张立群;汪蕙;赖百塘;王玥
目的研究Nogo-A阳性神经元在正常成年大鼠脑内的分布. 方法免疫组织化学方法(ABC法).结果Nogo-A在正常大鼠脑内的神经元和纤维有广泛的表达,出现在许多核团,主要在1.前脑的大脑皮质、嗅觉系统、海马、隔区、基底神经节、丘脑、下丘脑和视前区等部位;2.脑干的视听觉、体躯感觉、内脏觉核团、运动核团以及网状结构等;3.小脑Purkinje细胞和深核.阳性反应物主要见于神经元的胞浆和突起内,在脑室系统的嗅球室管膜、侧脑室和第三脑室部分室管膜细胞及其突起内也有表达.结论Nogo-A在脑内神经元的广泛存在提示其在正常状态下的脑功能中可能起重要作用.
作者:程希平;刘惠玲;宋朝君;金伯泉;焦西英;游思维;鞠躬 刊期: 2005年第05期
目的观察巢蛋白(nestin)阳性细胞在发育早、中期胎儿肝中的形态及分布,探讨其在肝发育中的作用.方法取10~20周胎儿肝组织,常规石蜡切片,地高辛标记nestin寡核苷酸探针,原位杂交组织化学法显示netin阳性细胞.结果nestin阳性细胞主要分布在肝界板处或发育中的胆管周围,细胞体积较小,细胞核呈圆或卵圆形,核大,常见双核.结论肝内存在一定数量的nestin阳性细胞,该细胞具有较强的分裂增殖能力,可能是胚胎早期发育过程中隐藏在机体各种组织中的一类具有相同功能的细胞,在日后的肝细胞修复及肿瘤的发生中起着重要的作用.
作者:安靓;陈远泉;田雪梅 刊期: 2005年第05期
作者: 刊期: 2005年第05期
目的观察妊娠期小鼠暴露尼古丁对后代大脑皮层和海马形态结构发育及对神经细胞黏附分子(NCAMs)表达的影响.方法建立妊娠期暴露尼古丁的小鼠动物模型,HE染色观察后代大脑皮层和海马形态结构的改变,免疫组织化学法、蛋白质免疫印迹法观察生后小鼠NCAMs表达的变化.结果妊娠期暴露尼古丁小鼠的后代其大脑皮层和海马变薄,海马各区细胞层也变薄.与对照组相比,妊娠期暴露尼古丁小鼠的后代大脑皮层和海马中,PSA-NCAM表达升高,而NCAM-180、140和120的表达减弱. 结论妊娠期小鼠暴露尼古丁能阻碍后代大脑皮层和海马形态结构的正常发生,还能改变NCAMs在生后小鼠大脑皮层和海马中的表达.
作者:薛晓东;翟秀岩 刊期: 2005年第05期
目的观察血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)蛋白和mRNA在大鼠胚胎发育不同时期皮肤淋巴管内皮的表达模式,明确VEGFR-3在胚胎淋巴管发生中的生物功能.方法应用免疫组织化学技术(SABC法)和原位杂交技术对61例大鼠胚胎第15 d和第21 d皮肤组织进行VEGFR-3蛋白和mRNA检测.结果皮肤淋巴管内皮细胞阳性表达VEGFR-3蛋白和mRNA,在大鼠胚胎发育的第15 d和第21 d,VEGFR-3蛋白在淋巴管内皮的阳性表达率分别是38.71%(12/31)和73.33%(22/30),第21 d胚胎皮肤淋巴管内皮VEGFR-3蛋白的表达水平明显高于第15d胚胎淋巴管内皮VEGFR-3蛋白的表达水平(x2=7.408 P<0.01).VEGFR-3 mRNA在淋巴管内皮的阳性表达率分别是61.29%(19/31)和80.0%(24/30).结论1.大鼠胚胎皮肤淋巴管阳性表达VEGFR-3蛋白和VEGFR-3mRNA.2.随着大鼠胚胎的发育,VEGFR-3蛋白和mRNA在皮肤淋巴管的阳性表达均表现为上升的趋势.3.VEGFR-3在大鼠胚胎皮肤淋巴管的发育中起一定的调节作用.
作者:马晶;赵玲辉;刘宝全;张雅芳;杨树才 刊期: 2005年第05期
目的研究透明质酸(HA)在单核细胞中的分布,HA受体CD44和细胞问黏附分子-1(ICAM-1)在单核细胞中的表达以及HA及其受体对单核细胞黏附和迁移的影响.方法用Percoll非连续密度梯度离心法分离狗外周血单核细胞,然后用免疫荧光染色法标记单核细胞的HA、CD44和ICAM-1.通过用透明质酸酶(HAase)消化细胞表面的HA、在培养皿底面和细胞培养池膜上涂布HA和在培养液中添加HA,观察细胞表面的HA、底物HA和游离HA对细胞黏附和迁移的影响.以抗体阻断剂抑制CD44或ICAM-1,研究HA受体的介导作用.结果单核细胞表面和细胞内存在HA,并表达CD44和ICAM-1.消化细胞表面HA后,黏附和迁移的单核细胞数减少.在培养皿底面和细胞培养池膜上铺HA,黏附和迁移的细胞数增加.培养液中加入HA,黏附和迁移的细胞数减少.阻断CD44后,HA底物上黏附和迁移的细胞数减少,而阻断ICAM-1后黏附和迁移的单核细胞数无明显变化.结论单核细胞内外分布有HA.单核细胞表面的HA和底物HA促进细胞的黏附和迁移,但游离HA阻碍单核细胞的黏附和迁移.CD44介导HA对单核细胞黏附和迁移的作用.
作者:李鸿帅;王海杰;谭玉珍 刊期: 2005年第05期
目的探讨在制备的肝损伤模型中人脐血单个核细胞向肝细胞的分化能力. 方法采用腹腔注射CCl4和5-氟尿嘧啶的方法制备肝损伤模型,将分离的脐血单个核细胞以2×107/ml经尾静脉注射入裸鼠体内.4周后处死裸鼠取肝组织.以RT-PCR方法对ALB、AFP mRNA的表达进行检测;并用免疫组织化学SP染色检测人HSA、PCNA、ALB的表达情况.结果RT-PCR显示ALB、AFP mRNA在人肝组织移植组中表达呈阳性,而在损伤未移植组和正常对照组表达为阴性;免疫组织化学染色表明,在裸鼠肝实质区域出现人HSA、PCNA和ALB阳性表达细胞.结论人脐血单个核细胞在裸鼠体内确有向肝细胞分化的趋势.
作者:万汇涓;张芳婷;龙霞;叶静;于洁;房家智 刊期: 2005年第05期
目的研究卵泡刺激素(FSH)在体外对胰腺组织分泌胰岛素和胰高血糖素的影响.方法体外孵育大鼠胰腺组织并施加不同浓度FSH,应用酶联免疫分析(ELISA)方法检测上清液中胰岛素和胰高血糖素的含量.结果当FSH浓度小于10-2IU/L时,胰岛素和胰高血糖素分泌量随FSH浓度的增加而减少;当FSH浓度大于10-2IU/L时,胰岛素和胰高血糖素分泌量随FSH浓度的增加而增加.结论FSH在体外对胰岛素和胰高血糖素分泌具有相同的双向调节作用,FSH可能对胰腺内分泌具有调节功能.
作者:初晨宇;吕葆真;孙岚;黄威权;王世鄂;付建芳 刊期: 2005年第05期
目的探讨脾虚证时分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号传导通路中信号分子表皮生长因子(EGF)、胞外信号调节激酶(ERK)的变化及加味四君子汤治疗脾虚证的机理.方法HE染色、免疫组织化学反应、免疫印迹法.结果脾虚胃溃疡大鼠下颌下腺颗粒曲管细胞内EGF阳性反应产物的含量增加,胃黏膜磷酸化的ERK减少,胃溃疡愈合延迟;经过加味四君子汤治疗后,上述异常变化得到纠正. 结论EGF信号传递分子表达的变化可能是脾虚胃溃疡的发病机理之一,加味四君子汤能通过纠正这些变化而发挥治疗作用.
作者:杜鹃;王秀琴;季凤清;李宝红;曾晓蓓;孙海梅 刊期: 2005年第05期
目的研究骨形态发生蛋白-2(BMP-2)对骨髓源性心肌干细胞(MCSC)向心肌分化的作用,探讨MCSC向心肌分化中的BMP-2信号转导机制.方法从SD大鼠骨髓中筛选MCSC,用BMP-2诱导向心肌定向分化.RT-PCR检测诱导前后BMP-2受体BMPRIA和BMPRII、心肌早期转录因子Nkx2.5和GATA-4以及cTnT mRNA的表达.免疫细胞化学标记诱导后细胞cTnT和Cx-43的表达.结果用BMP-2诱导后,MCSC的形态和排列发生变化.RT-PCR检测结果显示,诱导前BMPRIA和BMPRII以及Nkx2.5和GATA-4呈低表达,诱导后1周表达增加,3~4周表达明显.cTnT mRNA在诱导前不表达,诱导后1周开始表达,3~4周表达明显.免疫细胞化学染色显示,cTnT和Cx-43从诱导后2周开始表达.3~4周cTnT表达增强,呈现密集的横纹样结构.Cx-43在2周位于细胞膜下,3周分布于相邻细胞连接处,4周呈颗粒状密集分布于肌管的相邻细胞连接处. 结论BMP-2通过BMPRIA和BMPRII的介导作用诱导MCSC分化为心肌细胞.
作者:贺其志;谭玉珍;王海杰;王新艳;孙丽莉 刊期: 2005年第05期
目的探讨不同发育阶段树突状细胞(DC)的微观流变学特性及其差异. 方法应用密度梯度离心法从正常人外周血分离获得单个核细胞,经贴壁培养和免疫磁珠阴性选择获取纯化的单核细胞,以此作为DC前体(pDC)在体外培养诱导获得未成熟DC(imDC)和成熟DC(mDC).并用免疫细胞化学、免疫荧光、酶细胞化学、流式细胞仪等技术对不同发育阶段的DC进行鉴定;应用微观流变学研究方法对以上细胞的电泳率、渗透脆性、膜流动性和傅立叶红外光谱(FT-IR)进行测量和分析. 结果改进的分选法所获得的CD14+pDC>97%.体外加入rhGM-CSF和IL-4培养6d后,S-100+imDC占细胞总数的96.9%;再加入rhGM-GSF、IL-4和TNF-α培养48 h后,CD86+mDC占细胞总数的87%.其微观流变学特性为:mDC电泳率明显高于pDC和imDC(P<0.05);3种细胞均具有较强的抗低渗能力,但imDC强(细胞未破碎率为27%);mDC的膜流动性大,其荧光偏整度P值为0.062±0.001(P<0.01);FT-IR显示mDC中的蛋白质二级结构发生了较大变化. 结论DC的微观流变学特性随其不同的发育阶段而发生了明显变化.
作者:王国涛;唐军民;唐岩;战军;曾柱;文宗耀 刊期: 2005年第05期
目的探讨青藏高原耗牛脑动脉供应的形态学特征,为高原动物脑动脉供应的形态学研究提供理论依据.方法对经10%福尔马林溶液固定的成年牦牛头进行大体解剖,追踪其脑动脉的来源和分布,并测量各动脉的口径.结果脑的血液由颈内动脉、上颌动脉、枕动脉和椎动脉供应.上述血管的分支于大脑垂体周围和枕骨基底部分别形成前、后硬膜外异网和大脑动脉环.颈内动脉通过大脑前动脉和大脑中动脉主要供应大脑半球前部(约60%)的血液.椎动脉参与形成基底动脉、小脑动脉系和大脑后动脉,供应脑干、小脑和大脑后部(约40%)的血液.血管起始端口径自0.4mm到2.6mm不等.结论牦牛脑的血液是由颈内动脉、上颌动脉、枕动脉和椎动脉供应的.
作者:邵宝平;丁艳平;俞红贤;王建林 刊期: 2005年第05期
目的探讨海洛因依赖对大鼠胰岛A细胞胰高血糖素免疫反应(Glu-IR)的影响.方法应用免疫组织化学SABC单染法、形态计量及放射免疫测定法,研究大鼠海洛因依赖期间,A细胞面数密度(NA)及血浆胰高血糖素水平的变化.结果与正常组及盐水组比较,A细胞免疫组织化学显色在海洛因依赖组均增强,阳性细胞增多;A细胞的NA在海洛因依赖第38 d组明显增加,P<0.01;血浆胰高血糖素水平在海洛因依赖第10 d、24 d、38d组均高于正常组和盐水组,P<0.01.结论A细胞通过增加细胞数和增强合成分泌胰高血糖素的功能,参与海洛因依赖期间大鼠糖代谢的调节过程.
作者:韩晶;梁文妹 刊期: 2005年第05期
目的研究鸡胚胎原始生殖细胞(EPGCs)对不同冷冻体系的适合性. 方法对发育至第19期和第28期胚胎性腺PGCs,采用二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇、聚乙二醇为冷冻保护液,在不同组合、不同浓度、不同的冷冻程序下进行超低温冷冻保存.结果1.采用同一种冷冻保护液,10%浓度与15%浓度之间,除DMSO+乙二醇(冷冻保护液Ⅳ)外,其他类型的冷冻液对EPGCs保存后存活率的影响差异不显著(P>0.05);20%浓度的各种冷冻保护液对EPGCs保存后的存活率低,且与10%和15%浓度相比差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);2.采用同一种冷冻保护液,浓度为10%时,冷冻程序Ⅰ(2~4℃平衡45~60min,-4~-6℃诱发结晶45min,悬挂液氮面1 h以上,投入液氮保存)和冷冻程序Ⅱ(2~4℃平衡90~120 min,悬挂液氮面1 h以上,投入液氮保存)对EPGCs冷冻后存活率差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01);3.采用冷冻程序Ⅰ,浓度为10%时,不同的冷冻保护液对EPGCs保存后的存活率影响显著(P<0.05)或极显著(P<0.01),DMSO+乙二醇(冷冻保护液Ⅳ)显示出好的保护效果;4.第19期和第28期性腺中的EPGCs在相同的冷冻条件下冷冻后,存活率差异不显著(P>0.05). 结论采用冷冻程序Ⅰ,在10%的DMSO+乙二醇(冷冻保护液Ⅳ)的保护下对鸡EPGCs冷冻较为适合.
作者:李碧春;肖小珺;陈国宏;秦洁;蔡琳琳 刊期: 2005年第05期
目的研究颞下颌关节盘前移位对关节软骨组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)系统的影响.方法24只日本大耳白兔在不打开关节囊的情况下建立右侧颞下颌关节盘前移位动物模型,分别于术后4、1、2、4、8d和12周各处死4只动物.常规HE染色观察髁突软骨的形态学变化,并以原位杂交法检测髁突软骨细胞中uPA和纤溶酶原激活剂抑制剂-1(PAI-1)的基因表达变化.结果术后髁突受力区出现一过性的软骨变薄、各层排列紊乱等病理变化.uPA和PAI-1基因转录水平在术后即开始上调,至2周时达到高水平,至12周时基本恢复至正常水平,与髁突软骨的适应性改建相一致.结论颞下颌关节盘前移位后,关节软骨内uPA系统的变化与关节软骨的适应性改建密切相关.
作者:詹静;谷志远;吴利群;张银凯;胡济安 刊期: 2005年第05期
目的建立温度敏感型永生化神经前体细胞系,鉴定其细胞生长特点及表达抗原的特性. 方法利用逆转录病毒感染原代培养的胚胎13d SD大鼠中脑神经前体细胞,建立温度敏感型永生化神经前体细胞系RMN,利用免疫细胞化学、Western blot和流式细胞分析方法测定RMN细胞的特征. 结果在33℃条件下,RMN细胞呈多边形,有较短突起;细胞增殖迅速,群体倍增时间为48 h,可连续传代和冷冻保存;细胞表达SV40大T抗原,nestin蛋白和Nurrl蛋白;RMN细胞中未发现染色体倍体的异常,裸鼠接种20周后未观察到肿瘤的形成.在39℃条件下,RMN细胞增殖速度减缓,细胞形成较长突起.在含1%胎牛血清的培养基中培养1周后,RMN细胞可表达β-Ⅲ-tubulin,GFAP和Gal C等抗原,但SV40抗原表达减弱.结论RMN细胞系是SV40/tsA58基因永生化的大鼠神经前体细胞系,是具有温度敏感性及多分化潜能的前体细胞系.
作者:张海燕;段德义;赵春礼;兰兰;赵咏梅;王蓓蓓;苏玉金;徐群渊 刊期: 2005年第05期
目的观察哺乳期雌性小鼠第四脑室外侧隐窝室管膜形态的变化与哺乳之间的关系.方法HE染色和扫描电镜法.结果光镜下对照组外侧隐窝室管膜细胞单层稀疏排列,哺乳早、中期外侧隐窝室管膜细胞密集,常呈双层或多层排列,在室管膜细胞增厚区上可见均质的絮状物,以哺乳中期明显,此改变与对照组比较具有显著的差异(P<0.05).扫描电镜下对照组外侧隐窝处纤毛稠密,呈簇状分布;哺乳早期纤毛黏连成束,纤毛肿胀增粗,室管膜表面可见到密集的、大小不一的分泌囊泡;哺乳中期分泌囊泡比早期小,囊泡在室管膜表面黏连在一起,成层分布;哺乳末期室管膜细胞的纤毛和微绒毛与对照组相似.结论小鼠第四脑室外侧隐窝室管膜细胞有旺盛的分泌现象,这种改变与哺乳周期密切相关.
作者:郝庆卯;马常升;许力军;曹翠丽;李学平;杨天祝 刊期: 2005年第05期
目的研究外源FHIT基因对不同FHIT基因背景肺癌细胞系恶性增殖的影响并探讨抑癌机理.方法用Lipofectamine介导PEGFP-FHIT真核表达质粒转染受体细胞系并建立稳定转染细胞系.RT-PCR、免疫组织化学及Western blot方法鉴定转染细胞中外源FHIT基因和蛋白的表达.细胞集落形成实验研究外源FHIT基因对肺癌细胞恶性增殖的影响,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡.Western blot检测母系及转染细胞系中p21Waf/cip蛋白的表达.结果3种受体细胞转染外源FHIT基因后均检测到FHIT mRNA和蛋白的表达.集落形成实验801D-FHIT(46.3%)、A2-FHIT(43.7%)、A549-FHIT(32.7%)细胞集落形成率比801D(58.2%)、A2(60.3%)、A549(52.8%)的低,差异有显著性(P<0.01).FACS分析细胞周期显示:801D-FHIT、A2-FHIT和A549-FHIT细胞分别出现了G1、S和G2/M期阻滞.转染FHIT基因的801D-FHIT、A2-FHIT和A549-FHIT细胞p21Waf/cip蛋白表达增加. 结论外源FHIT基因能够抑制不同FHIT基因背景的肺癌细胞的恶性增殖,并引起细胞周期改变,不同FHIT基因背景的细胞产生细胞周期阻滞的时间不同.FHIT基因通过促进p21Waf/cip蛋白的表达来调节细胞周期.
作者:张立群;汪蕙;赖百塘;王玥 刊期: 2005年第05期
目的探讨灵芝孢子(萌动激活赤灵芝孢子)对大鼠脊髓受损伤运动神经元存活和表达神经营养素-3(NT-3)及一氧化氮合酶(NOS)的影响.方法对单侧腹根切断后的大鼠胃饲不同剂量的灵芝孢子,计算受损伤运动神经元存活率;用免疫组织化学及原位杂交方法检测NT-3的表达;用酶组织化学方法检测NOS的活性.结果腹根切断后35 d,对照组运动神经元存活率为47.32%,灵芝孢子低、中、高剂量组的运动神经元存活率分别为67.11%、72.67%和81.67%;腹根切断后高剂量组存活的运动神经元NT-3和NOS的表达都高于对照组. 结论灵芝孢子促进大鼠脊髓前角受损伤的运动神经元存活,其存活率与用药剂量有关;灵芝孢子促进大鼠脊髓存活的运动神经元表达NT-3和NOS.
作者:张伟;曾园山;陈穗君 刊期: 2005年第05期
目的探讨自体外周嗅成鞘细胞对脊髓损伤修复的可能作用和促进受损轴突再生的能力,为临床应用自体OECs修复脊髓损伤进行可行性研究.方法以改良的Allen法建立脊髓(T9~10节段)损伤模型后,将动物分为自体OECs悬液组和Hanks液对照组,分别移植含自体OECs的细胞悬液和Hanks液,以神经丝蛋白(NF)和神经生长因子受体蛋白(NGFR p75)免疫荧光双标染色,激光共聚焦显微镜检测移植效果;通过BBB行为学评分记录两组动物后肢恢复功能.结果镜下观察可见自体OECs悬液组动物脊髓损伤处的空洞较对照组明显缩小.而自体OECs悬液组免疫荧光标记纤维中夹有NGFRp75标记的OECs,且随标记的NF纤维走行方向排列.行为学观察可见自体OECs悬液组的大鼠后肢运动功能较对照组有显著恢复.结论自体OECs悬液多点注射有助于脊髓损伤部位神经纤维的再生.
作者:陈庆山;陈欣;杨磊;王珂;石献忠;孙宇;潘胜发;于恩华;周长满 刊期: 2005年第05期