学术投稿

RNA干扰对小鼠脾淋巴细胞TNF-α表达的影响

宋晓宇;郑宁宁;孙杰;张海鹏;赵昕

关键词:RNA干扰, 小片段双链RNA, 肿瘤坏死因子α, 脾淋巴细胞
摘要:目的:触发哺乳动物细胞内RNA干扰,研究肿瘤坏死因子(TNF-α)特异性小片断双链RNA对活化的小鼠淋巴细胞TNF-α表达的影响.方法:原代培养小鼠脾淋巴细胞并用脂多糖激活,确立细胞分泌TNF-α的峰值,将针对TNF-α靶序列的干扰片断经PCR扩增后转染入细胞,ELISA法检测TNF-α浓度,RT-PCR法检测TNF-α mRNA的表达.结果:终止刺激后48 h淋巴细胞分泌TNF-α达高峰,TNF-α特异RNA干扰组与阴性对照组比较TNF-α浓度降低近30%,TNF-α mRNA表达抑制率达54.5%.结论:TNF-α小片断双链RNA可特异性抑制哺乳动物淋巴细胞TNF-α的表达;RNA干扰具有严格的序列特异性,只特异的沉默靶基因而不影响其他基因的表达.
中国医科大学学报杂志相关文献
  • 慢性铝暴露对大鼠认知功能及海马MAPK活性的影响

    目的:探讨慢性铝暴露损害大鼠学习记忆的作用机制.方法:选择断乳后Wistar 大鼠,以含不同浓度氯化铝的水进行饲养.3 个月后,进行跳台行为学及有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK) 活性的测定.结果:染铝各组大鼠的血铝、脑铝浓度与对照组相比均升高,且有显著性差异(P<0.01);染铝各组潜伏期与对照组比较均缩短(P<0.01);染铝组的海马 MAPK活性与对照组比较显著降低(P<0.05).结论:不同浓度慢性铝暴露可引起大鼠脑铝和血铝的含量增高,使海马MAPK活性下降,导致大鼠认知功能降低.

    作者:邢伟;黄莹;王彪;许金华;赵岩;岳志军 刊期: 2007年第03期

  • 多支冠状动脉病变支架术的疗效及预后

    目的:研究多支冠状动脉病变患者支架术的疗效及预后.方法:通过电话或门诊共随访到256例完成经皮冠状动脉介入术(PCI)的冠心病病例.其中单支病变(甲组)104例,多支病变(乙组)152例,乙组又分完全重建组67例和不完全重建组85例,分别比较各组支架术后的长期结果.结果:甲、乙组平均随访时间及手术并发症均无统计学差异.与甲组比较,乙组心绞痛复发率明显增高(P<0.01),再住院率、心脏事件发生率增高,心功能改善率降低(均P<0.05);不完全重建组心脏事件增多(P<0.05),心绞痛复发率及再住院率明显增多、心功能改善率明显减少(均P<0.01).与完全重建组比较,不完全重建组心绞痛复发率及再住院率增高,心功能改善率减少(均P<0.05).结论:多支病变患者冠脉内支架术安全,但长期疗效和预后较单支病变差,而病变冠脉完全重建组长期疗效和预后与单支病变相似,显著优于不完全重建组.

    作者:黄汝刚;齐国先 刊期: 2007年第03期

  • 慢性乙醇摄入对大鼠单个肝窦内皮细胞结构的影响

    目的:观察慢性乙醇摄入对大鼠单个肝窦内皮细胞(LSEC)结构的影响.方法:采用乙醇直接灌胃的方法建立酒精性肝病大鼠动物模型,应用稍加改良的Pertoft梯度离心方法对不同阶段的LSEC进行分离纯化,用透射电镜观察不同时期LSEC形态和结构的改变.结果:乙醇灌胃4周末、8周末、12周末LSEC在形态、窗孔大小和数量上均出现不同程度的改变;停止乙醇灌胃12周末,大部分细胞比乙醇灌胃12周末时有明显的恢复.结论:乙醇的慢性刺激使细胞形态改变;停止刺激后,细胞的形态、窗孔大小和数量都有一定的恢复.

    作者:常冰;张健;王炳元;鞠晓华;刘畅;王颖;傅宝玉 刊期: 2007年第03期

  • 血清C反应蛋白水平预测危重症患者预后的临床研究

    危重症患者C反应蛋白(CRP)水平与预后相关.CRP水平与APACHE Ⅱ评分明显相关,预后不良组CRP值明显高于预后良好组.

    作者:吴健;李澎;陈卫民 刊期: 2007年第03期

  • 血链球菌血链素的分离纯化及其化学组成的测定

    目的:分离纯化血链球菌血链素,并对其组成成分进行检测.方法:通过羟基磷灰石(HA)柱层析、Sephadex G-150凝胶柱层析、中空纤维柱超滤脱盐、浓缩,分离并纯化血链素,SDS-PAGE检测其纯度及亚基分子量并检测其分子量,同时以紫外线吸收法及苯酚-硫酸法检测血链素蛋白及糖含量.结果:血链素分子量为180 kDa,亚基分子量为110 kDa和70 kDa,其中蛋白含量为87.51%,糖含量为12.49%.结论:纯化的血链素是一种由两个亚基组成的糖蛋白.

    作者:寇育荣;李雪莲;潘亚萍 刊期: 2007年第03期

  • 大鼠脑出血后脑组织bax蛋白表达及神经生长因子对其的影响

    目的:探讨bax蛋白在脑出血(ICH)后神经损伤过程中的作用以及神经生长因子(NGF)对脑出血损伤的保护机制.方法:采用脑内注射自体新鲜动脉血的方法制作大鼠ICH模型.利用免疫组化方法检测bax蛋白表达的变化.结果:ICH对照组、NGF干预组在ICH后6 h即有bax蛋白阳性表达,24 h达峰值,之后下降,7 d时仍高于生理盐水对照组.NGF干预组与ICH对照组相比较bax蛋白峰值出现的时间无变化,但各时点bax蛋白的表达均较ICH对照组显著减少(P<0.05).结论:ICH后血肿周围脑组织细胞凋亡增加,加重神经功能损伤.应用NGF可使血肿周围脑组织bax蛋白表达明显下降,起到减轻神经功能损伤,促进神经功能恢复,达到治疗脑出血的目的.

    作者:高岩;滕伟禹;葛宇松 刊期: 2007年第03期

  • 解偶联蛋白2在高糖致大鼠胰岛β细胞功能障碍中的作用

    目的:探讨高糖对体外培养的大鼠胰岛β细胞解偶联蛋白2(UCP-2)表达的影响及其可逆性.方法:体外分离Wistar大鼠胰岛细胞进行培养,根据培养液中葡萄糖浓度和培养时间分组:A组5.5 mmol/L葡萄糖培养3 d;B组11 mmol/L葡萄糖培养3 d;C组22 mmol/L葡萄糖培养3 d;D组5.5 mmol/L葡萄糖培养6 d;E组11 mmol/L葡萄糖培养3 d续5.5 mmol/L葡萄糖培养3 d;F组22 mmol/L葡萄糖培养3 d续5.5mmol/L葡萄糖培养3 d.采用RT-PCR方法检测胰岛β细胞的UCP-2基因表达情况.结果:B组UCP-2基因表达水平较A组明显增高(P<0.05);C组UCP-2基因表达水平较A组降低,但二者之间无统计学差异.D组与A组比较UCP-2基因表达水平没有明显变化.与B组相比,E组UCP-2基因表达则显著减少(P<0.05);与C组相比,F组的UCP-2基因表达水平略升高,但无统计学差异.结论:在一定葡萄糖浓度和暴露时间范围内,葡萄糖可诱导大鼠胰岛细胞UCP-2基因表达增加,高糖对UCP-2基因表达的诱导可以逆转.

    作者:任冬月;赵晓娟 刊期: 2007年第03期

  • 头孢替唑钠在葡萄糖氯化钠钾注射液中与莲必治配伍的稳定性考察

    采用高效液相色谱法,考察头孢替唑钠与莲必治在葡萄糖氯化钠钾注射液中配伍的稳定性.头孢替唑钠与莲必治的平均回收率分别为100.24%,99.18%;RSD分别为0.81%,0.93%.室温放置4 h内输液pH值及含量均无明显变化,颜色淡黄并逐渐加深.

    作者:姜清华;徐英宏;赵铁 刊期: 2007年第03期

  • 细胞外信号调节激酶在乳腺癌中的表达及意义

    目的:研究细胞外信号调节激酶(ERK)在乳腺癌中的表达及在乳腺癌发生发展中的作用.方法:采用Western blot技术和免疫组化方法,研究ERK1和ERK2蛋白在60例乳腺癌,10例乳腺良性肿瘤,10例正常乳腺组织中的表达.结果:ERK1 和ERK2在乳腺癌中有过度表达,与正常乳腺及乳腺良性肿瘤相比,其差异有显著性(P<0.01),乳腺癌Ⅲ~Ⅳ期表达高于Ⅱ期和Ⅰ期,差异有显著性(P<0.05);有腋窝淋巴结转移者表达高于无腋窝淋巴结转移者,差异有显著性(P<0.05).ERK1和ERK2在高、中、低分化乳腺癌中无显著差异,与乳腺癌病理类型无关.结论:ERK的过度表达在乳腺癌的发生发展及淋巴结转移中起重要作用.

    作者:赵杨;赵林;郭科军;陈波;温放 刊期: 2007年第03期

  • 肺癌中Pten/MMAC1/Tep1蛋白的表达及临床意义

    目的:探讨抑癌基因Pten/MMAC1/Tep1蛋白在不同病理分期(pTNM )的肺腺癌、鳞癌中表达及其临床意义.方法:应用S-P免疫组织化学方法检验87例肺腺癌、鳞癌中Pten/MMAC1/Tep1蛋白表达,与其临床病理分期pTNM的关系.结果:肺腺癌组织中的Pten/MMAC1/Tep1蛋白表达阳性率为61.9%,肺鳞癌中表达阳性率为40.0%.二者Pten/MMAC1/Tep1蛋白表达均与肺癌的临床病理分期pTNM、分化程度有关(P<0.01),而与肿瘤的大小无关.结论:检验Pten/MMAC1/Tep1蛋白在肺癌中的表达可能对肺腺癌、鳞癌的疗效评估和预后评价具有一定意义.

    作者:张文峰;愈磊;李玉;张林;陈东义 刊期: 2007年第03期

  • 高脂血症对兔肾脏功能的影响

    目的:通过建立兔高脂血症的动物模型,观察高血脂对兔肾脏功能的影响,并探讨致病机制.方法:选日本纯种雄性大耳白兔60只,随机分成3组,每组20只,分别为空白对照组、单纯高脂饮食组、调脂药辛伐他汀治疗组;比较实验前后血清胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)水平,24 h尿总蛋白定量以及肾脏α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)含量.结果:单纯高脂饮食组24 h尿总蛋白定量、血脂水平、肾脏组织α-SMA含量高于另外两组;辛伐他汀治疗组的相应检测指标高于空白对照组.结论:高脂血症是导致肾脏功能损伤的独立的危险因素,辛伐他汀类调脂药可以减轻高脂血症对肾脏的损伤.

    作者:刘大军;刘红霞;商惠萍;李德天 刊期: 2007年第03期

  • 人工敷料Epigard在烧伤及肉芽创面手术中的应用

    用人工敷料Epigard敷盖肉芽创面或切(削)痂创面,创面愈合快,病人痛苦少,疤痕少,功能恢复佳.

    作者:姜英令;侯晶星;张惠;薛宝升;唐明睿 刊期: 2007年第03期

  • 集中环磷酰胺冲击联合泼尼松在初治SLE患者中的疗效

    目的:观察集中环磷酰胺(CTX)冲击联合泼尼松在初治系统性红斑狼疮(SLE)患者中的疗效.方法:选取初诊且未经治疗的SLE48例.CTX每2周冲击1次.每次第1 d CTX 0.4 g,第2 d CT X0.6 g.泼尼松0.8 mg/kg体质量.对SLE患者进行SLE活动性指数(SLEDAI)评分.将总分数(SLEDAIT)分成临床评分(SLEDAIc)、实验室评分(SLEDAIL).分别于治疗前,治疗后4,8,12周进行SLEDAIT、SLEDAIc、SLEDAIL评分.于治疗前及治疗后12周测定尿蛋白、血清补体、血清抗双链DNA抗体(ds-DNA).结果:共有41例随访至12周.治疗后4周与治疗前比较,SLEDAIT、SLEDAIc及SLEDAIL均明显下降(P<0.01),在8周时SLEDAIc继续下降(P<0.05),而SLEDAIL下降不明显.12周时SLEDAIT变化不明显.12周时与治疗前比较,补体C3、C4及ds-DNA均显著下(P<0.01)降,尿蛋白下降不明显.结论:集中环磷酰胺冲击方案有效.在12周时CTX总量可达6~8g,能迅速缓解病情,而不增加CTX的不良反应,可减少泼尼松的用量.

    作者:张洪峰;肖卫国;侯平;王晓菲;李舒帆;蒋力;张晓莉;鲁静 刊期: 2007年第03期

  • 选择性绿激光前列腺汽化术的护理

    总结选择性绿激光治疗前列腺增生的护理经验,认为多媒体宣传教育在整个护理过程中起到了较大的作用,充分的术前准备、精心的护理是手术成功的保证.

    作者:王晓丽;刘星;冯秀芹;刘屹立 刊期: 2007年第03期

  • JNK蛋白在全脑缺血再灌注损伤中的表达

    目的:探讨大鼠全脑缺血再灌注氨基末端激酶或应激活化激酶(JNK)蛋白表达的变化.方法:构建大鼠全脑缺血再灌注模型,采用TUNEL法原位检测凋亡锥体细胞,免疫印迹检测不同实验组中JNK蛋白表达.结果:缺血再灌注各组神经元细胞的凋亡率明显高于假手术组(P<0.05).缺血再灌注组JNK蛋白表达积分光密度值与假手术组相比有显著差异(P<0.05).结论:在脑缺血及再灌注损伤中存在JNK途径的过度激活,进而导致神经元细胞的凋亡明显增加.

    作者:陈宏志;陈卫民 刊期: 2007年第03期

  • 三维CT血管造影在高血压病因筛查中的应用价值

    探讨多层面螺旋CT、三维CT、血管造影(3DCTA)在高血压病因筛查中的应用价值.3DCTA对于临床疑有血管病变的高血压患者血管狭窄的显示和高血压病因的筛查具有重要的临床价值.

    作者:屈达;戴旭;徐克 刊期: 2007年第03期

  • 用ABCD评分法预测173例TIA患者的卒中风险

    目的:探讨ABCD评分法在预测患者短暂性脑缺血发作(TIA)后卒中风险上的作用.方法:应用6分制ABCD评分法对173例TIA患者的临床资料进行分析.结果:TIA后7d内发生卒中的患者中,86.7%的患者评分≥5分,所有得6分的患者有80.0%于7 d内发生卒中,所有得5分的患者有32.1%于7d内发生卒中,得分≤4的患者只有1.4%于7 d内发生卒中.结论:ABCD评分法是一种简便易行的对TIA患者进行分层评价的办法.

    作者:孟祥亚;何志义;邓淑敏 刊期: 2007年第03期

  • 脊髓髓内肿瘤的显微外科治疗

    分析脊髓髓内肿瘤42例临床资料,总结归纳临床表现、手术方法、技巧及经验,提出早期诊断及肿瘤全切的必要性.

    作者:董欣明;刘云会;王成林;潘蔚然 刊期: 2007年第03期

  • 人骨髓间充质干细胞的培养及鉴定

    目的:探讨人骨髓间充质干细胞(hMSCs)体外分离培养及鉴定.方法:成人骨髓取自手术中非血液系统疾病、非肿瘤及乙肝表面抗原阴性患者摘取的肋骨,采用贴壁筛选法进行体外扩增;用免疫组织化学法对培养的细胞进行鉴定.结果:体外培养的原代hMSCs 9 d融合,免疫组织化学染色CD44表达阳性.结论:贴壁筛选法在体外很容易分离培养和扩增hMSCs,可作为获得hMSCs的一种有效手段.

    作者:于长江;洪晶 刊期: 2007年第03期

  • 谷氨酰胺对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织细胞间黏附分子1的影响

    目的:探讨谷氨酰胺(GLN)对内毒素致急性肺损伤大鼠肺组织细胞间黏附分子1基因(ICAM-1 mRNA)及ICAM-1蛋白表达的影响.方法:静脉注射脂多糖(LPS) 5 mg/kg复制大鼠急性肺损伤模型,雄性SD大鼠50只随机分为5组.对照组、脂多糖组、谷氨酰胺预先给药组、谷氨酰胺即时给药组、谷氨酰胺延迟给药组,分别于LPS注入前1 h,LPS注入即刻,LPS注入后1 h,均静脉注射谷氨酰胺0.75 g/kg.所有动物于注射LPS 4 h后颈动脉放血处死,逆转录聚合酶链反应检测肺组织ICAM-1 mRNA表达水平,免疫组化法检测肺组织ICAM-1蛋白表达,HE染色光镜下观察肺组织形态学变化.结果:同脂多糖组相比,谷氨酰胺预先给药和谷氨酰胺即时给药使内毒素性急性肺损伤肺组织ICAM-1 mRNA及ICAM-1蛋白表达减少,HE染色光镜下可见肺部炎症反应减轻.结论:谷氨酰胺早期给药对内毒素性急性肺损伤起保护效应,作用机制可能与抑制肺组织细胞间ICAM-1的过多生成有关.

    作者:白涛;吴新军;王俊科 刊期: 2007年第03期

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