吴昊;姚平;刘宁;林宏生;张利;侯辉歌;查振刚
目的:观察血管内皮生长因子在口腔扁平苔藓上皮细胞中的表达.方法:①实验材料:选择2005-01/2006-03在泰山医学院附属医院经临床与病理检查确诊的7例口腔扁平苔癣患者口腔黏膜损害标本,所有患者此前均未经任何治疗,无其他系统性疾病,伴有系统性疾病者不纳入研究范围.②实验方法:分离上皮层和固有层后,体外培养口腔扁平苔癣上皮细胞,提取总RNA和蛋白质,另取5例来源于本科手术切除的正常口腔黏膜作为对照,患者知情同意.③实验评估:以逆转录-聚合酶链反应检测口腔扁平苔癣和正常口腔黏膜上皮细胞血管内皮生长因子mRNA的表达,蛋白免疫印迹检测血管内皮生长因子蛋白质的表达水平.结果:①正常口腔黏膜上皮细胞和口腔扁平苔癣的上皮细胞均表达血管内皮生长因子4种亚型:血管内皮生长因子121、血管内皮生长因子145、血管内皮生长因子165和血管内皮生长因子189.其中血管内皮生长因子121、血管内皮生长因子165和血管内皮生长因子189 mRNA在口腔扁平苔癣上皮细胞水平明显高于正常口腔黏膜上皮细胞的表达,差异具有显著意义(P<0.01).②蛋白免疫印迹发现口腔扁平苔癣黏膜上皮细胞血管内皮生长因子蛋白质水平较正常口腔黏膜上皮细胞表达增加(P<0.01).结论:血管内皮生长因子mRNA和蛋白质在口腔扁平苔癣上皮细胞中表达增高.
作者:张古泉;龙跃州;邢在臣;杨明峰;贾玉生 刊期: 2007年第32期
目的:探讨单基因遗传自然发病型(db/db)糖尿病小鼠颌下腺转化生长因子β1和血管内皮生长因子表达变化与糖尿病性神经病变关系.方法:实验于2003-09/2004-05在承德医学院中心实验室和承德医学院附属医院病理科完成.①实验材料:引进日本C57BL/ksj-db/+m表型正常隐性基因小鼠80只.②实验干预及分组:小鼠近亲(兄妹)交配,得到纯合子和非纯合子后代.纯合子后代为单基因遗传自然发病型糖尿病小鼠,即db/db型,相当于人类Ⅱ型糖尿病;非纯合子后代,即db/+m型,为糖尿病和肥胖基因携带者.生后4周起,平均血糖值升高达10 mmol/L以上且同时伴发肥胖者确定为糖尿病鼠,选取3,4,6,8,10个月龄db/db型,血糖>10 mmol/L的雄性小鼠作为实验组;相应月龄的雄性同种db/+m型小鼠为对照组,每组5只动物.③实验评估:动物麻醉多聚甲醛灌注固定后,取3,4,6,8,10个月两组小鼠颌下腺,采用SP免疫组织化学染色,观察颌下腺的组织学改变和转化生长因子β1、血管内皮生长因子阳性表达的变化.结果:除去死亡和造模失败的小鼠外,正常对照组16只、实验组25只进人结果分析.①两组小鼠内皮细胞生长因子的表达变化:内皮细胞生长因子在正常鼠及糖尿病鼠颌下腺的血管内皮细胞中均有表达,实验组与对照组内皮细胞生长因子阳性细胞表达随月龄增加而增多.在月龄相同时,实验组的表达均强于同龄对照组(P<0.05或0.01).②两组小鼠转化生长因子β1的表达变化:转化生长因子β1在正常及糖尿病鼠颌下腺的腺泡细胞、颗粒曲管及纹状管细胞中均有表达,阳性颗粒位于胞浆内.对照组阳性细胞数随月龄变化不大,实验组阳性细胞表达数随月龄增加而增多.在月龄相同时,实验组的表达均高于同龄对照组(P<0.01).结论:db/db糖尿病小鼠颌下腺转化生长因子β1表达增强,同时有间质纤维增强,转化生长因子β1表达上调与糖尿病间质纤维增生密切相关.db/db糖尿病小鼠颌下腺血管内皮生长因子表达随病程延长表达增加,与糖尿病病程呈正相关.
作者:杜金凯;王春艳;高福禄;葛志华 刊期: 2007年第32期
目的:观察鼠肢芽提取液及运动对坐骨神经损伤修复的作用.方法:实验于2005-09/2006-09在湛江师范学院重点学科实验室完成.①实验分组:用成年Wistar怀孕大鼠肢芽制备提取液.出生3 d Wistar乳鼠40只,行右侧坐骨神经切断术,按随机数字表法分为肢芽提取液非运动组、肢芽提取液运动组、生理盐水非运动组、生理盐水运动组,每组10只.肢芽提取液非运动组、肢芽提取液运动组损伤局部用鼠肢芽提取液每隔2 d注射1次.肢芽提取液运动组乳鼠每天进行零坡度跑台运动训练,每周递增速度,25,30,35,40 m/min.生理盐水非运动组、生理盐水运动组损伤局部注射等量的生理盐水.生理盐水运动组乳鼠运动时间和程度同上.②实验评估:术后30 d肉眼观察坐骨神经失神经后有无水肿、充血、坏死,新生轴突长度、粗细等情况;光镜检查脊髓前角神经元胞体状况,尼氏染色Nissl小体状况(包括核、核仁)神经元有无浓缩、破碎、胶质细胞数量;运动神经元计数检查尼氏染色切片上双侧前角运动神经元数目,标准为能辨认出细胞核的神经元轮廓.结果:①肉眼观察坐骨神经失神经后状况:失神经后,局部有轻微水肿、充血、坏死,有新生轴突,肢芽提取液运动组新生轴突较粗较长,生理盐水非运动组局部严重水肿、充血、坏死,新生轴突,较细较短.②光镜下观察神经元情况:生理盐水非运动组神经元无浓缩、破碎不明显、胶质细胞数量稍有改变.肢芽提取液非运动组有些神经元浓缩、破碎、胶质细胞数量增多.肢芽提取液运动组神经元无浓缩、轻微破碎、胶质细胞数量增加.③运动神经元数目:术后30 d肢芽提取液非运动组损伤侧神经元数目高于生理盐水非运动组,差异有显著性意义(t=2.85,P<0.005).肢芽提取液运动组损伤侧神经元数目高于肢芽提取液非运动组,生理盐水运动组损伤侧神经元数目高于生理盐水非运动组,差异均有显著性意义(t=2.38,2.48,P<0.005).④运动神经元存活率:乳鼠坐骨神经切断术后局部注射肢芽提取液,术后30 d,运动乳鼠可维持损伤侧脊髓前角运动神经元存活率77.96%,非运动乳鼠存活率59.75%;局部注射生理盐水,运动乳鼠可维持损伤侧脊髓前角运动神经元存活率33.45%,非运动乳鼠存活率28.62%.结论:鼠肢芽提取液对坐骨神经损伤的修复作用显著,加入运动干预后恢复效果更佳.
作者:朱齐宁;崔静 刊期: 2007年第32期
目的:观察骨髓基质干细胞与异种脱蛋白松质骨复合修复尺骨缺损的可行性.方法:实验于2006-01在辽宁医学院附属第一医院外科实验室(省级重点实验室)完成.①实验材料:取12月龄健康杂种犬18只,体质量(15.0±2.2)kg.②实验方法:将所有动物的双侧尺骨制备成中断20 mm骨-骨膜缺损模型,骨髓基质干细胞与脱蛋白松质骨于体外复合培养后,将其植入其中16只犬的右侧缺损处作为实验组,左侧植入单纯脱蛋白松质骨作为对照组,另2只犬不植入任何材料为空白组.③实验评估:在4,8,12周分别行大体标本、扫描电镜和组织学观察,比较3组骨缺损修复的能力.结果:纳入健康杂种犬18只,均进入结果分析.4周时实验组支架材料部分吸收,植入物表面有纤维骨痂形成,对照组支架材料少量吸收,植入物表面有少量骨样组织形成;8周时,大体标本及组织学观察,实验组中的支架材料已完全降解,骨缺损部分修复,对照组中植入物两端少量新骨形成,材料中为纤维骨样组织;12周时,实验组骨缺损完全修复,对照组植入物两端有新骨包绕,与骨端连接紧密.12周时空白组骨缺损未修复.结论:利用体外扩增培养的骨髓基质干细胞与异种骨组合,具有较强的骨传导和骨诱导活性.
作者:李晖;刘丹平 刊期: 2007年第32期
目的:观察阻塞型睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者认知功能及血清胰岛素样生长因子1水平的变化,并分析其相关性.方法:试验于2005-11/2006-04在中南大学湘雅二医院老年病科睡眠实验室完成.80例受试者进行多导睡眠监测,应用包含11个亚组的简易智能状态量表评价认知功能,同时检测血清胰岛素样生长因子1水平.采用SPSS13.0统计软件,对以上各指标间的相关性进行线性相关、Spearman秩相关及多元逐步回归分析.结果:①分组:80例受试者根据呼吸暂停低通气指数(AHI)分为轻度组14例(5≤AHI<15),中度组12例(15≤AHI<30),重度组44例(AHI≥30),对照组10例(AHI<5).②组间比较:OSAHS患者慢波睡眠时间、快动眼睡眠时间、低血氧饱和度和血清胰岛素样生长因子1水平均低于对照组(P<0.05).③认知功能损害:OSAHS患者简易智能状态量表中短时记忆、注意与计算、语言复述、时间定向、地点定向、言语表达6个亚组分值低于对照组(P<0.01).④多导睡眠图各指标与其他指标相关性:简易智能状态量表总分及血清胰岛素样生长因子1与AHI负相关(P<0.01),与慢波睡眠时间、快动眼睡眠时间和低血氧饱和度正相关(P<0.01);不同受累认知功能亚组与多导睡眠图各指标相关性不全一致,但均与睡眠结构紊乱及低氧相关.⑤简易智能状态量表总分及血清胰岛素样生长因子1相关性:两者呈显著正相关(r=0.778,P<0.01).结论:①患者存在认知功能受损,主要表现在总体认知功能以及短时记忆、注意与计算、语言复述、时间定向、地点定向、言语表达领域的损害,随着病变严重程度的加深,认知功能受损的范围增加.②总体认知功能与夜间低氧、睡眠结构紊乱以及血清胰岛素样生长因子1水平降低相关.③患者血清胰岛素样生长因子1水平降低,与夜间低氧、睡眠结构相关.
作者:许琰;罗荧荃;杨宇 刊期: 2007年第32期
目的:总结微创经皮钢板置入内固定治疗胫腓骨骨折的技术操作特点,并观察材料及宿主反应.方法:2004-06/2006-10在济宁医学院附属金乡医院对18例胫腓骨骨折患者在微创手术下进行了手术置入内固定材料.男13例,女5例,年龄17~73岁.术后按Johner-Wruhs方法评价测试各大关节功能,分为优、良、中、差.全部病例进行临床随访.术前、术后1周、6周、3个月、半年及1年分别摄X线片与健侧对比测量患肢外观、成角、旋转和短缩情况,并观察材料及宿主反应.结果:①本组病例切口均顺利愈合,术后3~14 d出院.②全部获得随访,平均随访时间14个月;骨愈合时间3~10个月.③按Johner-Wruhs方法评价功能,优13例,良4例,中1例,差0例,以优良为满意标准,本组病例总体满意率94.4%.④术后1例出现跛行步态,中度疼痛,骨成角畸形15°,可能因为患者对不锈钢材料有排斥反应造成固定不牢所致.结论:微创经皮钢板置入内固定材料治疗胫腓骨骨折具有手术创伤小、骨折愈合快、功能恢复好的特点;内固定材料未出现特殊材料反应与宿主反应.
作者:徐海波;张普晟;王洪兵 刊期: 2007年第32期
目的:了解兔屈趾肌腱Ⅱ区伤口愈合过程中转化生长因子β1受体在不同时间和部位的表达情况.方法:实验于2004-09/2005-07在青岛大学医学院附属医院动物实验中心完成.①实验材料:清洁级成年新西兰大白兔42只,体质量4.0~4.5 kg,雌雄不拘.②实验干预及分组:36只成年新西兰大白兔左前中趾Ⅱ区屈趾深肌腱被完全切断并修复为实验组,分别于1,7,14,21,28,56 d获取肌腱,每个时间点6只;另取6只兔,不损伤和修复屈趾肌腱做对照组.③实验评估:用Western blot和免疫组织化学技术分析两组转化生长因子β1受体的表达差异.结果:①Western blot发现实验组切断修复后的肌腱转化生长因子β1受体蛋白的上调,主要集中在腱鞘、腱外膜和沿肌腱切口处,在14 d达到高峰至56 d才明显降低;对照组只见极少的受体表达.②免疫组织化学染色结果与Western blot是一致的.结论:肌腱损伤修复后,肌腱和腱鞘转化生长因子β1受体的表达明显增加,在术后14 d达到高峰,56 d开始降低,这种受体上调可能为屈指肌腱术后瘢痕形成的生物学调节提供新的途径.
作者:张才龙;夏长所 刊期: 2007年第32期
背景:反义药物的研究仍然是当前生物医学领域较为活跃的热点之一,其具有高效特异的优势,作为基因治疗的途径已受到许多研究者的关注.目的:观察脂质体介导角蛋白14反义寡核苷酸对人角质形成细胞K14基因和蛋白表达及体外增殖活性的影响.设计:单一样本观察.单位:解放军第四军医大学西京医院皮肤科.材料:人表皮角质形成细胞、K14寡核苷酸基因片段(全硫代修饰,以上序列均由上海生工生物工程公司合成).反转录酶、TaqDNA聚合酶均购自Invitrogen公司,K14单抗购自Antibody公司,SABC试剂盒购自博士德.EPICS-PRO-FILEⅡ流式细胞仪(美国Coulter).方法:人表皮角质形成细胞原代培养,3~10代用于实验,利用脂质体将人工合成的正义、反义及错配K14寡核苷酸基因片段导人角质形成细胞,并设空白组作对照.应用流式细胞仪、反转录聚合酶链式反应和免疫组化方法检测反义寡核苷酸对角质形成细胞的细胞周期、K14基因和蛋白表达的影响.主要观察指标:寡核苷酸转染人角质形成细胞后对角质形成细胞增殖和K14表达的影响.结果:①反转录聚合酶链反应产物电泳显示:各组均出现特异的K14基因条带,反义组基因表达明显低于正义组、错义组和空白组.正义组、错义组和空白组K14/β-actin比值相近(P>0.05);而反义组明显低于前述3组(F=47.554,P<0.01).②免疫组化法检测K14蛋白表达:培养的角质形成细胞均表达一定水平的K14,加入反义寡核苷酸(ASODN)后,K14表达明显减少,20 μmol/L浓度的反义寡核苷酸即可显著抑制K14的表达;而对照细胞组K14的表达没有明显变化.③流式细胞仪检测DNA含量变化:经K14反义寡核苷酸处理细胞48 h,可见细胞处于G1期细胞比例明显上升(74.6%),S期细胞比例明显下降(19.4%),而正义组,错义组及空白组均无此变化.结论:反义寡核苷酸可特异地抑制K14的合成,从而抑制人角质形成细胞的增殖.
作者:陈玉欣;郑淑云;李巍;刘玉峰 刊期: 2007年第32期
目的:不同牵引节奏对腰椎间盘突出症的治疗效果是否可以产生影响?分组比较其效果,以探索疗效更好、不良反应更少的牵引方法.方法:①对象:选择2005-10/2006-04山东省立医院门诊和病房以及济南华飞骨伤医院病房收治的腰椎间盘突出症患者220例,男116例,女104例;年龄(17~68)岁;病程1 d~3年.②分组:按随机数字表法将患者分为一维牵引慢牵快放组60例,一维牵引快牵慢放组60例,三维牵引慢牵快放组50例,三维牵引快牵慢放组50例.各组性别、年龄、病程均衡.③干预:各组患者在普通治疗的基础上施以不同牵引节奏的牵引治疗.一维牵引慢牵快放组和快牵慢放组:应用山东省医疗器械研究所生产的WQL-307型牵引床,牵放时间分别为3~5 s/0.5 s,0.2 s/1 s;三维牵引慢牵快放组和快牵慢放组:应用济南市华飞产业有限公司生产的C型电脑三维牵引床,牵放时间分别为3~5 s/0.5 s,0.2 s/1 s;各组牵引距离为40~60 mm,均牵引一两次,间隔不少于5 d.④评估:观察各组患者临床疗效及治疗前后口本骨科学会(JOA)总评分变化.结果:220例患者全部进入结果分析.①临床疗效:一维慢牵快放牵引组的总有效率优于一维快牵慢放牵引组(91.67%,78.33%,P<0.05);三维慢牵快放牵引组的总有效率优于三维快牵慢放牵引组(96.00%,80.00%,P<0.05).②治疗前后JOA总评分比较:一维慢牵快放牵引组前后差值与一维快牵慢放牵引组前后差值比较,差异有显著性(8.50±3.89,6.02±2.61,P<0.05),三维慢牵快放牵引组前后差值与三维快牵慢放牵引组前后差值比较,差异有显著性(9.14±4.09,6.78±2.45,P<0.05).结论:无论是一维牵引慢牵快放还是三维牵引慢牵快放的疗效都优于传统的快牵慢放牵引法.慢牵快放牵引法能使手法的颤压力更有效地传递到突出物上,在安全前提下可牵引距离更大,相应椎间隙加大,后纵韧带牵张力增加,更有利于突出物变位还纳.
作者:王海泉;孟迎春;范璞 刊期: 2007年第32期
目的:观察葛根素对去卵巢骨质疏松性骨折大鼠胰岛素样生长因子1表达的影响.方法:实验于2005-02/2006-01在解放军第四五四医院骨科和南京医学院完成.实验材料:葛根素购自中国生物药品鉴定所.SD雌性大鼠40只,8月龄,体质量(280±19)g,由南京医学院实验动物中心提供.实验方法:将大鼠用4%戊巴比妥钠40 mg/kg腹腔内麻醉,在无菌条件下行双侧卵巢摘除术,术后继续饲养2个月,借助骨折器建立股骨闭合性骨折模型.按随机排列表法分为对照组和治疗组,每组20只.治疗组术后给予灌胃20 mg/(kg·d)剂量的葛根素,对照组给予2 mL生理盐水处理.于骨折后第2周利用Western-blot和RT-PCR方法检测胰岛素样生长因子1蛋白与胰岛素生长因子1 mRNA表达,观察葛根素对胰岛素生长因子1表达的影响.结果:40只大鼠全部进入结果分析.①Western-blot检测胰岛素生长因子1蛋白:与对照组相比,治疗组胰岛素生长因子1蛋白表达明显升高(1.40±0.09,3.2±0.31,P<0.05).②RT-PCR分析胰岛素生长因子1 m RNA表达:与对照组相比,治疗组胰岛素生长因子1 mRNA表达明显升高(12.3±2.09,23.1±1.32,P<0.05).结论:葛根素可以通过调节胰岛素生长因子1的表达,从而可能加快去卵巢大鼠骨质疏松性骨折的愈合.
作者:周强;付庭斌 刊期: 2007年第32期
目的:骨形态发生蛋白与骨延长关系的报道很少.为观察其对于牵拉骨再生延长区骨愈合的作用,将重组人骨形态发生蛋白2经皮注射到兔胫骨延长区,行组织学验证.方法:实验于2004-06/2005-03在吉林大学基础医学院实验动物中心完成.①实验材料:雄性日本大耳白兔30只;重组人骨形态发生蛋白2(由美国哈佛医学院分子骨科中心Oliver博士馈赠).②实验干预及分组:制作日本大耳白兔延长区骨再生不良动物模型24只,行快速延长,2次/d,1 mm/次,2 mm/d,共延长10 d,共2 cm.将兔子随机分为2组,每组12只.对照组,延长结束后延长区注射醋酸盐缓冲液;重组人骨形态发生蛋白2组,延长结束后延长区注射醋酸盐缓冲液溶解的重组人骨形态发生蛋白2.③实验评估:延长结束后2周、4周时2组各取4只兔,麻醉后处死,进行延长区拍摄X射线片及延长区骨标本组织学光镜检查.结果:术中兔死亡及针道处骨折6只,24只进入结果分析.①延长区X射线片评价:延长结束后2周和4周时,显示重组人骨形态发生蛋白2组新生骨痂明显多于对照组,延长结束后4周时重组人骨形态发生蛋白2组髓腔开始形成.②延长区组织学观察结果:延长结束后4周时,对照组延长区周新生软骨、骨增多,融合成片,出现编织骨.重组人骨形态发生蛋白2延长区软骨细胞吸收矿化,转化为编织骨,并逐渐向皮质骨改建塑形.结论:牵拉骨再生延长结束后,延长区经皮注射重组人骨形态发生蛋白2,经间接X射线及组织学直接验证,对延长区骨愈合有促进作用.
作者:徐鹏;王丹辉;李长胜;张新 刊期: 2007年第32期
目的:探讨将小肠黏膜下层粘接交联制作小口径血管支架的可行性.方法:实验于2006-04/12在上海交通大学附属第六人民医院中心实验室和四肢显微外科研究所完成.①实验材料:小肠黏膜下层膜按Abraham法制备;清洁级雄性新西兰大白兔24只,2.8~3.2 kg.②实验过程:以胶原蛋白-硫酸软骨素共混溶液将猪小肠黏膜下层膜粘接成小口径(内径3.0 mm)管型支架,并用碳化二亚胺交联,得到粘接交联小肠黏膜下层管.取24只兔,手术造成颈总动脉缺损,随机平分为2组,对照组采用缝制小肠黏膜下层管桥接修复缺损;实验组采用粘接交联小肠黏膜下层管桥接修复缺损.③实验评估:通过爆破压测定检测支架的粘接强度、通过体外溶血试验和细胞毒性试验检测支架的生物相容性;于术后1,2周和1,2个月做血管彩色多普勒超声检测其通畅性;以组织学苏木精-伊红染色、Masson染色观察组织生长情况,评价支架的血液相容性和组织再生能力.结果:①粘接交联的小肠黏膜下层血管支架爆破压:在湿润状态的爆破压可达22.1 kPa;溶血率为1.4%;细胞毒性评级为0~1级.②支架溶血率和细胞毒性:体外溶血及细胞毒性试验均表明碳化二亚胺交联小肠黏膜下层管具有良好的生物相容性,完全符合医用生物材料的应用要求.③植入兔体内后支架通畅性和组织学表现:植入替代兔颈总动脉缺损后2个月,粘接交联支架的通畅率为83.3%(10/12),明显高于缝制支架的33.3%(4/12)(P<0.05);在通畅血管中动脉瘤样扩张的发生率,缝制支架为100%(4/4),粘接交联支架仅为20%(2/10).所有通畅的血管在术后1个月时均有完整平滑的内膜形成和平滑肌细胞长人;2个月时平滑肌细胞增多,小肠黏膜下层的胶原纤维也明显减少;无炎症反应、血管破裂发生.结论:粘接交联法可用于小肠黏膜下层小口径血管支架的制作,可保持支架的良好生物相容性并改善血管重建过程中小肠黏膜下层的力学性质,从而显著提高小肠黏膜下层用于修复小口径血管缺损的成功率.
作者:刘生和;王建广;范存义;莫秀梅 刊期: 2007年第32期
目的:创面微环境中许多细胞都能不同程度的产生活性氧等自由基.观察氧化应激对大鼠真皮成纤维细胞生物学行为的影响,有利于认识创面愈合的机制.方法:实验于2005-09/2006-03在上海市烧伤研究所完成.①实验材料:体质量为200~220g的清洁级雄性SD大鼠,由中科院上海动物实验研究所提供.②实验方法:取SD大鼠背部皮肤组织,消化分离表皮真皮,剪成0.1 cm×0.2 cm真皮块,置于含体积分数为0.10 FBS的DMEM培养瓶中,在37 ℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中培养,每周换液2次.约7~10 d后,成纤维细胞逐渐从真皮块中迁移出来,并且大量增殖,待原代培养成纤维细胞生长融合成片,用0.05%胰酶-EDTA消化,用含体积分数为0.10 FBS的DMEM终止消化,离心后,按1:3分装传代.取对数生长期的成纤维细胞,培养24 h后,分别以20,50,100,150 μmol/L H2O2干预成纤维细胞,另设空白对照(不加H2O2)及凋零组(只加Hank's液不加细胞).③实验评估:采用MTT法观察细胞活力,流式细胞仪观察细胞凋亡,荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测,脂质过氧化物测试盒测试细胞丙二醛含量.结果:①MTT法观察细胞活力:随着H2O2浓度增加,成纤维细胞活力明显降低,各H2O2干预组吸光度值均较空白对照组低(P<0.01).②流式细胞仪测定细胞凋亡:与空白对照组相比,20 μmol/L H2O2干预组细胞凋亡无明显变化,100 μmol/LH2O2干预组细胞凋亡明显升高(F=47.78,P<0.01).③细胞内活性氧的测定:与空白对照组相比,20,100 μmol/L H2O2干预组细胞活性氧产生明显升高(F=166.557,P<0.01,P<0.01).④细胞内脂质过氧化物测定:与空白对照组相比,20 μmol/L H2O2干预组细胞脂质过氧化产物丙二醛含量无明显变化,100 μmol/L H2O2干预组细胞脂质过氧化产物丙二醛含量明显升高(F=5.756,P<0.01).结论:氧化应激能导致大鼠真皮成纤维细胞细胞活力下降,凋亡增加,抗氧化治疗可以作为难愈性创面的治疗策略.
作者:杨国志;王润秀;林源;陆树良;梁自乾;刘达恩;葛奎;乔亮;宋振强;黄飞 刊期: 2007年第32期
目的:观察Ⅱ型胶原诱导的实验性关节炎动物模型组织细胞因子基质金属蛋白酶3和组织金属蛋白酶抑制剂1表达的变化,探讨基质金属蛋白酶3和组织金属蛋白酶抑制剂1在类风湿关节炎发病机制中的作用.方法:实验于2005-09/2006-11在白求恩国际和平医院中心实验室完成.①实验分组:健康雄性Wistar大鼠60只,体质量(100±20)g,随机选出50只以备造模,另外10只作为对照组.在造模成功的大鼠中再随机选出10只作为模型组.②实验方法:采用10 mg牛Ⅱ型胶原与100 mg弗氏不完全佐剂和60 mg卡介苗充分研磨后,以每支每点0.1~0.2 mL(1 g/L)从大鼠背部尾根部多点皮下注射,于10 d后按上述方法和剂量再次重复免疫和制作大鼠胶原性关节炎模型.③实验评估:初次免疫后7周,剥离膝关节滑膜,进行苏木精-伊红染色光镜下观察;切除另侧膝关节滑膜,免疫组织化学染色后,用Metamorph图像分析系统进行检测,计算每个视野基质金属蛋白酶3和组织金属蛋白酶抑制剂1的阳性面积比,以其作为阳性反应细胞密度.结果:纳入大鼠60只,20只进入结果分析.模型组大鼠关节组织中的基质金属蛋白酶3阳性密度为0.75±0.19,明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.01);组织金属蛋白酶抑制剂1的表达阳性密度为0.48±0.17,与对照组0.78±0.21比较明显降低,差异有显著性意义(P<0.01).结论:细胞因子基质金属蛋白酶3和组织金属蛋白酶抑制剂1表达的变化与胶原性关节炎大鼠的发病相关.
作者:杨慧君;钱玉中;杨继章;李倩 刊期: 2007年第32期
目的:依据同期全国标准对2 645名少数民族学生身体机能状况进行3年追踪观察,并与同期全国农村学生平均值比较.方法:观察对象为广西民族大学2003级学生,均参加了广西民族大学2003年、2004年、2005年3次体质健康测试.参加测试学生共15个民族2 645人,其中男生1 337人,女生1 308人,年龄18~20岁.收集受试学生3年的身高、体质量、肺活量、立定跳远、立位体前屈、体质量指数等数据,与同期全国农村学生平均值比较,应用SPSS11.5软件进行数据处理.结果:①身高和体质量:学生刚进校时的身高偏低、体质量偏轻,到了大学三年级,身高体质量与全国持平,增长率比全国农村学生同期多2.45%;女生身高体质量增幅明显低于男生,身高增长率比全国同期多1.57%,而体质量增长率则比全国农村学生同期少0.4%,形成偏瘦型体型.②肺活量:学生刚进校时肺活量低于同期全国农村学生平均水平(P<0.01),3年里男生增长了11.55%、女生增长率为27.72%,到了大学三年级女生肺活量达到全国农村学生同期平均水平,男生还没有达到.③立位体前屈:学生在刚入校时高于同期全国农村学生平均水平(P<0.01),男女生均呈逐年上升趋势.④立定跳远:学生在下肢肌肉力量和爆发力能力上低于全国农村学生同期水平,到了大学三年级,男生增长率为18.15%,达到了全国农村学生同期水平,女生低于全国农村学生同期水平.⑤体质量指数:男女学生均低于全国农村学生同期水平,体质量偏轻者女生多于男生.结论:①广西民族大学2003级2 645名少数民族学生大学3年期间身体形态发育处于高峰期,男生身体形态发育良好;女生形成偏瘦型体型,身体形态发育情况总体欠佳.②与全国农村学生同期平均水平比较,少数民族学生肺活量机能较差,立位体前屈机能较高,立定跳远平均水平男生较高,女生较差.③男女体质量指数分布有所不同,体质量偏轻者女生多于男生,营养状况总体欠佳.
作者:邱红霞;何江川 刊期: 2007年第32期
目的:验证重组人酸性成纤维细胞生长因子关节腔内注射对兔实验性早中期骨关节炎软骨退行性变的防治作用.方法:实验于2005-10/2006-04在暨南大学附属第一医院中心实验室完成.选用健康新西兰大白兔30只,切断膝关节前、后交叉韧带建立兔骨关节炎模型后,按随机数字表法分为3组,空白组、透明质酸钠组和重组人酸性成纤维细胞生长因子组.重组人酸性成纤维细胞生长因子组术后第8周起于手术侧膝关节腔内注射入酸性成纤维细胞生长因子8 000 IU/(只·周),透明质酸钠组关节腔内注射透明质酸钠1 mL/(只·周).空白组不进行干预.术后第16周空气栓塞法处死动物,大体观察及手术显微镜下观察软骨表面分级;取股骨髁负重面软骨标本进行苏木精-伊红、沙黄染色及骨关节炎组织病理学评分(正常为0~1,重度为10分以上)、分级.结果:30只动物全部进入结果分析.①重组人酸性成纤维细胞生长因子组和透明质酸钠组标本股骨髁负重软骨有轻度粗糙,关节软骨可见浅表溃疡形成.空白组标本股骨髁负重面软骨有轻~中度溃疡形成.②3组动物关节软骨表面分级差异有显著性意义(χ2=22.97,P=0.000).③3组动物骨关节炎软骨的组织病理学分级差异有显著性意义(χ2=16.84,P=0.005),透明质酸钠组和重组人酸性成纤维细胞生长因子组的骨关节炎组织病理学评分均显著低于空白组(P<0.05).结论:关节腔注射重组人酸性成纤维细胞生长因子可以较好的延缓兔膝骨关节炎软骨退行性变和预防骨关节炎的发展.
作者:吴昊;姚平;刘宁;林宏生;张利;侯辉歌;查振刚 刊期: 2007年第32期
目的:观察经皮椎体内注入骨水泥(聚甲基丙烯酸甲酯)治疗脊椎骨质疏松压缩性骨折的疗效.方法:自2005-06/2006-06吉林大学中日联谊医院骨科及大庆龙南医院骨科对35例40个椎体的骨质疏松压缩性骨折患者使用经皮椎体内注射骨水泥,行椎体成形术.成形材料:美国KYPHON公司生产的骨水泥,生产准许号:(GB/T19001-2000和YY/T0287-1996).结果:35例患者均参加随访6个月.术后均未出现骨水泥外漏、脊髓或马尾神经损伤等并发症.35例患者中5例出现穿刺部位局部疼痛,服用镇痛药物后均缓解.疼痛完全消失25例,占71.4%;明显缓解8例,占22.6%;轻度缓解2例,占6.0%;无缓解0例.15例患者在术后72 h内均能下床活动.术后未再发生压缩性骨折及疼痛.结论:经皮椎体注入骨水泥可以有效改善椎体骨质疏松压缩性骨折患者疼痛症状,随访6个月未出现充填剂不良性宿主反应,临床疗效较好.
作者:景元海;杨小玉;赵丛然;李恒;郭明峰;汪群;王强 刊期: 2007年第32期
目的:观察高原军事训练期间等长运动对武警战士血管功能影响,为指导在高原的军事训练提供科学依据.方法:试验于2005/2006在青海(海拔约3 000 m,大气压力在60.49 kPa)和天津(海拔约4 m,大气压力约101.08 kPa)完成.受试者为武警某部新兵连战士.将受试者分为3组,高原籍高原训练组(简称高原Ⅰ组,38人)、平原籍高原训练组(简称高原Ⅱ组,62人)、平原籍平原训练组(简称平原组,60人).所有受试者进行12周训练,训练强度相同.训练前、训练第4,8,12周用XXG-E3型自动心血管功能诊断仪记录血管功能指标;每次在静态和50%单手大握力状态下3 min末同步纪录桡动脉脉搏图和肱动脉血压.结果:160名受试者均进入结果分析.①与等长运动前比较,3个组运动后平均收缩压升高[如第12周,平原组:(94.6±13.3)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)→(109.1±12.1)mm Hg;高原Ⅰ组:(93.9±7.3)mm Hg→(108.7±10.7)mm Hg;高原Ⅱ组:(98.0±10.6)mm Hg→(114.2±10.8)mm Hg;P均<0.001],平均舒张压升高[平原组:(73.7±8.8)mm Hg→(87.5±11.1)mm Hg;高原Ⅰ组:(73.1±7.1)mm Hg→(89.2±11.7)mm Hg;高原Ⅱ组(77.3±8.9)mm Hg→(97.1±9.7)mm Hg;P均<0.001]、平均动脉压升高[平原组:(84.1±10.8)mm Hg→(98.3±11.4)mm Hg;高原Ⅰ组:(83.5±7.0)mm Hg→(99.0±11.0)mm Hg;高原Ⅱ组(87.7±9.5)mm Hg→(105.7±10.0)mm Hg;P均<0.001],高原Ⅱ组脉压差减小[(43.5±8.1)mm Hg→(34.2±9.3)mm Hg,P<0.001].②与等长运动前比较,3个组运动后冠状动脉灌注压升高[平原组:(7.54±1.13)kPa→(9.26±1.56)kPa;高原Ⅰ组:(7.37±1.21)kPa→(9.52±1.96)kPa;高原Ⅱ组(7.99±1.28)kPa→(10.83±1.49)kPa;P均<0.001]、主动脉排空系数增大(平原组:0.19±0.03→0.21±0.02;高原Ⅰ组:0.18±0.02→0.21±0.03;高原Ⅱ组:0.18±0.03→0.22±0.03;P均<0.001),总外周阻力、标准周阻增大,尤以高原Ⅱ组明显(P<0.001).③与等长运动前比较,三个组左室射血阻抗运动后减小.④与等长运动前比较,3个组肺动脉压、肺动脉阻力、肺动脉楔压、血管弹性系数运动前后无显著差别(P>0.05).结论:①在低氧环境军事训练期间50%等长握力运动对体循环血管的功能影响较大,对肺循环血管的功能影响较小.②低氧军事训练对平原籍战士影响较大,但未见损伤心室和肺循环功能.
作者:佟长青;赵娟;薄海;向晓辉 刊期: 2007年第32期
目的:观察牵张成骨修复颅骨缺损过程中硬脑膜组织力学性能的变化.方法:实验于2006-03/12在武汉大学人民医院外科实验室完成.①实验材料:选用健康清洁级山羊30只,18~24个月龄,体质量18~20 kg,性别不限,由武汉大学医学院实验动物中心提供(SCXK(鄂)2003-2004).②实验方法:将山羊单纯随机分为6组:7d组(牵张第7天),固定0,2,4,8周组,正常对照组,每组5只.取实验组山羊25只,切开颅顶,暴露颅顶区骨面,裂钻行10 mm×25 mm颅骨切开,仔细分离硬脑膜,移去骨块,形成骨缺损,建立颅骨缺损牵张模型.延迟7 d后开始牵张,牵张速率为0.8 mm/d,2次/d,每次0.4 mm,间隔12 h,总牵张距离10 mm.分别于牵张中(牵张第7天)、牵张结束当天(固定期第0周)、固定期第2,4,8周处死动物,处死后将各组动物沿牵张区外5 mm切取硬脑膜组织20 mm×30 mm.正常对照组5只动物不实施手术,取同样大小颅顶区硬脑膜组织.③实验评估:标本修整后分别沿牵张方向和垂直牵张方向切成长宽比为5:1的窄条形试件,浸入人工脑脊液直接送实验室,进行单向拉伸实验和拉伸蠕变实验,观察硬脑膜弹性模量和在相同载荷条件下应变值变化.结果:30只山羊全部进入结果分析.①不同时期两个方向硬脑膜组织弹性模量变化:不同时期两个方向硬脑膜组织弹性模量:沿牵张方向硬脑膜弹性模量在牵张期逐渐增加,至固定期第2周大,以后逐渐下降,至固定期第8周接近正常;在垂直牵张方向上,硬脑膜弹性模量值无明显变化.②不同时间硬脑膜在相同载荷条件下的应变值变化:当突然加载荷时有一初始变形,随后在该载荷作用下标本的变形随时间变形缓慢增加,但幅度很小.正常对照组初始应变值ε约为0.03,牵张中、末应变值变化与正常对照组一致,固定第2,4周ε增加,至第8周趋于正常.结论:硬脑膜组织在牵张过程中出现适应性改建,牵张成骨修复颅骨缺损对硬脑膜组织力学性能无不良影响.
作者:周海孝;余墨声;胡静;戚孟春 刊期: 2007年第32期
背景:目前国内外学者对骨性翼腭窝局部解剖学和影像学作了一些研究,而有关骨性翼腭窝的断层解剖学研究尚缺乏.目的:在成人颅骨标本的冠状面和水平面上测量翼腭窝的有关孔距和径抖值,观察翼腭窝在相应切面上的形态.设计:重复测量设计.单位:成都医学院科研处.材料:实验于2006-03/2006-11在成都医学院人体解剖学教研室局部解剖实验室完成.选取中国成人完整无损干性颅骨30例(60侧),未分年龄、性别.方法:对30个(60侧)成人干性颅骨标本左右两侧的翼腭窝进行切片,其中15个行冠状面切片,另15个行水平面切片,观察测量翼腭窝在相应层面的形态和有关孔距和径值,并对所得结果进行统计学分析.主要观察指标:①在冠状面上测量:眶圆距(眶下裂低处与圆孔中心之间的距离);圆翼距Ⅰ(圆孔与翼管中心之间的上下垂直间距);圆翼距Ⅱ(圆孔出现处与翼管出现处之间的距离).②在水平面上测量:前后径(每层面上与腭骨垂直板相平行的翼腭窝前后壁间距大值);左右径(每层面上腭骨垂直板中点至翼腭窝前壁外后突出处和翼腭窝后壁前外突处连线的中点之距离).③分别在冠状面、水平面上观察:各层面上翼腭窝的形态.结果:①冠状面上,左右两侧翼腭窝的第1~6层70%(21侧)呈斜倒梯形,30%(9侧)呈斜四边形,第7~10层均表现为管形.右侧眶圆距平均值为(5.0±2.7)mm,左侧眶圆距平均值为(5.3±2.1)mm;右侧圆翼距Ⅰ平均值为(6.4±3.9)mm,左侧圆翼距Ⅰ平均值为(6.1±4.3)mm;右侧圆翼距Ⅱ平均值为(7.3±2.6)mm,左侧圆翼距Ⅱ平均值为(7.5±2.1)mm.②水平面上,左右两侧翼腭窝第一二层其前、后壁主要表现为凸面均向后的双弧形80%(24侧);第三四层主要表现为凸面相对的双弧形约66.7%(20侧);第五六层主要表现为管形60%(18侧);第7~10层则全部表现为管形.水平面上,第1~6层翼腭窝左右径大于前后径,第7~10层翼腭窝左右径约等于前后径.左右两侧样本间翼腭窝各层面径值差异不明显(P>0.05).结论:骨性翼腭窝断层解剖学研究弥补了对其局部解剖的局限,为翼腭窝影像学及相关外科手术提供了可靠的解剖学依据.
作者:刘卫华;李鑫;马大军;刘亚国;王伦安 刊期: 2007年第32期