刘慎沛;田拥军;杨燕;杨东亮
目的 观察核转录因子-κB(NF-κB)圈套寡核苷酸对NF-κB活性的影响,研究Survivin在其诱导肝癌细胞HepG2凋亡中的作用.方法 将异硫氰酸荧光素(FITC)标记的NF-κB圈套寡核苷酸转染至HepG2细胞中,荧光倒置显微镜和共聚焦显微镜进行核内定位观察,凝胶迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测转染前后NF-κB活性变化;流式细胞仪和TUNEL检测细胞凋亡率;Western blot检测凋亡抑制蛋白Survivin的改变.结果 NF-κB圈套寡核苷酸转染后定位于细胞核内,EMSA显示转染后NF-κB活性明显下降.与未处理组、转染错义组相比,转染NF-κB圈套寡核苷酸组的HepG2细胞凋亡率增加,Survivin蛋白表达下调[(39.8±1.9)、(42.7±2.5)vs(20.1±3.1)].结论 NF-κB圈套寡核苷酸具有促进肝癌细胞HepG2凋亡的作用,其机制可能与下调Survivin的表达有关.
作者:张万广;杨盛力;李哲夫;张峰;徐宗全;王其;张志伟 刊期: 2007年第05期
Marshll-White综合征临床少见,近几年来报道逐渐增多,自1994年以来国内已有20例报道[1-4].为分析该综合征的临床特点,我们对协和医院皮肤科门诊1999年10月至2006年6月所诊治的10例该综合征患者进行分析,现报道如下.
作者:樊超;朱里;刘文韬;黄长征;涂亚庭 刊期: 2007年第05期
目的 探讨经阴道超声检查(TVS)结合多变量Logistic回归分析法对早期异位妊娠(EP)的诊断价值.方法 运用TVS检测和观察97例确诊的早期EP患者的子宫内膜厚度、对称性、回声、形态等二维声像图特征,进行单、多因素Logistic回归分析和ROC曲线分析,找出有意义的变量和建立预测方程.结果 子宫内膜三线状改变及内膜厚度≤9mm是有意义的超声诊断变量,OR值分别为299.59和34.139,多变量Logistic预测方程的建立比单独应用单一变量拥有更大的曲线下面积,能够更好地鉴别诊断EP.结论 TVS对EP的早期诊断敏感性较高.TVS结合多变量Logistic回归分析能克服用单一变量指标作为诊断和鉴别诊断标准时敏感性较低的问题,能更准确地预测EP.
作者:陈智毅;谢明星;柳建华;梁伟翔;梁琨 刊期: 2007年第05期
目的 研究胰岛素样生长因子Ⅰ型受体(IGF-ⅠR)在急性髓细胞性白血病(AML)中的表达特点及抗IGF-Ⅰ R单克隆抗体对人急性早幼粒细胞白血病细胞株HL-60的作用.方法 通过流式细胞仪检测白血病细胞和HL-60细胞表面IGF-ⅠR的表达,并用鼠抗人IGF-ⅠR单克隆抗体(IGF-ⅠR MAb)作用于HL-60细胞,用CCK-8法检测细胞增殖,用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期的变化.结果 IGF-Ⅰ R在急性髓细胞白血病和HL-60细胞普遍表达,原始细胞比例越高,IGF-Ⅰ R表达越强(P<0.01).0.001~10.000 μg/ml的IGF-Ⅰ R MAb可抑制HL-60细胞生长,且随时间的延长和药物剂量的增大,这种抑制作用更加明显(P<0.05).0.001~10.000 μg/ml浓度范围内,IGF-Ⅰ RMAb诱导HL-60细胞的凋亡率随药物浓度的增大而增高,但对HL-60细胞周期无显著影响.结论 IGF-Ⅰ R在急性髓细胞性白血病中普遍表达,IGF-Ⅰ R的高表达可能与细胞的恶性转化和白血病细胞的生长有密切关系.IGF系统对肿瘤细胞的促增殖及抗凋亡作用能被IGF-Ⅰ R单克隆抗体所阻断,IGF-Ⅰ R有可能成为抗白血病治疗的靶点.
作者:孙思;刘隽;周咏明;熊芳;李玥莹;刘伟;王萍;黄士昂 刊期: 2007年第05期
目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)信号转导通路下游信号分子Smad2、Smad3在TGF-β1促进大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)成骨分化中的作用.方法 采用RT-PCR、Western blot检测TGF-β1促MSCs成骨分化过程中Smad2、Smad3 mRNA和蛋白表达的变化;脂质体介导稳定转染Smad3△C,间接免疫荧光试验鉴定;采用RT-PCR检测转染细胞中碱性磷酸酶(ALP)和核心结合因子(cbfa1)mRNA的表达,用对硝基苯磷酸盐(PNP)法检测细胞ALP活性,用茜素红染色法检测细胞矿化能力,观察Smad3△C对MSCs成骨分化的影响.结果 在TGF-β1刺激后24 h,MSCs中Smad3的mRNA和蛋白表达量明显减少(P<0.01),而整个刺激过程中,Smad2的mRNA和蛋白表达量无明显变化(P>0.05);稳定转染细胞中c-Myc抗原阳性表达;受TGF-β1刺激后,MSCs和V-MSCs(空载体转染组)中ALP、cbfa1 mRNA的表达水平、矿化能力明显高于Smad3△C-MSCs;随TGF-β1刺激时间延长,Smad3△C-MSCs中ALP活性增加缓慢,仅于48 h有明显增加(P<0.05),但与同时段MSCs和V-MSCs中ALP活性相比,差异有极显著性意义(P<0.01).结论 TGF-β1促进MSCs成骨分化这一生物学效应的输出受Smad3特异性和选择性的调节.
作者:王运涛;郑启新;吴小涛;郭晓东;茅祖斌;陈辉;赵梓汝 刊期: 2007年第05期
目的 总结86例主动脉窦瘤破裂合并主动脉瓣关闭不全的外科治疗经验.方法 86例主动脉窦瘤破裂合并主动脉瓣关闭不全患者,合并室间隔缺损64例,感染性心内膜炎8例,右室流出道狭窄或右室双腔心10例.瘤破口和室缺均采用Dcron补片修补,主动脉瓣整形15例,主动脉瓣置换28例.余合并症均同期予以处理.结果 围手术期死亡1例,远期死亡4例.再次手术3例,其中急诊二次手术1例.主动脉窦瘤破裂修补术后残余分流2例,室缺修补术后残余分流2例.其余病例心功能明显改善,主动脉瓣关闭不全减轻,临床效果良好.结论 主动脉窦瘤破裂合并主动脉瓣关闭不全是少见的心脏疾病,手术是唯一有效的治疗方法.采用主动脉及心腔双切口利于心肌保护和确切修补主动脉窦瘤,纠正合并畸形.
作者:吴龙;孙宗全;张凯伦;蒋雄刚;周诚 刊期: 2007年第05期
目的 建立准确度高、灵敏性好的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定血浆中盐酸伐昔洛韦水解产物阿昔洛韦的浓度,以研究盐酸伐昔洛韦片在体内的药代动力学及相对生物利用度.方法 采用两制剂双周期交叉试验设计,18名男性健康志愿者先后分别单剂量口服盐酸伐昔洛韦受试片剂或参比片剂300 mg,采用RP-HPLC,以更昔洛韦为内标,测定血浆阿昔洛韦浓度.用3P97药代动力学程序处理血药浓度数据并计算参数,并作出生物等效性评价.结果 口服盐酸伐昔洛韦受试片剂和参比片剂后的药代动力学参数AUC0-t分别为(9.87±2.48)和(9.94±2.67)(μg·h)/ml,AUC0-∞分别为(10.84±2.98)和(10.83±3.18)(μg·h)/ml;Cmax分别为(3.06±0.66)和(3.16±0.66)(μg·h)/ml;Tmax分别为(1.25±0.26)和(1.17±0.24)h.受试盐酸伐昔洛韦片剂以AUC0-t和AUC0-∞计算其相对生物利用度分别为(100.6±11.7)%和(101.7±13.3)%.结论 建立的阿昔洛韦血药浓度监测方法灵敏、准确,测定结果可靠;统计分析结果表明受试制剂与参比制剂具有生物等效性.
作者:金悠;李玉倩;朱征;周俊;龙利红;陈建国 刊期: 2007年第05期
目的 初步分析高氧暴露下早产大鼠肺组织线粒体蛋白质表达谱的改变,并对还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位4(ND4)的动态表达进行研究.方法 建立高氧暴露早产大鼠动物模型,采用双向电泳检测线粒体蛋白质差异性表达,运用RT-PCR和Western blot方法分别检测ND4 mRNA及其蛋白表达.结果 与空气组比较,高氧暴露4 d导致46种肺组织线粒体蛋白质出现差异性表达;高氧暴露1、4和7 d,早产大鼠肺组织ND4 mRNA和蛋白表达均较空气对照组显著降低(均P<0.01),10 d时,差异则无显著性意义(P>0.05).结论 高氧暴露导致肺细胞线粒体(包括呼吸链)功能状态改变可能是促使肺损伤发生发展的重要因素.
作者:李文斌;常立文;容志惠;卢红艳;汪鸿;刘伟;蔡成 刊期: 2007年第05期
目的 探讨穿心莲对实验性肝硬化大鼠肠道细菌移位的作用,为其临床应用提供依据.方法 将30只肝硬化模型大鼠随机分为4组:穿心莲(AN)组[n=8,穿心莲0.5 g/(kg·d)],诺氟沙星(NF)组[(n=8,诺氟沙星0.3 g/(kg·d)],穿心莲+诺氟沙星(AN+NF)组[n=8,穿心莲0.5 g/(kg·d)+诺氟沙星0.3 g/(kg·d)],肝硬化对照(CN)组[n=6,生理盐水2 ml/(kg·d)],治疗2周后结束.比较各组大鼠死亡率,取外周静脉血检测血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、一氧化氮(NO)水平;取肠系膜淋巴结、血液、肝、脾和回肠内容物做细菌培养;采用高压液相色谱法检测肠黏膜通透性;部分肝脏和回肠组织作病理切片检查.结果 与CN组相比,AN、NF和AN+NF组的TNF-α、NO浓度显著降低(均P<0.05),回肠细菌计数和细菌移位发生率显著下降(均P<0.05),AN和NF组的肠道通透性显著下降(均P<0.05).病理检查发现CN组肝硬化大鼠回肠绒毛变短、破坏,炎症细胞浸润增多,而其他3组的肠绒毛结构改变不明显.结论 穿心莲能有效阻断肝硬化大鼠的肠道细菌移位.
作者:吴春明;覃慧敏;李洪涛;宋建新 刊期: 2007年第05期
目的 探讨子宫内膜异位症(EMT)和子宫腺肌病(AMS)患者异位及在位子宫内膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达及其在血管生成调控机制中的作用.方法 采用免疫组织化学SABC方法检测16例异位内膜组织、10例腺肌瘤组织、20例在位内膜组织中VEGF的表达,并和20例正常子宫内膜组织作对照.结果 VEGF在异位内膜组织(EMT,E)中阳性表达率为93.75%(15/16),强阳性表达8例;在腺肌瘤组织(AMS,A)中阳性表达率为80.00%(8/10),强阳性表达4例;于在位内膜组织(eutopic,e)中阳性表达率为55.00%(11/20),强阳性表达3例;对照组子宫内膜组织(control,C)中阳性表达率为20.00%(4/20),无强阳性表达.E+A与e阳性表达比较差异有极显著性意义(P<0.01);E+A与C阳性表达比较差异有极显著性意义(P<0.01);e与C阳性表达比较差异有显著性意义(P<0.05).E+A与e强阳性表达比较差异有显著性意义(P<0.05);E+A与C强阳性表达比较差异有极显著性意义(P<0.01).结论 EMT、AMS异位及在位内膜组织高表达VEGF可能与EMT和AMS发生密切相关.
作者:周志强;章汉旺;俞维 刊期: 2007年第05期
目的 研究皮质类固醇激素(布地奈德混悬液)对体外培养的变应性鼻炎鼻黏膜组织黏蛋白MUC5AC和MUC5B基因和蛋白表达的影响.方法 采用体外鼻黏膜组织培养方法,分空白对照组、组胺刺激组和组胺刺激加布地奈德干预组进行研究,培养后组织分别用RT-PCR和免疫组织化学2种方法检测黏蛋白MUC5AC和MUC5B基因和蛋白表达.结果 与其他两组相比,组胺刺激组黏蛋白MUC5AC和MUC5B基因及蛋白的表达均显著增强(均P<0.05),而布地奈德干预组中黏蛋白MUC5AC和MUC5B基因及蛋白的表达与对照组相比差异无显著性意义(均P>0.05).结论 皮质类固醇激素--布地奈德混悬液能下调黏蛋白MUC5AC和MUC5B基因和蛋白的表达,从而减少变应性鼻炎鼻黏膜黏液的过度分泌.
作者:龙小博;甄宏韬;彭璐;金肆;崔永华;高起学 刊期: 2007年第05期
目的 探讨牛磺酸在体外冲击波碎石术(ESWL)致肾损伤中的保护作用及机制.方法 40只家兔随机分为:生理盐水对照组、牛磺酸组.分别测定ESWL前后外周血中损伤相关因子内皮素(ET-1)、丙二醛(MDA)及保护相关因子一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量.并观察肾脏组织形态及细胞超微结构变化.结果 两组在ESWL后外周血ET-1、MDA含量均升高,NO和SOD的含量则均降低,同期牛磺酸组ET-1、MDA升高幅度明显低于对照组,同期牛磺酸组SOD、NO降低幅度也明显低于对照组.结论 牛磺酸可能通过减少肾组织氧自由基的产生,调节ET-1、NO水平之间平衡的机制,保护肾脏,缓解ESWL引起的肾脏损伤
作者:朱伟;曾甫清;刘聪;何延瑜 刊期: 2007年第05期
目的 观察丙酮酸乙酯(EP)对急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)大鼠全身毛细血管渗漏(SCL)的影响,探讨下调血清高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平在AHNP治疗中的作用.方法 采用胰管逆行灌注人工胆汁的方法复制大鼠AHNP模型.随机分为正常对照组(Normal组,n=8)、假手术组(Sham组,n=8)、AHNP组(n=16)、EP组(n=16).EP组建模12 h开始使用EP治疗.建模24 h取材,检测与水分渗漏相关的肺系数、肺湿/干比、腹水量.使用伊文氏蓝(EBD)尾静脉注射,检测与蛋白渗漏相关的腹水、肺、胰腺、空肠、回肠、耳廓组织EBD含量;Western blot法检测血清中HMGB1的含量.结果 建模后24 h,EP组血清HMGB1浓度明显低于AHNP组[(87±16)ng/ml vs.(154±22)ng/ml,P<0.05].EP组大鼠腹水量、肺系数、肺湿/干比明显低于AHNP组,均P<0.05.EP组大鼠胰腺、空肠、回肠和耳廓组织EBD含量明显低于AHNP组.结论 下调血清HMGB1水平可有效减轻AHNP大鼠SCL的程度.
作者:杨智勇;陶京;周峰;熊炯炘;吴河水;王春友 刊期: 2007年第05期
目的 研究诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在兔碱烧伤角膜的表达与角膜新生血管形成的关系.方法 将33只家兔分为正常组(3只,6眼)、烧伤组(30只,60眼),以2 mol/L NaOH制备双眼角膜重度碱烧伤模型,用裂隙灯图像分析系统记录角膜新生血管(CoNV)生长情况.碱烧伤组分批(n=5)于伤后第1、4、7、14、21、28天处死家兔,分别取角膜组织行病理学检查和iNOS的免疫组织化学检测.结果 iNOS在正常兔角膜上皮层及基质层仅有少量表达,在烧伤组表达明显增强(P<0.05),表达范围主要在基质层炎性细胞、角膜上皮细胞及新生血管内皮细胞,表达峰值在术后第7天,随后下降,在第21天时又有所回升.结论 碱烧伤后角膜组织中iNOS的表达明显增加,其变化趋势与碱烧伤后角膜新生血管的生长曲线相一致且高峰期提前2~3 d,提示INOS水平与无菌性炎症性新生血管形成有明显的相关性.
作者:陈芳;杨红;张新芳 刊期: 2007年第05期
目的 构建土拨鼠肝炎病毒核心蛋白质粒并进行原核表达、抗体制备.方法 应用基因工程技术将编码截短型土拨鼠肝炎病毒核心蛋白(WHcAg1~149aa)的基因片段装入原核表达载体pQE60上,在JM109菌内进行诱导表达,使用切胶回收及Ni-NTA柱两种方法纯化目的蛋白.将纯化蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,并采用酶联免疫吸附实验、免疫组织化学及Western blot检测抗体的灵敏度和特异性.结果 成功地构建了含截短型土拨鼠肝炎病毒核心区基因的质粒并获得表达,经纯化得到了分子量约为16.5 kD的重组核心蛋白,免疫家兔获得了高效价的特异性多克隆抗体,而且与HBcAg有交叉反应.结论 获得的重组截短型土拨鼠肝炎病毒核心抗原(1~149aa)纯度高,免疫原性强.获得的兔抗-WHc效价高,特异性好,与HBcAg有交叉反应.
作者:张振华;田拥军;李磊;王宝菊;孟忠吉;陆蒙吉;杨东亮 刊期: 2007年第05期
目的 研究武汉同济医院2004~2005年检出的表皮葡萄球菌的耐药情况,分析耐药趋势.方法 对检出菌株复苏、培养,进行常用抗生素的药物敏感性试验,分析药敏结果.结果 共检出表皮葡萄球菌61株,全部复苏、培养成功.苯唑西林耐药41株(占67.21%),苯唑西林敏感20株(占32.79%).苯唑西林耐药的表皮葡萄球菌(MRSE)组的多重耐药率及总耐药率均显著高于苯唑西林敏感的表皮葡萄球菌(MSSE)组.在体外药敏试验中,对头孢唑啉、头孢呋新、庆大霉素及氨苄-舒巴坦保持较低的耐药率(<30%),而对SMZ-TMP、青霉素、红霉素、克林霉素及左氧沙星耐药率较高(>50%),没有发现对万古霉素耐药的菌株.结论 表皮葡萄球菌耐药情况严重,MRSE的多重耐药率、总耐药率较高.
作者:邢铭友;田德英;刘莉娜;朱旭慧;孙自镛;黄加权;齐俊英 刊期: 2007年第05期
目的 调查武汉市社区获得性腹泻患者中志贺菌感染和流行状况,分析志贺菌血清型分布及耐药性,为社区获得性腹泻治疗和该菌的基因分型提供客观依据.方法 菌株来自2004年夏秋季武汉市4所大型医院门诊腹泻患者的粪便标本;药物敏感试验采用琼脂稀释法和纸片扩散法;结果分析采用WHONET5.3软件和SPSS 12.0软件;基因分型采用重复基因外回文序列-聚合酶链式反应(REP-PCR).结果 5 079份粪便标本分离出29株志贺菌,占所检出病原菌总数的23%,血清分型涉及B群和D群,D群占59%.志贺菌对头孢他啶和头孢吡肟的敏感率高,为100%;其次为氨曲南、呋喃妥因和氟喹诺酮(诺氟沙星、环丙沙星、左氧氟沙星和莫西沙星),敏感率为93.1%~96.6%;对头孢曲松、头孢噻肟、卡那霉素和庆大霉素的敏感率为75.0%~82.8%;对氯霉素、氨苄西林、萘啶酸、四环素和大观霉素的敏感率均小于50%;未发现复方新诺明敏感株.耐药模式多达20种,多为12种联合耐药;各群有各自的优势耐药模式.REP-PCR基因分型结果提示16株D群志贺菌有7种指纹图谱,12株B群志贺菌有2种指纹图谱.结论 武汉地区因志贺菌感染导致社区获得性腹泻的比例较低,D群感染占优势.头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南和氟喹诺酮有较好的抗菌活性.B群和D群对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸和氯霉素的敏感性差异有极显著性意义.多重耐药普遍存在,耐药模式繁多.武汉市志贺菌有相同或相似的克隆,血清型单一的D群有多种基因型,B群中f2a比f4c的遗传多样性高.
作者:游升荣;孙自镛 刊期: 2007年第05期
目的 确定巨细胞病毒(CMV)体外能否直接攻击肝细胞,并建立肝细胞感染模型.方法 ①人肝细胞系感染:用人CMV(HCMV)AD169毒株感染正常人肝细胞系(L-02)和人胚肺成纤维细胞(HELF)与L-02共培养细胞,HC-MV感染的HELF细胞为阳性对照;②原代鼠肝细胞(PML)感染:用重组鼠CMV(MCMV)感染PML细胞.光镜观察细胞病变(CPE),电镜观察病毒颗粒,间接免疫荧光(IFA)法检测HCMV抗原;原位杂交法检测MCMV IE基因.PML性质经观察其特征性超微结构和检测培养上清白蛋白水平予以鉴定.结果 在PML细胞纯度>95%(培养第8天)时感染病毒,3 d后>80%细胞出现典型CPE;电镜下胞核和胞质内见大量病毒颗粒;病毒IE基因检测呈阳性.HELF细胞可被HCMV感染;而L-02细胞无论是单独,还是与HELF共培养,其病毒标志物均呈阴性,细胞结构保持正常.结论 原代鼠肝细胞体外可受到MCMV直接感染,为CMV肝炎的体外研究提供成功的肝细胞感染模型;而正常人肝细胞系不能感染HCMV,推测其表面HCMV受体发生改变或丢失.
作者:聂兴草;方峰;李红;董永绥;甄宏;李革 刊期: 2007年第05期
目的 观察盐酸戊乙奎醚(长托宁)作为术前用药对阿曲库铵肌肉松弛作用的影响.方法 选择90例无脑、心、肺、肝、肾和神经及肌肉代谢性疾病的男性全麻患者,随机分为阿托品0.5 mg组(A组)、盐酸戊乙奎醚0.5 mg组(B组)和盐酸戊乙奎醚1.0 mg组(C组).插管前30 min按分组术前用药,观察肌肉松弛药的起效时间、临床作用时间、恢复指数、95%恢复时间及T4∶T1≥0.75恢复时间.结果 C组和A、B组比较阿曲库铵起效时间显著缩短,差异有显著性意义(P<0.05);临床作用时间、T4∶T1≥0.75时间及25%~75%恢复时间无明显差异,95%恢复时间C组较A和B组延长,但差异无显著性意义(P>0.05).A和B组间各项观测指标差异均无显著性意义.结论 盐酸戊乙奎醚作为术前用药更适合仅使用非去极化肌肉松弛剂作为肌肉松弛诱导的全麻患者.
作者:罗辉宇;李樊生;彭勃 刊期: 2007年第05期
目的 采用转化生长因子-β1(TGF-β1)转基因小鼠,研究高水平的TGF-β1对巩膜厚度以及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)水平的影响,以探讨TGF-β在巩膜重塑中的作用及可能的机制.方法 应用Alb/TGF-β1(Cys223,225Ser)转基因小鼠模型作为实验对象,同窝出生的C57BL/6J野生型小鼠作为对照组.ELISA法测定血浆TGF-β1浓度.Western blot法测定巩膜组织TGF-β1、MMP-2及TIMP-2浓度,应用Whatman Biometria凝胶分析软件分析Western blot结果.对全眼球经视神经乳头正中石蜡切片进行数码图像分析测定后极部巩膜厚度.结果 TGF-β1转基因小鼠血浆TGF-β1浓度约为野生型对照小鼠的1.68倍(P<0.01),转基因小鼠巩膜组织中TGF-β1的表达水平是野生型小鼠的2.68倍(P<0.01),MMP-2的表达水平和野生型小鼠差异无显著性意义,TIMP-2的水平是野生型小鼠的3.15倍(P<0.01),转基因小鼠后极部巩膜厚度较野生型小鼠显著增厚(P<0.01).结论 TGF-β1浓度增高会导致巩膜增厚.TGF-β1通过升高TIMP-2的水平抑制MMP-2的活性,从而抑制胶原的降解导致巩膜增厚.
作者:刘海霞;杨坤禹;项楠;张虹 刊期: 2007年第05期