肌样细胞分化,悬浮培养有助于细胞的心肌化过程.

    作者:尹青;赵昱;赵秀军;陈炜;张雷;赵春芳 刊期: 2007年第05期

  • SUR1 Ser1369Ala多态性与磺脲类药物疗效的相关性

    目的 观察磺脲类药物受体基因(sulfonylurea receptor SUR1 )第33号外显子上的一处错义突变(Ser1369Ala,TCC→GCC)与格列齐特降糖效果之间的关系.方法 选取2型糖尿病患者104人,口服格列齐特56天,监测空腹血浆葡萄糖、服糖后30 min及2 h血糖水平,检测Ser1369Ala多态性位点基因型,根据基因型不同建立相加模型、显性模型及隐性模型.分析降糖有效及无效者的基因型有无差异.结果 TT,TG和GG型组第1天与第57天空腹血浆葡萄糖、服糖后30 min及2 h血糖无明显下降;将TG型和GG型合并为一组与TT组比较第57天静脉空腹血糖显著下降(P<0.05);将TT型和TG型合并为一组与GG型比较无差别.结论 携有SUR1基因的Ser1369Ala多态性位点G等位基因的人群对磺脲类药物比较敏感.

    作者:杨毅;郭丽敏;杨金奎 刊期: 2007年第05期

  • 熊果酸抑制人胃腺癌SGC-7901细胞系COX-2的表达

    目的 观察熊果酸(UA)对胃腺癌细胞SGC-7901环氧化酶-2(COX-2)表达的影响.方法 采用MTT法观察细胞增殖;Western blot法检测COX-2蛋白表达;放射免疫分析法观察细胞合成PGE2.结果 UA可以抑制SGC-7901细胞的增殖,并呈浓度和时间依赖性;外源性PGE2并不能逆转UA的抑制增殖作用;UA可以降低细胞COX-2蛋白的表达,并呈浓度依赖性;UA可以抑制PGE2的合成,但该作用无浓度依赖性.结论 UA通过抑制COX-2的表达、减少PGE2的合成抑制胃腺癌细胞SGC-7901的增殖,可能成为一种胃癌预防剂.

    作者:胡志芳;邓涛;张奕颖;江华;陈会敏;董兴高;张秋萍 刊期: 2007年第05期

  • SREBP-1C、GRP-94在小鼠肝细胞脂质代谢中的作用

    目的 探讨高同型半胱氨酸(Hcy)血症中肝细胞固醇调节元件结合蛋白(SREBP-1C)与葡萄糖调节蛋白94(GRP-94)的表达变化,评价内质网应激蛋白对肝细胞脂质代谢的影响.方法 高蛋氨酸饮食诱导小鼠高Hcy血症,分析肝细胞内甘油三酯(TGE)、胆固醇(CHO)含量的变化,RT-PCR、Western blot分别检测内质网应激蛋白SREBP- 1 C和GRP- 94 mRNA及其蛋白表达.结果 高蛋氨酸饮食后小鼠各时点血浆Hcy及肝细胞内TGE、CHO含量均显著升高,而血浆TGE、CHO含量升高并不明显;小鼠肝细胞内质网应激蛋白SREBP- 1 C和GRP- 94 mRNA及其蛋白表达也显著升高(P<0.05).结论 Hcy诱导的内质网应激可引起SREBP-1C、GRP-94的表达变化及内源性固醇调节通路失调.

    作者:黄丹文;晏春根;朱东方;倪培华 刊期: 2007年第05期

  • P2X受体拮抗剂对大鼠心肌缺血心电图的影响

    受损伤(创伤、休克或缺血)时心血管组织可释放三磷酸腺苷(ATP),而心脏和血管的细胞均表达嘌呤受体的亚型,表明嘌呤类物质可影响心血管功能.

    作者:李桂林;戴群;梁尚栋;徐昌水;张春平;高云 刊期: 2007年第05期

  • 人CD23基因的扩增及其在HEK 293T细胞的高效表达

    目的 建立一个有效表达CD23的系统.方法 采用RT-PCR方法,从外周血淋巴细胞中扩增人的CD23 cDNA基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1B上,构建成pcDNA3.1/CD23 质粒表达载体;将pcDNA3.1/CD23质粒转染HEK293T细胞,通过流式细胞仪和Western blot检测CD23在细胞中的表达情况.结果 扩增的CD23 cDNA序列与文献报道的一致;通过构建表达载体和转染细胞实现了CD23 cDNA在293T细胞膜上的表达.转染效率达80%以上,并获得了较高水平的表达.结论 扩增CD23 cDNA基因,经过转染HEK293T细胞,实现了CD23在HEK293T细胞的高效表达.

    作者:李秀锦;仲峰;付志强;范绍瑛;李轶;刘俊乐;仲飞 刊期: 2007年第05期

  • 低氧预适应小鼠脑组织内P38 MAPK磷酸化水平增高

    目的 探讨P38丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,P38 MAPK)在小鼠脑低氧预适应形成过程中的作用.方法 用成年雄性BALB/c小鼠制备小鼠整体低氧预适应模型,小鼠随机分为正常对照(H0)、早期(H1~H4)和延迟性(H5~H6)低氧预适应等7组;应用Western bolt并结合Gel Doc凝胶成像系统,定量检测小鼠脑组织内P38 MAPK磷酸化水平和蛋白表达量.结果 与H0组小鼠相比,H2~H6组的海马和皮层及H3~H6组的下丘脑中P38 MAPK磷酸化水平明显增高 (P<0.05,每组n=6);H1~H6组的皮层、海马和下丘脑中P38 MAPK蛋白表达量无明显变化.结论 P38 MAPK磷酸化激活而非蛋白表达量的变化可能参与了小鼠脑低氧预适应的发生、发展过程.

    作者:卜祥宁;韩松;李俊发 刊期: 2007年第05期

  • 食管上皮癌变过程中FAS、FASL、FADD和caspase-8的表达及其意义

    目的 研究细胞凋亡调控因子FAS、FASL、FADD和caspase-8基因在食管上皮癌变过程中的表达及其意义.方法 用免疫组化SP法检测食管黏膜中FAS、FASL、FADD和caspase-8的表达;原位杂交法检测食管黏膜中FADD mRNA和caspase-8 mRNA的表达.结果 从食管正常黏膜组织到不典型增生和食管癌组织,FAS蛋白表达率呈逐渐下降趋势,FASL蛋白表达率呈逐渐上升趋势,食管癌与正常组织之间差异明显(P<0.05).高、中分化鳞癌中蛋白阳性表达率显著高于低分化鳞癌(P<0.05).从食管正常黏膜组织到不典型增生和食管癌组织,FADD和caspase-8蛋白及RNA阳性表达率呈逐渐下降趋势,食管癌与正常黏膜组织之间差异明显(P<0.01);caspase-8蛋白和mRNA在高、中分化鳞癌中的表达率高于低分化鳞癌(P<0.05).结论 FAS与FASL的表达失衡与食管癌的发生、发展有密切关系,并与食管癌的分化和免疫逃避有关.FADD与caspase-8基因表达异常在食管癌的发生、发展中可能起着重要作用.

    作者:许欣;彭林涛;刘丽华;王佩;左连富 刊期: 2007年第05期

  • 三磷酸腺苷结合盒转运体A1对糖尿病地鼠巨噬细胞内胆固醇外流的影响

    目的 探讨糖尿病地鼠巨噬细胞内胆固醇外流的改变,尤其是三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的功能变化以及与载脂蛋白AI(apoA-Ⅰ)的相互作用.方法 用金黄地鼠高脂及糖尿病模型,分离纯化腹腔巨噬细胞,用外源性apoA-Ⅰ及8-br-cAMP在体外干预巨噬细胞,测定干预前后巨噬细胞ABCA1表达和细胞内胆固醇含量的变化.结果 细胞内胆固醇含量在糖尿病组高于高脂组和正常对照组.apoA-Ⅰ和8-br-cAMP在体外均增加糖尿病组巨噬细胞ABCA1 mRNA的表达.apoA-Ⅰ使各组细胞内胆固醇外流均增加,且与孵育时间成正比,胆固醇外流量糖尿病组高于高脂组和正常对照组.结论 糖尿病鼠巨噬细胞内胆固醇大量沉积,可能与内源性apoA-Ⅰ量和功能的改变所引起的ABCA1介导的细胞内胆固醇外流受阻有关.

    作者:朱颖;陈连凤;方全;严晓伟 刊期: 2007年第05期

  • 烟碱型乙酰胆碱受体与临床疾病

    烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)是配体门控的离子通道受体家族成员,广泛分布于中枢神经、神经肌肉接头以及其他细胞表面.构成亚基不同和分布部位的差异表现为受体功能的多样性.早期研究发现,nAChR主要与神经电信号传导有关;近期研究认为它是胆碱能抗炎通路的关键受体.阐明这些功能的生理机制对重症肌无力、癫痫以及多器官衰竭等相关疾病有重要的临床意义.

    作者:周国勇;胡森 刊期: 2007年第05期

  • 2001年河北省儿童青少年血压及相关因素分析

    目的 探讨河北省健康儿童青少年的血压分布与性别、年龄、城乡以及生长指标的相关性.方法 采用分层不等整群抽样的原则,在河北省的两市、两县中随机抽取检测人群,体检确定为健康的5268名10~18岁的儿童、青少年,进行血压、身高和体重等指标的测定.结果 儿童、青少年的血压随着年龄的增长而升高,城市男、女儿童、青少年的血压高于农村(P<0.001),尤其以舒张压更明显;男性和女性的血压偏高率分别为7.5%和6.8%,总血压偏高率为7.2%,高于以往同地区儿童、青少年的血压偏高率;血压偏高者其收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、体重和BMI值均显著高于同年龄、同性别的血压正常者(P<0.001);Pearson相关分析显示,男、女学生收缩压和舒张压与年龄、身高、体重、BMI均呈正相关(P<0.001),其中男生血压与身高、体重,女生与体重的相关系数较大.结论 河北地区儿童、青少年的血压偏高率高于该地区已报道值;体重偏高或肥胖儿童、青少年应注意控制体重,以降低患原发性高血压的危险性.

    作者:祖淑玉;刘伟;徐成丽;韩少梅;朱广瑾 刊期: 2007年第05期

  • 碱性成纤维细胞生长因子诱导人间充质干细胞向心肌样细胞分化

    目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在体外诱导人骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌样细胞分化中的作用,及其对MSCs增殖的影响.方法 用含5-氮杂胞苷(5-aza)的培养基(A组)、含bFGF的培养基(B组)、含5-aza+bFGF的培养基(C组)以及普通培养基(对照组)培养人骨髓MSCs.观察细胞形态的改变;免疫细胞化学法检测α-actin、cTnT和connexin-43的表达;RT-PCR法检测Nkx2.5 、GATA- 4 和cTnT的mRNA水平;MTT法检测MSCs的增殖.结果 A组和C组的部分细胞呈肌细胞样改变,表达蛋白α-actin,cTnT和connexin43;A组和C组的cTnT、Nkx2.5 和GATA- 4的mRNA水平明显高于对照组,B组的Nkx2.5 和GATA- 4 的mRNA水平明显高于对照组;B组细胞增殖明显高于对照组,A组和C组细胞增殖明显低于对照组,但C组明显高于A组.结论 bFGF能明显促进MSCs增殖,与5-aza合用能更好地诱导人MSCs向心肌样细胞分化.

    作者:杨琳;陈连凤;沈悌 刊期: 2007年第05期

  • P38/caspase-3介导的MEF2C信号通路参与大鼠脑缺血再灌注损伤

    目的 观察大鼠脑缺血再灌注后海马CA1区肌细胞促进因子(MEF) 2C磷酸化(激活)和蛋白水平的变化规律,并探讨其可能的分子机制.方法 采用SD大鼠四动脉结扎模型,用免疫印迹法检测蛋白表达,给药组大鼠在缺血前20 min脑室给药.结果 脑缺血再灌注可诱导MEF2C激活,6 h达高峰;其蛋白表达在再灌后期(3~5 d)明显下降.Caspase-3蛋白和激活的caspase-3 (17 ku) 水平在再灌后期均显著增加;Caspase-3特异性抑制剂Ac-DEVD-CHO可明显阻止再灌3 d 的MEF2C蛋白表达降低.P38激酶抑制剂SB202190不但抑制再灌注6 h 的MEF2C激活,而且也降低了再灌注3 d 的caspase-3激活;但胞外信号调节激酶 (ERK) 5的反义寡核苷酸未显著影响MEF2C的磷酸化水平.结论 P38/caspase-3依赖的MEF2C信号通路可能参与了大鼠脑缺血再灌注诱发的神经元凋亡过程.

    作者:王瑞敏;张全光;武鹏;杨方;马文东 刊期: 2007年第05期

  • 大鼠急性肺栓塞后cytokeratin-19表达下降

    目的 研究急性肺血栓栓塞大鼠的肺组织中细胞角蛋白19(cytokeratin-19,CK-19)及其分解产物CYFRA21-1的表达变化.方法 建立大鼠急性肺血栓栓塞模型并做肺泡灌洗.用半定量RT-PCR法和Western blot法检测CK-19的mRNA和蛋白表达;免疫组化方法检测CK-19在肺组织内的分布;放免法检测血清和肺泡灌洗液中CYFRA21-1的水平;检测动脉血氧饱和度.结果 急性肺栓塞后CK-19 mRNA和蛋白质水平均逐渐降低;肺泡上皮细胞CK-19的表达明显下降;血清和肺泡灌洗液中CYFRA21-1水平升高;动脉血氧饱和度呈明显下降趋势.结论 急性肺栓塞不仅导致CK-19表达降低,而且分解代谢增强,因此CYFRA21-1的检测对于判断急性肺栓塞的严重程度及预后具有重要意义.

    作者:李圣青;遆新宇;简文;刘阿茹;欧阳海峰;赵峰 刊期: 2007年第05期

  • 内脏高敏感大鼠结肠电活动及运动异常

    目的 探讨内脏高敏感大鼠结肠电活动及运动的特点.方法 实验分对照组和模型组,模型组腹腔注射鸡卵清蛋白使大鼠内脏致敏.2周后,记录结肠快波、慢波及收缩波,观察消化间期移行性综合肌电IMC的周期、Ⅲ期持续时间、快波和慢波的波动频率及平均大振幅,记录结肠收缩波数目及收缩波指数.结果 模型组消化间期复合肌电的周期延长(P<0.01),Ⅲ期持续时间延长(P<0.01),快波的波动率加快(P<0.05),平均大振幅增大(P<0.01).慢波的波动频率加快(P<0.05),平均大振幅增大(P<0.01).收缩波数目增加(P<0.05),收缩波指数增大(P<0.05).结论 内脏高敏感大鼠结肠电活动及运动有明显异常.

    作者:印媛君;吕宾;杨午鸣;柯庆;丁瑞峰 刊期: 2007年第05期

基础医学与临床杂志

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主办:北京生理科学会