李旻；邱红玉；孙永玉；李红发
目的探讨细胞周期检测点对不同放射剂量射线的耐受性及咖啡因对细胞周期检测点的影响.方法对数生长期的急性早幼粒白血病细胞株(HL-60)细胞经不同剂量的X射线照射,并加入终浓度为5 mmol/L的咖啡因培养4 h后,用亚G1峰法检测细胞凋亡,用DNA链缺口标记法(TdT)分析凋亡细胞的细胞周期特异性.结果不同剂量X射线照射均可诱导HL-60细胞凋亡,2 Gy X射线的照射主要诱导G1期细胞凋亡,20 Gy X射线照射诱导的细胞凋亡由G1期发展至以S期和G2期为主.加入咖啡因能使射线诱导的细胞凋亡减少,其中2 Gy X射线照射的细胞表现为G1期细胞凋亡减少,而20 Gy X射线照射的细胞主要表现为以S期和G2期为主的细胞凋亡的减少.结论细胞对放射剂量的反应性与细胞周期检测点之间存在一定的关系,咖啡因对射线诱导的细胞凋亡及检测点的影响与射线的剂量有关.
作者：冷彦；陶德定；申漫里；覃吉超；陈元；龚建平 刊期： 2004年第01期
目的研究氯胺酮对小鼠吗啡戒断症状和脊髓星形胶质细胞活性的影响.方法昆明种小鼠30只,随机分为5组(n=6),A组:皮下剂量递增法给药建立吗啡依赖模型;B组:对照组,给予等容积的生理盐水;C、D、E3组:吗啡用药均同A组,后一次吗啡注射30 min后分别腹腔注射0、8、16 mg/kg氯胺酮.观察纳络酮催瘾后戒断症状的改变;用免疫组化方法测定各组脊髓星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫反应阳性产物的变化.结果与C组相比,D组可缓解吗啡戒断症状(P＜0.05),而E组则明显缓解(P＜0.01);D组和E组吗啡戒断所致的体重下降显著减轻(P＜0.01).脊髓GFAP免疫反应阳性产物表达相对面积,A组与B组比较,D、E组与C组比较差异均无显著性意义(均为P＞0.05).结论氯胺酮可缓解小鼠吗啡戒断症状,脊髓星形胶质细胞GFAP活性可能未参与介导吗啡依赖和戒断反应.
作者：项红兵；田玉科；孙怡 刊期： 2004年第01期
目的了解武汉城区部分居民支气管哮喘的发病情况及可能的相关因素,为支气管哮喘发病的流行病学研究提供参考.方法采用随机抽样的方法,抽取武汉城区一居委会700余户居民进行问卷调查.结果调查样本1082人,支气管哮喘的患病人数35人,现患率3.23%.男性患病率3.59%,女性患病率2.77%.0～14岁年龄组患病率4.76%,15～24岁年龄组患病率2.10%,25～59岁年龄组患病率2.52%,60岁以上年龄组患病率7.89%.有哮喘家族史是发病的高危因素(OR=9.62),同时患有其他过敏性疾病也是发病的重要危险因素(OR=8.27).一楼居民相对其他楼层发病率高(OR=2.81)结论武汉城区部分居民的支气管哮喘的发病率为3.23%,其中老年人的发病率高,儿童次之.发病的危险因素包括遗传背景、居住条件等.
作者：刘光辉；祝戎飞；王忠喜；黄爱霞；李文静；陈欢；张威 刊期： 2004年第01期
目的从细胞凋亡的角度探讨老年慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)的发病机制.方法用流式细胞仪检测了8例老年人慢性ITP患者治疗前后T淋巴细胞(CD3+)、B淋巴细胞(CD19+)Fas蛋白和Fas-L蛋白的表达.结果治疗前T淋巴细胞的Fas蛋白表达明显低于正常(P＜0.01),Fas-L蛋白表达明显高于正常(P＜0.01);B淋巴细胞的Fas和Fas-L蛋白表达与正常对照相比差异无显著性意义.经治疗血小板恢复正常的患者T淋巴细胞的Fas蛋白表达上调和Fas-L蛋白表达下调,与治疗前相比差异有极显著性意义,与正常对照相比差异无显著性意义.结论治疗前老年慢性ITP患者体内Fas/Fas-L途径介导的T淋巴细胞凋亡异常,经治疗后T淋巴细胞的Fas蛋白表达上调,有助于抗原活化的B淋巴细胞的凋亡.
作者：高清平；杨年兰；陈友华；敖绪斌；陈伦华 刊期： 2004年第01期
目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIf-1α)反义寡核苷酸对乙型肝炎病毒x蛋白(HBx)诱导的人肝癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)表达的抑制作用.方法用编码HBx基因全长的pHA-HBx质粒转染肝癌HepG2细胞;Western Blot方法鉴定HBx基因的整合和表达;用转染后的细胞建立表达HBx的裸鼠人肝癌模型.实验组用HIF-la反义寡核苷酸作肿瘤组织内注射,对照组以相同体积的生理盐水作瘤体注射,观测不同时间点裸鼠肿瘤的生长状况.采用免疫组织化学染色方法检测肿瘤组织中HIF-1α、VEGF表达水平和微血管密度.结果 HBx基因成功整合入肝癌HepG2细胞基因组并表达;实验组经反义寡核苷酸处理后肿瘤体积和重量均低于对照组,两组间差异有显著性意义(P＜0.05);实验组肿瘤组织中HIIF-1α表达下调;实验组肿瘤组织中VEGF表达为(21.6±6.7)%,低于对照组的(78.6±10.2)%(P＜0.01),微血管密度为19.75±7.38,低于对照组的36.64士12.25(P＜0.01).结论 HIIF-1α反义寡核苷酸肿瘤组织注射可以抑制肝癌组织中HBx诱导的VEGF表达,抑制表达HBx的肿瘤生长.
作者：李东华；陈孝平；张万广；王海平；裘法祖 刊期： 2004年第01期
目的探讨异种动物蛋白所致家兔免疫性血管炎的病理特点,为建立川崎病动物模型提供实验依据.方法 用牛血清白蛋白重复静脉注射复制兔的免疫性血管炎模型,25只幼兔作为实验A组,10只成年兔作为实验B组,10只幼兔为正常对照组.分别做冠状动脉造影、冠状动脉组织病理分析和相关免疫学检查.结果经大体标本肉眼观察和冠状动脉造影证实:实验A组中有6只发现有冠状动脉扩张,实验B组均未出现冠状动脉扩张.病理检查:光镜下见实验A、B组均出现不同程度内皮细胞肿胀、坏死、内皮下组织水肿、血管壁炎性细胞浸润和弹力纤维断裂等改变,实验B组的病理改变较轻,且实验A组中冠脉扩张者比无冠脉扩张者病理损伤重;电镜检查:实验A组冠状动脉组织出现不同程度内皮细胞肿胀、坏死、脱落、染色质浓聚、平滑肌细胞轻度变性、线粒体肿胀及内质网扩大等改变.实验B组仅见内皮细胞肿胀和轻度平滑肌细胞变性.结论首次发现用牛血清白蛋白诱导幼兔免疫性血管炎,可导致冠状动脉扩张,其病理改变与川崎病相似,可作为建立川崎病的实验动物模型方法;提供了免疫性血管炎可引起幼龄动物冠状动脉扩张的实验依据.
作者：韦卫中；陈绍军；王宏伟；胡秀芬 刊期： 2004年第01期
目的探讨胚胎玻璃化冷冻技术的临床应用效果.方法运用玻璃化冷冻技术保存75例患者的397个胚胎,复苏13例69个胚胎,并根据患者的情况进行胚胎移植.结果 69个胚胎中,丢失3个,存活26个,存活率为39.4%.复苏后8例患者因胚胎质量差未移植,另外5例患者共移植了14个胚胎,其中1例获得单胎妊娠,分娩1名健康女婴.结论玻璃化冷冻技术简便、经济,并能够有效地冻存人类早期胚胎,可成为胚胎冷冻方法的另一个选择.
作者：王俊霞；朱桂金；魏玉兰 刊期： 2004年第01期
目的探讨p21WAF1和CyclinD1在宫颈癌发生、发展、预后中的意义.方法采用免疫组化SP法检测41例宫颈癌,17例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和10例正常宫颈组织中p21WAF1和CyclinD1的表达,及它们与病理组织分级、临床分期、转移和生存时间的相关性.结果宫颈癌组织中CyclinD1的阳性表达率明显高于CIN组和正常对照组(均为P＜0.05),但与肿瘤分级、临床分期、转移无显著相关性(均为P＞0.05),CyclinD1阳性表达的宫颈癌患者的中位生存期明显小于阴性表达者(均为P＜0.05).宫颈癌组织p21WAFl阳性表达率则明显低于CIN组和正常对照组(P＜0.05),p21WAF1与肿瘤分级有明显相关性(P＜0.05).结论 CyclinD1高表达,p21WAF1低表达与宫颈癌的发生、发展密切相关.CyclinD1表达可作为判断宫颈癌患者预后的指标.
作者：卢实；王泽华 刊期： 2004年第01期
目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、热休克蛋白70(HSP70)在脑出血灶周脑组织中的表达及其意义.方法应用免疫组织化学技术检测37例脑出血灶周脑组织中HIF-lα、HSP70的表达.结果 37例脑出血灶周脑组织中HIF-1α阳性率为40.5%,其中出血量＞60 ml者HIF-lα阳性率为88.9%,与其他出血量者(30～45 m1,46～60 ml比较差异有显著性意义(P＜0.05).HIF-1α表达与血肿作用时间明显相关,随着出血后手术时间的推迟而增加(P＜0.05).HIF-1α与HSP70的表达呈正相关(n=15,r=0.82,P＜0.01).结论脑出血后HIF-1α的表达与出血量及血肿作用时间相关,为判断脑出血灶周缺血半暗带的存在提供了依据;HSP70有神经细胞保护及抑制凋亡的作用.
作者：唐洲平；郭守刚；彭岚；朱遂强；方思羽；张苏明 刊期： 2004年第01期
目的探讨氧化修饰的低密度脂蛋白(ox-LDL)是否诱导培养的平滑肌细胞表达血管细胞粘附分子1(VCAM-1).方法采用原位杂交和免疫组化的方法检测ox-LDL刺激后,原代培养小鼠主动脉中膜平滑肌细胞表达VCAM-1 mRNA和蛋白的情况.结果 ox-LDL作用后,平滑肌细胞VCAM-1 mRNA经原位杂交显色,细胞平均吸光度(A)值为0.200 5±0.019 0,与对照组(0.144 6±0.005 5)相比差异有极显著性意义(F=137.12,P＜0.01).平滑肌细胞VCAM-1蛋白表达经免疫组化显色后,细胞平均吸光度值为0.129 5±0.024 0,较对照组(0.068 7士0.008 5)亦有所增加,方差分析显示差异有极显著性意义(F=94.58,P＜0.01).结论 ox-LDL能够诱导动脉中膜平滑肌细胞表达高水平的VCAM-1 mRNA和蛋白,从而在动脉粥样硬化斑块形成过程中起重要作用.
作者：杨丽敏；瞿智玲；宗义强 刊期： 2004年第01期
目的介绍一种高灵敏度的DNA甲基化分析方法,即巢式甲基化特异性PCR法(nested-MSP,nMSP),探讨该方法佳应用条件,并用该法分析新鲜癌组织、石蜡包埋组织及肿瘤患者血清中p16基因启动子的甲基化状态.方法将基因组DNA变性成为单链,用亚硫酸氢盐修饰单链DNA,所有未甲基化的胞嘧啶被转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不变.设计针对甲基化和非甲基化等位基因的特异引物,进行巢式PCR扩增,后经凝胶电泳检测目的片段.结果在3种类型的标本中都检测出了p16基因启动子的甲基化,比普通的甲基化特异性PCR法具有更高的灵敏度.结论巢式甲基化特异性PCR是一种灵敏度高、特异性强的甲基化检测方法,可广泛应用于不同类型标本基因启动子甲基化分析.
作者：姚群峰；康新江；郝巧玲；唐朝晖；周宜开 刊期： 2004年第01期
目的探讨β-连环素(β-cat)、上皮钙粘附素(E-cd)和Wnt-1蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)的表达及其与临床病理特征的关系.方法应用免疫组织化学(SP法)检测63例NSCLC肿瘤组织中β-cat、E-cd和Wnt-1蛋白的表达.结果低分化组中βcat、E-cd的异常表达率均高于高分化组(P＜0.01);在伴有淋巴结转移的原发灶Ecd异常表达率高于无转移的原发灶(P＜0.05);E-cd膜表达下降和正常的两组病例中,前者β-cat的异常表达率高于后者(P＜0.01);细支气管肺泡癌中Wnt-1的表达率高于鳞状细胞癌和腺癌(P＜0.01),高分化组中Wnt-1的表达高于低分化组(P＜0.05).结论βcat、E-cd和Wnt-1在NSCLC的发生、分型、分化程度、浸润和转移中起重要作用,β-cat和E-cd的协同作用可能影响着NSCLC的发生、发展.
作者：李钫；吴翠环；吴人亮；刘丽芳；龚战 刊期： 2004年第01期
目的研究错配修复基因hMLH1和hMSH2在不同肾组织中的表达水平及其对肾癌预后的预测.方法 采用免疫组织化学方法检测71例肾癌组织及其癌周正常组织,31例肾良性病变组织石蜡标本中hMLH1、hMSH2的表达水平,同时收集所有标本的详细病理学资料,将蛋白表达水平与病理结果进行对比.结果hMLH1和hMSH2的表达水平在肾良性病变中均明显高于癌组织和癌周正常组织,在高分化肾癌中均明显高于低分化肾癌,1年内无复发组显著高于1年内复发组;hMSH2在无转移组中的表达显著高于有转移组,而hMLH1在有无转移组的表达差异无显著性意义.结论 hMLH1、hMSH2两种修复蛋白在肾癌和肾良性病变组织中的表达水平有明显差异,且与肿瘤分化程度和肿瘤复发密切相关;hMSH2与肾癌转移有关,hMLH1与转移的关系不明显.hMSH2和hMLH1蛋白表达水平对肾癌预后有一定的预测作用.
作者：徐伟；刘成倍；王祥林；庞桂建；毕新生 刊期： 2004年第01期
目的探讨抗神经元抗体抗-Hu、抗-Yo、抗-Ri抗体的检测与副肿瘤综合征早期诊断的关系.方法采用蛋白免疫印迹分析(Western Blot)法对12例确诊为副肿瘤综合症(PNS)的患者血清及32例非PNS血清进行检测.结果 12例确诊患者血清中检测到一项或多项抗体阳性;PNS患者血清中抗-Hu、抗-Yo、抗-Ri抗体的阳性率高于非PNS对照组,差异有极显著性意义(P＜0.01);正常对照组血清抗-Hu,抗-Yo,抗-Ri抗体全部为阴性.结论抗神经元抗体抗-Hu、抗-Yo、抗-Ri抗体可作为PNS早期诊断及确诊的指标.
作者：谢俊丽；崔天盆；王小梅；王涛 刊期： 2004年第01期
目的评价羟基喜树碱对人肝癌BEL-7402细胞的细胞毒性.方法将羟基喜树碱以不同终浓度作用于人肝癌BEL-7402细胞.用MTT比色法观察其细胞毒性,荧光显微镜、透射电镜检测凋亡细胞的形态改变并记数凋亡指数,流式细胞仪定量分析细胞凋亡率.结果羟基喜树碱以剂量依赖的方式抑制BEL-7402细胞的生长;荧光显微镜和透射电镜观察到细胞皱缩、核质浓缩、核碎裂、细胞起泡以及凋亡小体形成等凋亡特征性的形态学改变;流式细胞仪直方图上可见亚二倍体峰;以浓度为12.5、25、50、100、200μg/ml的羟基喜树碱处理48 h后,细胞凋亡率分别为(14.68±2.17)%、(21.24±3.76)%、(31 54±4.58)%、(40.21±5.26)%和(48.35±6.70)%,与对照组(2.09±0.42)%比较差异均有极显著性意义(P＜0.01).结论羟基喜树碱既能抑制人肝癌BEL-7402细胞增殖,又能诱导其凋亡,显示出较强的细胞毒性.
作者：李军尧；唐忠志 刊期： 2004年第01期
目的探讨体重指数(BMI)正常的多囊卵巢综合征(PCOS)与胰岛素抵抗(IR)之间的关系.方法 对53例PCOS患者按BMI分为正常体重PCOS组(PCOS Ⅰ组,BMI＜24 kg/m2)31例与超重/肥胖PCOS组(P-COSⅡ组,BMI≥24 kg/m2)22例,同时选取BMI正常的非PCOS妇女30例为对照组,采集静脉血检测空腹血清胰岛素(FINS)和空腹血糖(FPG),稳态模式评估法(HOMA)的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)评价胰岛素抵抗程度.结果①PCOS Ⅰ组FINS、黄体生成素(LH)、睾酮(T)水平及HOMA-IR值高于对照组,差异有极显著性意义(P＜0.01);②PCOSⅡ组FINS水平和HOMA-IR值高于PCOS Ⅰ组,差异有极显著性意义(P＜0.01);③LH水平和BMI与HOMA-IR值显著相关,但前两者与HOMA-IR不存在交互影响(均P＞0.05);IR在PCOS患者中的暴露率显著高于对照组.结论 BMI正常的PCOS患者存在IR;肥胖可加重PCOS的高胰岛素血症和IR;IR为PCOS发病的独立重要危险因素.
作者：李旻；邱红玉；孙永玉；李红发 刊期： 2004年第01期
目的克隆和表达HLA Ⅰ类分子轻链(β2m)基因,为人工制备HLA Ⅰ类分子提供基础.方法利用逆转录PCR技术从Jeg-3细胞株中克隆β2m基因,与质粒pET22b(+)重组,构建原核表达载体pET22b(+)-β2m,转化宿主菌E coli BL21(DE3),诱导β2m基因高效表达,并采用双抗体夹心ELISA法对表达产物进行抗原性和功能鉴定.结果酶切和测序证实β2m基因克隆和载体构建成功,目的蛋白在宿主菌中高效表达于包涵体中;通过包涵体的分离和纯化获得初步纯化的β2m,所制备的β2m能够与特异性抗体结合,并能与HLA Ⅰ类分子重链形成具有天然构象的HLA Ⅰ类分子.结论人β2m基因能够在原核宿主中高效表达,表达产物具有形成HLA Ⅰ类分子的功能.
作者：陈浩；翁秀芳；吴雄文；梁智辉；韩军艳；黄亚非；龚非力 刊期： 2004年第01期
目的观察采用不同方式植入羟基磷灰石(HA)义眼座的临床效果.方法对27例患者根据眼部的不同条件,分别以全镂空巩膜壳内植入式、半巩膜壳内植入式及肌锥内植入式等手术方法植入义眼座,并对其效果进行分析比较.结果 3种术式义眼座活动度有明显不同,全镂空巩膜壳内植入式活动度好且并发症少.结论义眼座植入全镂空巩膜壳内能获得理想的手术效果.
作者：张虹 刊期： 2004年第01期
目的探讨影响辅助生殖技术(ART)手术成功率的临床因素.方法回顾分析1994年到2002年2014个ART手术中,患者的年龄、病因、手术方式和获卵数对辅助生殖技术成功率的影响.结果①女性年龄是影响试管婴儿妊娠率的独立因素,随着年龄的增长,不仅获卵数和可移植的胚胎数下降,而且胚胎质量降低,导致妊娠率降低和流产率升高;②男性因素不孕和附睾或睾丸穿刺取精行卵母细胞内单精子注射手术的妊娠率较高,而原因不明不孕症的妊娠率较低,但都可能与年龄的影响有关;③获卵数超过30个,虽然患者年轻,妊娠率反而下降,其原因不明.结论女性年龄是影响ART手术成功率的重要因素,在比较分析其它因素时都必须首先排除年龄的影响.
作者：朱桂金；靳镭；章汉旺；刘群；李舟；魏玉兰 刊期： 2004年第01期
目的了解2型糖尿病患者血浆脂联素水平与体重指数(BMI)、血浆胰岛素水平、游离脂肪酸(FFA)及血脂的相关性.方法根据BMI水平将51名2型糖尿病患者分为肥胖2型糖尿病组(BMI≥25kg/m2)、正常体重2型糖尿病组,将28名正常体重非糖尿病者设为对照组.以ELISA法测定脂联素和FFA,化学发光法测定空腹胰岛素(FINS),同时测定空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2HPG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),计算低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).结果肥胖2型糖尿病组脂联素水平显著低于非肥胖2型糖尿病组和对照组(P＜0.05),后两组脂联素水平无差异.单因素相关分析显示脂联素与BMI及TG负相关,相关系数分别为-0.3459(P＜0.01)和-0.3603(P＜0.01),与FFA等无相关性.包括年龄、BMI、HDL-C、LDL-C、TG、TC、FPG、FINS、FFA和HOMA-IR的多因素回归分析显示,BMI和TG对脂联素的影响相当.结论不同BMI个体的脂联素水平具有差异,在正常BMI范围内的2型糖尿病患者与非糖尿病者血浆脂联素水平差异无显著性.胰岛素抵抗程度对脂联素无明显影响.TG和BMI是一组很好的评估脂联素水平和作用的指标.
作者：杨雁；张木勋；Katherine Cianflone；余海英；张建华；王宏伟；卢慧玲 刊期： 2004年第01期
华中科技大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：华中科技大学
