学术投稿

天然高产脂肪酶细菌的分离鉴定及脂肪酶基因的分析

张迎光;施晓聪;林全思;王震;吕建新

关键词:脂肪酶基因, PCR, TA克隆
摘要:目的:从环境中分离高产脂肪酶的细菌,并克隆其脂肪酶基因.方法:从天然高油脂含量土壤筛选高产脂肪酶的细菌,鉴定菌种后,设计相应引物PCR扩增脂肪酶基因并进行TA克隆,重组载体转入E.coli DH5α构建工程菌,双酶切及测序鉴定脂肪酶基因.结果:经过微生物菌种鉴定获得4株高活力菌,其中一株金葡菌产酶高,利用PCR技术成功扩增脂肪酶基因,该基因经过克隆测序及其双酶切鉴定证实为新发现的突变脂肪酶基因,其二级结构与标准基因(EU310372)有较大不同.结论:成功分离一株高产脂肪酶的菌株--金黄色葡萄球菌,克隆的脂肪酶基因为新发现的突变型.
温州医科大学学报杂志相关文献
  • 口服结肠靶向载体研究应用进展

    口服结肠靶向给药系统(oral colon targeting-drug delivery system,OCTDS)是20世纪90年代后期发展起来的充分利用结肠特殊的生理特点(pH梯度、小肠相对稳定的转运时间、高浓度微生物及特殊酶、结肠内的较大的压力)的新型给药方式.

    作者:周志彩;赵应征 刊期: 2009年第06期

  • 130例腔镜甲状腺良性肿瘤手术治疗体会及方法改进

    目的:探讨经乳晕入路腔镜甲状腺良性肿瘤手术的手术方法及疗效.方法:回顾分析2004年1月-2008年12月间,由同一组医师完成的130例经乳晕入路腔镜甲状腺良性肿瘤手术的临床资料.按手术方式改进前后分为2组(A组、B组),A组30例,B组100例,比较两组的手术时间、出血量、术后引流量、术后住院时间和并发症.结果:130例患者均顺利进行腔镜下甲状腺肿瘤切除术,3例出现术后喉返神经暂时性损伤,6例皮下瘀斑.B组的手术时间及术中出血量明显少于A组( P<0.05),两组间的术后并发症发生率均未见统计学差异( P>0.05).结论:腔镜甲状腺良性肿瘤手术安全可靠,具有良好的美容效果,改进手术操作步骤后可缩短手术时间,减少出血量,具有推广价值.

    作者:殷凯;徐鲁白;周斌;王继生;许家;胡海;蔡景理 刊期: 2009年第06期

  • 初发鼻咽癌与复发鼻咽癌差异表达基因的研究

    目的:通过全基因组基因芯片研究初发鼻咽癌(pNPC)与复发鼻咽癌(rNPC)之间的差异表达基因.方法:选择rNPC和pNPC组织标本,应用Affymetrix Gene1.0 ST芯片,构建表达谱,检测两者之间的差异表达基因.结果: rNPC组与pNPC组比对,发现差异基因46个,下调基因38个,上调基因8个.这些基因参与钙结合、蛋白结合、酶活性调节等过程.结论: rNPC和pNPC之间存在基因差异表达,为了解rNPC的发生机制的研究起了一定的作用.

    作者:黄振校;李文峰;杜季梅;黄亚;谭映霞;方渭清;廖志苏 刊期: 2009年第06期

  • 非诺贝特对高糖培养肾小球系膜细胞胞外基质产生及降解影响

    目的:探讨非诺贝特对糖尿病肾病的保护机制.方法:大鼠肾小球系膜细胞分别培养在正常糖浓度(5.5mmol·L -1,对照组)、高糖浓度(25 mmol·L-1,高糖组)及25 mmol·L-1葡萄糖+非诺贝特100μmol·L -1(非诺贝特组).CCK-8测定系膜细胞增殖;ELISA法检测培养上清液Ⅳ型胶原(Col -Ⅳ)、纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶组织抑制因子 -1(TIMP-1);明胶酶谱法检测培养上清基质金属蛋白酶-2,9(MMP -2,9)的活性.结果:高糖组系膜细胞较对照组出现增殖增加,合成基质蛋白Col-Ⅳ,FN增多,MMP-2及MMP-9活性下降,TIMP -1含量增加,TGF-β1分泌增加.与高糖组比较非诺贝特干预后能完全或部分逆转上述变化.结论:非诺贝特能抑制高糖培养的系膜细胞增殖,减少胞外基质合成,增加胞外基质的降解.

    作者:倪连松;金洁娜;郑景晨;沈飞霞 刊期: 2009年第06期

  • 股骨前轴作为全膝置换股骨假体旋转对位标志的可靠性研究

    目的:在MRI上测量全膝置换股骨假体旋转对位骨性标志,研究股骨前轴作为全膝置换股骨假体旋转对位骨性标志的可靠性.方法:78侧正常成人膝关节,行磁共振扫描,在横断面图像上定位经股骨上髁轴、Whiteside's前后轴、股骨后髁轴和股骨前轴.测量Whiteside's前后轴、股骨后髁轴、股骨前轴相对于经股骨上髁轴旋转的角度,比较它们相对于经股骨上髁轴的可靠性.结果:股骨前轴相对于STEA内旋(9.61±3.36)°,相对于CTEA内旋(13.32±3.27)°.Levene检验提示股骨前轴分别与股骨后髁轴、Whiteside's前后轴相比,相对于经股骨上髁轴的变异性有显著差别.结论:股骨前轴作为全膝置换股骨假体旋转对位标志的可靠性差.

    作者:吴剑彬;潘骏;王逸扬 刊期: 2009年第06期

  • 负重位全下肢摄片技巧及影响因素

    目的:探讨数字化负重位全下肢优质X线片的影响因素.方法:用西门子500MA-X线机,根据关节畸形或下肢不等长患者下肢长度采用2~3个14×17in暗盒-IP板对其进行X线投照,经过后处理得到负重位全下肢X线片,分析和总结对下肢全长X线片质量的影响因素.结果:通过正确选择、放置暗盒-IP板及摄影体位,选择合适的摄影条件,合理使用CR系统后处理功能,获得优质负重位全下肢X线片,骨盆至踝关节影像均清晰完整显示在同一胶片上,影像质量完全满足临床对下肢力线、长度的测量要求. 结论:影响数字化负重位全下肢X线片质量的因素有:摄影体位、摄影条件、暗盒 -IP板、CR后处理功能等.

    作者:赵晓君;章智敬;白光辉;虞志康;张弦 刊期: 2009年第06期

  • 广州市登革1型病毒基因组测序及系统进化分析

    目的:对引起2002年广州登革热的登革1型病毒分离株(71/02GZ)进行全基因组测序和系统进化分析.方法:采用C6/36细胞培养71/02GZ,分别采用RT -PCR,5'RACE和3'RACE扩增基因组中编码区序列、5'和3 '末端非编码区序列,PCR产物克隆到载体并测序,拼接成全基因组序列,分别基于 E基因序列、E/NS1连接区240 nt、基因组中10016nt进行系统进化分析.结果:71/02GZ株基因组全长10735 nt,两端非编码区(NCR)长度分别为94 nt和462 nt.基于E基因序列、E/NS1连接区240 nt、基因组中10016 nt的进化分析结果显示71/02GZ株和2002年广州分离株(GZ01/02,GZ/218/2002),1995 年广东分离株(GD23/95,GD01/95)、1995年广州分离株(GZ01/95)组成一个基因型;而1999年广东分离株(GD05/99),1997年广东分离株(GD14/97)和1980年广州分离株(GZ/80)属于另一个基因型;另外,71/02GZ株同1998年印度尼西亚分离株(98901530 DF DV-1-ID)的同源性高.结论:71/02GZ株可能是印度尼西亚输入的.

    作者:文金生;江丽芳;晏辉钧 刊期: 2009年第06期

  • 后腹腔镜保留肾单位肾肿瘤手术

    目的:探讨后腹腔镜下保留肾单位治疗肾肿瘤的方法.方法:后腹腔镜下保留肾单位手术治疗肾脏肿瘤患者12例,其中肾细胞癌6例,肾错构瘤6例.肿瘤直径2.0~3.7 cm,平均2.7 cm.结果:12例手术均成功,手术时间60~210 min,平均115 min.术中出血25~150 mL,平均106 mL.肾蒂血流阻断时间18~43 min,平均28 min.术后住院4~7 d,平均5.7 d.6例肾细胞癌术后切缘均为阴性.术后随访6~18个月,平均11.3个月,复查B超及CT未见肿瘤残留及复发,静脉尿路造影(IVU)提示患侧残肾显影良好.结论:后腹腔镜保留肾单位肾肿瘤手术,具有创伤小、出血少、住院时间短以及术后恢复快等优点,是替代开放手术治疗小的肾肿瘤的安全方法.

    作者:吴松江;孙方浒;张显军;张文刚;俞洪元 刊期: 2009年第06期

  • 贝复济喷剂外用对深Ⅱ度烧伤创面愈合时间的影响

    目的:通过对深II度烧伤创面愈合时间的临床观察及相关对比分析,探讨贝复济喷剂(b -FGF)外用对创面愈合时间的影响.方法:选择本院1999年1月至2006年6月188例单纯小面积深Ⅱ度烧伤患者,以不同时期应用的烧伤创面外用药作为对照,并分A、B、C三组,观察并分析贝复济喷剂外用对烧伤创面愈合时间的影响.结果:2005年7月-2006年6月,合理使用贝复济组,深Ⅱ度烧伤创面愈合时间缩短为(16.76±1.61)d,未使用贝复济组,深Ⅱ度烧伤创面愈合时间为(21.79 ± 3.93)d.结论:单纯深Ⅱ度烧伤创面外用贝复济喷剂能明显缩短创面愈合时间,疗效确切.

    作者:徐建军;王宏清;耿武军;林才 刊期: 2009年第06期

  • 宫颈环切术在宫颈高度鳞状上皮内病变中的诊治价值

    目的:探讨宫颈环切术(LEEP)在宫颈高度鳞状上皮内病变(HSIL)中的诊治价值,积累术后再处理经验.方法:回顾性分析2004年12月至2007年12月,因宫颈HSIL在我院接受LEEP治疗的503例患者的临床病理资料及随访资料,宫颈CIN 2级367例,CIN 3级130例,原位癌2例,可疑原位癌及浸润癌4例.结果:503例HSIL患者中,LEEP术前术后病理符合率为38.2 %(192/503);级别升高占14.9%(75/503),其中检出20例浸润癌,占3.98 %.LEEP术后行子宫切除或宫颈癌根治术26例,病理转阴9例,病变残留8例,浸润癌5例,病理不详4例;病变持续存在4例,行第二次LEEP治愈;复发3例.LEEP治疗HSIL 的初次治愈率为95.8%(482/503).结论:LEEP可弥补阴道镜活检的不足,减少宫颈浸润癌的漏诊;其次,通过LEEP标本的二次病理,防止过度治疗,为部分患者保留子宫提供可能;对LEEP术后病理升级的患者,排除浸润癌后,可进一步随访观察.

    作者:周凯;瞿文珍;杨孝军;施铮铮;郑飞云;杨开颜 刊期: 2009年第06期

  • 口服小剂量西地那非治疗早泄疗效研究

    目的:评估持续口服小剂量西地那非、佐洛复、百优解治疗早泄及停药后的疗效.方法:191例早泄病人随机归入3组,接受为期3个月的西地那非、佐洛复、百优解治疗.记录各组病人在治疗前、治疗后以及治疗停药2个月、3个月中国早泄指数评估表(CIPE)评分及性双方对性生活的满意程度.比较各组及组间在各阶段的CIPE评分.结果:3组对象治疗前CIPE分别为(20.77±2.77)、(20.92±2.80)和(20.98±2.53)分,差异无显著性(P>0.05);治疗3个月后分别为(39.22±4.56)、(37.53±3.76)和(37.66±3.63)分;停药2个月后为(31.24±5.25)、(22.85±5.67)和(22.47±4.64)分.停药3 个月后西地那非组CIPE为(27.26±5.24)分.3组病人药物治疗3个月后CIPE较治疗前均有显著性升高(P<0.01).组间除佐洛复组与百忧解组差异无显著性外,西地那非组与其它两组间差异均有显著性(P<0.05).药物治疗后,3组对象夫妻性生活满意度明显改善,从高到低依次为:西地那非组、百忧解组、佐洛复组.西地那非组停药2个月后与治疗前CIPE差异有显著性( P<0.05);停药3个月后CIPE仍高于治疗前基线水平,41.5%病人仍具有较好疗效.佐洛复组及西地那非组停药2月后CIPE显著降低,大部分病人症状复发,退出研究,无法继续随访.结论:每日口服小剂量西地那非能有效治疗早泄.在效果上,好于左洛复和百忧解,每日口服小剂量西地那非在治疗停药后大部分病人疗效可达2个月以上.

    作者:陈洪德;谢辉 刊期: 2009年第06期

  • EphrinA1基因小干扰RNA的构建及其在Huh-7细胞中的沉默效应

    目的:构建针对EphrinA1基因的发夹状RNA(ShRNA)表达载体pSilencer2.1 -EphrinA1-SiRNA,观察其对人肝癌细胞Huh-7中EphrinA1基因表达的特异性抑制效应.方法:设计合成针对EphrinA1 mRNA的RNAi核苷酸片段,并定向克隆到pSilencer2.1-U6载体中,构建重组质粒pSilencer2.1 -EphrinA1- SiRNA,同时构建不针对任何序列的重组质粒pSilencer2.1 -EphrinA1-ScrRNA,通过脂质体介导转染入Huh-7细胞,应用逆转录聚合酶链反应检测小干扰RNA的沉默效应.结果:酶切鉴定证实pSilencer2.1-EphrinA1-SiRNA和pSilencer2.1 -EphrinA1-ScrRNA重组质粒构建成功,转染Huh-7细胞后,pSilencer2.1 -EphrinA1-SiRNA组EphrinA1 mRNA表达较pSilencer2.1-EphrinA1-ScrRNA组和空白对照组明显下调,差异有统计学意义(P<0.05).结论:pSilencer2.1 -EphrinA1-SiRNA载体的成功构建为下一步研究以EphrinA1基因为靶位点的肝细胞癌基因治疗奠定了重要的实验基础.

    作者:王怡;陈钢;陈必成;刘佳明;黄陈平 刊期: 2009年第06期

  • 反流性食管炎患者的社会支持和心理健康水平研究

    目的:探讨反流性食管炎(reflux esophagitis,RE)患者的社会支持状况和心理健康水平以及社会支持与抑郁、焦虑症状的关系.方法:采用随机抽样的方法抽取我院胃镜检查确诊为反流性食管炎患者和健康志愿者,进行问卷调查.问卷内容包括一般情况、社会支持评定量表、抑郁自评量表(SDS)和焦虑自评量表(SAS),对结果进行统计分析.结果:135例反流性食管炎患者和122例健康志愿者完成调查问卷.反流性食管炎患者主观支持和支持利用度均低于健康志愿者( P<0.01).反流性食管炎患者与健康志愿者在单纯焦虑症状、单纯抑郁症状及抑郁合并焦虑症状方面比较,差异均有显著性( P<0.05或P<0.01).反流性食管炎(A、B级)患者和反流性食管炎(C、D级)患者在抑郁症状及焦虑症状方面比较,差异无显著性 (P>0.05).反流性食管炎组中抑郁合并焦虑症状组与无症状组比较,主观支持分降低( P<0.01).结论:反流性食管炎患者主观支持和支持利用度比健康人群低;反流性食管炎患者有焦虑症状、抑郁症状明显多于健康志愿者;具有抑郁合并焦虑症状的反流性食管炎患者主观支持降低.

    作者:郑恩典;林存成;陈艳;郑亮 刊期: 2009年第06期

  • 输尿管中下段结石ESWL急诊治疗137例疗效分析

    我院2004年10月-2007年12月应用体外冲击波碎石术(ESWL)及中西药协同治疗急性输尿管中下段结石嵌顿伴绞痛137例,取得良好效果,现报告如下. 1临床资料 1.1临床资料本组137例,男101例,女36例,年龄 16~80岁,平均36岁.病程1h至3d,平均8h.ESWL治疗前都曾行解痉止痛无效或症状未明显缓解,所有病例均有典型输尿管绞痛发作的症状及体征.

    作者:王谦;饶大庞;陈映鹤;何有华;竺海波 刊期: 2009年第06期

  • 天然高产脂肪酶细菌的分离鉴定及脂肪酶基因的分析

    目的:从环境中分离高产脂肪酶的细菌,并克隆其脂肪酶基因.方法:从天然高油脂含量土壤筛选高产脂肪酶的细菌,鉴定菌种后,设计相应引物PCR扩增脂肪酶基因并进行TA克隆,重组载体转入E.coli DH5α构建工程菌,双酶切及测序鉴定脂肪酶基因.结果:经过微生物菌种鉴定获得4株高活力菌,其中一株金葡菌产酶高,利用PCR技术成功扩增脂肪酶基因,该基因经过克隆测序及其双酶切鉴定证实为新发现的突变脂肪酶基因,其二级结构与标准基因(EU310372)有较大不同.结论:成功分离一株高产脂肪酶的菌株--金黄色葡萄球菌,克隆的脂肪酶基因为新发现的突变型.

    作者:张迎光;施晓聪;林全思;王震;吕建新 刊期: 2009年第06期

  • 急性肝衰竭大鼠肝组织中钙蛋白酶/钙蛋白酶抑制蛋白的表达及乌司他丁对其的影响

    目的:探讨钙蛋白酶/钙蛋白酶抑制蛋白在急性肝衰竭模型中的表达情况及乌司他丁对其表达的影响.方法:通过腹腔注射D-氨基半乳糖(D-Gal)及脂多糖(LPS)建立大鼠急性肝衰竭模型.大鼠随机分为对照组、模型组及乌司他丁干预组.采用免疫组织化学方法检测钙蛋白酶/钙蛋白酶抑制蛋白表达情况.结果:D-Gal/LPS联合注射成功诱导大鼠急性肝衰竭模型,与对照组相比,模型组钙蛋白酶及钙蛋白酶抑制蛋白表达增加(P<0.05),但经乌司他丁干预后,钙蛋白酶表达较模型组明显减少( P<0.05),而钙蛋白酶抑制蛋白的表达无明显变化( P>0.05).结论:乌司他丁可能通过抑制钙蛋白酶活性,同时保持钙蛋白酶抑制蛋白活性,从而减轻肝脏炎症损伤.

    作者:商振球;陈永平;谷甸娜 刊期: 2009年第06期

  • 妊娠期甲亢治疗情况对子代预后的影响

    目的:探讨孕妇妊娠合并甲状腺功能亢进症(甲亢)对子代预后的影响.方法:选取2004年1月至2007年12月在我院出生,母妊娠合并甲亢的新生儿52例,根据孕妇甲亢治疗情况分为甲亢治疗组(41例)与未治疗组(11例),对两组甲亢孕妇所分娩的婴儿甲状腺功能与生长发育进行随访、分析.结果:未治疗组中,新生儿甲亢发生率为36.4%(4/11),甲状腺功能减低症发生率为45.5%(5/11),早产儿发生率为54.5%(6/11),小于胎龄儿发生率为18.2%(2/11).而治疗组中,新生儿甲亢发生率为2.4% (1/41),早产发生率为9.8%(4/41),未发生甲状腺功能减低症和小于胎龄儿.两组在婴儿甲状腺功能异常、早产及小于胎龄儿发生率上差异均有显著性(P <0.05).结论:母孕期甲亢未治疗者婴儿甲状腺功能异常、早产及小于胎龄儿发生率升高.合理治疗妊娠期甲亢对改善子代预后有积极意义.

    作者:高洁锦;钱燕;朱雪洁;凌雅;池美珠 刊期: 2009年第06期

  • 523例变态反应性皮肤病患者过敏原检测结果分析

    目的:探讨变态反应性皮肤病患者常见过敏原的分布特征.方法:对本院皮肤科门诊523例变态反应性皮肤病患者按荨麻疹组(322例)和皮炎、湿疹组(201例)进行分类;应用德国MORA -SUPER生物共振治疗仪对患者进行吸入、食入、其他变应原检测,进行相关统计学分析.结果:过敏原阳性率荨麻疹组为87.89%,皮炎、湿疹组为83.08%;从过敏原分布特征来看,以多种、多组物质过敏的患者为多;皮炎、湿疹组内少年组与中老年组之间阳性率差异较大.荨麻疹组前十位过敏原是:螨和昆虫(占54.97%)、霉菌(占49.38%)、海鲜类(占31.37%)、组胺(占20.50%)、酵母(占14.91%)、食用防腐剂(占14.29%)、抗氧化剂(占13.66%)、蛋黄(占12.11%)、甜味剂(占9.01%)、香料和药草(占7.45%);皮炎、湿疹组前十位过敏原是:螨和昆虫(占55.22%)、霉菌(占36.82%)、海鲜类(占31.84)、重金属(占15.92%)、抗氧化剂(占13.43%)、组胺(占12.44%)、食用防腐剂(占11.44%)、酵母(占8.46%)、谷类(占7.96%)、蛋黄(占7.46%)、广泛环境毒素(占7.46%).结论:变态反应性皮肤病患者的过敏原分布具有一定特征,可为本地区过敏性疾病的预防和治疗提供一定依据.

    作者:宣暄;吴灵欧;朱林榆;陈彬;李秉煦 刊期: 2009年第06期

  • 改革研究生教育二级管理工作的几点思索与实践

    近几年,我国研究生教育规模不断扩大,研究生连年扩招,在校研究生人数逐年增加.具不完全统计,全国在校研究生人数1998年为19.9万人,2001年为39.25万, 2003年为49万,2004年是81.99万,2005年为98万,2008年研究生在校人数已经超过150万人.我国研究生教育规模已经仅次于美国,成为第二大研究生教育国家,也成为真正意义上的研究生教育大国.但是,随着研究生教育规模的不断扩大以及研究生教育类型的不断多元化,在校研究生的教育管理矛盾也日益突出,如何在保证研究生教育质量的前提下,充分利用高校现有的教学科研资源,更好地施行研究生管理工作,提高研究生教育和管理的质量,已经成为许多研究生院校管理部门所面临的一项紧迫而重大的任务之一.

    作者:邵凯隽 刊期: 2009年第06期

  • 血尿酸水平与不同病因分型脑梗死发病及预后的关系

    目的:探讨高尿酸血症与不同病因分型脑梗死发病的关系;探讨脑梗死急性期血尿酸水平与脑梗死发病后3个月预后的关系.方法:选取在我院住院治疗的脑梗死患者405例.在血尿酸水平与脑梗死发病关系研究中,按照患者是否为动脉粥样硬化性脑梗死进行分组,在预后关系研究中按照3个月随访的 mRS评分进行分组.统计方法采用单因素分析和多因素分析相结合的方法,其中多因素分析采用logistic 回归分析.结果:与动脉粥样硬化性脑梗死发病有关的因素为年龄、高尿酸血症、高血压、糖尿病,其中,高尿酸血症的OR值为4.764;与脑梗死3个月预后有关的因素为年龄、NIHSS评分和卒中并发症,尽管血尿酸水平在单因素分析时有意义,但在多因素分析时未达到统计学显著性.结论:高尿酸血症是动脉粥样硬化性脑梗死的一个独立危险因素.急性期血尿酸水平尚不能作为脑梗死3个月预后的独立预测因子.

    作者:冯靓;韩钊;张征;臧秋玲;叶祖森;王苹莉 刊期: 2009年第06期

温州医科大学学报杂志

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主管:温州医科大学

主办:温州医科大学