秦桂萍；路喜安；齐广强；曲成毅；梁建芳；李士瑛
许多实验室在制作小型动物心肌梗死(myocardial infarction,MI)模型时要使用气管插管和呼吸机辅助呼吸[1～2],其操作复杂,总死亡率高.本实验就这一特点对已往制作的动物MI模型加以改进,使制作大鼠MI模型的方法简单、有效,并可对MI后大鼠进行超声心动图检测.
作者：刘尊齐；崔连群；盖玉生；李峰 刊期： 2007年第09期
目的 探讨准确高效追踪检测脑内移植来源细胞的方法.方法 克隆雄性大鼠Y染色体SRY基因的一个片段,并且将该片段标记成DNA探针,对大鼠的脑切片进行原位杂交.结果 使用大鼠Y染色体SRY基因片段标记的探针后,可以特异性检测雌性大鼠脑内来源于雄性大鼠的移植细胞.结论 使用原位杂交方法可以有效、准确地追踪检测移植细胞.
作者：李娜；赵焕英；杨慧 刊期： 2007年第09期
目的 研究1型及2型糖尿病对海马组织内Tau蛋白部分位点磷酸化水平的影响,并探讨其作用机制.方法 同月龄Wistar大鼠,分为对照组(CTL)、1型(T1DM)及2型(T2DM)糖尿病模型组.葡萄糖氧化酶法检测血糖,放免法检测血浆胰岛素,Western blot分析海马内总Tau以及Tau蛋白上部分位点(pSer199、pThr212、pSer214、pSer396及pSer422)的磷酸化水平.γ32P标记的ATP和特异性底物肽检测海马内胰岛素信号传导系统中的关键酶糖原合成激酶-3β(GSK-3β)活性.结果 T1DM及T2DM组血糖水平显著高于CTL组(P＜0.001);T2DM组血浆胰岛素水平显著高于CTL组(P＜0.001),而T1DM组显著低于CTL组(P＜0.01);T2DM组胰岛素抵抗指数显著高于T1DM及CTL组(P＜0.001).T1DM及T2DM组大鼠海马组织内总Tau蛋白水平与CTL比较无显著差异,但阿尔茨海默病相关的Tau蛋白磷酸化位点pS199、pT212及pS396在T1DM及T2DM组都呈现过度磷酸化状态.同时,GSK-3β活性在这两种糖尿病大鼠模型的海马组织内明显增高(P＜0.01,P＜0.001).结论 糖尿病大鼠海马组织内Tau蛋白部分位点磷酸化水平增高.胰岛素信号系统功能低下而导致传导途径中GSK-3β活性上调,这可能是引起大鼠海马内Tau蛋白磷酸化的一个主要原因.
作者：胡蜀红；杨雁；艾冬云；张建华；张木勋 刊期： 2007年第09期
目的 动态观察多房棘球绦虫重组BCG-Em Ⅱ/3疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的变化.方法 采用鼻腔内接种疫苗免疫BALB/C鼠,在免疫后0、2、4、6、8和10周各剖杀4只小鼠取脾,分离脾细胞,用EmAg或ConA刺激培养,收集脾细胞培养上清液,检测脾细胞培养上清液中的IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4水平,同时设有PBS对照.结果 疫苗接种组中IL-2、IFN-γ、TNF-α和IL-4分别在免疫后2～6、2～6、2～10和8～10周升高,分别在免疫后4、4、8和10周达高水平.结论 多房棘球绦虫重组BCG-Em Ⅱ/3疫苗在免疫早期(2～8周)即可诱导小鼠产生一个TH1型保护性免疫反应.
作者：李文桂；王鸿；朱佑明 刊期： 2007年第09期
目的 研究P21蛋白和凋亡相关基因XIAP在美伐他汀诱导A549细胞凋亡中的作用及其分子机制.方法 应用MTT法检测细胞系的增殖作用,流式细胞仪、透射电镜检测细胞周期和凋亡;用流式细胞术、Western blot和RT-PCR检测P21蛋白、XIAP蛋白及P21和XIAP mRNA的表达.结果 美伐他汀呈剂量和时间依赖性对A549增殖产生抑制;并诱导A549细胞G0/G1期阻滞和凋亡.美伐他汀对P21 mRNA及P21总蛋白的表达无影响,但可使P21胞膜蛋白的表达下降.美伐他汀作用后XIAP mRNA及XIAP蛋白的表达均下降.加入甲羟戊酸可完全逆转美伐他汀的上述作用.结论 美伐他汀通过甲羟戊酸途径抑制A549细胞增殖并诱导凋亡,使细胞周期进程阻滞于G0/G1期,XIAP参与美伐他汀诱导A549细胞凋亡的基因调控.美伐他汀靶向HMG-CoA还原酶,抑制P21蛋白异戊二烯化、阻止P21蛋白与细胞膜的结合,不影响P21总蛋白的表达.
作者：郭丽萍；罗建民 刊期： 2007年第09期
目的 探讨蛋白激酶C(PKC)对生长板软骨细胞增殖、细胞外基质合成和转录因子SOX9表达的影响.方法 分离、培养大鼠肋生长板软骨细胞(RGC),分别采用倒置显微镜、同位素掺入、RT-PCR和Western blot方法检测1、10和100 nmol/L的PKC激动剂PDBu对第一代无血清培养RGC的细胞形态、增殖、胶原和蛋白多糖的合成及COL2A1和AGGRECAN的转录及转录因子SOX9表达的影响.结果 100 nmol/L PDBu的处理,使无血清培养RGC的细胞形态接近于血清组(10% FBS);抑制增殖并促进胶原和蛋白多糖的合成,3H-TdR、3H-proline和35S-sulfate掺入量分别是无血清对照组的83%、152.6%和146.5%(P＜0.05);促进COL2A1和AGGRECAN的转录和SOX9的表达.结论 PKC的活化抑制了生长板软骨细胞增殖,促进其分化.
作者：季煜华；曾耀英；季秋虹 刊期： 2007年第09期
目的 比较来源于正常志愿者和慢性再生障碍性贫血(CAA)患者骨髓间充质干细胞(MSCs)免疫抑制作用的区别.方法 培养5例正常志愿者和10例CAA患者的骨髓MSCs,比较两组MSCs的形态、细胞表型、细胞因子的表达,通过PHA刺激的T细胞增殖试验、混合淋巴细胞培养和T细胞周期检测比较两组MSCs对T细胞的抑制作用.结果 两组MSCs形态、表型基本相同.CAA来源的MSCs对PHA和同种异体抗原诱导的T细胞的抑制作用均低于正常志愿者来源的MSCs,加入正常志愿者的MSCs后有更多的T细胞阻滞在G0/G1期,但CAA来源的MSCs作用较弱.两组MSCs表达的肝细胞生长因子(HGF)和转化生长因子(TGF-β2)无明显区别,但CAA患者的MSCs表达的TGF-β1、3较正常志愿者MSCs表达的明显减少.结论 虽然CAA的MSCs在形态、增殖和细胞表型上基本正常,但其对T细胞的抑制作用减弱,在经过免疫抑制剂治疗后仍然存在,其异常是否与CAA的发病机制有关需要进一步研究.
作者：刘丽辉；孙昭；韩钦；叶丽萍；施兵；金建刚；赵春华 刊期： 2007年第09期
目的 观察苦参碱对人单核细胞胆固醇和三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达的影响.方法 用TBARS法检测细胞内MDA,油红O染色法检测泡沫细胞的形成,荧光分光光度法检测细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量,RT-PCR和Western blot检测ABCA1 mRNA与蛋白的表达.结果 单核细胞经佛波脂(PMA)及ox-LDL共同孵育后,细胞内积聚的总胆固醇、游离胆固醇、胆固醇酯及脂质过氧化产物均明显增多(P＜0.05),有大量泡沫细胞形成,而ABCA1蛋白、mRNA水平明显减少(P＜0.05);苦参碱干预组显著缓解上述变化,细胞内胆固醇酯减少,ABCA1 mRNA、蛋白表达明显增加(P＜0.05).结论 苦参碱可能通过增强ABCA1的表达和降低细胞内胆固醇聚积而发挥抗动脉粥样硬化的作用.
作者：姜怡邓；张慧萍；曹军；李桂忠；王树人 刊期： 2007年第09期
目前的研究发现,容积调控氯通道(volume regulated anion channel,VRAC)很可能参与了细胞增殖[1],但还缺乏足够证据.本研究探讨渗透压改变对胃癌细胞增殖的影响,为VRAC参与细胞增殖提供了进一步的证据.
作者：田晶；候毅鞠；赵行宇；周士胜 刊期： 2007年第09期
目的 探讨肺癌RAS相关区域家族1A(RASSF1A)启动子CpG岛甲基化状态和基因表达水平与肺癌发生的关系.方法 用甲基化特异性PCR检测RASSF1A启动子CpG岛甲基化状态,实时定量PCR检测RASSF1A mRNA的表达水平.结果 在肺癌组织中RASSF1A启动子甲基化频率为53.33%(24/45),在正常肺组织中发生甲基化的频率为13.04%(3/23)(P＜0.05).正常肺组织中RASSF1A mRNA全部表达,肺癌组织中表达缺失率为28.89%(13/45),且表达量低于正常肺组织(P＜0.05);不同年龄、性别、肿瘤大小、恶性程度、肿瘤分类中其表达量无显著差异;RASSF1A甲基化与其mRNA表达水平下降密切相关.结论 肺癌中RASSF1A基因启动子甲基化频率明显升高,其表达普遍下调或缺失,提示RASSFlA启动子甲基化在肺癌发生、发展中起一定作用.
作者：余宗涛；袁亚莉；张吉才；高琼；吕军 刊期： 2007年第09期
目的 评价c-erbB-2蛋白表达与胃癌预后的关联性.方法 利用RevMan4.2软件对近15年国内外发表的有关c-erbB-2与胃癌预后研究的入选11篇文献进行定量综合分析.结果 11篇文献5年生存率合并OR值为0.69(95% CI:0.54～0.87);其中3篇以5年生存率为终末指标、以OR值为关联指标的文献,其5年生存率合并OR值为0.67(95% CI:0.48～0.94);高分化胃癌组和进展期胃癌组5年生存率合并OR值分别为0.18(95% CI:0.09～0.38)和0.72(95% CI:0.47～1.09).结论 e-erbB-2表达可能入选的11篇研究与胃癌预后呈负相关.
作者：秦桂萍；路喜安；齐广强；曲成毅；梁建芳；李士瑛 刊期： 2007年第09期
目的 探讨急性胃黏膜损伤时细胞凋亡形式及作用.方法 制备大鼠水浸-束缚应激(WRS)模型,计算溃疡指数(UI);TUNEL法检测胃黏膜细胞凋亡;透射电镜观察细胞形态;免疫组化法检测BCl-2/BAX蛋白的表达.结果 与正常大鼠比较,WRS后2 h,黏膜损伤严重(P＜0.01),凋亡细胞明显增多(P＜0.01),BCl-2表达明显减弱(P＜0.05),BAX表达明显增加(P＜0.01);WRS后24 h,黏膜修复,凋亡细胞仍高于正常水平(P＜0.05),BCl-2表达基本恢复正常,BAX表达仍高于正常水平(P＜0.05).透射电镜下可见WRS组发生凋亡的细胞形态各异.结论 细胞凋亡是急性胃黏膜损伤过程中细胞死亡的重要形式.
作者：刘婧；李兆申 刊期： 2007年第09期
目的 检测宫颈癌细胞系HeLa、CaSki和SiHa中结肠腺瘤性息肉病基因(APC)启动子区CpG岛甲基化状态;探索肼苯哒嗪(Hyd)能否作为去甲基化药物恢复APC表达.方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测细胞系中APC启动子区CpG岛甲基化情况;Hyd处理后,RT-PCR检测APC Mrna表达.结果 APC启动子区CpG岛在HeLa细胞中被甲基化,在CaSki细胞中半甲基化,在SiHa细胞中无甲基化;一定浓度Hyd处理HeLa、CaSki细胞后,检测到APCmRNA表达.结论 HeLa、CaSki细胞系APC表达沉默与APC启动子区甲基化有关;Hyd能作为去甲基化药物诱导APC表达.
作者：宋银宏；张昌菊 刊期： 2007年第09期
目的 建立非探针标记荧光定量PCR的SNP检测技术,分析人脂联素(APM1)基因单核苷酸多态性(SNP)与Ⅱ型糖尿病(T2DM)的关系.方法 设计3'末端碱基特异性引物,进行定量PCR反应,通过比较各对引物的扩增效率判断基因型,并进行测序验证.利用该方法确定20例T2DM、24例肥胖及28例同年龄组正常人APM1基因的45位和276位碱基的SNP.结果 该方法能有效地区分不同的基因型,与测序结果符合率100%.APM1基因45位SNP与T2DM相关(P＜0.05),基因型为TT纯合子者发生T2DM的危险性是G/T和GG者的3倍;而肥胖与APM1基因45和276位点SNP无关.结论 等位基因3'末端碱基特异性引物定量PCR可以用于基因SNP检测.APM1基因45位碱基的SNP与T2DM发生有关.
作者：宋现让；王淑芳；迟伟玲 刊期： 2007年第09期
microRNAs(miRNAs)是人类新发现的一类非编码小分子RNA,广泛分布于真核细胞内.miRNAs通过与靶基因互补位点配对结合,在转录后水平负性调控靶基因的表达,参与生长发育、细胞增殖、细胞凋亡、细胞分化等生命过程.据推测,大约1%的人类已知基因编码miRNAs,而miRNAs可调控人类基因组中10%～30%的基因.本文就如何识别miRNAs及其靶基因作一简要介绍.
作者：宋宝；宋现让；刘杰；魏玲 刊期： 2007年第09期
临床见习是医学生从理论学习到临床实践的重要转折,全面而系统的临床实习是医学生接受实践检验、巩固和加强所学理论知识,培养独立工作能力的一个十分重要的阶段.本文根据临床见习教学特点,分析当前临床教学和医学生临床见习中存在的伦理学难题,并就如何解决进行探讨.
作者：阿赛古丽 刊期： 2007年第09期
尽管传统开胸手术仍适合于多数纵隔肿瘤的切除,但胸腔镜(VATS)已越来越多地用于纵隔手术.本文分析了我院VATS切除纵隔肿瘤的临床资料,以评估其临床价值.
作者：戈烽；王志勇；曹智理 刊期： 2007年第09期
作者： 刊期： 2007年第09期
目的 探讨抗聚丝蛋白抗体(AFA)对类风湿关节炎(RA)诊断的价值,并比较与RA的其他早期诊断指标的相关性.方法 从人表皮细胞中提取并部分纯化聚丝蛋白(filaggrin)抗原,用于免疫印迹检测(Western blot)103例RA血清标本和140例对照血清,包括系统性红斑狼疮(SLE)、干燥综合征(SS)、骨性关节炎(OA)95份及正常人45份.APF和AKA用间接免疫荧光法检测.结果 103例RA病人的AFA阳性率、特异性分别为35.9%,93.7%,显著高于疾病对照组和正常人(P＜0.001).在AFA阳性的37例中,AKA也阳性的为26例,重叠率为70.3%;APF亦阳性的为31例,重叠率为83.8%,AFA与AKA、APF之间存在相关性.结论 AFA对RA具有很高的特异性.AFA的检测可用于RA的临床诊断.AFA与APF及AKA有相关性,但不能完全取代它们的检测.
作者：艾脉兴；冷晓梅；曾小峰 刊期： 2007年第09期
目的 探讨大鼠前列腺药物活性研究的实验方法.方法 雄激素和细菌注射法制备大鼠的细菌性前列腺炎(BP)模型以及良性前列腺增生合并细菌性前列腺炎(BPH-BP)模型,口服四环素后不同时间检测大鼠血清和前列腺组织的药物活性、前列腺细菌数量及组织病理学改变.结果 病理学检查见雄激素注射10 d的前列腺有明显腺体及间质增生,感染2 d后形成急性化脓性炎症.给药3.5～4 h后,BP及BPH-BP组每克前列腺组织的药物浓度分别为22.44 mg和20.26 mg,高于同期血清的药物活性及药物低杀菌浓度;治疗8～11 d后,BP及BHP-BP组的前列腺无菌;治疗11 d并停药1周后的BP组前列腺未见急、慢性炎性改变,感染28 d的对照组每克前列腺可检出30个细菌,并有急、慢性化脓性炎症.结论 四环素可进入BP及BPH-BP的前列腺组织内,超过血清浓度与药物的MBC,使敏感细菌的数量减少和消失.
作者：吴晓娟；王和 刊期： 2007年第09期
基础医学与临床杂志
主管:北京市科学技术协会
主办：北京生理科学会
