向波；陈定强；徐霞
目的 构建害嗜鳞螨(Lepidoglyphus destructor)过敏原Lepd2的原核表达系统,获得Lepd 2的重组纯化蛋白.方法 通过双酶切pUC-Lep 2质粒,获取基因Lepd2,并结合高保真PCR获取去信号肽基因rLep d 2,连接载体pET44a并转入表达菌株Rosetta;利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)和蛋白免疫印迹法分别进行诱导表达与鉴定;用盐酸胍溶解包涵体并进行透析复性;使用Strep Ⅱ亲和填料来纯化目的蛋白.结果 构建了Rosetta-rLep d 2的原核表达体系;rLep d 2蛋白在菌体内主要表达形式为包涵体,通过透析复性和亲和纯化获得了高纯度的rLepd2蛋白.结论 获得的重组rLep d 2蛋白可为下一步评价其过敏原性提供研究材料.
作者：关志澳；何颖；邹泽红；陶爱林 刊期： 2016年第06期
目的 应用改良小室法在裸鼠体内构建出有正常组织结构的皮肤和毛发.方法 应用16.5 d小鼠胚胎的表皮细胞、成纤维细胞和Ⅰ型鼠尾胶原蛋白构建毛囊重建模型.首先在裸鼠背部做直径1.0 cm的圆形创面,将小室固定于创面上;然后,在小室内加入成纤维细胞和Ⅰ型鼠尾胶原蛋白混合悬液形成真皮层,等待胶原凝固后加入表皮细胞形成表皮层.对照组采用传统小室法,16.5 d小鼠胚胎的表皮细胞和成纤维细胞混匀后加入裸鼠体内构建好的小室中.结果 实验组和对照组在第10天拆除小室后创面皮肤均得到修复,两组无明显差异.拆除小室1周后,实验组在创面上形成均匀分布的毛发,对照组毛发呈现不均匀分布.拆除小室1个月后可观察到实验组和对照组创面均能够形成大量毛发.通过HE染色及免疫荧光检测发现改良小室法所构建的皮肤拥有正常的组织结构及完整的毛囊结构.结论 改良小室法能够构建出有正常组织结构的皮肤组织,是一个高效稳定的毛囊重建模型.
作者：何伟；云子轩；胡葵葵 刊期： 2016年第06期
目的 探讨水中分娩对母婴感染的影响.方法 选取行水中分娩的产妇160例,随机抽取同期160例传统经阴道分娩者(传统分娩组)作为对照.两组新生儿娩出后取咽及耳拭子作病原微生物培养,并于出生后2d抽血查血常规和C反应蛋白(CRP);两组产妇于分娩2d后抽血查血常规、CRP和降钙素原(PCT);并观察母婴感染相关的临床表现.结果 两组母婴感染临床表现比较差异无统计学意义(P＞0.05).传统分娩组产妇WBC为(9.65±3.16)×109,CRP为(37.32±10.13) mg/L,PCT为(0.06±0.05) ng/ml,而水中分娩组产妇WBC为(9.31±3.25)×109,CRP为(35.57±9.54) mg/L,PCT为(0.06±0.03) ng/ml,两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).传统分娩组新生儿WBC为(11.48±3.54)×109,CRP为(6.42±1.74)mg/L,而水中分娩组新生儿WBC为(11.39±2.50) ×109、CRP为(6.68±1.52)mg/L,两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).水中分娩组咽拭子阳性18例,耳拭子阳性27例;传统分娩组咽拭子23份阳性,耳拭子32份阳性,两组咽耳拭子病原微生物培养阳性率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 水中分娩并未增加母婴感染.
作者：李志彬；宁伟瑛；彭军；麦静仪；缪士霞 刊期： 2016年第06期
目的 探讨12～18岁儿童住院病种分布及各病种的疾病负担,为卫生资源的合理配置提供科学依据.方法 从中山市妇幼保健院病案室的医院病案系统中导出2003-2012年住院患儿(12～18岁)病案首页信息.按照2003-2007和2008-2012两个时间段分析各系统疾病以及主要病种构成的差异.以2010-2012年数据为基础,对各主要病种的平均住院日和费用进行聚类分析,探讨不同病种的疾病负担.结果 中山市妇幼保健院2003-2012年收治12～18岁住院儿童1 099例,ICD-10(国际疾病分类第十次修订)编码诊断共2 045条记录.排在前3位的系统疾病为呼吸系统疾病(449例,占21.96％),原位肿瘤、血液系统疾病(346例,占16.92％),消化系统疾病(254例,占12.42％).排在前5位的单病种为地中海贫血(7.04％)、急性上呼吸道感染(6.45％)、支气管肺炎(5.62％)、贫血(4.99％)、系统性红斑狼疮(4.21％).2008-2012年相对2003-2007年,呼吸系统疾病构成比显著下降(30.17％下降至20.57％);原位肿瘤、血液系统疾病构成比显著上升(8.81％上升至18.29％),肌肉和骨骼系统和结缔组织疾病构成比显著上升(1.36％上升至5.49％).对各病种按照平均住院日和费用进行聚类分析,可分为两类,一类病种特点为住院时间短、费用低,为常见病、多发病,包括地中海贫血、急性上呼吸道感染、系统性红斑狼疮等;二类病种特点为住院时间长、费用高,发病率低,包括胸腔积液、低渗透性和低钠血症、感染性休克等.结论 对于12～18岁儿童,呼吸系统疾病,原位肿瘤、血液系统疾病,消化系统疾病是近十年来主要住院病种.部分病种构成比变化趋势明显.各病种平均住院日和费用差异较显著,根据聚类分析,可分为一类病种和二类病种.
作者：舒建义；林翠兰；陈昂 刊期： 2016年第06期
目的 探讨降钙素原(PCT)在重症肺炎并发弥散性血管内凝血(DIC)诊断中的作用.方法 选取惠州市第一人民医院呼吸内科重症肺炎患者79例,根据是否合并弥散性血管内凝血将患者分为研究组(合并DIC,DIC评分≥5分)和对照组(未合并DIC,DIC评分＜5分),采用酶联免疫荧光法测定血清PCT水平,比较两组血清PCT水平和DIC评分,分析血清PCT水平与重症肺炎并发DIC及其凝血指标的关系.结果 研究组血清PCT水平和DIC评分均明显高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);血清PCT＜2.0 ng/ml重症肺炎患者DIC并发症发生率为12.66％(10/79),血清PCT≥2.0 ng/ml重症肺炎患者DIC并发症发生率为37.97％(30/79),两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).经Pearson相关性分析显示,血清PCT水平与外周血血小板计数、D-二聚体呈明显的正相关(r=0.512,P＜0.05;r=0.496,P＜0.0S).结论 血清PCT水平在重症肺炎并发弥散性血管内凝血患者中显著增高,可能通过影响重症肺炎凝血功能参与DIC发生和发展的过程.
作者：曾明旋；张灵娟；石喆 刊期： 2016年第06期
目的 探讨噻托溴胺联合正压无创呼吸机通气治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并慢性呼吸衰竭的临床疗效.方法 收集2008年1月至2013年1月邢台市第三医院收治的62例COPD合并慢性呼吸衰竭患者,随机分为噻托溴胺对照组(n=18,给予噻托溴胺吸入)、无创通气对照组(n=18,给予无创呼吸机治疗),治疗组(n=26,给予噻托溴胺联合无创呼吸机治疗).观察治疗前后三组患者血气分析(PaO2、PaCO2、pH)、肺通气功能(FEV1、FEVl/FVC)指标的变化以及住院时间.结果 三组患者治疗后的动脉血气、肺功能检查较治疗前明显改善(P＜0.05),且治疗组改善情况优于两个对照组(P＜0.05),住院时间亦较对照组缩短(P＜0.05).结论 无创呼吸机通气联合噻托溴胺可作为COPD合并呼吸衰竭的常规治疗手段.
作者：张永红；刘红红；李爱军；董世荣 刊期： 2016年第06期
目的 探讨损伤控制性复苏方案院前救治重症创伤性凝血病的效果及对患者凝血功能的影响,为临床治疗提供参考.方法 选取2012年12月至2014年12月湖北省当阳市人民医院诊治的重症创伤性凝血病患者320例,根据复苏方法随机分为观察组和对照组,每组160例.对照组患者给予传统的复苏方案进行院前救治,观察组患者给予损伤控制性复苏方案救治.观察并记录两组患者在相应救治方案干预后的低体温时间、凝血功能障碍时间、酸中毒时间、住院时间及死亡率.结果 两组患者在相应复苏方案干预后,观察组患者的低体温时间、凝血功能障碍时间、酸中毒时间分别为(9.3±1.2)、(13.5±5.6)、(15.4±4.7)h,显著低于对照组患者的(20.2±1.9)、(31.3±12.2)、(30.1±5.8)h,差异有统计学意义(t值依次为61.354、16.773、24.901,均P＜0.05);观察组患者的住院时间、疾病死亡率均低于对照组,差异有统计学意义(t=13.022、x2=6.850,均P＜0.05).结论 重症创伤性凝血病患者给予损伤控制性复苏方案院前救治,可以显著提高患者的治疗效果,且安全有效,值得临床推广.
作者：李刚；张希洲 刊期： 2016年第06期
目的 探讨内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)在多囊卵巢综合征(PCOs)患者中的表达变化及其临床意义.方法 选取54例多囊卵巢综合征卵巢组织标本(PCOS组)、40例正常卵巢组织标本(正常组),采用免疫组化法(SP)检测两组标本中EG-VEGF和血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况.结果 PCOS组卵巢组织标本中EG-VEGF、VEGF光密度值分别为(0.179 4±0.008 5)、(0.176 3±0.009 0),均显著高于正常组的(0.163 8±0.007 2)、(0.162 9±0.008 7),差异均有统计学意义(P＜0.05).PCOS组卵巢组织标本中EG-VEGF、VEGF的阳性表达分布与正常组比较差异均有统计学意义(P＜0.05),PCOS组卵巢组织标本中EG-VEGF、VEGF的阳性表达率显著高于正常组(P＜0.05).结论 EG-VEGF在多囊卵巢综合征患者中的表达水平显著升高,其过表达可能与PCOS患者血管生成有关.
作者：杜亚萍；杨慧 刊期： 2016年第06期
目的 建立以液态芯片为检测手段的快速、高通量的铜绿假单胞菌多重耐药基因监测技术平台,探索建立能够常规应用于临床并解决现行临床表型测定局限性的分子生物学技术.方法 针对铜绿假单胞菌中常见的OPRD2、TEM、OXA10、AAC3、AAC6、VIM、VEB、IMP共8个耐药基因序列进行分析,依次对这8个耐药基因设计多重PCR扩增引物和序列特异的核酸探针,选取临床鉴定的含各耐药基因的耐药菌株作为阳性参比品进行检测工艺优化,进行铜绿假单胞菌多重耐药基因液态芯片监测平台的研发.结果 初步建立了铜绿假单胞菌多重耐药基因液态芯片监测平台,组装了铜绿假单胞菌多重耐药检测液态芯片试剂盒1套.选择了8株含各耐药基因铜绿假单胞菌阳性菌株,用组装的试剂盒重复检测10次,耐药基因检测阳性率为100％,各耐药基因检测信号间无交叉,灵敏度、特异度以及重复性都很好.利用此平台进行了一定数量的临床标本检测分析.从检测结果来看,40份标本中,18份标本耐药基因阳性,其中含多耐药基因的标本有9份,占50％.18份阳性标本的耐药基因与耐药表型分析结果一致.结论 此监测平台是将一种多重扩增技术和芯片技术-悬浮阵列技术相结合的方法,具有特异性高、可组合筛查、检测通量高的优势.
作者：孙青菊；苑同业；王军；姜美娟；刘金凤；梁冰 刊期： 2016年第06期
目的 探讨EB病毒(EBV)在老年性EBV阳性弥漫性大B细胞淋巴瘤(EBV+DLBCL)中的潜伏感染类型.方法 在前期的基础上,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及免疫组织化学(IHC)分析检测13例EBV+DLBCL病例EBV潜伏感染类型.结果 qRT-PCR显示,相对于阴性对照组,7例表达LMP1(7/13,53.8％),3例阴性(3/13,23.1％),3例由于RNA质量问题,未能决定其表达量;1例表达EBNA2(1/13,7.7％),9例阴性(9/13,69.2％),3例由于RNA质量问题,未能决定其表达量.IHC显示,9例表达LMP1 (9/13,69.2％),4例阴性(4/13,30.8％);1例表达EBNA2(1/13,7.7％),12例阴性(12/13,92.3％).综合分析,7例EBV+DLBCL患者EBV潜伏感染类型为Ⅱ型(7/13,53.8％),2例潜伏感染类型为Ⅰ型(2/13,15.4％),1例为Ⅲ型(1/13,7.7％),3例由于qRT-PCR未能决定其目的基因表达量,归为Ⅱ/Ⅲ或Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ型.结论 本文显示,EBV在老年性EBV+DLBCL中的潜伏感染类型大部分为Ⅱ型,但因本研究病例数量有限,还需要进一步的研究验证.
作者：陈少红；叶子茵；杨静；伍丽琼；王小拍；叶瑶；杜洪 刊期： 2016年第06期
目的 研究严重烧伤早期应用间歇性血液滤过(IHF)联合血液灌注流(HP)防治脓毒症的临床效果.方法 选取2013年3月至2015年12月于惠州市中心人民医院入院治疗的烧伤患者50例,随机分为研究组(n=25)及对照组(n=25).对照组按常规方法进行治疗,研究组在此基础进行IHF+HP治疗(伤后4、6、8、11d).记录两组患者伤后4、6、8、11、15 d的体温(BT)、心率(HR)和呼吸频率(BPM);白细胞数量(WBC)、中性粒细胞(NEUT)、尿素氮(BUN);白细胞介素-1 (IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及高迁移率簇蛋白-1(HMGB-1);LPS和PCT.结果 研究组伤后4、6、8、11、15 d的HR、WBC、BUN、IL-1、TNF-α、HMGBI、LPS和LCT均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);研究组除伤后4d外,其余天数BPM均明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);研究组除伤后6d外,其余天数BT明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);研究组除伤后8d外,其余天数IL-6均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IHF+HP的治疗方案对严重烧伤患者是可行有效的,能够防治脓毒症的发生.
作者：方向京；朱飞滨 刊期： 2016年第06期
目的 检测手足口病患儿血清中细胞因子的水平,探讨其临床意义.方法 收集2012-2014年送检至深圳市疾病预防控制中心并经鉴定为EV71感染的手足口病患儿106人,其中轻症组46人,重症组60人;同期收集查体健康且能够接受免疫预防接种的儿童50人为对照组.采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中细胞因子白介素10(IL-10)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和单核细胞趋化因子-1(MCP-1)水平.结果 与对照组相比,重症组、轻症组中IL-10、TGF-β1和MCP-1水平明显升高(P＜0.05).而随着病情的加重,IL-10、TGF-β1和MCP-1水平与病情呈正相关(r=0.625、0.177、0.552,P＜0.05).结论 IL-10、TGF-β1和MCP-1参与了EV71感染所致的手足口病发病的过程,并可能与疾病的严重程度有关.
作者：王玉洁；孟君；冯谦谨；杨洪；姚相杰；张海龙；陈龙；何雅青 刊期： 2016年第06期
目的 探讨短暂性脑缺血发作(TIA)患者血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)动态变化及其临床意义.方法 选取在医院接受治疗的短暂性脑缺血发作患者50例,为观察组.选取同期健康体检患者50例为对照组,检测短暂性脑缺血发作患者在入院24h内和入院5d时血清NSE水平.根据神经功能缺失症状持续时间将50例观察组分为短症状组(小于等于6h)和长症状组(6 h以上),观察不同神经功能缺失症状持续时间与NSE关系.结果 观察组在入院24 h时,NSE为(24.65±3.23)μg/L,入院5 d NSE为(19.42±2.78)μg/L;对照组在入院24h时,NSE为(14.65±2.33)μg/L,入院5 d NSE为(14.65±2.33) μg/L.观察组在入院24 h时,NSE水平明显高于对照组,入院5d后,NSE水平与入院时比较有明显下降,但仍高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).长症状组在入院24 h时,NSE为(29.63±2.27)μg/L,入院5 d NSE为(24.43±2.43)μg/L;短症状组在入院24 h时,NSE为(21.64±2.24) μg/L,入院5dNSE为(14.45±2.64)μg/L.两组患者在入院5 d NSE水平均有明显下降,但是长症状组在入院25 h和入院5d时NSE水平均明显高于短症状组,差异有统计学意义(P＜o.05).结论 短暂性脑缺血发作患者血清NSE明显升高,且随神经功能缺损时间呈正相关,对疾病的诊断和预后具有提示作用.
作者：王栋华；刘云诗；邓燕 刊期： 2016年第06期
目的 分析乳腺癌易感基因2(BRCA2)对乳腺癌干细胞的影响,并且从NOTCH信号通路角度分析BRCA2对乳腺癌干细胞的机制.方法 采用已经建立好的BRCA2反转录病毒干扰载体转染成MDA-MB-435S细胞,与此同时在采取球形成试验,检测细胞干扰乳腺癌易感基因2的相关效果,克隆形成试验检测BRCA2下调之后细胞的增殖能力以及蛋白质印迹法检测乳腺癌干细胞中的NOTCH1/NOTCH4在BRCA2中的表达.结果 试验组球形成试验的细胞数量为(25.0±1.0)个,对照组球形成试验的细胞数量为(11.0±2.0)个;试验组克隆形成试验的细胞数量为(102.1±12.1)个,对照组克隆形成试验的细胞数量为(50.0±11.1)个;试验组蛋白质印迹法的细胞数量为(75.0±13.1)个,对照组蛋白质印迹法的细胞数量为(42.2±10.0)个,两组数据比较差异有统计学意义(P＜0.05);球形成试验以及克隆形成试验的相关结果显示,比较对照组的BRCA2乳腺癌干细胞MDA-MB-435S细胞形成数量明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).蛋白印迹法检测显示,与对照组比较,在沉默的BRCA2乳腺癌干细胞MDA-MB-435S细胞中NOTCH1的表达显著增加,差异有统计学意义(P＜0.05),对NOTCH4的表达均未见.结论 BRCA2对乳腺癌干细胞转染成MDA-MB-435S细胞的能力显著增加.
作者：李永涛；于士昌；翟勇 刊期： 2016年第06期
目的 探讨蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(CIP2A)和c-myc在喉癌组织中的表达水平并分析二者间的相关性.方法 采用免疫组化SP法检测40例喉癌标本(包括10例对应癌旁正常组织),20例喉乳头状瘤和15例喉黏膜白斑中CIP2A的表达,检测40例喉癌标中c-myc的表达,结合病理资料进行分析.结果 CIP2A在喉癌组织中的表达明显高于喉粘膜白斑、喉乳头状瘤及癌旁正常组织(P＜0.05),且与肿瘤的T分级、临床分期、组织分化程度及淋巴结转移有关(P＜0.05).c-myc在喉鳞癌组织的表达明显高于癌旁正常组织(P＜0.01).Spearman等级相关分析显示,CIP2A与c-myc在喉鳞癌组织中的表达呈正相关(r=0.409,P＜0.05).结论 CIP2A与c-myc具有协同作用,共同参与喉癌的发生发展过程,CIP2A蛋白可能是喉癌靶向治疗的一个新靶点.
作者：陈翠霞；杨小敏；祝晓芬；罗铮铮；杨燕珍；付佳 刊期： 2016年第06期
目的 探讨雌激素和雌、孕激素联合应用所致大鼠子宫肌瘤后的免疫功能变化及其机制.方法 选取SPF级雌性SD大鼠90只,编号后采用随机数字表法分为空白组、雌激素组和雌+孕激素组各30只,采用苯甲酸雌二醇对雌激素组和雌+孕激素组进行肌肉注射连续3个月(0.2 mg/只,3次/周),雌+孕激素组在造模3个月后加用黄体 酮1.5 mg/只肌注(2次/周,连续1个月).观察比较三组大鼠子宫组织平滑肌厚度、子宫重量、卵巢重量,以及E2水平、ER评分、DR评分,测定T细胞亚群.结果 子宫组织平滑肌厚度值雌+孕激素组＞雌激素组＞空白组且组间差异均具有统计学意义(P＜0.05).雌+孕激素、雌激素组大鼠的子宫重量在造模第3个月、4个月较空白组显著的增加(P＜0.05)、卵巢重量较空白组显著的降低(P＜0.05).雌+孕激素、雌激素组大鼠的E2水平、ER评分、PR评分显著高于空白组(P＜0.05),雌+孕激素组的E2水平、ER评分、PR评分显著高于雌激素组(P＜0.05).雌+孕激素、雌激素组大鼠的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平显著低于空白组(P＜0.05)、CD8+显著高于空白组(P＜0.05),雌+孕激素组的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平显著低于雌激素组(P＜0.05).结论 雌激素和雌、孕激素联合应用所致大鼠子宫肌瘤模型免疫功能显著低下,激素受体水平可能是其主要影响因素之一.
作者：肖发菊；李金燕；黄爱华 刊期： 2016年第06期
目的 分析儿科急性上呼吸道感染门诊患者抗菌药物使用价值,探讨抗菌药物的应用合理性.方法 采取回顾性研究方法,选择河北北方学院附属第一医院2011年11月至2014年11月呼儿科急性上呼吸道感染的急诊患者的处方一共1 300张,采用SPSS12.0统计学软件进行统计分析.结果 选取的1 300张处方中,患者使用抗菌药物的处方有1 020张(78.46％);其中有28种抗菌药物,一共使用1 200次.其中常使用的抗菌素类是以下几种:头孢菌素类、头孢素类以及阿奇霉素类.使用单一的抗菌药物有1 015例,概率为78.08％;有203例是2种抗菌药物一起使用;其中有100例口服抗菌药物者,其概率为49.26％(100/203);其他药物有82例,其概率为6.30％.有1 000例静脉注射者,其概率为76.92％(1 000/1 300).排名在前9位的抗菌素用药天数为2 010 d,分布范围在3.1～6.5 d,用药的次数为1 021次;药物利用指数(DUI)值分布在0.89～1.36,平均DUI值为(1.01±0.04).结论 医院内儿科急性上呼吸道感染门诊患者抗菌药物使用价值比较高,使用的范围也比较合理.
作者：王静静 刊期： 2016年第06期
目的 探讨神经外科重症监护室(ICU)鲍曼不动杆菌(ABA)的临床分布及耐药变迁.方法 回顾性分析2010年1月到2014年12月339株ABA的临床分布及耐药性变迁.细菌鉴定和药敏试验采用西门子MicroScan WalkAway 40系统进行,采用K-B纸片扩散法测定头孢哌酮/舒巴坦(CSL)、多粘菌素B(PB)、米诺环素(MNO)3种抗菌药物的敏感性.采用WHONET5.6软件进行统计分析药敏情况.结果 339株ABA主要分离于痰液(84.66％),339株ABA对PB、CSL、MNO、复方新诺明(SXT)的平均耐药率分别为0.00％、26.46％、27.75％和56.12％,对亚胺培南(IPM)、美罗培南(MEM)的平均耐药率分别为55.86％、60.16％,对其他12种临床常用的抗菌药物的平均耐药率均＞70％.5年间IPM、MEM的耐药率变化大,其中IPM的耐药率从33.33％升为78.40％,MEN的耐药率从42.86％升为78.40％.5年来,18种抗菌药物的耐药率逐年增加.结论 神经外科ICU致医院感染ABA耐药情况严重,耐药率和多重耐药逐年增加,应引起重视.
作者：张薇；陈清；胡卫红；魏小文；王华 刊期： 2016年第06期
目的 建立在肝组织内含双链环状乙型肝炎病毒(HBV)基因组DNA的小鼠模型.方法 用PCR扩增HBV单拷贝线状基因组,将PCR产物转染Huh7、HepG2以及293T细胞,以ELISA检测培养细胞上清中的HBsAg和HBeAg;用尾静脉高压水动力法将PCR产物注射C57BL/6J小鼠,以免疫组化检测小鼠肝组织中的HBcAg,ELISA检测小鼠血清中的HBsAg、HBeAg.细胞转染以及小鼠体内实验均用质粒pAAV-HBV1.2作为阳性对照.结果 HBV基因组PCR产物转染Huh7、HepG2以及293T细胞均可分泌表达HBsAg和HBeAg,其中HBeAg的检测值分别为质粒pAAV-HBV1.2转染细胞的88.7％、79.9％和53.7％;PCR产物注射小鼠后,肝组织检测到HBcAg,血清中检测到HBsAg和HBeAg,HBsAg和HBeAg长持续时间分别为59 d和38 d,血清中HBsAg和HBeAg水平以及持续时间与质粒pAAV-HBV1.2注射的小鼠总体相似.结论 建立了一种新的HBV转基因小鼠模型,该模型制备方法简单,并且肝组织内存在与HBV cccDNA类似的HBV基因组.
作者：狄弘玮；彭浩然；王世杰；戚中田；赵平 刊期： 2016年第06期
目的 观察慢性阻塞性肺疾病病人在常用药物治疗基础上加用体外反博对患者肺功能影响.方法 收集武汉钢铁(集团)公司第二职工医院2014年2月至2015年6月确诊并收治的慢性阻塞性肺疾病患者82例,随机分成治疗组(n=42)和对照组(n=40),对照组应用常规药物,治疗组在常规药物基础上应用体外反搏,治疗前后应用血气分析、肺功能检测及6分钟步行法评定肺功能及运动耐量.结果 治疗组总有效率达88.09％,显著高于对照组的62.50％,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗组和对照组患者的肺功能及血气分析指标pH、PaO2、第1秒用力呼气容积(FEVl)、用力肺活量(FVC)、FEV1/FVC分别较治疗前显著升高,PaCO2较治疗前显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05);且治疗组治疗后的FEV1、FVC、6 min步行距离(6MWD)显著高于对照组治疗后,PaCO2显著低于对照组治疗后,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 在药物治疗基础上应用体外反搏治疗可提高患者肺功能及生活质量,且安全,有效,值得临床推广应用.
作者：刘美 刊期： 2016年第06期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
