学术投稿

AMY1基因编码α淀粉酶在体外培养大鼠颌下腺细胞中的表达

周青;隋承光;王玉新

关键词:颌下腺, 细胞培养, α-淀粉酶
摘要:目的:检测大鼠颌下腺(SMG)AMY1基因编码α淀粉酶(α-Amy)在体外培养颌下腺细胞中的表达,鉴定细胞来源和检测体外培养细胞的功能.方法:分别进行培养大鼠细胞RT-PCR检测淀粉酶的基因表达;免疫印迹法(Western blotting)检测淀粉酶蛋白质.结果:大鼠SMG组织和培养细胞检测在474 bp处显示有一相同的带.表明大鼠培养SMG细胞RT-PCR产物与大鼠SMG组织α-淀粉酶mRNA表达相同.免疫印迹结果显示大鼠SMG组织与培养细胞分别出现了一单独的α-淀粉酶免疫活性蛋白电泳带,其分子大小为50 kDa,两者免疫活性蛋白泳带一致.结论:大鼠SMG组织和培养细胞淀粉酶mRNA表达相同,大鼠培养SMG细胞与大鼠SMG组织具有同源性.体外培养SMG细胞通过AMY1基因编码α-淀粉酶表达.
中国医科大学学报杂志相关文献
  • 砷与紫外线联合作用对人黑色素瘤G361细胞系色素代谢的影响

    目的:探讨单纯紫外线(UV)暴露与砷(As)和紫外线联合暴露间在色素代谢方面有无差异.方法:采用体外细胞培养法将细胞分为9组(As:0,0.1,1 μmol/L;UV:5,10 mJ/cm2;As+UV:0.1μmol/L+5 mJ/cm2,1μmol/L+5 mJ/cm2,0.1μmol/L+10 mJ/cm2,1 μmol/L+10 mJ/cm2),UV照射后,培养72 h,测定黑色素水平、酪氨酸酶(Tyr)活力及TyrmRNA表达水平.结果:10 mJ/cm2UV组、0.1μ(mol/L+10 mJ/cm2组及1μmol/L+10 mJ/cm2组的黑色素水平分别显著高于5 mJ/cm2组、0.1μmol/L+5 mJ/cm2组、1μmol/L+5 mJ/cm2组及对照组;各组Tyr活力及mRNA表达水平与对照组相比无显著差异.结论:单纯UV作用对黑色素产生水平的影响与亚砷酸纳(NaAsO2)和UV联合作用对黑色素产生水平的影响无差异,砷对紫外线的促黑素化作用没有协同效应.

    作者:李昕;李冰;孙贵范 刊期: 2007年第06期

  • 大蒜素诱导人胃癌SGC-7901细胞M期阻滞及其机制研究

    目的:探讨大蒜素诱导人胃癌SGC-7901细胞M期阻滞作用及其机制.方法:以MTT比色法检测人胃癌细胞系SGC-7901细胞的增殖抑制率;采用免疫荧光染色、激光共聚焦显微镜检测等技术,比较药物处理前后M期细胞占总细胞数百分比的变化,观察细胞微管结构及细胞周期蛋白B1(cyclin B1)在胞内分布的变化,并做荧光定量分析cyclin B1在用药前后量的改变.结果:大蒜素抑制SGC-7901细胞的24 h IC50为7.2μg/ml,72 h IC50为20μg/ml;经大蒜素处理后,M期细胞占总细胞数的30.61%,明显高于对照组的4.69%(P<0.05).经大蒜素处理后细胞变小变圆,微管结构消失,胞质模糊;而对照组细胞形态正常,微管结构清晰完整.经大蒜素处理后,胞质中cyclin B1表达升高,并向核内聚集,cyclin B1荧光定量明显高于对照组(P<0.01).结论:大蒜素可以促进微管解聚,可以提高促成熟因子(MPF)的重要成份cyclin B1在细胞内的表达并促进其向核内转移,使细胞周期阻滞于M期.大蒜素可以作为一种新的作用于M期的抗肿瘤药物应用于临床.

    作者:陈铁军;哈敏文;孙丽萍;宫月华;柳云恩;袁媛 刊期: 2007年第06期

  • ACE、AT1受体及TGF-β1在肌营养不良中的表达

    目的:探讨肾素-血管紧张素系统(RAS)和转化生长因子β1(TGF-β1)在肌营养不良(MD)中的表达及与肌肉纤维化的关系.方法:应用Western印迹分析和三免疫荧光标记检测杜氏肌营养不良(DMD)、Becker型肌营养不良(BMD)和先天性肌营养不良(CMD)患者肌肉活检标本中血管紧张素转移酶(ACE)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1型(AT1)受体和TGF-β1的表达及共同定位.结果:Western印迹分析结果显示在MD的萎缩肌肉中ACE、AT1受体和TGF-β1的免疫反应明显增强;三免疫荧光标记显示DMD和CMD肌肉的肌内膜和肌束膜中大多数激活的成纤维细胞表达ACE和TGF-β1,ACE和TGF-β1在萎缩肌肉内也共同定位.结论:病变局部ACE、AT1受体和TGF-β1表达增加,表明肌肉组织中RAS在MD时被激活,可能与TGF-β1共同参与MD的发病,并在肌肉纤维化中起重要作用.

    作者:孙桂莲;江雅静;姜伟;杨志亮 刊期: 2007年第06期

  • 抑制消减杂交技术分析牙龈卟啉单胞菌基因差异初探

    目的:对比牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)低毒力株标准参考菌ATCC 33277与高毒力株W83之间的差异核苷酸序列,查找高毒力株W83缺失基因.方法:抑制消减杂交技术对比牙龈卟啉单胞菌低毒力株标准参考菌ATCC 33277与高毒力株W83的基因差异.以低毒力株ATCC 33277为tester,高毒力株W83株为driver,将提取的基因组DNA用内切酶Rsa Ⅰ酶切,连接特殊设计的adaptor进行两次消减杂交和PCR扩增,并与TA克隆载体连接,转化到JM109中,建立差异消减文库,经PCR筛选鉴定阳性克隆,进而对部分片段进行测序和同源分析.结果:经SSH筛选鉴定得到62个片段大小为125~632 bp的阳性克隆基因片段.结论:这些差异基因为研究牙周病的发生和发展提供重要线索.

    作者:林莉;潘亚萍;李琛;赵戬 刊期: 2007年第06期

  • 孕产妇产前检查现状及其影响因素研究

    目的:了解沈阳地区孕产妇产前检查现状,探讨影响妇女产前检查的主要因素.方法:采用分层随机抽样的方法对沈阳地区710名孕产妇的产前检查现状进行问卷调查,应用非条件Logistic回归方法对孕早期检查和产前检查次数的影响因素进行分析.结果:孕产妇产前检查率为91.55%,接受过8次以上产前检查的占44.27%,而孕12周内接受第一次产前检查的妇女占48.59%.多因素Logistic回归分析发现,妇女的文化程度、产前检查知识认知、家庭月收入、有无保健保偿、产次、有无孕保册等因素是孕早期检查的影响因素;而妇女的文化程度、家庭月收入、有无保健保偿、产前检查知识认知是产前检查次数的影响因素.结论:有必要针对各种影响因素开展不同形式的健康教育,引导妇女正确的产前检查的就医行为,促进妇女的生殖健康.

    作者:王玮;许伟;周宝森 刊期: 2007年第06期

  • 腰段连续硬膜外阻滞对妊娠期高血压疾病大鼠血清NO、SOD的影响

    目的:观察腰段连续硬膜外阻滞对妊娠期高血压疾病大鼠血清NO、SOD的影响.方法:参照OLSON等介绍的方法复制妊娠期高血压疾病大鼠模型.实验动物分为4组:对照组A组孕鼠从妊娠的第14 d起,每日皮下注射0.5 ml生理盐水;实验组B组孕鼠从妊娠的第14 d起,每日皮下注射L-NAME 50 mg;假手术组C组孕鼠从妊娠的第14 d起,行硬膜外腔置管术,但不给药;治疗组D组孕鼠从妊娠的第14 d起,行硬膜外腔置管术,每日注入0.125%Bupivicaine 25 μl.观察腰段连续硬膜外阻滞后大鼠血清NO、SOD含量的变化.结果:在妊娠第20 d A、B、C、D各组血清NO、SOD含量的变化,B、C组较A、D组明显降低(P<0.05),A、D组与B、C组相比无显著性差异(P>0.05).结论:腰段连续硬膜外阻滞可增加妊娠期高血压疾病大鼠血清NO、SOD的水平,这可能是其对妊娠期高血压疾病具有防治作用的机制之一.

    作者:高琳琳;董有静;崔健君 刊期: 2007年第06期

  • 舌鳞癌组织学恶性度与CD44v的关系

    总结1995~1999年舌鳞癌根治标本45例,对其进行组织学恶性度和CD44v相关关系做了分析.结果CD44v表达在浸润方式为3、4型组与2型组间差异有显著性.说明其在舌鳞癌中的表达与舌鳞癌侵袭转移有关.

    作者:李俊林;程丹;张恩礁 刊期: 2007年第06期

  • AMY1基因编码α淀粉酶在体外培养大鼠颌下腺细胞中的表达

    目的:检测大鼠颌下腺(SMG)AMY1基因编码α淀粉酶(α-Amy)在体外培养颌下腺细胞中的表达,鉴定细胞来源和检测体外培养细胞的功能.方法:分别进行培养大鼠细胞RT-PCR检测淀粉酶的基因表达;免疫印迹法(Western blotting)检测淀粉酶蛋白质.结果:大鼠SMG组织和培养细胞检测在474 bp处显示有一相同的带.表明大鼠培养SMG细胞RT-PCR产物与大鼠SMG组织α-淀粉酶mRNA表达相同.免疫印迹结果显示大鼠SMG组织与培养细胞分别出现了一单独的α-淀粉酶免疫活性蛋白电泳带,其分子大小为50 kDa,两者免疫活性蛋白泳带一致.结论:大鼠SMG组织和培养细胞淀粉酶mRNA表达相同,大鼠培养SMG细胞与大鼠SMG组织具有同源性.体外培养SMG细胞通过AMY1基因编码α-淀粉酶表达.

    作者:周青;隋承光;王玉新 刊期: 2007年第06期

  • 高效液相色谱法测定心脉宁胶囊中丹酚酸B含量

    采用高效液相色谱法对心脉宁胶囊中丹酚酸B进行含量测定方法的研究.丹酚酸B在0.194~0.970 μg范围内线性关系良好,回归方程为Y=818657.7X-1549.8.样品的平均回收率为99.9%.相对标准偏差(RSD)为1.67%.

    作者:陈再兴;罗濛;李丽红;全艳晖;孟繁浩 刊期: 2007年第06期

  • 成功建立小鼠心肌梗死模型的探讨

    目的:探讨如何成功建立小鼠心肌梗死模型,提高动物的存活率.方法:采用结扎冠状动脉左前降支方法建立小鼠心肌梗死模型,术后4周取出心脏对心肌进行TTC和HE染色检测.结果:通过时常规手术方法进行改进,术后2周小鼠存活率由40%提高到75%.心肌颜色、心电图特异性改变及心肌TTC和HE染色证明制模成功.结论:正确使用麻醉药、顺利气管插管、准确结扎冠状动脉、减少出血与肺损伤及术后观察和护理是保证制模成功的基础.

    作者:云伟;于艳秋;卢晓梅;金玉楠;李昆 刊期: 2007年第06期

  • 回肠黏膜上皮细胞内β-葡糖醛酸酶免疫电镜定位研究

    采用低温包埋、紫外线照射、抗β-葡糖醛酸酶抗体、胶体金探针及免疫电镜技术与方法,标记β-葡糖醛酸酶(β-Glu)的金颗粒定位于人体回肠黏膜上皮细胞内的内质网和溶酶体内.为研究回肠各种疾病和肿瘤β-葡萄糖醛酸酶活性及定量的变化,建立了正常的形态学研究模型.

    作者:宦大为;张文竹;杨波;刘树立;方长青;张弘 刊期: 2007年第06期

  • 剖宫产术后不同镇痛方法比较

    观察腰-硬联合阻滞麻醉下行剖宫产手术的病人120例,分别用吗啡、罗哌卡因单独或联合镇痛,比较4种不同镇痛方法的镇痛效果及不良反应.

    作者:黄威;常靖;吴秀英;关荣莉 刊期: 2007年第06期

  • ABCE1基因siRNA表达质粒的构建及鉴定

    目的:构建针对人ABCE1基因siRNA表达质粒,为进一步研究该基因功能奠定基础.方法:合成含靶向ABCE1基因siRNA转录模板的茎环结构,与两端分别有BamH Ⅰ、Hind Ⅲ酶切位点的RNAi-Ready pSIREN-DNR-DsRed-Express质粒连接,大肠杆菌中扩增,测序鉴定.结果:转化大肠杆菌涂布平板长出阳性菌落,重组质粒电泳初步说明质粒构建成功,测序结果表明RNAi-Ready pSIREN-DNR-DsRed-Express的酶切位点BamH Ⅰ、Hind Ⅲ之间有71 bp的插入片段,其序列与所设计、合成的ABCE1的siRNA转录模板序列一致.结论:siRNA转录模板完整正确地插入RNAi-Ready pSIREN-DNR-DsRed-Express质粒中.

    作者:郑毛根;田大力;黄波 刊期: 2007年第06期

  • caspase-3基因在高氧致早产鼠慢性肺疾病中的表达及其作用

    目的:探讨caspase-3在高氧致早产鼠慢性肺疾病(CLD)中的表达及其对肺上皮细胞(AEC)凋亡的影响.方法:将60例早产鼠随机分为模型组和对照组,分别于建立模型后1,3,7,14,21 d应用TUNEL和RT-PCR技术,动态检测AEC的凋亡指数(AI)和肺组织caspase-3基因表达.结果:暴露于高氧后3 d AEC的AI及肺组织的caspase-3 mRNA水平开始升高(P<0.05),7~21 d维持高水平(P<0.01),且肺组织caspase-3 mRNA表达与AEC的AI呈显著相关性(γ=0.69,P<0.01).结论:高氧诱导的肺组织caspase-3基因过度表达可能是CLD早产鼠肺上皮细胞凋亡的重要机制之一.

    作者:富建华;于凤英;薛辛东 刊期: 2007年第06期

  • 沈阳市部分中老年人群血尿酸水平的现况分析

    目的:探讨沈阳市部分中老年人群中高尿酸血症、代谢综合征的发病率及血清尿酸水平与高血压、冠心病及代谢综合征危险因素的关系.方法:选取2006年沈阳市部分省直机关单位在我院进行健康体检的中老年干部人群共1 154例,按统一方法测量物理及生化指标,对得出的数据进行统计分析.结果:高尿酸血症及代谢综合征的患病率分别为25.6%、31 5%.不同血清尿酸水平4组的比较、尿酸高组与尿酸低组的比较均揭示随血尿酸水平的升高,代谢综合征及各组分的患病率也随之增高.结论:血清尿酸浓度是代谢综合征危险因素的独立相关因素.即使在尿酸正常范围内,随着浓度的增加,代谢综合征的发病危险也会随之增加.控制血尿酸水平是代谢综合征治疗中的重要环节之一.

    作者:邓娓娓;张倩;王晓非;曹翠平;孙光;孟洁;徐锦春;郑玉华 刊期: 2007年第06期

  • 细胞芯片技术在急性白血病免疫分型中的应用

    目的:通过构建一种新型的细胞芯片,对急性白血病患者的外周血进行免疫分型,从而快速诊断白血病的类型.方法:将单克隆抗体点在醛基玻片上,细胞悬液滴于芯片,那些有相应CD抗原的细胞只能与相应的单克隆抗体的点结合,经荧光染色、扫描,还可进行Wright's染色.结果:25例AML的患者在芯片上均表达髓系的抗原:CD13,CD15,CD33;M4,M5表达CD14,M3不表达HLA-DR.5例ALL患者中2例表达B-ALL:CD10,CD19;3例T-ALL表达:CD5,CD7.结论:通过对细胞芯片的扫描实现了高通量的分析,其结果也可以通过普通显微镜观察.细胞芯片是一种快速、简便、低成本的技术,会得到广泛的应用.

    作者:李冬梅;赵雨杰;侯伟健;吴广平;杨华 刊期: 2007年第06期

  • 胰岛素抵抗大鼠脂联素与IKK mRNA表达的相关性研究

    目的:探讨胰岛素抵抗大鼠脂联素(APN)与核因子κB(NF-κB)抑制因子激酶(IKK)mRNA表达的关系.方法:采用高脂饲料喂养建立胰岛素抵抗大鼠模型,并用正常血糖-高血浆胰岛素钳夹技术评估.应用RT-PCR方法检测大鼠脂肪组织中APN和IKKmRNA的表达.结果:高脂饲料组大鼠的葡萄糖输注率明显低于基础饲料组[GIR60~120(0.76±0.28 vs 4.26±0.70)mg·kg-1·min-1,P<0.01];与基础饲料组相比,高脂饲料组大鼠脂肪组织APN mRNA的表达显著降低(A值APN/β-actin0.39±0.23 vs 1.26±0.30,P<0.05)、IKKmRNA的表达显著升高(A值IKK/β-actin 0.99±0.10 vs 0.17±0.02,P<0.05),APN与IKKmRNA的表达相关(r=-0.83,P<0.05).结论:胰岛素抵抗大鼠脂肪组织APN与IKKmRNA的表达显著负相关,提示IKK引起的NK-κB的活化可能与胰岛素抵抗时脂肪组织APN合成减少有关.

    作者:崔丽娟;都健;曾芙蓉;朱丹;王娟 刊期: 2007年第06期

  • 2002~2006年《中国医科大学学报》载文分析

    目的:分析《中国医科大学学报》2002~2006年的载文特点,了解该刊的编辑质量和期刊论文的学术水平,为进一步办好刊物和学校评估提供依据.方法:依据《中国期刊网全文期刊数据库》(CNKI)与手工检索,统计2002~2006年出版的《中国医科大学学报》所载论文的多项文献定量指标.结果:《中国医科大学学报》5年总载文量为1377篇,期均篇数为45.90篇,篇均页数为2.11页.在栏目中,临床医学发文数量多,占总发文量的54.83%.在引文统计中,含引文文章逐年增加,2006年引文率为99.67%,英文引文条数很高,平均占71.79%.在文章时滞统计中,长为930 d,短为30 d,平均为344.92 d.在基金资助文章统计中,受资助级别越来越高,获资助篇数越来越多,多是2006年,为149篇.结论:《中国医科大学学报》所载文献质量较高.该刊不仅是我国医学研究领域重要的信息源之一,也是我国医学领域的主要核心期刊.

    作者:王维秋;庞翔娟 刊期: 2007年第06期

  • 不同加热处理的义齿基托树脂的表面粗糙度研究

    目的:研究不同热处理方法对聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)基托材料表面粗糙度的影响.方法:制作64个蜡型分成8组,分别采用常规水浴加热、微波长周期加热、微波短周期加热和电加热方法处理二种PMMA基托材料,经抛光处理后,用表面粗糙度仪测量各组试件的表面粗糙度值(Ra),并进行统计分析.结果:微波加热组和电加热组基托材料的表面粗糙度值与水浴加热组相比无显著性差异.结论:微波加热处理和电加热处理二种PMMA基托材料均能获得与常规水浴加热处理一样的效果.

    作者:王彦红;杨晓东;蒋聪敏;韩冰 刊期: 2007年第06期

  • 既往有偿供血HIV感染者合并HCV感染的研究

    随机抽取河南、吉林、辽宁174例有偿供血人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者,标准化问卷收集社会人口学、行为学、有偿供血史资料,采集静脉血进行HIV和丙型肝炎病毒(HCV)检测.结果显示HCV感染率95.40%.既往有偿供血(浆)是感染HCV的主要原因,有偿供血HIV感染者HCV感染集中于1992年后.

    作者:张旻;胡清海;陈昕;赵飞;张新刚;代娣;尚红 刊期: 2007年第06期

中国医科大学学报杂志

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主管:辽宁省教育厅

主办:中国医科大学