学术投稿

反式激活蛋白转导结构域介导绿色荧光蛋白在小鼠体内的跨膜转运

王海珍;许予明;陈奎生;李惠翔;张红新;杨静;张云汉

关键词:TAT, 蛋白转导域, 融合蛋白, 小鼠
摘要:目的 探讨HIV-1反式激活蛋白(TAT)的蛋白转导结构域(PTD)介导绿色荧光蛋白(EGFP)在小鼠体内的跨膜转运作用.方法 采用PCR及克隆技术构成表达载体pET28a-TAT-EGFP,在大肠杆菌中表达TAT-EGFP融合蛋白,将纯化后的融合蛋白注入小鼠尾静脉,取脑、心肌、肝、脾和肾等器官冰冻切片,荧光显微镜下观察融合蛋白在组织中的分布.结果 表达和纯化了分子量为28KD的TAT-EGFP融合蛋白,在小鼠的肝、心肌、脑、肾和脾等组织切片荧光检测呈阳性.结论 TAT可介导EGFP在广泛组织内的跨膜转导,这一研究为外源活性大分子物质进入组织细胞提供了一个新的途径.
中国现代医学杂志相关文献
  • 显微手术治疗矢状窦旁脑膜瘤

    目的 总结矢状窦旁脑膜瘤的手术处理方法.方法 对36例矢状窦旁脑膜瘤及受累矢状窦进行切除,依具体情况重建或不重建矢状窦.结果 该组病人无手术死亡,手术后均未加重原有神经功能障碍,无脑血液回流障碍,3例重建矢状窦者未发现有矢状窦内血栓形成.结论 矢状窦旁脑膜瘤的治疗除肿瘤切除外,对受累上矢状窦处理是否彻底对预防术后复发是至关重要的.

    作者:喻孟强;蒋宇钢;张凌云 刊期: 2007年第10期

  • 聚醚砜膜对星形胶质细胞生物学行为的影响

    目的 研究聚醚砜膜对星形胶质细胞(AST)生长、存活增殖及分泌神经营养因子的影响.方法 取小鼠皮层组织进行AST原代培养,传代纯化培养后分为3组:A普通培养板组;B聚醚砜膜组;C层粘连蛋白包被膜组,观察和比较细胞形态学、细胞存活增殖能力的变化,同时测定培养基中神经生长因子(NGF)、脑源性生长因子(BDNF)含量.结果 在原代和传代培养期,聚醚砜膜上培养第3天后的AST细胞数较其他组明显减少(p<0.05).在传代培养期,3组的细胞存活增殖能力均在第7天后逐渐衰退,分泌NGF和BDNF的能力也呈相同的下降趋势,聚醚砜膜组AST的变化较另外2组的变化更为明显(P<0.05).结论 聚醚砜膜对星形胶质细胞的存活增殖有一定抑制作用,并降低AST分泌NGF和BDNF的能力,层粘连蛋白可在一定程度上减轻聚醚砜膜对AST功能的抑制作用.

    作者:严稽文;黄其林 刊期: 2007年第10期

  • 氧驱动雾化吸入治疗婴幼儿哮喘急性发作临床研究

    目的 探讨治疗儿童哮喘、缓解支气管痉挛、迅速解除缺氧状态的方法,验证氧驱动雾化吸入法的疗效.方法 将147例婴幼儿哮喘患儿,随机分成2组,治疗组81例,对照组66例.将治疗组、对照组随机分别分为3组.在综合治疗的基础上,各组分别给予1、2、3号雾化液吸入,治疗组各组采用氧驱动雾化装置+面罩给药,对照组各组予以超声雾化方式吸入治疗,比较两种雾化方式的治疗效果.结果 治疗组喘憋、缺氧状态及肺部哮鸣音较对照组明显改善,治疗组总有效率87.6%;对照组总有效率71.2%,疗效比较差异有显著性(P<0.05).3号雾化液疗效佳,与1号雾化液疗效比较差异有显著性(P<0.05).结论 氧驱动雾化吸入是治疗儿童哮喘的安全有效可靠的方法之一,β 2受体兴奋剂与糖皮质激素协同雾化作用疗效佳.

    作者:宋一萍;韩彦彦;梁旭;杨玮;郭红梅 刊期: 2007年第10期

  • 为培养研究生创新能力建设适宜环境

    环境对人的成长影响很大.研究生教育是高等教育的高层次,是国家创新体系中的重要组成部分.营造适宜环境,培养研究生创新能力是高等教育界十分关注的话题.该文从学校环境、社会环境对培养研究生创新能力进行了阐述,指出打牢基础,启迪智慧,是培养研究生创新能力的重要条件.

    作者:程仕平;张红 刊期: 2007年第10期

  • 小剂量丝裂霉素膀胱灌注预防膀胱癌术后复发

    目的 探讨小剂量丝裂霉素膀胱灌注预防膀胱癌术后复发的疗效及安全性.方法 回顾性分析104例接受保留膀胱术式治疗的膀胱癌患者临床资料,其中62例接受小剂量丝裂霉素素C(4mg/次)膀胱灌注治疗,42例接受标准剂量(40mg/次)膀胱灌注治疗.随访时间5年.结果 两组术后5年复发率差异无显著性,但小剂量膀胱灌注疗法并发症远少于后者.结论 小剂量丝裂霉素C可以有效地预防膀胱癌术后复发,同时减少了细胞毒性药物膀胱灌注的副作用,是一种安全、有效的预防膀胱癌术后复发的治疗手段.

    作者:何毅;李映川;杨海帆 刊期: 2007年第10期

  • 大肠癌和大肠腺瘤COX-2和BFGFR的表达及意义

    目的 研究COX-2和BFGFR在大肠癌及大肠腺瘤组织中的表达及意义.方法 采用SP免疫组化方法检测49例手术切除的大肠癌及25例大肠腺瘤性息肉,20例正常大肠黏膜标本组织中的COX-2、BFGFR表达.结果 COX-2、BFGFR在大肠癌中的表达阳性率分别为59.2%和65.3%,COX-2、BFGFR在腺瘤性息肉的表达率为52.0%和60.0%,COX-2、BFGFR在肠癌组织与腺瘤性息肉中表达均差异无显著性(P>0.05);正常肠黏膜中未检出COX-2、BFGFR.COX-2、BFGFR在大肠癌中表达与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤位置和分化程度无关(P>0.05).但与肿瘤Dukes分期和淋巴结转移之间具差异有显著性(P<0.05).大肠癌组织中COX-2、BFGFR表达两者间无相关性(P>0.05).结论 COX-2、BFGFR在大肠癌组织及大肠腺瘤中的表达水平增高,在大肠腺瘤恶变及大肠癌的发生发展过程中起重要作用,大肠癌组织中的COX-2、BFGFR表达无相关性.

    作者:韦良宏;林瑶光 刊期: 2007年第10期

  • 可调钠与超滤曲线模式透析在水负荷过多患者血透中临床观察

    目的 探讨联合应用可调钠与超滤曲线对长期血液透析水负荷过多患者的价值.方法 选择透析时间>5个月、透析间期体重增加>3.5 kg患者20例,每例患者先进行标准血液透析(SD),后采用钠及超滤曲线呈线型下降模式透析(SP+UP)各10次,观察记录每例患者每次血液透析中低血压、头晕恶心呕吐、肌肉痉挛发生频率,并监测后3次血透前后血钠浓度的改变.结果 SP+UP组低血压、肌肉痉挛发生频率均明显小于SD组,而血钠浓度的改变与SD组差异无显著性.结论 可调钠和超滤曲线联合使用能有效减少水负荷过多血液透析患者低血压、肌肉痉挛的发生.

    作者:许少英;李绪城;庄妙华 刊期: 2007年第10期

  • 肾移植术后并发输尿管结石1例报告

    1 临床资料患者,女性,46岁,因慢性肾功能不全尿毒症期于2004年4月在我院行同种异体肾移植术,术前配型良好,供受者ABO血型相同.术中常规留置输尿管支架管,2周后拔除.

    作者:张钢;蔡明;廖利民 刊期: 2007年第10期

  • 探讨不同手术方式对于慢性硬膜下血肿术后复发的影响

    目的 探讨不同手术方式对于CSDH患者术后血肿复发的影响.方法 回顾性分析142例CSDH患者的临床及神经影像学特征、手术方式及术后复发的关系.结果 142例患者均采用手术治疗,术后13例复发中,2例术前服用阿司匹林类药物.术前CT表现为高密度或混杂密度20例,表现为等密度46例,表现为低密度76例;双侧血肿14例;锥钻引流术38例,钻孔引流术90例.结论 锥钻引流术与钻孔引流术都是治疗慢性硬膜下血肿的有效方法,两者术后复发率无明显差异(0.50>P>0.25);开颅血肿清除术后复发率低.

    作者:龙洪;兰松 刊期: 2007年第10期

  • 肺爆震伤的临床救治(附16例报告)

    目的 探讨肺爆震伤的临床特点,总结诊疗中的经验教训.方法 对16例病人的临床表现、治疗措施及疗效进行归纳分析.结果 治愈14例,死亡2例,2例均死于多器官功能衰歇.结论 早期诊断、及时介入呼吸机辅助呼吸是纠正低氧血症、修复肺实质损伤、降低全身性炎性反应的关键,综合治疗有较好的效果.

    作者:王明海;杨文宇;谭挺;孙建忠;杨苓山;吴劲 刊期: 2007年第10期

  • 螺旋CT肺血管造影结合血浆D-二聚体分析对肺栓塞的诊断价值

    目的 探讨螺旋CT肺血管造影结合血浆D-二聚体(dimer)分析在肺栓塞(PE)诊断中的临床价值.方法 疑有PE的患者104例进行肺螺旋CT肺血管造影和血浆D-二聚体分析.以临床诊断为依据,分别评价肺螺旋CT肺血管造影、D-二聚体分析及螺旋CT肺血管造影结合D-二聚体分析对PE的诊断价值.结果 44例确诊为PE,60例排除PE.肺螺旋CT肺血管造影对86例(82.17%)明确诊断,另18例(17.13%)为非确定性诊断.螺旋CT肺血管造影诊断PE的灵敏度、特异性分别为88.6%、95.5%.血浆D-二聚体分析诊断PE的灵敏度、特异性分别为95.5%、63.3%.以D-二聚体<500 mg/L作为螺旋CT肺血管造影中非确定性诊断病例排除PE的依据,则诊断的特异性和准确性分别提高到88.9%和86.4%.结论 在螺旋CT肺血管造影出现非确定性诊断结果时,血浆D-二聚体测定可作为排除PE的依据,结合血浆D-二聚体测定可提高诊断的特异性和准确性.

    作者:李双保;唐华平;张明泳;王红梅;郝月琴;郝万明 刊期: 2007年第10期

  • 睾酮对损伤的血管组织血管细胞黏附分子-1的表达和内膜增殖的影响

    目的 观察内外源性睾酮对球囊损伤的血管组织血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)的表达和内膜增殖的影响.方法 30只雄性家兔随机等分为替代组、单纯去势组和对照组,前两组动物行去势术(切除双侧睾丸和附睾),后一组动物行相应假手术;均于去势术后2周行右侧髂动脉内皮剥脱术,替代组同时给予十一酸睾酮.脱内皮术后2周将动物处死,取损伤血管段,应用免疫组织化学法观察血管组织VCAM-1的表达、应用HE染色观察血管病理形态的变化.结果 与单纯去势组和对照组相比,替代组脱内皮术后2周损伤血管组织VCAM-1表达明显增强[(0.3465±0.0084)vs(0.3109±0.0056)及(0.3180±0.0099),分别P<0.001和0.01],损伤血管内膜面积和内膜/中膜面积比值明显增大[(1.65±0.39)mm2 vs(0.65±0.18)mm2及(0.75±0.21)mm2,(0.92±0.20)vs(0.38±0.07)及(0.43±0.09),均P<0.01],而前两组之间上述指标相比差异无显著性栽(均P>0.05).结论 雄性兔去势后补充该实验剂量的外源性睾酮可促进损伤的血管组织表达VCAM-1和促进内膜增生,而内源性睾酮水平短时降低对损伤血管组织VCAM-1的表达和内膜增生无影响.

    作者:赵子牛;付海霞;许家琍;蒋锡嘉;李庚山 刊期: 2007年第10期

  • 反式激活蛋白转导结构域介导绿色荧光蛋白在小鼠体内的跨膜转运

    目的 探讨HIV-1反式激活蛋白(TAT)的蛋白转导结构域(PTD)介导绿色荧光蛋白(EGFP)在小鼠体内的跨膜转运作用.方法 采用PCR及克隆技术构成表达载体pET28a-TAT-EGFP,在大肠杆菌中表达TAT-EGFP融合蛋白,将纯化后的融合蛋白注入小鼠尾静脉,取脑、心肌、肝、脾和肾等器官冰冻切片,荧光显微镜下观察融合蛋白在组织中的分布.结果 表达和纯化了分子量为28KD的TAT-EGFP融合蛋白,在小鼠的肝、心肌、脑、肾和脾等组织切片荧光检测呈阳性.结论 TAT可介导EGFP在广泛组织内的跨膜转导,这一研究为外源活性大分子物质进入组织细胞提供了一个新的途径.

    作者:王海珍;许予明;陈奎生;李惠翔;张红新;杨静;张云汉 刊期: 2007年第10期

  • 移动远程医疗系统的研究

    介绍一种移动远程医疗系统的实现方法.将数据视频、音频终端设备通过WiFi(IEEE802.11b)网络与移动路由器联接,移动路由器通过多重化CDMA数据通道,经由移动通讯网关连结到数据中心服务器上.通过数据中心服务器指派分配与医护人员形成互动机制,完成移动远程医疗数据交互.

    作者:郑兵;宋福群 刊期: 2007年第10期

  • 关于长学制医学生早期从事科研工作的理论与实践

    创新是知识经济的灵魂.高等医学教育对于医学生创新意识与创新能力的培养负有义不容辞的责任.该文通过对中美医学生培养模式的比较,根据我国国情提出长学制医学生早期从事科研工作的理论,并对这一理论进行实践方面的探讨.

    作者:谷蔚琼 刊期: 2007年第10期

  • 99mTc-DTPA-DG对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响

    目的 观察99mTc-DTPA-DG对人乳腺癌MCF-7细胞DNA合成的影响,探讨99mTc-DTPA-DG作为一种分子显像剂评价肿瘤的疗效.方法 采用一步法合成99mTc-DTPA-DG,培养人乳腺癌MCF-7细胞,分别加入不同浓度的DTPA-DG、FDG和DG(每毫升生理盐水中分别加入DTPA-DG、FDG和DG为5mg,25 mg及50 mg),干预24 h后,掺入3H-TdR6 h,检测3种药物是否参与人乳腺癌MCF-7细胞DNA的合成,比较不同的浓度下细胞的摄取率,以及不同药物对细胞增殖的影响.结果 DTPA-DG及DG均掺入人乳腺癌MCF-7细胞的增殖,DTPA-DG组摄取率高于DG组和FDG组(n=4,P<0.00),且浓度为0.5 mg时3H-TdR摄取率高.FDG随着时间的延长和浓度的升高,摄取率逐渐下降,可能不掺入细胞核或者产生了细胞毒性.结论 99mTc-DTPA-DG能够参与肿瘤细胞的增殖,反映细胞核的活性,可以作为一种分子显像剂评价肿瘤的疗效.

    作者:赵燕凌;陈跃;范旗;何菱;李举联 刊期: 2007年第10期

  • 上腹部不适患儿幽门螺杆菌感染类型研究

    目的 了解以上腹部不适就诊的14岁以下患儿幽门螺杆菌(Hp)的感染情况,探讨应用免疫印迹法分型诊断儿童Hp感染的临床意义.方法 采取705例以上腹部不适就诊患儿的静脉血,应用免疫印迹法进行Hp抗体谱带分析,分型诊断Hp感染.当检出有与Hp细胞毒相关蛋白A(CagA)和(或)空泡毒蛋白A(VacA)相关的抗128、116、95、和91 kD蛋白抗体时,Hp的感染类型定为Ⅰ型;仅有与Hp尿素酶和鞭毛蛋白相关的抗30、66、50和54 kD蛋白抗体时,Hp的感染类型定为Ⅱ型.结果 共检出Hp抗体阳性468例,总阳性率为66.38%,其中Ⅰ型Hp占44.87%,Ⅱ型Hp占55.13%.共有63例患儿经内镜检查明确诊断患有消化性溃疡,其中的Hp抗体总阳性率为84.54%,Ⅰ型Hp抗体总阳性率为82.54%,比未被诊断为消化性溃疡患儿的64.50%和24.61%均显著增高.结论 利用免疫印迹法可方便地对儿童Hp感染进行血清学分型诊断;Hp感染在腹部不适的患儿中较为普遍,尤其是在消化性溃疡患儿中;Ⅰ型Hp感染与消化溃疡的关系更为密切,应进行根除治疗.

    作者:杨光;李鸣;何伟真;崔金环;谭家驹 刊期: 2007年第10期

  • Flavopiridol抑制尤文肉瘤WE-68细胞增殖的实验研究

    目的 以人尤文肉瘤细胞系WE-68为实验对象,探讨flavopiridol在体内外抑制尤文肉瘤细胞增殖的机制.方法 MTT法观察生长抑制效应;流式细胞术及DNA凝胶电泳检测细胞凋亡;western免疫印迹法测定bcl-2、bcl-xl、bax和mcl-1基因的表达.建立WE-68细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察肿瘤的生长情况,肿瘤标本石蜡切片,TUNEL染色法检测体内肿瘤细胞的凋亡诱导情况.结果 flavopiridol可显著抑制WE-68细胞增殖,且剂量-效应,时间-效应关系.WE-68细胞经flavopiridol处理后可发生凋亡.Flavopiridol能显著下调md-1的表达,但对bcl-2、bd-xl和XIAP表达无影响.结论 flavopiridol在体内外可显著抑制尤文肉瘤WE-68细胞生长并诱导凋亡,其机制可能与降低mcl-1蛋白表达有关.

    作者:李旭;范姝丽;李岩;范广宇;朱悦;屠冠军 刊期: 2007年第10期

  • 大鼠胰腺不同发育时期胰岛素分泌相关基因的表达

    目的 探讨与胰岛素分泌相关基因在大鼠发育不同阶段的表达趋势.方法 采用高密度寡核苷酸芯片和RT-PCR技术对孕12.5 d(E12.5)、E15.5 d(E15.5)、E18.5 d(E18.5)初生和成年大鼠胰腺进行基因转录水平分析.结果 在大鼠发育不同阶段胰岛素mRNA持续表达;调控胰岛素基因表达的相关转录因子多在E12.5或E15.5开始表达(分别占60%和20%);与胰岛素分泌相关的基因多在胚胎发育中后期开始表达(占66.7%),其中基因Rim1在胰腺发育不同时期呈现差异表达,于初生期达到表达高峰.结论 胚胎发育中后期是胰腺内分泌部发育的关键阶段.

    作者:郭静;袁庆新;刘莉洁;滕丽萍;张永玲;程梅;蔺扬波;德伟 刊期: 2007年第10期

  • POEMS综合征临床分析

    目的 探讨POEMS综合征的临床特点和诊断,减少误诊发生.方法 回顾性分析5例pOEMS综合征患者的一般资料、临床表现、辅助检查、治疗及预后.结果 5例患者中分别有多发性神经病、脏器肿大、内分泌病、异常蛋白血症和皮肤病变.5例患者对激素治疗均有一定疗效,死亡2例.结论 POEMS综合征为多系统病变,临床表现复杂多样,对原因不明的多发性神经病变伴肝脾肿大及水肿的患者,应考虑POEMS综合征的可能,需进一步检查,明确诊断.

    作者:吕海东;秦东香;张三军;马晓丽;钱琪;韩凯;宋学云;杨斌 刊期: 2007年第10期

中国现代医学杂志

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主管:中华人民共和国教育部

主办:中南大学,中南大学肝胆肠外科研究中心