梁文凯；荆春霞；王环宇
1 概述合同管理是企事业单位管理基础工作的重要内容,提高合同管理水平,规范、高效的合同签订和履行,能够有效地防范风险、优化管理、降低成本、提高效益.网络办公自动化、信息化的普及,使合同管理实现信息化管理已成为现实.
作者：冯霞；张盛；苏晓婷 刊期： 2015年第02期
目的 探讨巨细胞病毒性肝衰竭患者的临床特征及预后.方法 回顾性分析总结38例巨细胞病毒性肝衰竭患者的临床资料.结果 患者年龄在2个月～ 75岁,成人12例(31.58％),除外各种诱因后仍有6例发病前为健康成人(15.79％).临床分型以急性、亚急性为主(76.32％),症状以纳差(60.53％)、发热多见(57.89％),生化指标恶化组患者白蛋白、胆碱酯酶低于改善组,总胆红素高于改善组(P＜0.05),而凝血酶原活动度间无明显差异.并发症以肝性脑病、腹水、上呼吸道感染为主.经治疗总体改善率31.58％,其中成人患者的改善率仅为16.67％.患者的年龄、肝性脑病是影响预后的独立危险因素.结论 巨细胞病毒性肝衰竭以急性、亚急性为主,年龄不同临床表现不尽相同.健康成人感染巨细胞病毒后可进展为肝衰竭,预后差.患者的年龄、肝性脑病是影响预后的独立危险因素.
作者：臧红；严福明；游绍莉；朱冰；刘婉姝；万志红；刘鸿凌；李晨；貌盼勇 刊期： 2015年第02期
目的 探讨新生儿脐血中自然杀伤细胞(natural killer cell)亚群分布和功能.方法 收集2013年8月至2013年12月在北京地坛医院妇产科分娩的HBV DNA阴性(＜500拷贝/ml)孕妇所生新生儿脐带血以及正常成人外周静脉血,采用流式细胞术测定全血中NK细胞不同亚群频数及分布以及pDC频数和表面分子(CD80、CD83、CD86)的表达;采用Luminex技术检测两组血清中IFN-r、IFN-a、IL-10、IL-6水平.结果 新生儿CD16+ CD56+ NK细胞频数显著低于成人组(19.36±11.41,44.30±9.79,P=0.000),其中CD16+ CD56dim NK阳性率显著低于成人组(20.01 ±11.47,43.77±9.72,P=0.000),但CD16-CD56bright NK在两组中差异无统计学意义;新生儿pDC频数及其表面CD80、CD83、CD86阳性率均显著低于成人组(P=0.000);脐血中细胞因子IFN-r含量显著低于成人组(P=0.003),但IFN-a、IL-6和IL-10在两组之间差异无统计学意义.结论 新生儿NK细胞和pDC的频数低于成人.
作者：陈晓雪；李明慧；刘梦；张丹；张璐；路遥；华文浩；宋淑静；谢尧 刊期： 2015年第02期
目的 对临床证实由巨细胞病毒(CMV)感染所致的脑性瘫痪的患儿进行临床特点分析.方法 对51例明确由CMV感染的脑性瘫痪进行相关临床症状分析,找出其特性,并分析其发生的原因.结果 在CMV感染所致的脑性瘫痪的临床症状与其他原因所致的脑瘫相似,但其他原因所致的脑瘫临床症状比较重;CMV感染的脑瘫有37.25％伴有肝功能损害;发育商测定CMV感染的脑瘫90.20％有中重度缺陷,而其他原因所致的脑瘫发育商中重度占52.6％,二者有明显区别(P＜0.05);CMV感染的脑瘫患儿有88.23％运动功能为Ⅱ-Ⅲ级,以中轻度受损为主.结论 人巨细胞病毒所致的脑性瘫痪其运动功能大都是中轻度受损,智力发育则明显以中重度缺陷为主,表现出智力受损程度远远大于运动功能受损程度,而其他类型的脑瘫,运动功能受损程度往往大于智力受损程度.同时人巨细胞病毒感染的脑瘫患儿易伴有肝功能损害等多脏器损伤.
作者：陈星；陈见南；杨路；陈春花；邱纪方 刊期： 2015年第02期
目的 分析人细小病毒B19及人细小病毒4(PARV4)在西藏藏族人群中与内地汉族人群中的基因特点.方法 采用建立的B19与PARV4 PCR筛查方法,分别从西藏藏族人群中与内地汉族人群血液标本中获得人细小病毒B19及PARV4的部分基因片段,经纯化、测序后,进行基因进化树分析.结果 共获得10个B19 VP1基因片段序列(西藏,2个;四川,3个;浙江,5个);10个PAV4ORF1基因片段序列(西藏,2个;四川,2个;云南,1个;浙江,5个);西藏藏族人群中细小病毒B19基因与内地汉族人群同属基因1A亚型,但为不同进化分支;而西藏藏族与内地汉族人群PAV4基因属同一分支.结论 细小病毒B19基因在西藏藏族与内地汉族人群中的差异分析为该病的检测与控制提供了参考.
作者：朱娜；佟瑞；周为民；谭心怡；楼永良；谭文杰 刊期： 2015年第02期
目的 通过携带人端粒酶逆转录酶(hTERT)的慢病毒颗粒转染法,制备可用于人巨细胞病毒(HCMV)培养的永生化MRC-5细胞.方法 以携带hTERT基因的质粒pLXSN-hTERT为分子基础,通过PCR构建慢病毒载体质粒pLVX-EFl a-hTERT.pLVX-EF1 a-hTERT质粒与Lenti-X HTXPackaging Mix2混合后转染293T细胞,并经Real-time PCR定量所获得的慢病毒颗粒,在慢病毒原液感染MRC-5细胞后连续传代获得永生化的MRC-5T细胞,并观察HCMV在MRC-5T细胞中的感染特性.结果 获得了表达hTERT基因的慢病毒颗粒LVX-EF1a-hTERT,制备了可用于HCMV培养的永生化MRC-5细胞.结论 建立了人端粒酶逆转录酶永生化MRC-5细胞的方法,为永生化原代细胞等其他种类细胞提供了技术保障和物质基础.
作者：吴萌；殷建忠；朱武洋；鲁茁壮 刊期： 2015年第02期
目的 本研究旨在分析乙型肝炎病毒(HBV)阿德福韦(ADV)非经典耐药相关突变的临床流行特点和表型耐药特征.方法 选取1741例慢性HBV感染者,PCR直序法检测7种非经典ADV耐药突变.对rtN238T突变患者进行动态克隆测序;构建rtN238T、rtA181V和rtA181V+ rtN238T突变株的pTriEx-HBV 1.1重组载体,瞬时转染HepG2细胞,评价各病毒株的表型耐药特性.结果 rtN238T突变在应用ADV治疗患者中的检出率高于未治疗患者和其他核苷类药物治疗患者(X2=17.10,P＜0.01).随访患者在接受ADV治疗47个月后发生病毒学反弹和生化学突破,并检出rtN238T+ A181V和rtN238T克隆株;随后应用ETV治疗33个月,病毒载量和ALT恢复正常,患者体内病毒全部转变为野生株.rtN238T+ A181V病毒株复制力显著高于rtA181V(t=9.54,P＜0.01).与野生株相比,rtN238T+ A181V突变株对ADV敏感性下降.结论 rtN238T突变可以增加ADV经典耐药突变株rtA181V的复制力,是一种ADV耐药相关的复制力补偿突变.
作者：李晓东；秦雅群；武晶晶；李梵；廖浩；陈容娟；徐东平 刊期： 2015年第02期
目的 了解我国国产轮状病毒口服活疫苗的接种比例及实际接种程序,评价该疫苗使用的接种程序是否合理. 方法 对深圳市宝安区某接种点登记在册的2007年1月1日至2010年12月31日出生的儿童轮状病毒口服活疫苗接种情况进行分析,包括接种比例,接种年龄,接种季节.与深圳市轮状病毒流行的年龄分布进行比较分析疫苗接种程序的合理性.结果 深圳的接种比例为25.2％.首剂接种高峰年龄为10月龄及12月龄,在18月龄后基本不进行首剂的接种.接种无明显高峰季节.结论 结合轮状病毒哨点监测资料分析,不支持目前的免疫程序,需要根据我国轮状病毒流行特点及我国其他疫苗使用程序进行修改.
作者：刘娜；马智超；李苑；段招军 刊期： 2015年第02期
目的 了解云南省大理地区HCV基因分型及主要流行基因型6n和3a HCV E基因遗传进化和分子特征.方法 2014年1-5月在大理州人民医院收集临床诊断丙型肝炎患者血清;HCVRNA提取,RT-PCR扩增和序列分析.结果 收集到HCV患者血清24份,21份HCV 5UTR基因扩增阳性,其中HCV基因3型15例(3a4例,3b 11例)和HCV基因6型6例(6k 4例,6n 2例).2株HCV(10和4)E1/E2基因序列分析结果显示:4与3a型HCV同源性高,87.98％±3.07和87.97％±2.82,10病毒与6n型HCV同源性高,90.30±1.87和90.54±1.53;2株病毒E1/E2基因均存在10个潜在糖基化位点;与其他病毒相比,2株病毒仅有5个T细胞抗原表位预测分值发生变化,其余37个抗原表位预测分值变化不大.结论 大理地区目前以基因3型(3a、3b)和基因6型(6k、6n)为主要流行HCV基因型或基因亚型,大理地区流行的3a和6n型HCV的致病性、免疫学等生物学特性未发生明显变化.
作者：王佳丽；王静林；杨红樱；钟国梁；马顺高 刊期： 2015年第02期
目的 调查EBV在本地区体检人群中的流行情况.方法 应用酶联免疫吸附法检测EBV四种标志性抗体的阳性率并分析各项指标与临床诊断的关联性.结果 总共筛查198例EBV受检者,其中EBVCA-IgG阳性率高,其次是EBNA-IgG和EBEA-IgG,阳性率低为EBVCA-IgM,本地区未成年人感染EBV高于成年人,秋冬季高于其他季节,病例追踪发现EBVCA-IgG阳性和EBNA-IgG阳性与鼻咽癌密切相关.结论 EBV感染在人群中广泛存在,发生与地域、季节、年龄、自身免疫力有关,定期体检有助于相关疾病及早发现、早治疗.
作者：韩兰英 刊期： 2015年第02期
目的 研究表达HBsAg的重组质粒pVR-S与表达HBsAg的重组腺病毒rAdV-S在不同免疫策略下的免疫效果.方法 使用BALB/c小鼠,在比较电击与肌注两种方法后,分别单独免疫pVR-S和rAdV-S,使用ELISA和Elispot方法分别检测体液免疫和细胞免疫水平;然后采用联合免疫pVR-S和rAdV-S,比较联合免疫与单独免疫对小鼠产生免疫应答的不同影响.结果 与肌内注射相比较,电击注射pVR-S能更快诱导较高的HBsAb抗体水平.当pVR-S和rAdV-S分别单独免疫时,pVR-S引起体液免疫应答的速度较慢,而rAdV-S可在第2周迅速诱导产生体液免疫应答,rAdV-S诱导的体液免疫应答和细胞免疫应答水平均高于pVR-S;联合免疫pVR-S和rAdV-S时,联合免疫产生的细胞免疫应答是单独免疫的2～3倍,同时还可诱导出相同或更高水平的体液免疫应答.结论 rAdV-S的单独免疫效果高于pVR-S,联合免疫可比单独免疫诱导产生更强的免疫应答,有助于提高机体抗病毒能力.
作者：王颖慧；陈国敏；毕胜利；曾毅 刊期： 2015年第02期
目的 构建重组表达载体TAT-KLF4,在E.coli BL21中高效表达并纯化融合蛋白.方法 经PCR获得编码人KLF4的开放读码框基因序列,酶切并连接到原核表达载体PET-28b-TAT-V2上,得到重组表达载体TAT-KLF4,转化大肠埃希菌,IPTG诱导TAT-KLF4融合蛋白的表达.表达产物用SDS-PAGE鉴定,亲和层析柱纯化融合蛋白,并应用Western Blot检测蛋白的特异性,应用免疫荧光检测融合蛋白转导HSF细胞的效果.结果 成功构建了TAT-KLF4融合蛋白的原核表达载体,在诱导下获得了高效表达并纯化了融合蛋白,Western Blot实验提示获得了特异性的融合蛋白.免疫荧光提示融合蛋白可快速转导入HSF细胞内.结论 为通过蛋白转导方式诱导多能干细胞提供了物质基础.
作者：王建军；万志红；赵平；靳雪源；谢国明；辛绍杰 刊期： 2015年第02期
目的 评估RNA恒温扩增实时荧光检测技术(SAT)在肺结核诊断中的应用.方法 采用SAT、罗氏培养法、萋尼法同时对277份痰标本进行检测,采用x2检验比较SAT与另2种方法对痰标本中结核分枝杆菌检出的阳性率;分别以临床诊断和罗氏培养为标准计算治疗前和治疗后SAT检测的灵敏度、特异性、阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV).结果 SAT、罗氏培养法、萋尼法对277份痰标本检测的阳性率分别是47.3％ (131/277)、30.3％(84/277)、29.6％(82/277),SAT检测的阳性率与罗氏培养法(x2=16.8,P＜0.05)和萋尼法(x2=18.3,P＜0.05)比较,差异具有统计学意义.治疗前以临床诊断为标准,SAT的灵敏度、特异性、PPV、NPV分别是59.0％ (95/161)、97.4％(37/38)、99.0％(95/96)、35.9％(37/103);治疗后以罗氏培养为标准,SAT的灵敏度、特异性、PPV、NPV分别是11/11、64.2％ (43/67)、31.4％ (11/35)、100％ (43/43).结论 SAT对痰中结核分枝杆菌具有较高的敏感度,可辅助肺结核的早期诊断,能明显缩短治疗后活菌的检测周期,辅助疗效判断,为治疗方案的早期调整提供参考.
作者：罗贤；张腊红；洪理泉；徐金田；刘霞；徐立群；陈兆军 刊期： 2015年第02期
目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)前C区基因变异与肝细胞癌(HCC)发生的关系.方法 收集在山西医科大学第一医院感染病科门诊及住院的患者血清及病例资料共99例,其中慢乙肝55例,肝癌44例.采用半巢式聚合酶连反应及直接测序法检测前C区基因变异的情况.分别检测两组患者的乙肝病毒标志物、HBV DNA,采用病例对照研究方法对患者的年龄、性别、HBeAg、HBVDNA基线水平和HBV前C区基因变异位点进行分析.结果 (1)肝癌患者的HBeAg阴性率均高于慢乙肝组,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)肝癌组患者HBV DNA载量低于慢乙肝组,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)共发现前C区有G1896A、G1899A两个热点突变位点,其中G1896A位点在肝癌组的突变率显著高于慢乙肝组,差异有统计学意义(P＜0.05),而G1899A在两组之间差别无统计学意义.(4)另在前C区发现有插入及缺失突变,均相对点突变发生率较低.结论 HBV前C基因区G1896A位点突变与HCC发生密切相关.
作者：胡艳芳；王淼；史为涛；王勤英 刊期： 2015年第02期
粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)是许多造血刺激因子中的一员,具有刺激骨髓前体细胞向粒细胞、巨噬细胞分化及增殖的作用,临床上被广泛应用于恶性肿瘤化疗后骨髓抑制的治疗.而近年来研究发现,GM-CSF不仅是造血刺激因子,它还是一个重要的炎症因子,参与调节机体的免疫反应,并与多种疾病的发病密切相关.本文主要对GM-CSF的功能以及其在炎症性疾病及肿瘤中的作用进行简要概述.
作者：黄辉煌；王嗣予；徐若男；徐向升；王福生 刊期： 2015年第02期
目的 评价胆固醇转运子ABCA1在朊病毒病中所发挥的作用.方法 运用WesternBlot检测朊病毒毒株263K感染的仓鼠脑组织和稳定感染羊瘙痒因子Chandler株的小鼠神经细胞系SMB-S15中ABCA1表达的变化,并检测ABCA1激活剂8-Br-cAMP对SMB-S15细胞中朊病毒prpSc含量的影响.结果 与正常对照相比,朊病毒感染的动物及细胞模型中ABCA1蛋白表达显著升高(P＜0.05),并且在细胞模型中ABCA1活化显著增加prpSc的含量.结论 以上结果提示ABCA1与朊病毒感染的相互关系.该项研究为探索朊病毒复制的分子机制提供了新的思路,同时为以控制胆固醇内稳态为靶点的抗朊病毒治疗提供了理论依据.
作者：王晶；张瑾；张宝云；肖康；陈利娜；孙静；董小平；石琦 刊期： 2015年第02期
库蚊黄病毒(Culex flavivirus,CxFV)是属于黄病毒科(Flaviviridae)黄病毒属(flavivirus)的单股正链RNA病毒.2003年,日本开展的一次全国性蚊虫传播病毒分布调查中发现一种新黄病毒,由于该病毒在淡色库蚊、三带喙库蚊和其他库蚊中分离到,故命名为库蚊黄病毒[1].CxFV虽然对人类和其他脊椎动物致病性尚不清楚,但由于与其他具有明确致病性的黄病毒成员如登革病毒(Dengue virus,DENV)、西尼罗病毒(West nile virus,WNV)、圣路易脑炎病毒(St Louis encephalitis virus)、日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)和黄热病毒(Yellow fever virus,YFV)等在生态学和遗传学上存在密切的关系,近年来受到人们越来越多的关注[2].
作者：梁文凯；荆春霞；王环宇 刊期： 2015年第02期
目的 探讨JY佐剂对人乳头瘤病毒16和18型L1病毒样颗粒(HPV16 +18 L1 VLP)黏膜免疫效果的影响.方法 用含或不含JY佐剂的HPV16+ 18 L1 VLP分别经鼻腔和肌内注射免疫小鼠3次,检测血清IgG抗体、中和抗体和肺灌洗液sIgA抗体滴度与细胞免疫反应.结果 含JY佐剂的HPV16+ 18 L1 VLP鼻腔免疫组血清IgG抗体滴度明显高于不含佐剂组(P＜0.01),含或不含佐剂的VLP肌内注射组抗体滴度相同;含JY佐剂的HPV16+ 18 Ll VLP肌内注射免疫组血清中和抗体滴度高于不含佐剂组,仅在含有佐剂的VLP鼻腔免疫组检测到血清中和抗体;含JY佐剂的HPV16+ 18 L1 VLP鼻腔免疫组肺灌洗液sIgA抗体浓度明显高于不含佐剂组(P＜0.05);含JY佐剂的HPV16+ 18 L1 VLP鼻腔免疫和肌内注射组细胞斑点数均明显高于不含佐剂组(P ＜0.01,P＜0.05).结论 JY佐剂能增强HPV16+ 18 L1 VLP经鼻腔免疫后的小鼠的细胞、体液和黏膜免疫应答,但肌内注射免疫组佐剂作用不明显.
作者：麻粉莲；郑文芝；张骞；袁武梅；郑丽舒；侯云德 刊期： 2015年第02期
目的 分析儿童IM、EBV-HLH、CAEBV中EBV EBER基因特征,探讨EBV变异株与EBV感染疾病临床表型间的相关性.方法 应用PCR方法扩增288例IM、52例EBV-HLH和9例CAEBV全血标本的EBNA3C和EBER基因,根据EBNA3C扩增产物的大小进行EBV分型;EBER基因扩增产物经测序后应用BioEdit 7.0.9和Mega4.0.2软件进行分析.统计分析不同EBV亚型和EBER基因型与临床表型的关系.结果 349例标本EBNA3C基因扩增阳性,EBV-Ⅰ/II型的检出率分别为98.6％和1.4％,共检测到EB-6m、EB-8m和EB-7m等3种EBER基因型,其检出率分别为96％、2.9％和1.1％,不同EBER基因型在IM、EBV-HLH、CAEBV中的检出率差异无统计学意义.结论 儿童EBV感染疾病中EBV以EBV-Ⅰ型为主,EB-6m基因型是EBER基因型中的优势基因型.
作者：鲁伟峰；艾军红；刘亚丽；刘春艳；谢正德 刊期： 2015年第02期
目的 比较慢性乙型肝炎(CHB)患者和非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者外周血中性粒细胞、淋巴细胞计数及中性粒细胞淋巴细胞比值(neutrophil-to-Iymphocyte ratio,NLR),探讨中性粒细胞在鉴别CHB及NAFLD所致肝损伤性质中的应用价值.方法 对2012年5月至2015年5月在杭州师范大学附属医院就诊的325例CHB患者和402例NAFLD患者血常规和生化学指标进行回顾性分析,比较两组患者外周血中性粒细胞(Neu)、淋巴细胞(Lym)绝对值以及NLR;同时比较两组ALT升高患者外周血中性粒细胞、淋巴细胞绝对值及NLR.结果 CHB患者Neu、Lym低于NAFLD患者,而NLR高于NAFLD患者,差异有统计学意义(P＜0.01).在ALT升高的患者中,CHB患者Neu、Lym值低于NAFLD患者(P＜0.01);Neu、Lym预测NAFLD及CHB肝损伤的曲线下面积(ROC)分别为0.694、0.731,高于NLR曲线下面积0.454.结论 Neu、Lym对鉴别NAFLD和CHB所致的肝损伤性质具有一定价值.
作者：马晓洁；应丽美；陈颖基；朱葛丽；王磊；施军平 刊期： 2015年第02期
中华实验和临床病毒学杂志
主管:实验和临床病毒学杂志
主办：中国科学技术协会
