学术投稿

尼龙毛分离纯化正常人外周血T淋巴细胞

彭红伟;程浪;王强强;王萍

关键词:尼龙毛, MTT法, 流式细胞仪
摘要:目的:建立尼龙毛分离纯化人外周血T淋巴细胞的方法,并探讨其增殖活性。方法密度梯度离心法分离正常人外周血单个核细胞,以尼龙毛分离出T细胞,使用流式细胞仪鉴定细胞纯度、回收率;MTT法检测细胞增殖活性。结果尼龙毛法分离后T淋巴细胞纯度为(70.70±3.45)%,稍高于分离前(66.71±5.47)%(t=1.746,P>0.05)。回收率为(42.4±6.95)%,用植物血凝素(PHA)刺激分离后的T淋巴细胞的刺激指数(SI)为(1.80±0.27)。结论在细胞生物学研究中,尼龙毛分选T淋巴细胞纯度不高,PHA刺激T淋巴细胞的增殖性较强。
热带医学杂志相关文献
  • 山东省医务人员对乙肝母婴传播阻断措施认知情况及影响因素

    目的:了解山东省医务人员对乙型肝炎病毒(HBV)母婴传播阻断措施认知情况及影响因素。方法采用整群随机抽样方法,于2014年5-7月对山东省5个地区的医务人员725人进行调查,发放“预防乙肝母婴传播知识调查表”,调查其对HBV母婴传播相关知识的知晓情况。调查内容包括:医务人员的基本情况、HBV母婴传播相关知识。结果参与调查的医务人员共725人,获得有效问卷721份,有效率为99.45%。接受调查的医务人员对HBV母婴传播相关知识知晓率为51.18%(369/721)。不同机构、不同级别机构、不同文化程度、不同专业类别的医务人员对HBV母婴传播阻断措施知晓率差异有统计学意义(P<0.05),而不同性别、年龄、职称、民族的医务人员知晓率差异无统计学意义(P>0.05)。多因素Logistic分析结果显示,调整了不同机构和文化程度的因素后,机构级别、专业类别均影响医务人员对HBV母婴传播阻断措施的知晓结果。结论医务人员对HBV母婴传播阻断措施知晓率普遍较低。应加强广大基层医务人员,尤其是保健人员对HBV母婴传播阻断措施相关知识和技能的培训。

    作者:李庆彦;刘春华;谷金君;李庆方;王思奎 刊期: 2016年第01期

  • 2013-2014年新疆某医院血液科感染病原菌分布

    目的:对血液科住院患者中病原微生物检出率进行分析,了解病原菌分布情况,为临床防治提供科学依据。方法对2013-2014年从血液科住院患者中临床分离出的病原菌分布进行回顾性调查分析。结果2303例患者中临床分离出病原菌220株。感染病原菌以革兰阴性杆菌为主(47.27%),其次是革兰阳性菌(38.18%)和真菌(14.55%)。在不同的标本中革兰阴性菌、革兰阳性菌、真菌的检出率不一,血培养及痰培养的阳性率较高。结论血液病患者合并感染病原菌以革兰阴性杆菌为主,应采取综合性的治疗措施,有效降低医院感染的发生。

    作者:古力巴旦木·艾则孜;曹海洲;陈刚;袁海龙 刊期: 2016年第01期

  • 两种手术治疗对精索静脉曲张患者免疫及预后的影响

    目的:探讨两种手术治疗对精索静脉曲张患者血清免疫球蛋白浓度及预后的不同影响,为精索静脉曲张治疗方法的选择提供依据。方法将88例原发性精索静脉曲张患者根据手术方法分为显微镜组(n=44)和腹腔镜组(n=44)。比较两组疗效、手术时间、术后住院时间、围术期血清免疫球蛋白浓度、并发症发生及术后12个月的复发情况。结果显微镜组手术时间为(54.69±8.59)min,长于腹腔镜组的(35.97±7.15)min,差异有统计学意义(P<0.05)。与腹腔镜组比较,显微镜组T2和T3的血清免疫球蛋白浓度升高,差异有统计学意义(P<0.05)。显微镜组并发症总发生率和术后12个月复发率分别为2.27%和2.27%,均低于腹腔镜组的20.45%和18.18%(P<0.05)。结论显微镜下行精索静脉高位结扎术治疗精索静脉曲张可更有效提高患者免疫功能和改善其预后,可行性和安全性较高,值得临床推广使用。

    作者:何平胜 刊期: 2016年第01期

  • D-二聚体与超敏C反应蛋白在急性主动脉夹层早期诊断中的意义

    目的:探讨D-二聚体与超敏C反应蛋白(hs-CRP)在急性主动脉夹层(AAD)早期诊断中的意义及对预后判断的价值。方法选取2014年3月至2015年3月期间兰州军区总医院收治的70例AAD病例,记录分别在发病<6 h、6~12 h、1 d、3 d、手术中、术后1 d、术后2 d及术后7 d时的D-二聚体和hs-CRP水平,并分析两者在AAD早期诊断中监测的意义及对预后判断的作用。结果 De Bakey I型AAD患者的hs-CRP、D-二聚体水平均显著高于De BakeyⅡ型和De BakeyⅢ型[hs-CRP:(109.34±46.81)mg/L vs (75.63±39.84)mg/L vs (69.55±35.27)mg/L,D-二聚体:(2.82±0.89)mg/L vs (1.19±0.48)mg/L vs (0.77±0.26)mg/L],差异有统计学意义(P<0.05);De Bakey Ⅱ型与De Bakey Ⅲ型之间的CRP及D-二聚体浓度比较差异无统计学意义(P>0.05)。发病后D-二聚体及hs-CRP水平均明显上升,hs-CRP在发病12 h后开始上升,D-二聚体在12 h内开始上升,两者均在术后3 d达到高峰,术后7 d明显降低;D-二聚体和hs-CRP水平无并发症组患者显著低于并发症组(P<0.05),非死亡组显著低于死亡组(P<0.05)。结论 hs-CRP和D-二聚体水平监测有利于AAD早期的鉴别诊断,与AAD患者的生存时间相关。

    作者:焦丕奇 刊期: 2016年第01期

  • 登革热的实验室早期诊断

    目的:建立登革热实验室早期诊断方法。方法采用酶联免疫吸附试验( ELISA )检测登革病毒( DENV ) NS1抗原,实时聚合酶链反应( Real-time PCR )检测DENV RNA 并分型,对2014年广东省暴发流行期间疑似登革热的病例进行实验室早期诊断,并对两种检测方法进行比较分析。结果272例研究对象中267例临床诊断为登革热, DENV NS1抗原阳性245例,阳性率为90.1%(245/272);DENV RNA阳性256例,阳性率为94.1%(256/272)。256例核酸阳性病例中DENV-1型224例,占87.5%(224/256);DENV-2型15例,占5.9%(15/256);DENV-1型和DENV-2型同时阳性17例,占6.6%(17/256)。两种方法检出的符合率为93.0%(253/272)。结论2014年广东省登革热暴发流行主要以DENV-1为主,同时存在DENV-2型散在流行及少数DENV-1型和DENV-2型合并感染;ELISA方法检测DENV NS1抗原及Real-time PCR检测DENV RNA的两种检测方法,有助于登革热的早期检出。

    作者:李玉枝;平岖;赵令斋;雷杨;洪文昕;胡凤玉;张复春;唐漾波 刊期: 2016年第01期

  • 新型载阿霉素纳米粒子制备及其性能研究

    目的:制备新型载阿霉素纳米粒子,观察其理化性能,研究其对乳腺癌MDA-MB231细胞凋亡及在裸鼠体内的抑瘤作用,为三阴性乳腺癌的治疗提供依据。方法制备右旋糖苷纳米粒子,构建EGFR-Dextran-DOX纳米材料, Hoechst33258荧光染料及ELISA实验检测MDA-MB231细胞凋亡。将裸鼠随机分为4组,作相应处理后分别注射磷酸缓冲盐溶液(PBS)、阿霉素(DOX)、Dextran-DOX及EGFR-Dextran-DOX,测量各组瘤体大小。结果 EGFR-Dextran-DOX纳米粒子大小均一,平均粒径98 nm,包封率为77.0%,载药量9.8%。pH值越低,EGFR-Dextran-DOX纳米粒子DOX释放率越高。 EGFR-Dextran-DOX处理组的细胞凋亡率及在裸鼠体内的抑瘤作用高于DOX和Dextran-DOX组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功制备EGFR-Dextran-DOX纳米粒子,制备的纳米粒对三阴性乳腺癌具有靶向抑制作用。

    作者:朱婷;谢妮;刘丽桃;姚雨江;方周宾;万丽丽 刊期: 2016年第01期

  • 人3型腺病毒纤突的原核表达及其免疫原性分析

    目的:克隆表达人3型腺病毒(HAdV-3)的纤毛蛋白纤突片段(knob),分析其免疫原性,为腺病毒临床诊断试剂及新型疫苗的研发奠定基础。方法 PCR扩增knob基因片段,克隆到表达载体pGEX-4T-3中进行诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表达产物,包涵体溶解复性后亲和层析纯化融合蛋白,Western blot鉴定,纯化的蛋白免疫小鼠制备抗血清,间接ELISA法检测小鼠血清的效价,Western blot鉴定抗血清特异性。结果成功构建了重组原核表达质粒pGEX-Ad3 knob,其在大肠杆菌中高效表达并纯化重组knob融合蛋白,融合蛋白免疫小鼠抗血清效价高达107, Western Blot证实此抗血清可识别人3型腺病毒纤维蛋白。结论成功获得了重组HAdV-3 knob蛋白,其具有强免疫原性,可以作为研发人3型腺病毒入侵机制研究、诊断试剂及疫苗研发的原料。

    作者:蒋再学;王芳;田新贵;朱蔚云;苏晓波 刊期: 2016年第01期

  • 两种不同生物补片对感染性腹壁缺损患者的疗效

    目的:探讨两种不同生物补片治疗感染性腹壁缺损患者的效果。方法将37例感染性腹部缺损患者采用随机数字表法分为治疗组(n=18)和对照组(n=19),治疗组使用猪小肠黏膜下层(SIS)生物补片治疗,对照组使用人体真皮脱皮细胞基质(HDM)补片治疗,观察两组患者的治疗效果和并发症发生情况。结果治疗组患者疼痛评分、住院时长和引流管保留时长明显优于对照组,差异有统计学意义(t=9.224、18.486、13.632,P均<0.05)。治疗组皮下积液和感染的发生率明显低于对照组,差异有统计学意义(χ2=5.482、4.251,P均<0.05);腹壁疝、腹壁膨出、瘘、肠梗阻发生率两组差异不明显(χ2=3.324、2.931、3.324、3.057,P>0.05)。对两组患者进行3-6个月随访,治疗组的复发率为11.11%(2/18),对照组的复发率为26.32%(5/19),差异无统计学意义(χ2=2.931,P>0.05)。结论 SIS生物补片临床应用效果较好,值得推广。

    作者:孙锋;吴雪松;黄明;雒海波;唐浩然 刊期: 2016年第01期

  • 2005-2014年南昌市输入性疟疾流行特征分析

    目的:分析南昌市近10年疟疾流行的特点,为制订疟疾防制策略提供依据。方法收集全市2005-2014年间疟疾疫情资料、个案调查表,描述流行病学方法分析疟疾病例在时间、地区和人群中的分布特点。结果2005-2014年南昌市共发现疟疾112例,其中男110例,女2例。平均年发病率为0.2287/10万,其中2005-2011年间发病率呈上升趋势(χ2=18.426,P<0.01),2011-2014年间发病率差异无统计学意义(χ2=3.038,P=0.386)。输入性疟疾病例为108例,占总病例数的96.43%,本地复发病例4例,其中2例为间日疟。按发病地区分,前3位依次是青山湖区、进贤县和南昌县,分别为33、24和17例,西湖区、东湖区、青云谱区、新建县和湾里区分别为14、9、9、5和1例。病例主要集中在20~49岁年龄组,占总病例数的79.46%(89/112)。全年每月均有病例报告,无明显季节性。职业分析发现,往来非洲、东南亚等疟疾高发地区的务工人员(农民、工人和民工)为高危人群,分别占总病例数的25.0%(28/112)、23.2%(26/112)和11.6%(13/112)。结论输入性疟疾占南昌市疟疾病例的绝大多数,应作为今后疟疾防治工作的重点。

    作者:付仁龙;彭国华;胡主花 刊期: 2016年第01期

  • Kin17在宫颈癌中的表达及意义

    目的:探讨Kin17在宫颈鳞状细胞癌及癌前病变组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学方法(Envision法)检测宫颈鳞状细胞癌(SCC)患者(n=88)、宫颈高级别上皮内病变(HSIL)患者(n=8)、宫颈低级别上皮内病变(LSIL)和慢性宫颈炎患者(n=16)中Kin17的表达情况。结果 SCC组、HSIL组和LSIL及慢性宫颈炎组的Kin17阳性表达率分别为72.72%(64/88)、37.50%(3/8)和18.75%(3/16),SCC组阳性表达率明显高于HSIL组、LSIL和慢性宫颈炎组(P<0.05);Kin17表达与SCC患者淋巴结转移相关(P<0.05),即有淋巴结转移组中Kin17表达明显高于无淋巴结转移组;而与患者年龄、FIGO分期、肿瘤分化程度无相关性(P>0.05)。结论 Kin17在宫颈癌的异常表达可能与肿瘤的发生、发展有关,检测Kin17蛋白表达水平可作为监测宫颈癌发生的辅助手段之一。

    作者:陈娜;郜红艺;吴坤河;饶金;方良欣 刊期: 2016年第01期

  • Brugada综合征研究进展

    Brugada综合征是一种有遗传倾向的以恶性心律失常为主要表现的综合征,由于编码心脏Na离子通道的基因(SCN5A)突变而发病。1992年Brugada兄弟描述其特征性心电图表现,之后发现该疾病又有夜间猝死这一凶险的预后,因此一直是心血管疾病基础和临床研究领域内的一大前沿和焦点。本文就BS的流行病学、遗传基础及细胞学机制和心电图特征等方面新研究进展作一综述。

    作者:李俊强;王国林;宁金民 刊期: 2016年第01期

  • 新会区流动人口预防接种知识知晓现状调查

    目的:了解新会区流动人口对预防接种相关知识知晓、态度及影响因素,为做好流动人口的预防接种工作提供技术参考。方法采用拦截偶遇抽样,采样专门调查问卷,现场调查240名儿童监护人,数据用Data3.1录入,用SPSS17.0进行统计分析,比较不同人群特征对预防接种知识的掌握情况,分析预防接种各知识点的掌握情况。结果流动人口预防接种知识得分84.64,不同性别监护人国家免疫规划知识回答得分差异无统计学意义(χ2=1.456, P>0.05)。高学历监护人比低学历的知晓率高,正规医疗机构出生比非正规医疗机构出生儿童的监护人的知晓率高,高收入监护人比低收入的知晓率高,不同学历、不同出生地点和不同收入的流动人口知晓情况差异均有统计学意义(χ2=20.437,P<0.01;χ2=9.071,P<0.01;χ2=5.088,P<0.01)。结论选择合适低收入、低学历人群的预防接种宣传方式,提高流动人口对预防接种风险因素的认知程度,减少偶合反应的发生。

    作者:曾庆生;陈日暖;林亦吞;梁钦达 刊期: 2016年第01期

  • 不同年龄类风湿关节炎患者的临床特征

    目的:探讨类风湿性关节炎(RA)中青年组与老年组的临床特征。方法对69例17~60岁中青年与51例60岁以上的老年患者的临床资料进行比对分析。结果老年组以心血管病变、胃肠受累、骨关节炎、肺间质病变多见,与中青年组比较差异有统计学意义(P<0.05);与中青年组比较,老年组中血清C反应蛋白(CRP)显著升高[(33.1±21.2) mg/L vs (61.0±20.3)mg/L],而类风湿因子(RF)(75.3%vs 37.3%)与抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP抗体)阳性率(59.4%vs 35.2%)降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论老年组的关节病变与合并疾病所占比例明显高于中青组,且老年组RA并发症类型、发病机制与中青年显著不同。

    作者:杨梅花;王向红;冯忠军;米娇 刊期: 2016年第01期

  • 858例人工流产术前女性阴道微生态状况的临床分析

    目的:探讨人工流产术前女性阴道分泌物的微生态状况以及临床意义。方法选取2014年1-12月在南方医科大学附属顺德第一人民医院门诊就诊自愿要求人工流产的858名女性,术前取阴道分泌物,通过革兰氏染色法、阴道pH值试纸法以及阴道微生物功能检测,进行阴道微生态评价,检查结果按年龄段进行回顾性分析。结果在858例女性中阴道微生态失衡有301例(35.08%),其中单一感染171例(56.81%),以外阴阴道假丝酵母菌病感染为主,混合感染130例(43.19%),以外阴阴道假丝酵母菌病合并需氧菌性阴道炎感染为主,高发人群年龄组别均为20~29岁。结论早孕期人流术前阴道微生态失衡发病率较高,尤其20~29岁人群外阴阴道假丝酵母菌病以及混合感染的发病率高,应重视人工流产术前阴道微生态的检测。

    作者:欧阳才颜;罗一平;叶桂娥;叶燕珊 刊期: 2016年第01期

  • 2010-2014年三水区恙虫病流行特征

    目的:分析2010-2014年三水区恙虫病的流行特征,为恙虫病的预防和控制提供参考依据。方法收集《中国疾病预防控制信息系统》中报告的三水区2010-2014年恙虫病病例进行描述性流行病学分析,并采用SPSS19.0软件对数据进行统计分析。结果三水区2010-2014年共报告恙虫病87例,报告病例数呈逐年增加趋势,除10~岁组外,其他年龄段均有发病,40岁及以上病例占发病总数的91.95%,农民占病例数的50.57%,全年报告病例主要集中在6-10月。结论三水区是恙虫病的流行地区,2010-2014年流行强度呈直线上升趋势,发病有明显的季节性和职业性,夏秋为发病高峰,防控重点是夏秋季的农村地区及农民。

    作者:何永辉;郑秀钰;李庆文;王海荣;余小庆;蔡文安 刊期: 2016年第01期

  • 2009-2014年梧州市霍乱弧菌监测结果

    目的:为了解梧州市外环境霍乱弧菌的存在和水产品的污染状况,掌握其菌型、分布、毒力等动态变化情况,为霍乱防控工作提供科学依据。方法采集梧州市两城区各大集贸市场销售摊档水产品、熟食制品、市区河水和池塘水(每年5~10月监测)以及医院腹泻就诊病人(每年1~12月监测)样品,并对其进行霍乱弧菌监测。结果熟食制品(600份)、腹泻病人大便标本(7693份)均未检出霍乱弧菌。河水、池塘水和海水产品阳性率为2.9%(69/2375)。其中O1群占91.3%(63/69),O139群占8.7%(6/69);O1群血清学分型:稻叶型49.3%(34/69),小川型42.0%(29/69)。各血清型CT毒力基因均为阴性。结论梧州市外环境水体、海水产品受霍乱弧菌污染严重,且菌株型多元化,应予继续加强监测,以防具毒力致病菌株流行扩散。

    作者:冼桂江;盘珍梅;彭美薇;覃敏兰 刊期: 2016年第01期

  • rhBNP与硝普钠对顽固性心力衰竭的疗效比较

    目的:观察和比较重组人脑利钠肽(rhBNP)与硝普钠治疗难治性心力衰竭的临床效果。方法将92例顽固性心力衰竭住院患者随机分为对照组和研究组,每组46例,两组均给予常规治疗,包括吸氧、卧床休息、低脂低盐饮食和洋地黄类药物等抗心衰治疗。对照组在常规治疗基础上给予硝普钠,研究组则应用冻干rhBNP治疗,连续治疗72 h后观察其疗效。结果研究组治疗有效率高于对照组(91.3%vs 73.9%),差异有统计学意义(χ2=5.91,P<0.05)。治疗前两组左室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、每搏输出量(SV)、心输出量(CO)等心功能指标差异无统计学意义(P>0.05),治疗后两组心功能均有改善,与同组治疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.05);而研究组改善程度高于对照组(P<0.05)。治疗后两组K+、Na+、转氨酶(ALT)、血清肌酐(Cr)无明显变化,而超敏C反应蛋白(hs-CRP)和血尿素氮(BUN)明显下降(P<0.05),研究组下降程度高于对照组(P<0.05)。结论 rhBNP对顽固性心力衰竭患者心功能具有明显改善作用,且能有效改善肾功能,其疗效优于硝普钠,有一定的临床应用价值。

    作者:滑俊峰;马朝晨 刊期: 2016年第01期

  • 2014年广州市南沙区登革热疫情分析

    目的:分析广州市南沙区2014年登革热疫情的流行特征,为今后开展登革热防治工作提供参考依据。方法采用描述性流行病学方法对2014年南沙区登革热疫情资料进行分析。结果2014年6-12月南沙区发生登革热疫情,共报告病例483例,累计发病率为77.26/10万,无死亡病例。首发病例于6月11日发病,末例病例于11月30日发病,疫情持续172 d。病例发病时间呈现出两个高峰,分别是7月下旬和9月中旬至10月上旬。男244例,女239例,男女性别比为1.02∶1。发病年龄集中在20~49岁年龄组,共报告308例(63.77%)。病例职业分布以农民、工人为主。疫情流行期间全区平均布雷图指数、平均房屋指数、平均容器指数高分别达24.35、18.05和22.78。结论2014年南沙区登革热疫情历时较长,是该地区历史上为严重的一次疫情;同时加强病例和媒介监测是控制登革热疫情的关键。

    作者:张志忠;张海洋;陆少艳;彭欣;郭钊平;林爱华;李茳;曹基辉 刊期: 2016年第01期

  • 尼龙毛分离纯化正常人外周血T淋巴细胞

    目的:建立尼龙毛分离纯化人外周血T淋巴细胞的方法,并探讨其增殖活性。方法密度梯度离心法分离正常人外周血单个核细胞,以尼龙毛分离出T细胞,使用流式细胞仪鉴定细胞纯度、回收率;MTT法检测细胞增殖活性。结果尼龙毛法分离后T淋巴细胞纯度为(70.70±3.45)%,稍高于分离前(66.71±5.47)%(t=1.746,P>0.05)。回收率为(42.4±6.95)%,用植物血凝素(PHA)刺激分离后的T淋巴细胞的刺激指数(SI)为(1.80±0.27)。结论在细胞生物学研究中,尼龙毛分选T淋巴细胞纯度不高,PHA刺激T淋巴细胞的增殖性较强。

    作者:彭红伟;程浪;王强强;王萍 刊期: 2016年第01期

  • 结核感染T细胞斑点试验在疑似结核病患者诊断中的价值

    目的:探讨结核感染T细胞斑点试验在结核病患者诊断中的价值。方法对2012年4月至2013年4月沈阳市胸科医院收治的结核病疑似患者100例的临床资料进行回顾性分析。根据诊断情况将患者分为肺结核组、肺外结核组、非结核病组,记录各组患者抗结核治疗前T-SOPT.TB和TST试验检测结果,比较结核病患者抗结核治疗前后抗原A和抗原B特异性斑点数的变化。结果肺结核组T-SOPT.TB试验敏感度、特异度、阴性似然比、阳性似然比分别为86.96%、95.65%、0.007、28.396,TST试验敏感度、特异度、阴性似然比、阳性似然比分别为69.57%、65.22%、0.371、5.438;肺外结核组T-SOPT.TB试验敏感度、特异度、阴性似然比、阳性似然比分别为83.78%、91.89%、0.009、24.482, TST试验敏感度、特异度、阴性似然比、阳性似然比分别为67.57%、64.86%、0.194、3.128;非结核病T-SOPT.TB试验敏感度、特异度、阴性似然比、阳性似然比分别为7.50%、15.00%、0.011、26.714,TST试验敏感度、特异度、阴性似然比、阳性似然比分别为5.00%、12.50%、0.245、4.379。60例结核病患者抗结核治疗前抗原A特异性斑点和抗原B特异性斑点分别为98、49,抗结核治疗后抗原A特异性斑点和抗原B特异性斑点分别为46、18。抗结核治疗前后患者T细胞斑点试验结果比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 T-SOPT.TB在诊断结核病患者中有较好的临床应用价值,敏感度和特异度较高。

    作者:于丹;刘宁 刊期: 2016年第01期

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主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会