学术投稿

电压门控钠通道亚型Nav1.5在乳腺癌细胞中的表达及与细胞体外转移的关系

高瑞;王静;沈怡;雷鸣;王泽华

关键词:电压门控钠通道, Nav1.5, 侵袭转移, 乳腺癌
摘要:目的 观察电压门控钠通道(voltage-gated sodium channels,VGSCs)亚型在乳腺癌细胞中的表达及其与细胞体外转移的关系.方法 通过RT-PCR,Western blot,MTT及Transwell小室迁移和侵袭实验,检测乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7中VGSCs的表达及VGSCS特异性阻断剂河豚毒素(TTX)对细胞的毒性、迁移和侵袭特性的影响.结果 在MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞中同时存在NaV1.1,NaV1.4和NaV1.8的高表达;而在MDA-MB-231细胞中发现NaV1.3和NaV1.5、NaV1.6的表达量较MCF-7细胞中明显升高,尤其是NaV1.5的表达具有功能性意义.体外应用1μmol/L和30μmol/L TTX处理细胞后,与对照组相比,MDA-MB-231细胞的体外侵袭性分别下降了(12.50±0.19)%和(53.58±1.03)%.而MCF-7细胞的体外侵袭性却没有发生明显变化.结论 乳腺癌细胞MDA-MB-231中存在高表达的NaV1.5,TTX阻断VGSCs后显著抑制其体外侵袭力.
华中科技大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 肝复乐对肝纤维化大鼠神经递质受体表达的调节作用

    目的 研究中药肝复乐对肝纤维化大鼠肝细胞神经递质受体表达的调节作用,探讨其抗肝纤维化的机制.方法 将40只Wistar大鼠分为3组:正常对照组10只、肝复乐组15只及模型组15只.用CCl4皮下注射制备大鼠肝纤维化模型,采用光镜及电镜观察肝组织病理学改变;运用半自动生化分析仪测定谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清7谷丙转氨酶(GGT),放射免疫法测定血清层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、透明质酸(HA)的含量,免疫组织化学SP法检测各组肝组织M1、N型胆碱能受体(M1-AChR、N-AChR),α1、β2型肾上腺素能受体(α1-AR、β2-AR)的表达水平.结果 肝复乐组病理改变较模型组明显改善;肝复乐组Mt-AChR、N-AChR的表达较模型组显著降低(均P<0.05),而α1-AR、β2-AR的表达较模型组显著升高(均P<0.05).结论 肝复乐能通过抑制肝组织M1-AChR、N-AChR的表达,促进α1-AR、β2-AR的表达,从而调节神经递质在肝纤维化中的作用.

    作者:孙雪梅;刘红艳;王光林;段瑞娴;程勇卫;吴翠环;唐望先 刊期: 2009年第02期

  • NTF2对视网膜新生血管的抑制作用

    目的 体外实验研究核转运因子2(NTF2)对视网膜新生血管的抑制作用.方法 以血管内皮生长因子(VEGF)刺激体外培养人视网膜血管内皮细胞,并分为转染重组腺相关病毒2-NTF2(rAAV2-NTF2)的实验组和转染等量空白rAAV2的对照组,利用流式细胞仪和Boyden小室观察NTF2对激活状态的人视网膜血管内皮细胞增殖和迁徙的作用.结果 流式细胞仪检测结果显示实验组在G1期的细胞比例为(49.57±0.43)%,对照组为(27.21±0.86)%,两者差异有统计学意义(P<0.05)./30yden小室实验检测迁徙细胞数,实验组和对照组分别为(13.85±1.5)和(34.6±2.5)(n=6,P<0.05),说明NTF2能抑制人视网膜血管内皮细胞的增殖和迁徙.结论 NTF2对视网膜新生血管具有抑制作用.

    作者:李斌;赵敏红;李贵刚;徐玲娟;向艳;毛晓春 刊期: 2009年第02期

  • 维甲酸信号通路对脂多糖作用后A549细胞SP-B表达的影响

    目的 探讨在感染相关的肺透明膜病发病中是否有维甲酸受体α(retinoic acid receptor-α,RARα)异常的机制参与以及全反式维甲酸(all trans-retinoic acid,ATRA)对脂多糖(1ipopolysaccharide,LPS)引起的A549细胞肺泡活性蛋白-B(surfactant protein B,SP-B)表达下调是否有干预作用.方法 将体外培养的人肺腺癌细胞A549分为①对照组:用无血清DMEM培养液培养;②LPS组:含10μg/ml LPS无血清DMEM培养液培养24 h;③LPS+ATRA治疗组:10μg/ml LPS培养24 h,再加入1 μmol/ml ATRA培养24 h;④ATRA+LPS预防组:1 μmol/ml ATRA培养24 h,再加入10μg/ml LPS培养24 h.应用免疫细胞化学方法(SP法)检测各组A549细胞中SP-B、RARα的表达及分布情况.结果 LPS组A549细胞胞质中SP-B表达较对照组明显减弱(P<0.05);RARα胞核内表达减弱而出现明显胞质内表达(P<0.05).LPS+ATRA治疗组SP-B表达与对照组比较表达强度相近(P>0.05);RARα表达强度及细胞内定位与对照组表达无明显变化(P>0.05).ATRA+LPS预防组A549细胞质中SP-B表达明显减弱;胞核中RARα的表达明显减弱,而胞质内表达增强,与LPS组结果一致(P>0.05).结论 LPS可引起A549细胞SP-B蛋白水平下调.其机制可能与LPS引起RARα表达和细胞内分布异常有关;ATRA可能通过诱导RARα核内表达而干预LPS引起的A549细胞SP-B表达下调;预先给与ATRA不能减轻LPS引起的A549细胞SP-B蛋白水平下调.

    作者:张荣辉;吕晶;李娜萍 刊期: 2009年第02期

  • 黑质内注射脂多糖对小胶质细胞MHC Ⅱ表达的影响

    目的 观察黑质内注入脂多糖(LPS)后对黑质小胶质细胞主要组织相容性复合物Ⅱ(MHC Ⅱ)表达的影响.方法 采用立体定向技术向大鼠单侧黑质内注入LPS建立帕金森病动物模型.分别于注药后1、7、14、60 d时采用免疫组化法检测MHC Ⅱ阳性细胞;Western blot检测黑质小胶质细胞MHC Ⅱ蛋白的表达;双标荧光染色法检测p47phox(NADPH氧化酶标志物)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在MHC Ⅱ阳性小胶质细胞的表达.结果 注射LPS后I d.注射侧黑质区始出现MHC Ⅱ阳性细胞,7 d时达高峰,14 d时减少,60 d时仅见少量的阳性细胞.Western blot检测结果也有类似的趋势.双标荧光染色法检测到p47phox和iNOS在MHCⅡ阳性小胶质细胞均有表达.结论 黑质内单次注射LPS可激活黑质小胶质细胞并表达MHC Ⅱ;LPS可诱导MHC Ⅱ阳性小胶质细胞同时表达iNOS和NADPH氧化酶.

    作者:王普清;孙圣刚;张允健;乔娴 刊期: 2009年第02期

  • 荧光原位杂交产前诊断羊水间期细胞非整倍体的临床应用价值

    目的 探讨荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)诊断羊水间期细胞非整倍体的临床应用价值.方法 收集547例孕妇中唐氏综合征筛查阳性者28例及3例具有其他产前诊断指征的孕妇,共计31例患者的羊水,应用13/21号染色体特异性双色探针对羊水间期细胞进行FISH检测,以羊水培养细胞常规G显带核型分析作为FISH检测结果对照.结果 31例标本中1例发生母血严重污染,其余30份标本均杂交成功(包括1例混浊羊水).FISH检测结果发现典型21三体1例,未发现13三体.FISH诊断结果与核型分析结果一致.结论 FISH产前诊断羊水间期细胞非整倍体准确率与核型分析一致,与核型分析相比,FISH具有快速、所需样本量少且结果直观易辨的优势,有较高的临床应用价值.

    作者:夏革清;张丽萍;谢宝国;吴超英 刊期: 2009年第02期

  • VEGF-C和ICAM-1在子宫腺肌病中的表达及意义

    目的 比较血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)在子宫腺肌病异位内膜、在位内膜与子宫肌瘤正常内膜中表达的差异,探讨其在发病机制中的意义.方法 用免疫组化链霉亲合素-生物素-过氧化物酶复合物法(SABC法)检测31例子宫腺肌病患者的在位、异位内膜以及3l例子宫肌瘤患者正常内膜中2种因子的表达水平.分析同一内膜不同因子表达的相关性.结果 VEGF-C在在位内膜表达的平均吸光度值为(0.26±0.14),在异位内膜的表达值为(0.23±0.10),在正常内膜的表达值为(0.14±0.07),在位和异位内膜的表达均高于正常内膜(P<0.05),ICAM-1在在位内膜表达的平均吸光度值为(0.12±0.04),在异位内膜的表达值为(0.10±0.02),在正常内膜的表达值为(0.37±0.13),在位和异位内膜的表达均低于正常内膜(P<0.05).2种因子在在位内膜的表达均失去正常内膜所具有的相关性.结论 子宫腺肌病在位和异位内膜VEGF-C的过度表达和ICAM-1的低表达均可能与发病机制有关,在位内膜的改变在发病中起着重要作用.

    作者:胡亚敏;郑红兵 刊期: 2009年第02期

  • 藤黄酸抑制NF-кB信号通路阻滞Raji细胞周期进程

    目的 探讨藤黄酸对人B细胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)细胞系Raji细胞周期的影响及可能的信号通路.方法 采用碘化丙啶染色流式细胞术检测细胞周期.免疫印迹检测Cyclin D3、Cyclin E和NF-кB蛋白表达.结果 藤黄酸能明显抑制Raji细胞增殖,呈剂量依赖性阻滞Raji细胞周期于G0/G1.期,下调Cyclin D3、Cyclin E和NF-кB蛋白表达.结论 藤黄酸通过抑制调节Cyclin D3和Cyclin E的表达,阻滞细胞周期进程,该过程可能与NF-кB传导通路有关.

    作者:王勇;陈燕;吴小建;陈子;柯文娟;舒文秀;吴秋玲 刊期: 2009年第02期

  • 成人神经干细胞脑内移植后突触形成和电生理功能的实验研揪

    目的 研究成人神经干细胞(NSCs)脑内移植后新生神经元突触形成和电生理功能.方法 从开放性脑损伤患者外露的脑组织中分离培养出成人NSCs,利用病毒基因转移的方法对成人NSCs进行标记.将rAAV-LacZ标记的成人NSCs进行裸鼠脑内移植后行免疫电镜检查,观察新生神经元突触形成情况;重组GFP逆转录病毒标记成人NSCs裸鼠脑内移植后进行脑片的细胞电生理检测.结果 免疫电镜检查表明成人NSCs移植后分化的神经元与宿主细胞之间形成突触联系,膜片钳检测显示由成人NSCs分化而来的GFP阳性神经元具有自发的动作电位,全细胞膜片钳模式下可记录到Na+、K+电流.结论 成人NSCs移植后可以与宿主细胞形成突触联系,其分化的神经元细胞具有电生理功能.

    作者:杨林;周辉;王宇倩;朱剑虹 刊期: 2009年第02期

  • 间充质干细胞构建组织工程瓣膜的生物力学性能研究

    目的 采用碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)联合间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)构建组织工程心脏瓣膜(tissue engineered heart valve,TEHV),并对其生物力学性能进行研究.方法 分离培养大鼠MSCs,进行细胞鉴定后种植于去细胞瓣叶支架上.将瓣叶置于含5 ng/ml bFGF的培养液中,分别培养7 d和14 d作为实验组A和实验组B.实验组C除培养液中不添加bFGF外,其余同实验组B.对照组为大鼠肌成纤维细胞构建的TEHV.对各组TEHV进行形态学观察,生化检测和生物力学测试.结果 MSCs表达CD29(94.82%)和CD44(93.59%).各组TEHV具有相似的形态结构,DNA和羟脯氨酸含量、大负荷、大应力、大应变和弹性模量的差异无统计学意义(P>0.05).结论 采用MSCs和肌成纤维细胞构建的TEHV具有相同的生物力学性能,而采用bFGF联合MSCs体外构建TEHV能在更短的时间内获得相同的生物力学性能.

    作者:洪昊;苏伟;董念国;史嘉玮 刊期: 2009年第02期

  • GPI-PLD过表达对肺癌细胞株A549生物学特征的影响

    目的 研究糖基化磷脂酰肌醇特异性磷酯酶D(GPI-PLD)基因转染并过度表达对肺癌细胞株A549生物学特征的影响.方法 用脂质体转染法将GPI-PLD真核表达载体pcDNA3.1(+)/GPI-PLD转入A549细胞,以未转染的A549细胞及转染空载体pcDNA3.1(+)的细胞为对照,筛选出阳性细胞克隆.以胎盘碱性磷酸酶(PLAP)为底物,定量检测GPI-PLD活性,RT-PCR法确定GPI-PLD mRNA表达水平,细胞计数绘制生长曲线,锥虫蓝排斥法观察补体介导的细胞毒(CDC)杀伤率,分光光度法测定PLAP活性,ELISA检测癌胚抗原(CEA)的表达情况.结果 阳性细胞克隆GPI-PLD酶活性水平比对照组升高约3倍,GPI-PLD mRNA表达水平显著增加,GPI-PLD基因过度表达可促进GPI锚定的蛋白质如CEA和PLAP等被大量水解释放入培养液,导致细胞增殖能力减弱,对补体杀伤的敏感性增强.结论 成功将GPI-PLD基因转染入A549细胞,并在细胞中稳定表达.GPI-PLD过表达能抑制肿瘤细胞增殖,增强肿瘤细胞对补体杀伤的敏感性.

    作者:石新云;黄明清;黄洁 刊期: 2009年第02期

  • 滑动多层磁共振成像在直肠间质瘤分期中的应用价值

    目的 探讨滑动多层(sliding muhislice,SMS)磁共振成像(MRI)在胃肠道问质瘤(gastrointestinal stromaltumours,GIST)腹部分期中的应用价值和潜力.方法 2005年9月至2008年1月8例由组织学和免疫组化检测证实的直肠GIST患者,均接受盆腔静止高分辨率MRI和腹部SMS MRI检查进行治疗前分期.在盆腔静止高分辨率MRI采用T2一TSE序列检查后,利用SMS技术的T1加权增强FLASH-2D序列在1 min内检查整个腹部.分析图像,分别了解直肠GIST原发部位情况及腹部远处转移情况.结果 盆腔静止高分辨率MRI检查成功确定所有患者直肠GIST的大小、范围及局部侵犯程度,肿瘤大直径介于1.7~11.0 cm.SMS MRI检查的图像质量能够满足对可能的肝转移灶、转移淋巴结、肠系膜转移灶和骨转移灶的评价.结论 腹部SMS MRI联合盆腔静止高分辨率MRI可以在一次检查中完成直肠GIST的腹部分期.

    作者:熊斌;Arnd-Oliver Schaefer;Tobias Baumann;冯敢生;Mathias Lange 刊期: 2009年第02期

  • shRNA沉默基因DNMT1的表达对膀胱癌T24细胞增殖与凋亡的影响

    目的 体外研究shRNA(short hairpin RNA)沉默基因DNMTl的表达对膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响,初步探讨DNMT1在膀胱肿瘤形成过程中的作用机制.方法 实验分为空白对照组(给予脂质体)、HK组(含无效干扰序列的质粒)及pshRNA-DNMT1组;常规培养膀胱癌T24细胞株,用脂质体Lipofeetamine 2000将构建成功的重组质粒pshRNA-DNMT1转染进入T24细胞,然后进行RT-PCR、Western blot检测各组DNMT1 mRNA及蛋白质水平变化;进行MTT,Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测各组T24细胞增殖和凋亡情况.结果 重组质粒pshR-NA-DNMT1成功转染进入膀胱癌T24细胞;经RT-PCR检测pshRNA-DNMT1组DNMT1 mRNA表达减少,24、48、72h的抑制率分别是28.44%、52.48%、70.91%;转染pshRNA-DNMT1后,T24细胞中DNMT1蛋白24、48和72 h的抑制率分别为24.27%、57.79%、69.74%;在MTT检测中,pshRNA-DNMT1组的细胞增殖抑制率在24、48、72 h分别为(4.34±0.76)%,(9.87±1.54)%和(13.78±1.93)%,与空白对照组比较各时间点差异均有极显著性意义(均P<0.01);转染24、48和72 h后,pshRNA-DNMT1组细胞凋亡率分别为(3.87±0.81)%、(8.69±1.23)%和(11.46±1.24)%,与空白对照组比较差异均有极显著性意义(均P<0.01).结论 重组质粒pshRNA-DNMT1能有效降低膀胱癌细胞中DNMT1基因mRNA及蛋白的表达,并在一定程度上抑制T24细胞的增殖和促进凋亡.

    作者:张士龙;曾甫清;彭世波;董继华;廖贵益;汪良 刊期: 2009年第02期

  • 获得性双眼旋转性斜视的治疗与转归

    目的 探讨双眼旋转性斜视发病病因、临床特点、治疗效果及预后.方法 用同视机、双马氏杆等检查诊断双眼旋转性斜视患者10例,根据病因不同采用不同治疗方法.结果 2例由颅内病变引起者转至相应科室治疗原发病;8例脑外伤引起者,4例经药物及物理保守治疗,半年后基本恢复正常双眼单视功能;3例经保守治疗半年后行双上斜肌矢状移位术;1例因种种原因未能进一步治疗.结论 近年来该病发病有增多趋势,加强对该病的认识很有必要;部分患者经药物和物理等治疗可以临床治愈;双上斜肌矢状移位术也可取得令人满意效果.

    作者:王平;宋琳;李贵刚 刊期: 2009年第02期

  • Livin靶向siRNA对结肠癌细胞的抑制作用

    目的 构建Livin靶向siRNA重组表达载体,研究其对人结肠癌细胞生长的抑制作用.方法 构建Livin靶向siRNA重组表达载体并转染结肠癌细胞,通过RT-PCR和Western blot方法检测Livin的表达.结果 经酶切鉴定和测序结果证实Livin靶向siRNA重组表达载体构建成功,它对结肠癌细胞Livin mRNA和蛋白的表达抑制率分别为30.18%和28.88%.结论 Livin靶向siRNA重组表达载体构建成功并能显著抑制Livin基因的表达.

    作者:蔡明;王国斌;陶凯雄;蔡昌学 刊期: 2009年第02期

  • 线粒体ATP敏感钾通道对哮喘大鼠气道平滑肌细胞表型转化的影响

    目的 研究线粒体ATP敏感钾通道(mitoKATP)对哮喘气道平滑肌细胞(ASMCs)表型转化的影响.方法 腹腔注射和雾化吸人制备哮喘大鼠模型.取哮喘及正常大鼠ASMCs,分为以下6组进行干预:正常对照组;正常+mi-toKATP开放剂diazoxide组;正常+mitoKATP阻断剂5-HD组;哮喘对照组;哮喘+diazoxide组;哮喘+5-HD组.激光共聚焦显微镜检测各组ASMCs R-123荧光强度以反映线粒体膜电位(△ψm),Western blot法检测各组细胞α一肌动蛋白(ractin)表达量.结果 ①与正常对照组比较.哮喘对照组R-123荧光强度明显增强,α-actin表达明显下调(均P<0.05).②diazoxide干预ASMCs 24 h后.正常及哮喘ASMCs R-123荧光强度均明显增强(均P<0.05);正常ASMCs α-actin表达量无明显变化(P>0.05).但哮喘ASMCs α-actin表达量明显增加(P<0.05).结论 diazoxide引起mitoKATP开放,并逆转哮喘ASMCs由收缩型向合成型发生的表型转化.

    作者:赵建平;叶永军;高敏;胡伟华;周志刚 刊期: 2009年第02期

  • 波前像差引导的准分子激光原位角膜磨镶术后视觉质量评价

    目的 比较波前引导的准分子激光原位角膜磨镶术(LASIK)与标准LASIK治疗近视眼的术后视觉质量.方法 选取接受Zyoptix波前引导LASIK手术的近视患者80例(149只眼)作为试验组,并选取同期行标准LASIK手术的近视患者100例(176只眼)作为对照组,观察对比2组术后视觉质量.结果 ①视力变化:术后6个月,试验组佳矫正视力较术前提高1行以上的患眼为76眼(50.1%),明显高于对照组的53眼(30.1%,P<0.01);裸眼视力高于术前矫正视力的患眼为53眼(35.6%),明显高于对照组的31眼(17.6%,P<0.01).②屈光度变化:术后3个月对照组开始出现屈光度回退呈轻微欠矫,而试验组回退很少,基本趋于正视状态.③对比敏感度变化:术后1个月,2组对比敏感度较术前均下降,尤其以中频和高频下降明显,术后3个月,2组对比敏感度较1个月时略有增加,试验组增加明显.术后6个月,试验组对比敏感度较术前有提高,而对照组趋于术前水平.④高阶像差变化:术后2组的高阶像差均方根值(RMS)均较术前增加,但试验组较对照组增加值明显减小(P<0.05).结论 Zyoptix波前引导LASIK治疗近视的术后视觉质量优于标准LASIK手术.

    作者:刘苏冰;王丽娅;聂晓丽;买志彬;马恩普 刊期: 2009年第02期

  • 增强型绿色荧光蛋白标记骨髓间充质干细胞移植对帕金森病大鼠模型的治疗作用

    目的 探讨骨髓问充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植对帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠的疗效及其在脑内存活、迁徙、分化规律.方法 将造模成功的PD大鼠随机分为两组,将增强型绿色荧光蛋白(en-hanced green fluorescent protein,EGFP)标记的MSCs及PBS分别移植入两组PD模型纹状体.术后每周进行旋转试验,第1周和第9周行脑神经元特异性核蛋白(Neun)、胶质细胞源性蛋白(GFAP)及酪氨酸羟化酶(TH)的免疫组化鉴定,第9周行Western blot检测两组模型纹状体内TH的表达.结果 移植前MSC组及PBS组旋转次数分别为(8.2±0.6)、(8.3±0.6)圈/min,差异无统计学意义(P>0.05);术后第3周分别为(7.5±0.5)、(8.1±0.6)圈/min,差异有统计学意义(P<0.05),并持续至术后第9周.移植后第1周MSCs主要分布于针道附近.第9周则迁徙至两侧大脑半球,以移植侧半球为主.远迁徙至胼胝体的末端.小脑及脑于未见移植细胞.全脑未见畸胎瘤的形成.术后第1周免疫组化染色仅见GFAP和Neun表达.第9周GFAP、Neun仍有表达,以GFAP居多,同时在纹状体内还可见少量TH表达,提示MSCs在脑内主要分化为胶质细胞.部分为神经元.少数分化为多巴胺能神经元(dopaminergic neuron.DN).PBS组免疫组化染色未见上述蛋白的表达.Western blot检测仅MSCs组大鼠纹状体有TH的表达.结论 MSCs移植入纹状体后可分化为DN,从而改善PD症状,其移植治疗PD大鼠模型可能是安全有效的.

    作者:胡琦;康慧聪;刘晓艳;许峰;李巷;朱遂强 刊期: 2009年第02期

  • 电压门控钠通道亚型Nav1.5在乳腺癌细胞中的表达及与细胞体外转移的关系

    目的 观察电压门控钠通道(voltage-gated sodium channels,VGSCs)亚型在乳腺癌细胞中的表达及其与细胞体外转移的关系.方法 通过RT-PCR,Western blot,MTT及Transwell小室迁移和侵袭实验,检测乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7中VGSCs的表达及VGSCS特异性阻断剂河豚毒素(TTX)对细胞的毒性、迁移和侵袭特性的影响.结果 在MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞中同时存在NaV1.1,NaV1.4和NaV1.8的高表达;而在MDA-MB-231细胞中发现NaV1.3和NaV1.5、NaV1.6的表达量较MCF-7细胞中明显升高,尤其是NaV1.5的表达具有功能性意义.体外应用1μmol/L和30μmol/L TTX处理细胞后,与对照组相比,MDA-MB-231细胞的体外侵袭性分别下降了(12.50±0.19)%和(53.58±1.03)%.而MCF-7细胞的体外侵袭性却没有发生明显变化.结论 乳腺癌细胞MDA-MB-231中存在高表达的NaV1.5,TTX阻断VGSCs后显著抑制其体外侵袭力.

    作者:高瑞;王静;沈怡;雷鸣;王泽华 刊期: 2009年第02期

  • 靶向Mcl-1的shRNA重组质粒的构建及其对HepG2细胞增殖和凋亡的影响

    目的 设计以髓细胞白血病基因-1(Mcl-1)为靶点的短发夹状RNA(shRNA).构建携带此shRNA的重组质粒,探讨脂质体转染该重组质粒对肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响.方法 设计3对针对Mcl-1基因不同位点的shRNA片段的真核表达载体psiRNA-hHlneo-Mcl,用阳离子脂质体法将重组质粒转染至人肝癌细胞株HepG2中,通过RT-PeR及Western blot方法检测转染前后Mcl-1 mRNA及蛋白表达情况,筛选能高效抑制Mcl-1基因表达的shRNA重组质粒并应用MTT和流式细胞仪分析转染后细胞增殖和凋亡变化的情况.结果 成功构建含shRNA片段的重组质粒,依次命名为pMclsi-1、pMclsi-2、pMclsi-3.经测序证实.插入的DNA片段的序列与设计序列完全一致.重组质粒转染HepG2细胞后,Mcl-1基因的mRNA水平及蛋白水平明显下调,其中以pMclsi-1重组质粒下调效应强.MTT检测显示pMclsi-1可明显抑制HepG2细胞增殖,流式细胞仪测定转染后24 h细胞凋亡率为6.5%,48 h细胞凋亡率为15.6%,显著高于对照组(3.9%,P<0.05).结论 采用RNAi技术可特异阻断Mcl-1基因的表达,Mcl-1基因有促进细胞增生及抑制凋亡的作用.

    作者:余琴;陈琼;黄焕军;宋宇虎;常莹;田德安;林菊生 刊期: 2009年第02期

  • IGF-1基因转染促进胚胎干细胞诱导分化的心肌细胞中IGF-1、肌球蛋白、肌动蛋白及心肌特异性肌钙蛋白-T的表达

    目的 观察胰岛素样生长因子-T(IGF-1)基因转染对胚胎干细胞(ES细胞)诱导分化的心肌细胞中IGF-1、肌球蛋白(myoglobulin)、肌动蛋白(actin)及心肌特异性肌钙蛋白-T(Troponin-T)表达的影响.方法 将含有IGF-1基因的真核质粒转染人大鼠胚胎干细胞诱导分化的心肌细胞中,采用免疫组织化学方法对心肌细胞内上述4种蛋白的表达进行检测.利用HPIAS-2000图像分析系统测定4种蛋白在各组中表达的平均吸光度值和平均阳性面积率.结果 IGF-1基因转染后的心肌细胞内上述4种蛋白的表达明显高于未转染的对照组(P<0.05).结论 IGF-1基因转染的心肌细胞较未转染的心肌细胞合成IGF-1、肌球蛋白、肌动蛋白及心肌特异性肌钙蛋白-T的能力增强,为IGF-1基因治疗心肌梗死提供了实验依据.

    作者:杨虹;邓成国 刊期: 2009年第02期

华中科技大学学报(医学版)杂志

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主办:华中科技大学