冯通明;王威;钟倩红
目的 了解梅州市诺如病毒感染性腹泻流行病学特征.方法 收集2013年4月至2014年12月期间梅州市感染性腹泻哨点医院监测门诊的腹泻病例的粪便标本,采用实时荧光定量RT-PCR检测诺如病毒GⅠ和GⅡ基因组.结果 共收集腹泻病例粪便标本766份,诺如病毒核酸检测阳性92份,阳性率为12.01%;阳性标本中诺如病毒基因型GⅡ型91份(98.91%),GⅠ型1份(1.09%).全年均可检出诺如病毒,病毒检测阳性率高峰期集中在9-11月.不同性别间、不同年龄组之间诺如病毒检出阳性率差异无统计学意义(x2=1.51,P>0.05,x2=2.30,P>0.05).结论 诺如病毒是梅州市感染性腹泻常见病原,GⅡ型基因型为优势流行株;诺如病毒感染性腹泻全年均可发生,高峰期出现在秋冬季节;人群对诺如病毒普遍易感.
作者:杨翼龙;廖伟东 刊期: 2015年第05期
目的 分析肛周脓肿感染性的病原菌及耐药性,为临床抗菌药物的合理应用提供依据.方法 回顾分析2013年1月至12月肛周脓肿感染患者的病原菌分布,应用纸片扩散法(K-B)检测大肠埃希菌对抗菌药物的耐药性;双纸片扩散确诊试验检测ESBLs.数据处理应用WHONET5.4软件分析.结果 从肛周脓肿中共分离出108株病原菌,其中革兰阴性菌86株,占79.63%,革兰阳性菌22株,占20.37%,检出的61株大肠埃希菌中,对阿莫西林/克拉维酸、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、替卡西林/克拉维酸、亚胺培南、美罗培南、阿米卡星的耐药率均小于15%.检出大肠埃希菌中产ESBLs 20株,占32.79%.结论 肛周脓肿感染仍是以革兰阴性大肠埃希菌感染为主,合理使用抗菌药物以降低耐药性和采取有效措施控制其传播.
作者:韩树梅;丁晓旭;张学诚;宗春光 刊期: 2015年第05期
目的 探讨脾切除联合贲门周围血管离断术对酒精性肝硬化患者肝功能及肝功能储备的影响.方法 选择天津市第二人民医院2009年6月至2013年1月收治的32例酒精性肝硬化、肝功能Child· PughB级的门静脉高压症患者,分别于断流术前后测定吲哚氰绿实验肝脏排泄情况(ICGR 15)、胆碱酯酶(CHE)等肝储备功能指标及谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清白蛋白(ALB)、凝血酶原时间(PT)、总血清胆红素(TBIL)等肝功能指标.结果 患者术后3个月及6个月肝功能明显改善并保持稳定,差异有统计学意义(P<0.05).肝储备功能术后2周恢复术前水平,术后3、6个月较术前明显改善,差异有统计学意义(P<0.05).结论 脾切除联合贲门周围血管离断术能明显改善酒精性肝硬化患者远期肝功能,增强肝功能储备,且保持长期稳定,减少再次入院治疗机率.
作者:陈官明;张岩 刊期: 2015年第05期
目的 运用实时荧光环介导等温扩增技术(LAMP)建立一种快速准确检测淋球菌的方法,以期用于淋病的早期临床诊断.方法 以淋球菌porA为靶基因,设计保守性和特异性良好的引物,以淋球菌标准菌株基因组DNA为模板,进行LAMP扩增,用23种其他在生殖系统中存在的微生物验证其灵敏度和特异性.结果 实时荧光LAMP法可检测到1 pg/μl(103CFU/ml)淋球菌基因组DNA,稳定性良好,其针对23种其他在生殖系统中存在的微生物均不能扩增,porA引物对淋球菌高度特异,阳性结果15 min可快速检出.结论 成功建立了检测淋球菌porA的LAMP技术,为淋球菌的快速检测提供了新的手段,有望成为淋球菌常规检测的简便方法.
作者:刘美玲;夏勇;郭旭光;黄俊 刊期: 2015年第05期
目的 明确诊断并分析l例新生儿疑似流行性脑膜炎死亡病例可能的传染来源和传播途径.方法 收集死亡病例的血液标本及其密切接触者的咽试子标本并进行菌株的分离培养和分型及药敏试验.结果 死亡病例的血标本及其密切接触者患儿父亲咽试子标本均分离到B群脑膜炎奈瑟菌菌株,2株菌株对氨苄西林、环丙沙星、利福平、氯霉素、头孢噻吩、红霉素及四环素均敏感,对磺胺类药耐药.结论 根据该病例的特点和实验室检测结果,判断该病例为B群脑膜炎奈瑟菌引起的死亡病例.
作者:林世平;林一曼;姜伊祥;石晓路;陈琼城;邱亚群;李迎慧 刊期: 2015年第05期
目的 探讨降钙素原(PCT)清除率对脓毒症患者预后的影响.方法 82例脓毒症患者在入院后第1、3、5、7d测定PCT,根据预后分为死亡组(n=23)和存活组(n=59),比较两组PCT清除率.结果 两组基础疾病构成比例类似,死亡组合并有多脏器功能衰竭的比例较高.第3、5、7 d PCT清除率(PCTc-3、PCTc-5、PCTc-7)存活组明显高于死亡组,差异有统计学意义(P<0.05);受试者工作(ROC)曲线分析提示PCTc-7的曲线下面积(AUG)为0.892明显高于PCTc-3、PCTc-5.结论 PCTc-7可作为评估脓毒症预后的重要指标,其截值≥40%可作为预后有利的预测指标.
作者:罗永军;蓝光明;钟敏华;陈洁 刊期: 2015年第05期
目的 分析黑白与彩色多普勒阴道超声不同检查时间对早孕胚胎绒毛超微结构的影响.方法 选取人工流产的早孕者120例,随机分为两组,彩超组60例予阴道彩色多普勒超声检查,其中检查5 min者20例,10 min者18例,15 min者22例.黑白组60例予阴道黑白B超检查,其中检查5 min者19例,10 min者19例,15 min者22例.对比两组胚胎绒毛超微结构变异率及绒毛DNA单链断裂和双链断裂的情况.结果 检查5 min和10 min,两组胚胎绒毛超微结构变异率差异无统计学意义(P>0.05);检查15 min,彩超组绒毛超微结构变异率高于黑白组(P<0.05).检查5 min,两组DNA单链和双链断裂情况比较差异无统计学意义(P>0.05).检查10 min及15 min,彩超组绒毛DNA单链、双链断裂均较黑白组增加,差异均有统计学意义(P<0.05).彩超组:绒毛超微结构变异率,5 min组和10 min组无差异,15 min组高于10 min组.随着检查时间延长,DNA单链、双链断裂增加,5 min组<10 min组<15 min组.黑白组:检查15 min内,绒毛超微结构变异率无差异.15 min组DNA单链、双链断裂较10 min组增加(P<0.05).结论 阴道黑白超声检查15 min内,对胚胎绒毛超微结构影响较小.阴道彩色多普勒超声检查超过10 min,对胚胎绒毛超微结构影响会增加.超声检查选择应结合临床情况,并控制检查时间.
作者:万蕴华;黎明;邵喜艳;赵颖;钟敏;章任兵;卢洪 刊期: 2015年第05期
目的 了解医院就诊者肠道寄生虫感染状况和变化趋势,为防治提供参考.方法 采用酸-醚离心沉淀法处理粪便标本,取沉渣做直接涂片和碘染涂片,显微镜下检查肠道寄生虫,以描述流行病学方法分析人群寄生虫感染特征.结果 共检出10种寄生虫,感染率高为华支睾吸虫,其后依次为人芽囊原虫、钩虫、鞭虫和蛔虫,差异有统计学意义(x2=131.188,1261.928,129.386,P<0.01);2013和2005年总感染率分别是37.08%和41.07%,2013年感染率低于2005年,差异有统计学意义(x2=20.500,P<0.01);男性感染率高于女性,男性感染率高为华支睾吸虫,女性为人芽囊原虫,差异具有统计学意义(x2=12.859,313.621,95.293,P<0.01);华支睾吸虫感染率高年龄组均为31~和41~(x2=3.121,15.138,P<0.01);人芽囊原虫感染率高年龄组2005年是0~、11~、21~、31~(x2=8.322,P<0.05),而2013年是0~(x2=6.556,P<0.05);钩虫感染率高年龄组均为61 ~(x2=5.593,3.922,P<0.05).结论 南宁市就诊者肠道寄生虫感染率与8年前比较虽有所下降,但还是偏高,种类多;感染的优势虫种仍是华支睾吸虫和人芽囊原虫,土源性线虫感染率已降至较低水平.
作者:卢作超;胡缨;刘晓泉;刘登宇;李艳文 刊期: 2015年第05期
目的 用配基指数富集的系统进化技术(SELEX)技术筛选丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3的DNA适配子.方法 构建随机ssDNA文库,两端为固定序列,中间为39 nt的随机序列,总长度为85 nt,将NS3蛋白包被在96孔板上,ssDNA与NS3蛋白进行亲和反应,洗去未结合的ssDNA,洗脱回收与NS3蛋白结合的DNA,PCR扩增后,磁珠法分离成单链.重复以上筛选步骤,直至筛选出高特异性和亲和力的核酸适配子.将核酸适配子连接质粒载体克隆转人大肠杆菌,挑选阳性克隆提取质粒外送到公司进行测序.结果 通过8轮筛选,成功筛选出DNA适配子,并获得其中6条克隆的DNA一级序列.6条适配子序列长度相同,均为85 nt,两端固定序列与设计相符,中间为随机序列,随机序列无共同保守系列.所有寡核苷酸适配子的二级结构以茎环和凸环为主.结论 以NS3蛋白作为药物研究的靶点,结合SELEX筛选技术研究其核酸适配子,具有巨大的潜力和研究价值.
作者:徐国胜;骆晓枫;黄小荣;林昌盛;谢金卫;周俊宜 刊期: 2015年第05期
目的 探讨细胞间粘附分子-1(ICAM-1)基因469K/E多态性与动脉粥样硬化血栓形成性脑卒中(AIS)的相关性.方法 对345例脑梗死患者采用多聚酶链反应分析ICAM-l基因469K/E多态性,并根据基因型分两组,即ICAM-1基因EE+KE型组(n=139)和KK型组(n=206),比较两组AIS发病率、脑血管病传统危险因素等指标的差异,以评价AIS的危险因素.结果 EE+KE型组AIS、糖尿病发病率明显高于KK型组(P<0.01).采用多因素Logistic回归调整年龄、性别、吸烟、脑血管病家族史、总胆固醇、糖尿病后,EE+KE型组患AIS的风险是KK型组的3.64倍(P<0.01).而在回归中引入高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)自变量后,EE+KE型患AIS的风险下降(OR=3.13,P=0.04),进一步引入高血压病自变量后,ICAM-1基因型与AIS间不再存在相关性(P=0.24).结论 ICAM-1基因EE+KE型是AIS的独立危险因素,其可能通过改变HDL-C和血压水平影响AIS发病.
作者:刘洁;王前;郭艳敏 刊期: 2015年第05期
目的 了解本地区病毒性腹泻的病原体分布情况,为制订防控对策提供依据.方法 2012年1月至2013年12月从韶关市粤北人民医院收集感染性腹泻患者的粪便标本,采用ELISA方法检测轮状病毒(RV),采用荧光定量RT-PCR方法检测诺如病毒(NV).结果 共检测粪便标本431例,阳性数为242例,总阳性率为56.15%,其中轮状病毒和诺如病毒阳性率分别为29.7%、36.19%,两种病毒阳性率差异有统计学意义(x2=4.12,P<0.05);轮状病毒流行主要在秋冬季,诺如病毒则主要在夏秋季;0~岁组阳性率高,各年龄组间阳性率差异无统计学意义(x2=0.01~1.39,P>0.05).结论 病毒性腹泻病原体以诺如病毒和轮状病毒为主,诺如病毒感染以GⅡ型为主,;婴幼儿和老年人应该加强病毒性腹泻的监测.
作者:邱灿林;曾鑫;徐子强;徐亮 刊期: 2015年第05期
目的 去除重组巴西坚果过敏原蛋白Ber e 1(rBer e 1)溶液中的内毒素,为后续实验和重组过敏原蛋白的临床应用打下基础.方法 采用亲和层析法、超滤法和离子交换法联合应用以及Triton X-114萃取法与亲和层析法联合应用,比较这两个方案去除重组蛋白溶液中的内毒素效果.结果 亲和层析法、超滤法和离子交换法联合应用的内毒素去除率为99.99%,内毒素浓度为6.25 EU/ml,蛋白回收率为42.8%;Triton X-114萃取法与亲和层析法联合应用的内毒素去除率为99.99%,内毒素浓度为2.09 EU/ml,蛋白回收率为26.1%.结论 Triton X-114萃取法与亲和层析法联合应用蛋白溶液内毒素的去除效果较佳,且内毒素含量以及Triton X-114残留量均在《中国药典》的规定范围内.
作者:肖兰艳;何颖;刘雪婷;邹泽红;陈惠芳;李碧舟;及志恒;陶爱林 刊期: 2015年第05期
目的 探讨华支睾吸虫重组14-3-3ε蛋白(rCs 14-3-3ε)对肝内胆管癌细胞株CCLP-1细胞波形蛋白(vimentin)表达的影响,观察该过程中CCLP-1细胞侵袭和迁移能力的变化.方法 用不同浓度(1、5、10 μg/ml)rCs 14-3-3ε与CCLP-1细胞共孵育24、48、72 h后,通过Q-PCR、Western blot等实验方法检测vimentin的表达水平.用划痕愈合实验和Transwell小室侵袭实验检测rCs 14-3-3ε对CCLP-1细胞迁移和侵袭能力的影响.结果 Q-PCR实验表明5μg/ml rCs 14-3-3ε刺激CCLP-1细胞72 h后及10 μg/ml rCs14-3-3ε刺激CCLP-1细胞24、48、72 h后,vimentin mRNA水平显著上调;Western blot实验显示,10 μg/ml rCs14-3-3ε刺激CCLP1细胞48、72 h后,vimentin蛋白水平显著上调.划痕实验表明,rCs 14-3-3ε(10 μg/ml)能够促进细胞的迁移能力,处理后的细胞迁移率增大(P<0.01);Transwell小室检测显示,rCs 14-3-3ε(10 μg/ml)处理组中穿膜细胞数为对照组的1.78倍,显著增加(P<0.05).结论 rCs 14-3-3ε可以通过上调vimentin蛋白的表达,从而促进肝内胆管癌细胞株CCLP-1的侵袭和迁移能力.
作者:谢芝芝;毛强;余金芸;林金思;尚梅;宁丹;黄艳;余新炳 刊期: 2015年第05期
目的 获取SD大鼠胚胎中附植后的胚胎上胚层干细胞(EpiSCs),并就影响SD大鼠EpiSCs(SDEpiSCs)分离与培养的组织来源、胎龄、细胞因子等条件进行探讨,从而探索适宜SD大鼠EpiSCs分离培养的实验体系,为下一步SD大鼠EpiSCs的建系提供实验研究基础.方法 以昆明小鼠胚胎成纤维细胞为饲养层,分别取5.5日胎龄的囊胚和7.5日胎龄囊胚上胚层(Epiblast),用添加白血病抑制因子(LIF)或活化素(activin)的基础培养基进行原代培养,分别采用机械法和胰酶消化法对克隆集落进行传代培养.后通过碱性磷酸酶染色对克隆集落进行鉴定分析,并检测其体外分化能力.结果 培养于LIF培养基和activin培养基中的囊胚均发生严重分化.培养于LIF培养基中的Epiblast也发生了严重的自发分化,而在activin培养基中,Epiblast形成SDEpiSCs原代集落.经机械法传代获得AKP染色阴性、能形成拟胚体的SDEpiSCs.结论 利用细胞因子activin,结合机械传代法可从7.5日胎龄SD大鼠胚胎中获得SDEpiSCs.
作者:邓新燕;杨景超;陆杰;聂恩琼;张应涛;郭中敏 刊期: 2015年第05期
目的 采用光激化学发光免疫分析技术建立快速定量检测人附睾分泌蛋白4(HE4)的方法.方法 用两株配对的HE4单克隆抗体,一株HE4单克隆抗体包被受体微球,另一株HE4单克隆抗体用生物素标记,与链霉亲合素的供体微球共同组成检测试剂.结果 自制HE4试剂分析灵敏度为0.81 pmol/L,分析内和分析间的精密度分别为4.3%~7.2%和6.1%~7.7%,均低于10%,与癌抗原15-3 (CA15-3)、甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、癌抗原125(CA125)无明显交叉反应,120份临床血清样本用本试剂与罗氏电化学发光检测试剂盒平行检测,其相关系数为0.95.结论 自制HE4光激化学发光免疫分析试剂各项指标均能达到临床要求,有望替代国外同类产品.
作者:肖俐霞;林冠峰;陈少琅;吴英松 刊期: 2015年第05期
目的 对急性脑卒中并发肺部感染的病原菌谱及相关危险因素进行统计分析,寻求预防急性脑卒中患者并发肺部感染的科学方法.方法 收集统计2010年5月至2014年5月在我院住院治疗的298例急性脑卒中患者并发肺部感染患者的病原菌谱的检出情况,回顾性分析相关危险因素.结果 298例急性脑卒中患者合并肺部感染93例,感染率为31.20%,共分离病原菌108株,其中真菌21株,占19.44%,革兰氏阳性菌32株,占29.63%,革兰氏阴性菌55株,占50.93%;以铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、白色假丝酵母菌较为常见.急性脑卒中并发肺部感染与患者年龄、发病时间、住院时间、脑卒中史、慢性肺病、意识障碍、卒中类型、糖尿病、长期吸烟、低蛋白血症、肾功能不全、卧床时间、侵入性操作、免疫疾病等因素密切相关(P<0.01),而与性别、吞咽困难、高血压、高血脂、心力衰竭、合并冠心病无密切相关性(P>0.05).结论 医院急性脑卒中并发肺部感染受多种因素的影响,病原菌谱为革兰氏阴性菌多见,要预防急性脑卒中并发肺部感染必须采取多种综合干预措施.
作者:陈佳;李国扬;张晓云 刊期: 2015年第05期
目的 探究降钙素原应用于诊断危重孕产妇发生细菌感染的临床价值.方法 2012年2月至2014年9月期间入住深圳市宝安区人民医院重症医学科的96例危重孕产妇纳入研究,其中存在细菌的36例为A组,无细菌感染的60例为B组;同期选取普通产科检查的孕产妇共52例作为对照组,其中存在细菌感染的C组共32例,无细菌感染的D组共20例,所有患者入科留置样本同步检测降钙素原(PCT)、白细胞(WBC)、C反应蛋白(CRP).结果 PCT及CRP在四组的组间差异具有统计学意义F=3.90、F=4.19(P<0.05),A、C组的PCT(23.18±21.0)、(1.38±0.88)ng/ml)与B、D组(34.0±45.8)、0.3±0.2)ng/ml)组间差异具有统计学意义(P<0.05),但A组与C组间差异无统计学意义(P>0.05),CRP则发现仅A(128.63±86.5) rg/L)与B组(25.6±47.7) mg/L)差异有统计学意义(P<0.05).采用受试者工作特征(ROC)曲线计算结果显示PCT对诊断孕产妇发生感染的曲线下面积为0.953,敏感性及特异性达90.6%和91.3%,约登指数大值相应的PCT浓度:1.95 ng/ml为预测感染的佳临界值;优于CRP的62.5%及68.3%(曲线下面积:0.701、15.5 mg/L)、WBC的56.3%和56.3%(曲线下面积:0.564、ll.21×l09/L).结论 PCT在危重孕产妇中鉴别诊断发生细菌感染具有较强的敏感性及特异性.
作者:蔡朝民;林锦乐;张文武;李小云;刘香萍;程明刚;袁建辉 刊期: 2015年第05期
目的 构建不同长度人CYP3A4基因启动子荧光素酶报告质粒并予鉴定,检测L02细胞中各荧光素酶报告质粒相对荧光素酶活性,并分析AFB1处理对其影响,找出AFB1调控人CYP3A4基因可能的启动子区域.方法 采用PCR技术扩增不同长度人CYP3A4基因启动子片段,将其插入荧光素酶报告质粒pGL3-basic中荧光素酶编码序列之前,构建含不同长度CYP3A4启动子的报告质粒pGL3-basic-CYP3A4-1~7,将报告质粒转染L02细胞,检测其荧光素酶活性来表示CYP3A4对应启动子片段的转录活性.检测各报告质粒在AFB1处理下与DMSO对照相比荧光素酶活性上升的比例,找出AFB1上调CYP3A4启动子转录活性的作用区域.结果 报告质粒测序结果证实,上述荧光素酶报告质粒均构建成功.将报告质粒转染L02细胞,AFB1和DMSO处理后检测结果表明pGL3-basic-CYP3A4-1~6和pGL3-basic-CYP3A4-7相对荧光素酶活性受AFB1上升比率差异有统计学意义(P<0.05),pGL3-basic-CYP3A4-1至pGL3-basic-CYP3A4-6这6个报告质粒相对荧光素酶活性受AFB1上升比率差异无统计学意义(P>0.05).结论 成功构建了人CYP3A4基因不同长度启动子片段的荧光素酶报告质粒,并初步确定AFB1可以通过调控CYP3A4启动子-200~0 nt的结合位点来上调CYP3A4的转录活性.
作者:张岩;徐丹丹;范启明;陈雯;王庆 刊期: 2015年第05期
目的 比较深圳市南山区2012-2014年手足口病(HFMD)流行病学和病原学特征,探讨本地区手足口病流行的新特点,为手足口病防控工作提供科学依据.方法 采用描述性流行病学方法对南山区手足口病例周分布和112例手足口病病例的临床资料进行分析,应用Real-time RT-PCR技术对手足口病暴发疫情的主要病原体进行检测.结果 2012-2014年南山区手足口病流行每年存在两个高峰,约第17-27周(5-7月)出现全年第一个发病高峰,约第36-40周(9-10月)出现第二个发病高峰.病例人群男性多于女性(1.33∶1),1~4岁年龄组病例多,占病例总数的78.6%,病例大多伴发热,出现手、足、口、臀等部位典型的皮疹,在由手足口病引起的并发症中以神经系统为主,占72.3%.在EV71型引起手足口病暴发疫情病毒中,2012和2013年占20.0%,2014年占43.5%.结论 南山区手足口病流行高峰,在不同年度的流行时间存在一定差异.由EV71引起的手足口病暴发疫情中,2014年较上两年有较大上升.因此,需加强手足口病监测,有效预防手足口病流行或暴发.
作者:吴楠;段永翔;王颖;叶俊;郑慧敏;孙健 刊期: 2015年第05期
目的 探讨社区结肠造口术后管理模式承接出院后患者管理的效果.方法 选取广州市居住的出院造口患者62例,进行社区结肠造口术患者的管理,管理3个月,前后分别使用SF36生活质量评价量表和社会支持评定量表及健康行为能力自评量表进行管理效果评估.结果 SF36生活质量评价量表调查问卷对患者干预前后生活质量进行多维评价.干预前后一般健康状况、精力、情感职能、精神健康以及总分的差异有统计学意义(P<0.05).社会支持评定量表SSRS评价中,其中主观支持、对支持的利用度及总分差异有统计学意义(P<0.01).健康行为能力自评量表SRAHP4个分量表干预后得分均高于干预前,其中营养、心理安适及总分的差异有统计学意义(P<0.01).结论 社区结肠造口术后管理模式承接出院后患者管理能提高造口患者的综合状态和生命质量,为社区开展出院后造口患者的继续康复提供可操作性的经验.
作者:张毅钦;简少云;吴晓霞;刘莎娜;曾金楼;戴济平 刊期: 2015年第05期