郭丽萍；罗建民
目的 探讨新西兰大白兔腰椎关节突关节失稳诱发椎间盘退变(IVDD)的蛋白多糖和Ⅰ、Ⅱ型胶原基因的表达.方法 30只新西兰大白兔.随机分为骨性手术组和软组织手术组.软组织手术组仅骨膜下剥离L3～L7的椎旁肌肉;骨性手术组完整切除L4、L5双侧下关节突、L5棘突,保留L5、L6上关节突.骨性手术组L4-5、L5-6椎间盘为实验组椎间盘,上下相邻的L3-4、L6-7为自身对照组椎间盘;软组织手术组L4-5、L5-6椎间盘为实验对照组椎间盘.术后1、2、4及8个月处死实验动物,RT-PCR检测椎间盘中蛋白多糖和Ⅰ、Ⅱ型胶原基因表达,并用磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)做内参照行半定量.结果 随着术后时间的延长,各组蛋白多糖、Ⅱ型胶原表达量逐渐下降,Ⅰ型胶原表达量逐渐上升.相同时间段,蛋白多糖、Ⅱ型胶原实验组低,实验对照组高(P＜0.01);Ⅰ型胶原实验组高,实验对照组低(P＜0.01).结论 椎间失稳后可以诱发出IVDD.蛋白多糖、Ⅰ、Ⅱ型胶原基因表达能够较早反映出IVDD.
作者：黄宗强；刘尚礼；郑召民 刊期： 2007年第09期
目的 建立非探针标记荧光定量PCR的SNP检测技术,分析人脂联素(APM1)基因单核苷酸多态性(SNP)与Ⅱ型糖尿病(T2DM)的关系.方法 设计3'末端碱基特异性引物,进行定量PCR反应,通过比较各对引物的扩增效率判断基因型,并进行测序验证.利用该方法确定20例T2DM、24例肥胖及28例同年龄组正常人APM1基因的45位和276位碱基的SNP.结果 该方法能有效地区分不同的基因型,与测序结果符合率100%.APM1基因45位SNP与T2DM相关(P＜0.05),基因型为TT纯合子者发生T2DM的危险性是G/T和GG者的3倍;而肥胖与APM1基因45和276位点SNP无关.结论 等位基因3'末端碱基特异性引物定量PCR可以用于基因SNP检测.APM1基因45位碱基的SNP与T2DM发生有关.
作者：宋现让；王淑芳；迟伟玲 刊期： 2007年第09期
作者： 刊期： 2007年第09期
胰腺癌对传统治疗方法有抵抗性,现代分子生物学技术的应用则使提高患者生存率的希望增加,但前提是了解胰腺癌发病的分子机制.近年研究发现,在胰腺癌发生、发展的不同阶段有不同的信号通路激活并发挥作用.如:有丝分裂信号通路、生长因子信号通路、与发育有关的信号通路和黏蛋白信号通路.本文就它们和胰腺癌的关系做一综述.
作者：任新瑜；梁智勇；刘彤华 刊期： 2007年第09期
目的 研究三磷酸腺苷(ATP)对于人食管鳞癌Eca-109细胞系和人肝癌SMMC-7721细胞系的抗增殖作用和作用机制.方法 用MTT法测定肿瘤细胞的增殖,AO/EB双荧光染色法观察细胞形态学的改变,流式细胞仪定量检测细胞增殖周期、凋亡率及凋亡相关蛋白的改变.结果 ATP在0.01～0.3 mmol/L浓度范围内,可不同程度地抑制Eca-109和SMMC-7721细胞的增殖.细胞分别经0.3 mmol/L的ATP处理72 h后,少量SMMC-7721细胞形态出现了凋亡特征,而Eca-109细胞无明显凋亡特征;ATP 0.03、0.1和0.3 mmol/L分别处理细胞72 h后,两株细胞的凋亡率及凋亡相关蛋白均无显著变化.ATP0.3 mmol/L可使Eca-109细胞的G0/G1细胞数目显著增多,S期细胞显著减少,增殖指数显著降低.结论 ATP通过增加G0/G1期细胞和减少S期细胞,抗食管癌Eca-109细胞增殖,此作用与诱导细胞凋亡无关.而ATP对肝癌SMMC-7721细胞的抗增殖作用与周期无关.
作者：秦葵；朱忠宁；任雷鸣；刘江惠 刊期： 2007年第09期
目的 探讨肺癌RAS相关区域家族1A(RASSF1A)启动子CpG岛甲基化状态和基因表达水平与肺癌发生的关系.方法 用甲基化特异性PCR检测RASSF1A启动子CpG岛甲基化状态,实时定量PCR检测RASSF1A mRNA的表达水平.结果 在肺癌组织中RASSF1A启动子甲基化频率为53.33%(24/45),在正常肺组织中发生甲基化的频率为13.04%(3/23)(P＜0.05).正常肺组织中RASSF1A mRNA全部表达,肺癌组织中表达缺失率为28.89%(13/45),且表达量低于正常肺组织(P＜0.05);不同年龄、性别、肿瘤大小、恶性程度、肿瘤分类中其表达量无显著差异;RASSF1A甲基化与其mRNA表达水平下降密切相关.结论 肺癌中RASSF1A基因启动子甲基化频率明显升高,其表达普遍下调或缺失,提示RASSFlA启动子甲基化在肺癌发生、发展中起一定作用.
作者：余宗涛；袁亚莉；张吉才；高琼；吕军 刊期： 2007年第09期
目的 动态观察多房棘球绦虫重组BCG-Em Ⅱ/3疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的变化.方法 采用鼻腔内接种疫苗免疫BALB/C鼠,在免疫后0、2、4、6、8和10周各剖杀4只小鼠取脾,分离脾细胞,用EmAg或ConA刺激培养,收集脾细胞培养上清液,检测脾细胞培养上清液中的IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4水平,同时设有PBS对照.结果 疫苗接种组中IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4分别在免疫后2～6、2～6、2～10和8～10周升高,分别在免疫后4、4、8和10周达高水平.结论 多房棘球绦虫重组BCG-Em Ⅱ/3疫苗在免疫早期(2～8周)即可诱导小鼠产生一个TH1型保护性免疫反应.
作者：李文桂；王鸿；朱佑明 刊期： 2007年第09期
目的 评价c-erbB-2蛋白表达与胃癌预后的关联性.方法 利用RevMan4.2软件对近15年国内外发表的有关c-erbB-2与胃癌预后研究的入选11篇文献进行定量综合分析.结果 11篇文献5年生存率合并OR值为0.69(95% CI:0.54～0.87);其中3篇以5年生存率为终末指标、以OR值为关联指标的文献,其5年生存率合并OR值为0.67(95% CI:0.48～0.94);高分化胃癌组和进展期胃癌组5年生存率合并OR值分别为0.18(95% CI:0.09～0.38)和0.72(95% CI:0.47～1.09).结论 e-erbB-2表达可能入选的11篇研究与胃癌预后呈负相关.
作者：秦桂萍；路喜安；齐广强；曲成毅；梁建芳；李士瑛 刊期： 2007年第09期
目的 研究P21蛋白和凋亡相关基因XIAP在美伐他汀诱导A549细胞凋亡中的作用及其分子机制.方法 应用MTT法检测细胞系的增殖作用,流式细胞仪、透射电镜检测细胞周期和凋亡;用流式细胞术、Western blot和RT-PCR检测P21蛋白、XIAP蛋白及P21和XIAP mRNA的表达.结果 美伐他汀呈剂量和时间依赖性对A549增殖产生抑制;并诱导A549细胞G0/G1期阻滞和凋亡.美伐他汀对P21 mRNA及P21总蛋白的表达无影响,但可使P21胞膜蛋白的表达下降.美伐他汀作用后XIAP mRNA及XIAP蛋白的表达均下降.加入甲羟戊酸可完全逆转美伐他汀的上述作用.结论 美伐他汀通过甲羟戊酸途径抑制A549细胞增殖并诱导凋亡,使细胞周期进程阻滞于G0/G1期,XIAP参与美伐他汀诱导A549细胞凋亡的基因调控.美伐他汀靶向HMG-CoA还原酶,抑制P21蛋白异戊二烯化、阻止P21蛋白与细胞膜的结合,不影响P21总蛋白的表达.
作者：郭丽萍；罗建民 刊期： 2007年第09期
目的 建立人造血干细胞(HSC)体外大量扩增的佳培养模型.方法 采用模拟骨髓微环境的成骨细胞共培养法、条件培养基及模拟微重力效应三维培养等方法进行人脐带血来源HSC体外扩增.结果 在用含15%的条件培养基与成骨细胞共培养条件下,HSC的扩增倍数高,第7天和第14天扩增倍数分别为6.46和14.82倍.在此条件下进行集落形成实验对扩增后造血干细胞多能性的功能检测发现,粒细胞-巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)及红系集落形成单位(BFU-E)数目也多.结论 以成骨细胞作为饲养层细胞,添加15%的条件培养基不仅能使HSC在体外大量增殖,并且具有维持HSC自我更新和多向分化潜能.
作者：曲鑫建；李惠侠；丰美福；孙世铎 刊期： 2007年第09期
目的 探讨准确高效追踪检测脑内移植来源细胞的方法.方法 克隆雄性大鼠Y染色体SRY基因的一个片段,并且将该片段标记成DNA探针,对大鼠的脑切片进行原位杂交.结果 使用大鼠Y染色体SRY基因片段标记的探针后,可以特异性检测雌性大鼠脑内来源于雄性大鼠的移植细胞.结论 使用原位杂交方法可以有效、准确地追踪检测移植细胞.
作者：李娜；赵焕英；杨慧 刊期： 2007年第09期
microRNAs(miRNAs)是人类新发现的一类非编码小分子RNA,广泛分布于真核细胞内.miRNAs通过与靶基因互补位点配对结合,在转录后水平负性调控靶基因的表达,参与生长发育、细胞增殖、细胞凋亡、细胞分化等生命过程.据推测,大约1%的人类已知基因编码miRNAs,而miRNAs可调控人类基因组中10%～30%的基因.本文就如何识别miRNAs及其靶基因作一简要介绍.
作者：宋宝；宋现让；刘杰；魏玲 刊期： 2007年第09期
目前的研究发现,容积调控氯通道(volume regulated anion channel,VRAC)很可能参与了细胞增殖[1],但还缺乏足够证据.本研究探讨渗透压改变对胃癌细胞增殖的影响,为VRAC参与细胞增殖提供了进一步的证据.
作者：田晶；候毅鞠；赵行宇；周士胜 刊期： 2007年第09期
作者： 刊期： 2007年第09期
目的 观察chymase mRNA表达与糖尿病仓鼠心肌局部血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)水平以及心肌病变的关系.方法 腹腔注射链脲菌素(STZ)诱导1型糖尿病仓鼠模型,18周时电镜观察心肌超微结构,SABC法检测心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原水平,TUNEL技术检测心肌细胞凋亡,RT-PCR检测chymase mRNA表达水平,放射免疫分析法测定心肌Ang Ⅱ含量.结果 糖尿病组仓鼠血糖、血脂明显升高,心肌细胞线粒体肿胀明显、局部破裂,肌丝广泛溶解,核肿胀,Ⅰ、Ⅲ型胶原沉积、心肌细胞凋亡明显.心肌Ang Ⅱ含量,心肌chyamse mRNA表达水平均显著高于对照组(P＜0.01).结论 存在糖尿病心肌病变的仓鼠心肌中,chymase mRNA表达水平以及Ang Ⅱ含量显著升高,可能是导致心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原沉积、心肌细胞凋亡等心肌病变的重要原因.
作者：赵柯湘；肖谦；黄昶荃；高原 刊期： 2007年第09期
临床见习是医学生从理论学习到临床实践的重要转折,全面而系统的临床实习是医学生接受实践检验、巩固和加强所学理论知识,培养独立工作能力的一个十分重要的阶段.本文根据临床见习教学特点,分析当前临床教学和医学生临床见习中存在的伦理学难题,并就如何解决进行探讨.
作者：阿赛古丽 刊期： 2007年第09期
目的 检测宫颈癌细胞系HeLa、CaSki和SiHa中结肠腺瘤性息肉病基因(APC)启动子区CpG岛甲基化状态;探索肼苯哒嗪(Hyd)能否作为去甲基化药物恢复APC表达.方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测细胞系中APC启动子区CpG岛甲基化情况;Hyd处理后,RT-PCR检测APC Mrna表达.结果 APC启动子区CpG岛在HeLa细胞中被甲基化,在CaSki细胞中半甲基化,在SiHa细胞中无甲基化;一定浓度Hyd处理HeLa、CaSki细胞后,检测到APCmRNA表达.结论 HeLa、CaSki细胞系APC表达沉默与APC启动子区甲基化有关;Hyd能作为去甲基化药物诱导APC表达.
作者：宋银宏；张昌菊 刊期： 2007年第09期
目的 探讨急性胃黏膜损伤时细胞凋亡形式及作用.方法 制备大鼠水浸-束缚应激(WRS)模型,计算溃疡指数(UI);TUNEL法检测胃黏膜细胞凋亡;透射电镜观察细胞形态;免疫组化法检测BCl-2/BAX蛋白的表达.结果 与正常大鼠比较,WRS后2 h,黏膜损伤严重(P＜0.01),凋亡细胞明显增多(P＜0.01),BCl-2表达明显减弱(P＜0.05),BAX表达明显增加(P＜0.01);WRS后24 h,黏膜修复,凋亡细胞仍高于正常水平(P＜0.05),BCl-2表达基本恢复正常,BAX表达仍高于正常水平(P＜0.05).透射电镜下可见WRS组发生凋亡的细胞形态各异.结论 细胞凋亡是急性胃黏膜损伤过程中细胞死亡的重要形式.
作者：刘婧；李兆申 刊期： 2007年第09期
目的 探讨抗聚丝蛋白抗体(AFA)对类风湿关节炎(RA)诊断的价值,并比较与RA的其他早期诊断指标的相关性.方法 从人表皮细胞中提取并部分纯化聚丝蛋白(filaggrin)抗原,用于免疫印迹检测(Western blot)103例RA血清标本和140例对照血清,包括系统性红斑狼疮(SLE)、干燥综合征(SS)、骨性关节炎(OA)95份及正常人45份.APF和AKA用间接免疫荧光法检测.结果 103例RA病人的AFA阳性率、特异性分别为35.9%,93.7%,显著高于疾病对照组和正常人(P＜0.001).在AFA阳性的37例中,AKA也阳性的为26例,重叠率为70.3%;APF亦阳性的为31例,重叠率为83.8%,AFA与AKA、APF之间存在相关性.结论 AFA对RA具有很高的特异性.AFA的检测可用于RA的临床诊断.AFA与APF及AKA有相关性,但不能完全取代它们的检测.
作者：艾脉兴；冷晓梅；曾小峰 刊期： 2007年第09期
目的 探讨蛋白激酶C(PKC)对生长板软骨细胞增殖、细胞外基质合成和转录因子SOX9表达的影响.方法 分离、培养大鼠肋生长板软骨细胞(RGC),分别采用倒置显微镜、同位素掺入、RT-PCR和Western blot方法检测1、10和100 nmol/L的PKC激动剂PDBu对第一代无血清培养RGC的细胞形态、增殖、胶原和蛋白多糖的合成及COL2A1和AGGRECAN的转录及转录因子SOX9表达的影响.结果 100 nmol/L PDBu的处理,使无血清培养RGC的细胞形态接近于血清组(10% FBS);抑制增殖并促进胶原和蛋白多糖的合成,3H-TdR、3H-proline和35S-sulfate掺入量分别是无血清对照组的83%、152.6%和146.5%(P＜0.05);促进COL2A1和AGGRECAN的转录和SOX9的表达.结论 PKC的活化抑制了生长板软骨细胞增殖,促进其分化.
作者：季煜华；曾耀英；季秋虹 刊期： 2007年第09期
基础医学与临床杂志
主管:北京市科学技术协会
主办：北京生理科学会
