学术投稿

呼吸道合胞病毒诱导人上皮细胞趋化因子差异表达

赵东赤;李蕾;陈敏;张楚瑜;张其威

关键词:呼吸道合胞病毒, 上皮细胞, 细胞趋化因子, 宿主细胞, 差异表达, 病毒复制, 表达关系, 野生型, 检测, 感染, 标准
摘要:本研究采用分离野生型(wt)和标准株RSV感染上皮细胞,对宿主细胞mRNA差异表达进行检测,研究病毒复制与细胞趣化因子表达关系.
中华实验和临床病毒学杂志相关文献
  • 我国首批美沙酮维持治疗试点工作效果分析

    目的 对我国首批8个美沙酮维持治疗试点门诊的工作效果进行评估.方法 在美沙酮门诊开诊时、运行6个月及1年后三个时点,对受治者的人口学特征及吸毒有关行为等进行问卷调查,比较吸毒、违法行为、家庭关系等变化情况.结果 共有585人、609人和468人分别参加了基线调查、6个月评估和1年评估调查.受治者过去1个月注射吸毒的比例从基线的69.1%分别下降到6个月后的8.9%和1年后的8.8%;在有注射行为人群中,过去1个月注射次数由参加治疗前的平均90次下降到6个月和1年后的平均2次;受治者有工作的比例从治疗前的22.9%上升到6个月后的43.2%和1年后的40.6%.自我报告过去1个月因吸毒而发生违法犯罪行为的比例从治疗前的20.7%下降到6个月后的3.6%和1年后的3.8%.自我感觉家庭关系良好的比例从治疗前的49.6%上升到1年评估时的65.8%.95.9%的受治者对试点门诊提供的服务表示满意.结论 首批美沙酮维持治疗试点工作已在减少毒品使用、减少与吸毒有关的高危行为、减少与吸毒有关的违法犯罪行为以及恢复受治者的社会家庭功能方面取得效果.美沙酮门诊可作为针对吸毒者开展多种形式综合服务的平台.

    作者:庞琳;米国栋;王常合;罗巍;柔克明;李建华;吴尊友;社区药物维持治疗工作国家级工作组 刊期: 2007年第01期

  • 急性轮状病毒腹泻小儿单个核细胞Toll样受体的变化

    目的 研究轮状病毒腹泻小儿单个核细胞Toll样受体的变化.方法 收集3岁以下因急性轮状病毒腹泻来复旦大学附属儿科医院就诊的小儿 75例,以荧光定量RT-PCR方法检测外周血单个核细胞TLR 2,3、4、7、8 mRNA的表达情况.结果 起病时间在3 d以内的小儿外周血单个核细胞中TLR 2、3、4、7、8 mRNA的表达水平都有明显升高,P均<0.05.其中TLR 2、3、8 mRNA表达在发病7 d和14 d时仍高于对照组,P均<0.05.TLR 4 mRNA的表达在病情较重的患儿比较轻的患儿高,P<0.05.结论 多种TLR参与了轮状病毒引发的宿主免疫应答反应的启动和调节.

    作者:徐锦;杨毅;孙家娥;丁韵珍;苏犁云;邵彩虹 刊期: 2007年第01期

  • 含HIV-1 gag基因的重组腺病毒5型与35型嵌合病毒免疫效果研究

    目的 探讨含HIV-lgag基因的重组腺病毒5型与35型嵌合病毒(rAd5/F35)在BALB/c小鼠中的免疫效果.方法 PCR,间接免疫荧光鉴定HIV-1 gag基因在重组腺病毒(rAd5/F35-mod.gag)的正确插入和体外细胞水平的表达,用rAd5/F35-mod.gag以不同的方式免疫BALB/c小鼠,ELISA检测小鼠血清中的p24特异性抗体,细胞内细胞因子染色法检测小鼠的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答.结果 重组腺病毒rAd5/F35-mod.gag在体外细胞水平可以很好的表达目的基因gag;在小鼠体内重组腺病毒rAd5/F35-mod.gag可诱导特异性的CTL应答和血清IgG抗体反应,用rAd5/F35单独免疫2次,所诱发的CTL和血清IgG反应强.但Ad5初次感染后,产生的抗Ad5抗体可以抑制rAd5/F35疫苗的特异性免疫反应.结论 重组腺病毒rAd5/F35-mod.gag单独免疫可在小鼠体内诱导特异性的CTL应答和血清IgG抗体反应.只改变Ad5纤突蛋白Fiber,不能避免抗Ad5抗体的抑制作用.

    作者:刘新蕾;余双庆;冯霞;王小利;刘红梅;张晓梅;李红霞;周玲;李泽琳;曾毅 刊期: 2007年第01期

  • 酵母双杂交技术筛选人白细胞cDNA文库中HCV NS4A结合蛋白及CAML基因的克隆

    目的 应用酵母双杂交技术筛选人白细胞中与丙型肝炎病毒非结构蛋白4A(HCV NS4A)相互作用的蛋白.方法 连接有HCV NS4A酵母表达的载体pGBKT7-NS4A,转化入单倍体酵母细胞AH109,与转化了人白细胞cDNA文库质粒的单倍体酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基和X-a-半乳糖(X-a-Gal)上进行双重筛选阳性菌落,增菌后提取质粒,转化人大肠埃希细菌(DH5α),提取质粒并测序,进行生物信息学分析.对克隆重复率较高的蛋白编码基因进行克隆和回交验证.结果 筛选出在四缺(SD/-Trp-Leu-Ade-His)培养基和在铺有X-a-gal的四缺培养基上均能生长并变成蓝色的真阳性菌落45个,其中钙离子信号调节亲环素配体(CAML)29个.对CAML基因成功克隆,回交验证了HCV NS4A与CAML的相互作用.结论 成功筛选出7种在人白细胞cDNA文库中与HCV NS4A特异性相互作用的蛋白,为进一步探讨HCV的致病机制提供了新的线索.

    作者:程勇前;王琳;成军;刘妍;徐东平;钟彦伟;曲建慧;田江克;戴久增;李晓东 刊期: 2007年第01期

  • 国产HIV-1p24抗原检测试剂盒的评价

    目的 探讨国产的HIV-1 p24抗原检测试剂盒进行药物筛选研究的可行性.方法 对国产试剂盒的使用性能与Biomerieux公司商品化的Vironostika试剂盒进行比较,评估国产试剂盒的敏感性、重复性及检验效能.结果 国产试剂盒具有较高的敏感性和重复性,在体外药效学筛选实验中国产试剂盒的阳性检出率及药物评价结果与Vironostika试剂盒差异无统计学意义(P>0.05).结论 国产试剂盒具有较好的使用特性,在药物筛选中可以用国产试剂盒替代Vironostika试剂盒.

    作者:杨怡姝;王润田;张晓光;张红中;王惠芬;李泽琳;曾毅 刊期: 2007年第01期

  • 我国戊型肝炎ELISA诊断试剂的质量比较

    目的 对戊型肝炎(戊肝)诊断试剂进行质量评价.方法 选择北京万泰生物药业(万泰),北京现代高达生物技术(高达),上海科华生物工程(科华),GeneLabs Diagnostic Inc(GeneLabs),和河南华美生物工程(华美)共5家公司生产的检测戊肝病毒IgG(HEV-IgG)抗体的 ELISA 试剂,分别检测戊肝诊断试剂参比品、可疑戊肝临床患者和正常人群血清HEV抗体.结果 对24份阳性和30份阴性参比品检测,以万泰试剂检测符合率高,阳性和阴性符合率分别为95.83%(23/24)和96.67%(29/30),总符合率为96.30%,其次为高达试剂87.50%(21/24)和100%(30/30),总符合率为94.44%.华美试剂87.50%(21/24)和96.67%(29/30),总符合率92.59%,GeneLabs 66.67%(16/24)和100%(30/30),总符合率为85.18%,科华试剂45.83%(11/24)和100%(30/30),总符合率为75.93%.对42份可疑戊肝患者血清HEV抗体检测阳性率,高达试剂为100%(42),万泰和华美试剂均为97.62%(41),GeneLabs和科华试剂均为90.48%(38).对230份正常人群HEV抗体检测阳性率,从高到低依次为万泰试剂31.74%(73),华美试剂为23.91%(55),高达试剂为17.39%(40),CeneLabs和科华试剂分别是7.83%(18)和3.48%(8).结论 5家试剂检测急性期戊肝患者抗体阳性率均能达90%以上,具有很高的一致率,而应用于普通人群HEV感染的调查,其抗体阳性率从31.74%~3.48%不等.不同的试剂存在假阳性或和阳性漏检现象.依本室参比品和人群血清阳性率来看,万泰试剂检出率较高.

    作者:江永珍;田瑞光;鲁建;毕胜利 刊期: 2007年第01期

  • 江西省部分吸毒人群HIV-1分子流行病学调查

    目的 对江西省吸毒人群进行HIV-1分子流行病学调查研究,了解HIV-1流行情况、亚型种类、毒株来源、变异情况等,为政府部门制定预防控制决策提供技术资料.方法 传统流行病学与分子流行病学相结合,对江西省9例吸毒人员进行流行病相关因素分析和基因序列、系统进化分析.结果 江西省部分吸毒人群不仅共用注射器,同时伴有不洁性交史.流行毒株主要为HIV-1CRF01-AE,序列分析表明与越南和我国广西吸毒人群流行毒株相似性较高,与越南株U90087平均基因距离为9.00±2.27.系统进化分析表明,江西省吸毒人群的毒株来源完全一致.结论 目前江西省吸毒人群中HIV流行已从局部向全省蔓延,流行毒株为HIV-1 CRF01-AE.为阻止蔓延,应加强对吸毒人群和性乱人群的行为干预.

    作者:易志强;邢辉;胡国良;魏民;周小风;梁浩;江小明;卢飞豹;陈红;邵一鸣 刊期: 2007年第01期

  • 丁型肝炎病毒内蒙古株的原核表达及抗原性分析

    目的 获得表达量高、抗原性强的基因工程重组抗原.检测不同地区的丁肝患者血清,初步验证其抗原性及在检测不同地区丁肝血清方面的差异.方法 从内蒙古某丁肝患者血清中提取丁肝病毒,经RT-PCR与PCR,使用PET43a表达质粒及HDV L-Ag 5'和3'端引入His标签获得丁型肝炎病毒L-Ag 重组表达质粒,转化BL21(Rosetta)宿主菌,IPTG诱导表达.表达产物经饱和硫酸胺沉淀与亲和层析柱纯化后,采用EIA竞争法分析其抗原性.结果 经与ABBOTT Murex anti-Delta(total)试剂盒同步检测15份阳性和10份阴性血清,一致率100%.结论 EIA检测,证明具有良好的抗原性,基因工程表达的抗原蛋白在检测不同地区丁肝血清方面未见差异,故可用于丁肝的诊断及相关研究.

    作者:杨英超;伊瑶;赵洪兰;张文英;陈斯勇;毕胜利 刊期: 2007年第01期

  • 聚乙二醇α干扰素治疗慢性丙型肝炎效果观察

    α干扰素联合利巴韦林已成为CHC的标准抗病毒治疗方案.本研究随机、对照观察了聚乙二醇α干扰素(PEGIFNα)抗慢性丙肝病毒(HCV)感染的近、远期疗效,及药物耐受性,报道如下.

    作者:姜天俊;闫子国;闫慧颖;赵鹏;石磊 刊期: 2007年第01期

  • 1b型丙型肝炎病毒基因组不同区域基因变异对干扰素疗效的影响

    本研究对14例基因型1b型慢性丙型肝炎患者血清HCV基因组中E2/NS1(含HVR1和HVR2)、NS5A区准种异质性进行了检测,对HVR区准种异质性程度与干扰素(IFN)疗效的关系、NS5A2209-2248区是否存在干扰素敏感决定区(ISDR)等热点问题进行了探讨,为1b型慢性丙型肝炎患者应用IFN抗病毒治疗时进行疗效预测提供理论依据.

    作者:张琳;白菡;黄芬;赵桂珍;李颖 刊期: 2007年第01期

  • 北京地区人乳头瘤病毒16型感染及其E6/E7基因变异与宫颈病变的相关性研究

    目的 探讨HPV16感染及其E6/E7基因变异与宫颈病变的相关性.方法 采用导流杂交技术进行HPV感染分型检测,PCR扩增出80份HPV16阳性宫颈病变的E6/E7基因、克隆入pMD18-T载体,双向测序分析基因变异与宫颈病变相关性.结果 HPV16在宫颈病变患者中的检出率高为33.3%(154/463),与病变程度相关(P<0.05).E6/E7基因72份测序成功,DNA序列变异发生率为88.9%(64/72).氨基酸序列E6-D32E(T96G)和E7-N29S(A86G)位点突变同时伴随存在,D32E/N29S的检出率为38.9%(28/72),与宫颈病变程度相关(P<0.05).结论 HPV16是北京地区来源的宫颈病变中常见的致病型,其D32E/N29S变异与病变程度相关.

    作者:杨英捷;赵健;廖秦平 刊期: 2007年第01期

  • 自体细胞因子诱导杀伤细胞治疗HBV感染肝硬变患者的临床疗效分析

    目的 观察自体细胞因子诱导杀伤细胞(CIK细胞)治疗HBV DNA阳性肝硬化患者的近期疗效.方法 33例HBV DNA阳性肝硬化患者给予CIK细胞治疗,在体外培养前后以及回输体内后检测CD3+、CD3+ CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD56+、CD25+细胞以及mDC和pDC.比较治疗前后病毒学指标及肝脏功能的变化.结果 培养结束以及回输体内后,CD3+细胞、CD3+CD8+细胞、CD3+CD56+细胞较培养前显著升高,mDC和pDC在回输后也明显增高.12例患者HBV DNA阴转,4例患者拷贝数下降大于2个log.在14例HBeAg阳性患者中有10例阴转,2例出现HBeAb转换.肝脏功能较治疗前有所好转.所有患者均能耐受治疗.结论 CIK细胞可明显提高免疫效应细胞数量,具有一定的抗病毒效应作用,毒副作用低.

    作者:苏海滨;李捍卫;赵洪兰;施明;张冰;汤紫荣;雷周云;王慧芬;王福生 刊期: 2007年第01期

  • 无偿献血人群戊型肝炎病毒感染情况调查

    目的 调查绍兴市街头无偿献血者戊型肝炎病毒感染情况.方法 3701例无偿献血者标本采用ELISA方法检测抗-HEV IgG和抗-HEV IgM,RT-PCR检测抗-HEV IgM阳性血清HEV RNA.结果 本市无偿献血者抗-HEV IgG阳性率为29.91%(1107/3701);抗-HEV IgM阳性率为1.35%(50/3701);HEV RNA阳性6例,检出率为0.16%(6/3701),均为HEV基因1型;各季节抗-HEV IgG和抗-HEV IsM的阳性检出率无显著差异.结论 加强对献血者感染HEV情况的检测和研究,对保证用血安全,完善安全输血的保障体系有切实的意义.

    作者:桑列勇;庄培芬;傅立强;刘祎;葛胜祥;张军 刊期: 2007年第01期

  • 儿童麻疹163例临床分析

    2005年南通市冬春季节发生麻疹暴发流行,我院1~6月共收治163例儿童麻疹患者,现对其临床资料分析如下.

    作者:徐建中;张沛枫;孙伟;朱浩然;赵云 刊期: 2007年第01期

  • 聚乙二醇干扰素α-2a与干扰素α-2b治疗慢性丙型肝炎疗效分析

    丙型肝炎病毒(HCV)感染可导致肝脏炎症坏死和纤维化,抗病毒治疗是丙型肝炎治疗的根本疗法.我们对慢性丙型肝炎(CHC)患者分别采用聚乙二醇干扰素α-2a(PEG-IFNα-2a)和干扰素α-2b(IFNα-2b)治疗,并对两种干扰素的临床疗效进行对比分析.

    作者:王怡;高敏;李响;卢诚震;董萌;邱春婷;张万增 刊期: 2007年第01期

  • 新微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体对肝癌诊断的研究

    目的 探讨采用新型微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体AFP-L3在良恶性肝病及肝癌预警中的作用.方法 应用装有耦联了小扁豆凝集素(LCA)的微量离心柱分离甲胎蛋白异质体,采用化学发光法检测AFP和AFP-L3,并计算AFP-L3在AFP中的含量比例[AFP-L3(%)],分析AFP-L3(%)升高者与良恶性肝病的关系.结果 肝细胞癌患者血清中AFP-L3(%)明显高于其他肝病患者,P值均<0.001,以AFP-L3(%)≥10作为诊断指标,在已经确诊为肝癌的患者中灵敏度是90.9%.结论 微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体AFP-L3在预警肝细胞癌诊断及鉴别诊断中具有重要临床价值,特别是对低甲胎蛋白含量的肝病鉴别具有重要临床价值.

    作者:徐爱芳;王妙婵;眭东鸣;元幼红;陈刚;娄国强 刊期: 2007年第01期

  • 干扰素α-2b对慢性乙型肝炎患者氧化损伤状态的影响

    目的 探讨不同基因型慢性乙型肝炎患者干扰素α-2b(IFN α-2b)治疗前后氧化损伤状态的变化及其与抗病毒疗效的关系.方法 35例符合干扰素治疗指征的慢性乙型肝炎患者,分别给予IFN α-2b300万U,肌内注射,每周3次,疗程12周.治疗前后化学比色法测定患者血清丙二醛和总抗氧化能力指标的变化,同时在治疗过程中定期复查患者肝功、胆红素、血常规、HBV DNA及病毒标志物的变化,核酸杂交-酶联免疫吸附法测定乙肝病毒基因分型,18例健康人作为正常对照.结果 慢性乙型肝炎患者血清丙二醛浓度明显高于健康对照组(P<0.05),总抗氧化能力明显低于健康对照组(P<0.05).不同基因型患者血清丙二醛水平及总抗氧化能力无显著差别(P>0.05).干扰素治疗后患者血清丙二醛水平明显低于治疗前水平(P<0.05),无效组治疗后的丙二醛浓度仍高于健康对照(P<0.05).干扰素治疗前有效组的血清总抗氧化能力明显高于无效组(P<0.05),治疗后血清总抗氧化能力明显升高(P<0.05).结论 IFNα-2b治疗可以明显改善慢性乙型肝炎患者的氧化.抗氧化损伤平衡障碍,抗病毒治疗中适当应用抗氧化剂可能有助于提高临床疗效.

    作者:范玉琛;王凯;韩利岩;李心河;王惠敏;王磊一;侯云德 刊期: 2007年第01期

  • 两种实验方法检测乙型肝炎病毒前C区A1896变异的比较研究

    目的 建立错配PCR-限制性片段长度多态性(mPCR-RFLP)检测乙型肝炎病毒(HBV)前C区A1896变异的方法,与直接测序法比较,评估其应用价值.方法 利用错配PCR的原理扩增HBV前C区长194 bp的基因片段,扩增产物经限制性内切酶Bsu36I酶切,琼脂糖凝胶电泳,根据酶切图谱多态性,建立检测HBV前C A1896变异的方法,对134份乙肝患者血清进行分析,酶切同时测序.2份标本用克隆测序以验证酶切鉴定变异株、野株混合感染的准确性.结果 134份血清中117(87.31%)份能用酶切、109(81.34%)份能用测序成功分析HBV前C A1896状况.酶切与测序均成功的10l份血清中,54份为前C区A1896变异株,47份为前C区G1896野株,酶切与测序的结果完全一致.1份酶切鉴定为单纯前C区A1896变异株的5个克隆子均为前C区A1896变异株;1份酶切鉴定为混合感染标本的5个克隆子中,1个为前C区A1896变异株,另外4个为前C区G1896野株.酶切分析结果与克隆测序结果完全相符.结论 与测序法相比,本方法简便、特异性强,能鉴定混合感染,适合大样本分析,可用于临床及流行病学调查.

    作者:刘悦晖;丁静娟 刊期: 2007年第01期

  • 乙型肝炎患者胆囊黏膜中的HBsAg检测及其临床意义

    目前的研究已经表明了乙型肝炎病毒具有泛噬性,即不仅存在于肝组织中,病毒还可侵袭到不同的组织和器官中,已有报道肝炎患者的心肌、肾脏、胰腺、精细胞、前列腺、唾液腺、肝内胆管细胞、骨髓细胞和外周血单个核细胞中均存在乙型肝炎病毒抗原.

    作者:杨丽华;龚作炯;唐智娇 刊期: 2007年第01期

  • 小儿慢性丙型肝炎外周血T细胞亚群和TH1/TH2型细胞因子的研究

    目的 通过研究小儿慢性丙型肝炎外周血T细胞亚群及TH1/TH2型细胞因子的表达,进一步探讨小儿慢性丙型肝炎的免疫发病机制.方法 (1)流式细胞仪(FACS)检测16例慢性丙型肝炎患儿及10例正常对照外周血T细胞亚群.(2)将慢性丙型肝炎患儿和正常对照外周血单个核细胞(PBMC)体外培养72 h后,用ELISA法检测培养上清中THl型细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-12和TNF-γ)和TH2型细胞因子(IL-4、IL-10)的浓度.结果 (1)CD4+细胞无明显变化.CD8+细胞与正常对照比较明显升高(P<0.05).CD3+细胞升高,CD4+/CD8+比值下降,但与正常对照比较无统计学意义(P>0.05).(2)PBMC培养上清中IFN-γ、IL-10和TNF-α的水平明显升高(P<0.01),而没有检测到IL-2、IL4、IL-12的基础分泌.结论 慢性丙型肝炎患儿体内T淋巴细胞存在数量和功能的异常,CD8+细胞数升高,CD4+细胞功能异常,表现在以TH2型细胞因子的分泌为主.这可能与丙肝病毒(HCV)感染的慢性化有关.

    作者:董漪;张鸿飞;陈昊;李靖;杨晓晋;朱世殊;程云 刊期: 2007年第01期

中华实验和临床病毒学杂志

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主管:实验和临床病毒学杂志

主办:中国科学技术协会