李启扬;高风华;张世清;何家昶;杨卫平;汪天平;张功华
目的 分析2013年安徽省血吸虫病疫情和近年来变化趋势,为血吸虫病防治提供依据. 方法 收集安徽省2013年“寄生虫病防治信息管理系统”中血吸虫病防治统计数据和2004年以来的血防年报表数据,分析血吸虫病流行状况和变化趋势. 结果 截至2013年底,全省推算血吸虫病人19 81 6例,无急性血吸虫病病例报告,尚存晚期血吸虫病患者6 199例;现有钉螺面积27 396 hm2,其中新发现钉螺面积34.5 hm2,复现钉螺面积8.6 hm2;流行区现有存栏耕牛数41 949头,耕牛血吸虫感染率为0.31%;全省共有9个县(市、区)、76个乡(镇)、191个村(居委会)新达到传播控制标准,2个乡(镇)、14个村(居委会)新达到传播阻断标准.2008~2013年全省人群血吸虫感染率、耕牛血吸虫感染率、感染性钉螺面积、急性血吸虫病发病率均呈现下降趋势,钉螺面积在2.73亿m2~3.10亿m2间波动. 结论 全省血吸虫病疫情得到有效控制,但钉螺的分布状况仍不容乐观.为实现2015年前全省达到传播控制血吸虫病的目标,仍需加强实施以传染源控制为主的综合防治力度.
作者:李启扬;高风华;张世清;何家昶;杨卫平;汪天平;张功华 刊期: 2014年第06期
目的 分析3起霍乱疫情病原O139霍乱弧菌分子分型特征和遗传相关性,探讨O139霍乱疫情流行特征.方法 对2012年湖北省3起霍乱疫情分离鉴定的35株O139霍乱弧菌菌株用水煮法提取DNA,利用聚合酶链反应检测霍乱肠毒素CT基因;取新鲜培养的菌株,制备约4.3个麦氏单位的细菌悬浮液,经裂解、洗涤及限制性内切酶NotI和SfiI酶切后进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型,用凝胶成像仪获取电泳图像,分析DNA片段并用BioNumeries V4.6软件UPGMA方法(复选Dice相关系数)进行聚类分析. 结果 35株O139霍乱弧菌ctxA基因PCR扩增产物约为308 bp,分离自聚餐食用的凉菜、病人、带菌者及厕所标本(对应病人家)O139霍乱弧菌均为产毒株,经NotI酶切分为9种PFGE带型,SfiI酶切分为6种PFGE带型;A市2株病人分离菌和4株带菌者分离菌PFGE带型为KZGN11O139.CN0077+ KZGS12O139.CN0054,B市1株病人分离菌和1株厕所分离菌PFGE带型为KZGN11O139.CN0302+KZGS12O139.CN0058,C市和D市分离菌株优势型为KZGN11O139.CN0276+ KZGS12O139.CN0007,包括3株食品分离菌、2株厕所分离菌及16株病人和带菌者分离菌,另有6株PFGE带型呈现多样性. 结论 2012年湖北省霍乱疫情特点为散发以及聚餐导致的局限暴发,3起疫情的分离菌株带型各不相同,呈现多样性,其中2起为单一菌型感染,1起为混合菌型感染,传染来源复杂且不明确,提示应加强霍乱的病原学监测.
作者:杨红梅;张婷;江永忠;吕静;程均福;王鸣;李国明 刊期: 2014年第06期
目的 研究25种采自滇西地区药用植物的抗疟活性,为植物来源的新型抗疟药的研发天然产物奠定基础.方法 依次用75%乙醇和水对25种药用植物进行回流提取,提取物经冷冻干燥后,采用β-羟高铁血红素形成抑制试验进行筛选,以IC50值评价其活性. 结果 在供试的25种药用植物中,苦参、滇白珠、马尾黄连等12种植物粗提物具有不同程度的β-羟高铁血红素形成抑制活性,其中苦参地上部分水提物和滇白珠提取物活性较好,IC50值分别为(1344.2±46.9)μg/ml和大于1 388.9 μg/ml.具有抗疟活性的植物种类涉及10个科、12个属. 结论 苦参、滇白珠、马尾黄连等12种植物具有一定的抗疟活性,表明抗疟活性物质可能存在于多种植物中.
作者:肖朝江;徐伟;刘子琦;彭俊霖;张小东;姜北 刊期: 2014年第06期
目的 通过分析感染性心内膜炎链球菌的耐药基因,以便有效控制链球菌耐药性的进一步发展,从而为感染性心内膜炎的治疗提供依据. 方法 从感染性心内膜炎患者血培养标本中分离链球菌,提取DNA,采用PCR方法检测耐药基因,并作测序分析. 结果 PCR检测链球菌9种耐药基因,其中gyrA、parC、tetM基因扩增均阳性,且同源性较高.所有菌株的tetM基因同源性均为100%.有3株发生突变,突变位点分别为81位、87位和79位,且突变株均对氟喹诺酮类抗菌药物耐药.链球菌耐药基因编码氨基酸序列比对图显示,gyrA第81位由丝氨酸(Ser)突变为精氨酸(Arg),parC第87位由精氨酸(Arg)变异为亮氨酸(Leu),parC第79位由丝氨酸(Ser)突变为苯丙氨酸(Phe),因而可能导致耐药性的产生. 结论 分离自感染性心内膜炎患者的链球菌含有gyrA、parC、tetM基因,这3种基因可能与链球菌的耐药性有关.
作者:雷力成;杨诺;王佐岩;杨水祥 刊期: 2014年第06期
目的 比较咖啡酸玉米琼脂培养基(caffeic acid cornmeal agar medium,CACA)和黑米琼脂培养基(black rice agar medium)对鸽粪中新型隐球菌的分离效果. 方法 用无菌竹签从鸽舍随机采取鸽粪标本,取0.6g与10 ml无菌生理盐水制成悬液,然后按每个平板100μl分别接种咖啡酸玉米琼脂培养基和黑米琼脂培养基,肉眼观察菌落形态、颜色,光学显微镜下观察菌体形态,同时用特异性引物CN4和CN5扩增新型隐球菌URA基因,分别统计两种培养基中出现阳性菌株的平板数目. 结果 黑米琼脂培养基中新型隐球菌菌落呈棕黄色,外观湿润,状似胶汁.共分离获得23株新型隐球菌,检出率32.86%.CACA中新型隐球菌菌落较黑米琼脂培养基上的菌落小,褐色,干燥.共分离出11株新型隐球菌,检出率为15.71%.黑米琼脂培养基的检出率与CACA比较差异有统计学意义(P<0.05),且丝状真菌覆盖性生长的平板数目少于CACA,污染程度低于CACA;通过墨汁染色,在光学显微镜下观察新型隐球菌菌体呈圆形或卵圆形,外有宽厚荚膜,PCR扩增得到了目的条带产物. 结论 黑米琼脂培养基作为新型隐球菌的选择性培养基其分离培养效果(检出效果和检出率)优于CACA.
作者:陶星辰;尚秋菊;罗宗龙;杨静;代陆娇;苏鸿雁 刊期: 2014年第06期
目的 评估胶体染料试纸条法(DDIA)检测日本血吸虫感染的诊断效能. 方法 在万方数据、维普、中国知网、Web of Science、PubMed和Embase等数据库中检索有关DDIA诊断日本血吸虫感染的文献,采用RevMan和Metadisc软件进行meta分析,评估DDIA对日本血吸虫感染的诊断效能. 结果 共有16篇文献纳入分析,文献发表偏倚均较小,文献质量较高.16篇文献报道的DDIA检测日本血吸虫感染敏感度为0.448~1.000,特异度为0.322~0.987,合并敏感性89.2%00,合并特异性为62.7%.DDIA试验SROC曲线下面积为0.8992,Q*值为0.8304,DOR为20.49.结论 DDIA检测日本血吸虫感染的敏感性高、特异性强,可推广应用.
作者:钱熠礼;汪伟;洪青标 刊期: 2014年第06期
目的 观察肺炎支原体(Mycoplasma pneunoniae,Mp)感染RAW264.7细胞早期NLRP3炎性体及前炎性细胞因子的表达. 方法 将RAW264.7细胞随机分为5组,正常组用常规方法培养,不感染Mp;4个实验组RAW264.7细胞均用Mp感染4h,感染复数(细胞∶Mp)分别为1∶20、1∶40、1∶80、1∶100,采用FQ-PCR法检测细胞NL-RP3、ASC、caspase-1 mRNA表达和IL-1β、IL-18水平. 结果 Mp感染复数1∶20、1∶40、1∶80、1∶100组NL-RP3、ASC、caspase-1 mRNA表达量分别为2.i0±0.62、2.14±0.66、2.66±0.69、3.29±0.64和3.91±0.83、4.21±0.95、4.25±0.86、4.30±0.99和1.65±0.48、1.65±0.36、1.94±0.51、2.00±0.57,与正常对照组0.98±0.08、1.00±0.08、0.99±0.09比较,差异均有统计学意义(P<0.01);感染复数1∶100组IL-1β为200.00士9.25 pg/ml,与对照组159.92±5.89 pg/ml比较差异有统计学意义(P<0.01). 结论 Mp感染可诱导RAW264.7细胞NLRP3炎性体活化.NLRP3炎性体可能参与了Mp的早期感染.
作者:张涵;马晶;张云凌;张树明;许庆瑞;王伟明 刊期: 2014年第06期
为提高目前我国医学微生物学本科生的教学质量,结合本专业实验教学的实际情况,对其中存在的问题以及可能的解决方案进行初步探讨,文章分别从教师学生的比例、实验教学模式和实验室生物安全多个方面着手,分析实验教学的现状,并提出制作示教录像片、应用虚拟仿真实验教学模式、增加综合性实验与融合性实验的比重等可行性方案.
作者:于晗;贾继辉;周亚滨;齐眉 刊期: 2014年第06期
目的 了解中缅边境缅甸拉咱市恶性疟药物抗性现状,为中国第六轮全球基金疟疾项目制定防治策略提供依据. 方法 在缅甸拉咱市城区建立研究站,镜检发热病人和/或疑似疟疾病例,筛查疟疾患者.选择城区及郊区4村的单纯恶性疟现症患者,用WH推荐的体外微量试验测定恶性疟原虫对6种抗疟药的敏感性. 结果 体外微量测定43例,成功27例,测得恶性疟原虫对氯喹、哌喹、咯萘啶、青蒿琥酯、双氢青蒿素和双氢青蒿素/哌喹的抗性率分别为100%、0、25.9%、22.2%、7.4%和0,半数抑制浓度(IC50)分别为298.0、49.4、22.3、24.3、11.8和5.6/44.8 nmol/L.结论 缅甸拉咱市流行株恶性疟原虫对氯喹100%抗性,对咯萘啶、青蒿琥酯和双氢青蒿素具有一定程度抗性,对氯喹、咯萘啶和青蒿琥酯抗性呈逐渐增强趋势,对哌喹和双氢青蒿素/哌喹敏感.
作者:孙晓东;王剑;李先亮;杨捷;邓艳;Lasi Ja-hkawn 刊期: 2014年第06期
目的 研究结核分枝杆菌Rv1656重组蛋白在结核病辅助诊断中的应用价值. 方法 以痰涂片、痰培养及3个商品化的结核杆菌抗体试剂盒为对照,应用化学发光酶免疫分析法检测42例结核病患者和54例非结核肺部疾病患者尿液中抗Rv1656抗体水平;绘制抗Rv1656抗体检测工作特征曲线(ROC曲线),确定其诊断结核病的临界值,并评价其诊断效能. 结果 结核病组患者尿液抗Rv1656抗体为(39517.2±11802.7 pg/ml),非结核呼吸病组为(11416.3±1145.4 pg/ml),差异有统计学意义(t=3.002,P<0.01);痰菌阴性结核病患者尿液中抗Rv1656抗体为(47011.4±1529.9 pg/ml),痰菌阳性结核患者为(15535.7±1629.7 pg/ml),差异有统计学意义(t=2.035,P<0.05).尿Rv1656抗体诊断结核的灵敏度为42.8%,上海奥普血清结核抗体试剂盒为71.4%,差异有统计学意义(x2=63.87,P<0.01).尿Rv1656抗体诊断结核的特异性为83.3%,上海奥普血清结核抗体试剂盒为38.9%,差异有统计学意义(x2=76.15,P<0.01). 结论 结核分枝杆菌Rv1656重组蛋白具有抗原特异性可作为尿液结核抗体检测的组合抗原之一.
作者:冯金栋;阳幼荣;赵卫国;张俊仙;梁艳;吴雪琼 刊期: 2014年第06期
目的 构建新城疫病毒JL02/2000株P和NP基因真核表达质粒,并在BHK-21细胞中表达,为该病毒的反向遗传操作系统的建立奠定了基础.方法 根据新城疫病毒(JL02/2000毒株)的全基因组中的NP、P基因分别设计引物,应用RT-PCR方法扩增NP基因和P基因,将扩增的NP基因和P基因片段连接到pMD18-T载体上,限制性内切酶EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ酶切鉴定确认后回收目的条带,分别插入到真核表达载体pCI上,经测序确认pCI-NP、pCI-P辅助质粒的构建.将pCI-NP、pCI-P转染BHK-21细胞,两次换液,72 h后回收细胞,经RT-PCR检测NP和P基因片段. 结果 构建的辅助质粒pCI-NP和pCI-P经双酶切和测序鉴定到目的片段.pCI-NP、pCI-P转染后,RT-PCR检测到NP和P基因片段. 结论 新城疫病毒pCI-NP、pCI-P辅助质粒构建成功,pCI-NP、pCI-P可在BHK-21细胞中表达,为该病毒的反向遗传操作系统的建立奠定了基础.
作者:陈兴;阎富龙;徐一鸣;赵权;肖朋朋;郭海宁;靖杰;辛舒;鲁会军 刊期: 2014年第06期
双组分系统(two component system,TCS)是结核分枝杆菌(Mycobacterium Tuberculosis,MTB)感应环境因素刺激,并作出相应反应,以适应环境变化的一种跨膜信号转导系统.MprAB作为MTB目前发现的11个完整的TCS之一,与MTB的持留性及调节应激反应等方面密切相关,本文就MTB MprAB TCS的研究进展进行了综述.
作者:王钊;张万江 刊期: 2014年第06期
目的 重离子对肿瘤放疗比常规放疗更具优势,因为重离子放疗具有极佳的生物效应和剂量一致性.多房棘球蚴病具有肿瘤特性,本研究主要目的是用重离子放疗作为多房棘球蚴病的一种非手术治疗方法. 方法 通过LD50来评价原头蚴的死亡情况,应用光镜和投射电镜研究多房棘球蚴经X射线和碳离子电离辐射照射后形态结构变化.结果 电离辐射使多房棘球蚴细胞质减少,生发层细胞深入到角质层内的绒毛消失.细胞器混乱并聚集,线粒体、高尔基复合体等细胞器大量消失,生发层细胞内出现大液泡.与X线相比,碳离子辐射对多房棘球蚴的抑制作用更为明显.结论 多房棘球蚴经电离辐射后细胞结构和超微结构发生巨大变化,提示电离辐射可抑制多房棘球蚴生长.碳离子电离辐射对多房棘球蚴的抑制作用比X线辐射照射更为明显.
作者:赵玉敏;周鑫;周榕;张红 刊期: 2014年第06期
目的 通过对汕头市病毒性肝炎的病原学和 血清学监测分析,了解该地区病毒性肝炎发病情况,为该病的防控提供科学依据. 方法 4 726例肝炎患者血液标本在门诊或住院病人中采集,送至医院检验科实验室,采用ELISA法检测HAV-IgM、HBsAg、HBcAb-IgM、HBcAb、HBeAg、HBeAb、HCV抗体和HEV-IgM. 结果 共检出肝炎病毒抗体阳性4 635例,阳性率为98.07%.其中HAV-IgM阳性86例,HBsAg阳性4 037例,HBcAb-IgM阳性2 220例,HB-cAb阳性3 514例,HBeAg阳性1 122例,HBeAb阳性2 253例,HCV抗体阳性165例,HEV-IgM阳性150例,HAV、HBV、HCV、HEV感染率分别为1.82%、89.59%、3.49%和3.17%.乙肝患者中以25~45岁为主,占62.09%. 结论 汕头地区病毒性肝炎发生率较高,以乙肝感染为主,患者主要为青壮年,需要采取进一步干预措施.
作者:刘燕辉;陈宏辉;吴图扬;张普春 刊期: 2014年第06期
目的 预测结核分枝杆菌Rv3407的抗原表位. 方法 利用DNAStar软件包中Protean软件对Rv3407氨基酸序列进行分析,采用包括二级结构、亲水性、抗原性、表面可能性、柔韧性等多参数预测其二级结构及T细胞和B细胞抗原表位. 结果 Rv3407蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,潜在的B细胞抗原表位较少,可能位于11-26、28-43、50-61、66-74、76-99位氨基酸残基或其附近,这些区域基本上含有β转角结构,亲水性、表面可能性和柔韧性指数都较高.该蛋白潜在的T细胞抗原表位较多,可能位于2-12、22-26、34-37、40-44、56-60、75-79、86-93位氨基酸残基或其附近. 结论 结核分枝杆菌Rv3407是一个T细胞抗原表位占优势的蛋白抗原,B细胞抗原表位略少,预测结果为该蛋白抗原表位的进一步研究与应用奠定了基础.
作者:赵亚静;白雪娟;梁艳;张俊仙;阳幼荣;赵卫国;吴雪琼 刊期: 2014年第06期
目的 克隆牛乳源致病性金黄葡萄球菌nEBPS基因,经T程菌表达得到其编码抗原纯化蛋白,制备多克隆抗体,采用间接荧光抗体法鉴定nEBPS蛋白. 方法 设计1对克隆引物,PCR扩增牛乳腺炎金黄葡萄球菌内蒙古分离株EBPS基因序列,构建重组表达质粒,转化工程菌,表达膜表面亚单位蛋白nEBPS,纯化后免疫家兔制备抗nEBPS蛋白抗体,采用间接荧光抗体法对乳源致病性金黄葡萄球菌原生质体膜表面蛋白nEBPS进行亚细胞定位. 结果 在含25 μg/ml Amp、0.015 g/ml NaCl的LB液体培养基中成功培养制备了金黄葡萄球菌原生质体.对原生质体细胞(表面)和利用0.02 g/ml NaCl高渗溶液裂解原生质体细胞离心获得的细胞膜残片进行间接荧光抗体试验,均出现特异荧光.结论 间接荧光抗体试验鉴定nEBPS蛋白为膜表面蛋白,可作为乳及乳制品金黄葡萄球菌检测和制备免疫制剂的靶抗原.
作者:吴金花;布日额;锡林高娃;乌日汗;薛晓阳;刘洋 刊期: 2014年第06期
目的 分析2012~2013年河南省发热伴血小板减少综合征(SFTS)流行特征及病原学特点. 方法 应用描述流行病学方法分析河南省2012~2013年SFTS病例特征,利用PHGIS1.7.0软件绘制SFTS地区分布图,采用时间分布曲线结合圆形分布法分析SFTS季节性分布特征.收集病例急性期血清标本,应用实时荧光定量RT-PCR检测发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)核酸. 结果 2012~2013年河南省共报告SFTS病例1 225例,确诊病例年均发病率为0.2948/10万.死亡18例,病死率为1.47%.信阳市报告病例1 210例,占98.78%.病例主要集中在4~10月,5月份出现第1个发病高峰,9月份出现第2个发病高峰;2年间SFTS总的流行高峰期为4月23日~8月18日,SFTS发病在时间上存在集中趋势(Z=nr2=441.00,P<0.01).男性发病率0.4869/10万,女性发病率为0.8292/10万,差异有统计学意义(x2 =84.35,P<0.01).病例年龄1~93岁,平均59岁,其中40~79岁年龄组占病例总数的90.29%.农民1 172例,占病例总数的95.67%.本省医疗机构共报告SFTS 1 207例,占病例总数的98.53%;三级医院、二级医院和一级医院分别占报告机构总数的60.87%、30.43%和8.70%.2012和2013年SFTSV检测阳性率为57.14 %和50.87%,差异无统计学意义(x2=3.21,P>0.05). 结论 河南省SFTS发病具有明显的地域性和季节性,发病范围有扩大趋势.高龄女性农民为高危人群,SFTSV仍为主要致病病原.
作者:尤爱国;杨建华;杜燕华;王海峰;唐晓燕;陈豪敏;许汴利 刊期: 2014年第06期
目的 分析2010~2012年深圳市龙岗区致感染性腹泻沙门菌的流行特征及脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型,为沙门菌病的防控提供参考依据. 方法 对147株沙门菌进行生化鉴定和血清分型,利用PFGE进行分子分型,采集相关的流行病学信息并分析. 结果 龙岗区2010~2012年沙门菌的流行具有明显季节性,第三季度为高峰期(46.3%,96/147);患者主要为婴幼儿(27.9%,41/147)和青壮年(23.1%,37/147),男女比例为1.37∶1(85/62).147株沙门菌分属于33种血清型,肠炎沙门菌(35.4%,52/147)和鼠伤寒沙门菌(28.6%,42/147)为优势血清型,Xba Ⅰ酶切将其分为105种带型,肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌分别有17和34种PFGE型别,优势分子型别分别是XE5、XE1和XP8.AvrⅡ酶切显示本地区可能有数起小型暴发. 结论 深圳市龙岗区2010~2012年沙门菌PFGE型别较多,菌株来源复杂,主要呈散发状态,偶有局部小型暴发,夏秋季要做好学龄前儿童和青壮年沙门 菌病的防控工作.
作者:林文娟;刘渠;白江涛;王德全;陈应坚;金玉娟;甘莉萍;杨慧 刊期: 2014年第06期
目的 研究邯郸市2012年流感监测中分离的Yamagata系乙型流感毒株HA1的抗原性和基因特性,阐明HA1基因的变异与流感流行的关系. 方法 用MDCK细胞分离培养流感病毒,提取病毒核酸,采用RT-PCR方法特异性扩增病毒HA1基因,进行核苷酸序列测定,用DNAStar中Megalign软件进行分析.结果 2012年分离的Yamagata系乙型流感病毒与2008~2009年代表株B/Florida/4/2006相比亲缘关系较远,核苷酸同源性为96.2%~96.8%,氨基酸同源性为96.5~97.4%,HA1区9个位点氨基酸发生替换,其中6个参与抗原表位构成;与WHO推荐的2012~2013年疫苗株B/Wisconsin/01/2010相比亲缘关系近,核苷酸同源性为98.8%00~99.4%00,氨基酸同源性为97.4%~98.5%,有5个位点发生氨基酸替换,其中3个参与抗原表位的构成;与国家流感中心提供的标准抗血清的血凝抑制滴度≥1∶640. 结论 邯郸市2012年分离的Yamagata系乙型流感病毒血凝素蛋白HA1与B/Florida/4/2006相比已形成新的变种,与B/Wisconsin/01/2010相比也发生了新的变异,但尚不能确定是否形成Yamagata系有代表性的新变种.
作者:李燕霞;郭瑞玲;黄亮;闫永飞;邓健;郭娜娜;张治芳;马燕霞;李晓伟 刊期: 2014年第06期
目的 探讨乙型肝炎病毒X蛋白调控sFRP 1、sFRP5启动子区的甲基化修饰分子机制,以期指导乙型肝炎病毒感染所致疾病的临床治疗. 方法 选取标本株HBV并对其进行培养,提取DNA,纯化后分别进行甲基化特异性PCR和硫化测序PCR,对目的基因进行测序. 结果 稳定表达HBV的HepG2.2.15细胞株sFRP1、sFRP5基因的启动子区CpG岛的甲基化程度比HepG2细胞株高,经DAC处理的稳定表达HBV的HepG2.2.15细胞株的sFRP1、sFRP5启动子区CpG岛甲基化程度有部分回落且呈药物剂量依赖.乙型肝炎病毒X蛋白可对sFRP1、sFRP5基因的启动子区的甲基化起到诱导作用;DAC可逆转HBV X蛋白所诱导的sFRP1启动子区甲基化程度,且呈剂量依赖;进行sFRP1基因扩增时,HBx组的甲基化程度比GFP组高. 结论 乙型肝炎病毒x蛋白通过诱导相关的甲基化转移酶以及甲基化CpG粘附蛋白而富集于sFRP1基因和sFRP5基因的启动子区,从而促进基因CpG岛的甲基化,并且还可以诱导组蛋白的脱乙酰化,终导致sFRP1基因和sFRP5基因的表达下调或沉默.
作者:卫波;陈斌;成扬 刊期: 2014年第06期