周家杰;刘伟玲
目的 观察实验小鼠脑内包囊的时空分布特点,为探讨弓形虫感染引起的情志和行为改变提供病理基础.方法 弓形虫PRU株经口感染小鼠,经HE染色和免疫组化检测,在显微镜下计算前额、海马、丘脑、小脑和杏仁核部位的包囊个数,然后随机选取上述部位的5个视野拍照,计算包囊的平均密度,并用方差分析比较不同脑组织包囊密度有无统计学差异.结果 弓形虫感染30和90 d时,HE染色和免疫组化后显微镜观察发现,小鼠不同位置弓形虫包囊密度差异有统计学意义,其中,丘脑的包囊密度大,其次是前额皮质、海马、杏仁核,小脑的包囊密度小.丘脑的包囊密度显著高于其他4个脑区(P<0.01),小脑的包囊密度显著低于其它4个部位(P<0.01),而前额皮质、海马和杏仁核所含的包囊密度差异无统计学意义(P>0.05);弓形虫感染1个月时,杏仁核包囊密度明显低于感染3个月(F=18.314,P<0.001),但是小脑的包囊密度高于感染3个月(F=18.314,P<0.001).结论 弓形虫包囊在慢性感染小鼠不同脑组织内的分布具有时空特异性,这可能是其临床表现的病理学基础.
作者:申善良;刘敏;姚云英;吴焜;陈晓光 刊期: 2013年第06期
目的 构建可溶性DC-SIGN(sDC-SIGN)原核表达载体,获得不含标签蛋白的sDC-SIGN蛋白.方法 采用PCR方法,从含人DC-SIGN cDNA的重组质粒pGM-DC-SIGN扩增DC-SIGN胞外区基因片段,插入原核表达载体pET17b,构建重组表达载体pET17b-sDC-SIGN,经酶切图谱和测序鉴定,转入E.coli BL21 (DE3)诱导表达蛋白,用抗人DC-SIGN抗体-Sepharose 4B亲和层系纯化表达产物,以SDS-PAGE和Western blot鉴定.结果 从重组质粒pGM-DC-SIGN扩增获得1 300 bp目的基因片段,构建重组表达质粒pET17b-sDC-SIGN,其酶切图谱和序列与预期相符.纯化表达产物sDC-SIGN,鉴定其分子质量为38 000,Western bolt证明其可与抗人DC-SIGN抗体特异性结合.结论 获得了能高效表达重组人sDC-SIGN的大肠杆菌菌株和不带任何标签蛋白的sDC-SIGN蛋白,为深入研究sDC-SIGN的功能奠定了基础.
作者:张婧;张丽芸;卢晓;陈政良 刊期: 2013年第06期
目的 通过RNAi和蛋白复合物鉴定来初步分析布氏锥虫未知锌指蛋白TbZC3H8的特性及功能.方法 运用蛋白数据库和分析软件对TbZC3H8进行序列分析和结构域预测;构建RNAi诱导表达细胞株分析TbZC3H8经RNAi敲低后对锥虫生长的影响,并通过RT-QPCR和Western blot检测RNAi干扰效率;构建异位融合表达myc-TAP标签的TbZC3H8细胞株,采用串联亲和纯化合并质谱鉴定其蛋白复合物组成;采用免疫荧光分析蛋白定位.结果 TbZC3H8的CCCH结构域在动基体原虫中高度保守;RNAi下调TbZC3H8后明显抑制了锥虫复制;TbZC3H8蛋白复合物中包含多种未知蛋白和两种RNA结合蛋白;TbZC3H8蛋白定位于胞质中,血清饥饿和热刺激对其定位无影响.结论 TbZC3H8是锥虫生长必需的,TbC3H8与RNA结合蛋白的相互作用暗示其可能在RNA加工代谢中发挥着作用.
作者:雷霁卿;刘罗根;郭学敏 刊期: 2013年第06期
目的 探讨IVF-ET助孕治疗中新鲜周期移植不孕而后续的冷冻周期成功妊娠的原因以指导治疗.方法 回顾性分析体外受精或单精子卵母细胞浆内注射-胚胎移植术(IVF/ICSI-ET)治疗患者950个周期,其中新鲜周期妊娠组780个周期和新鲜周期未孕冷冻周期妊娠组170个周期,比较两组患者年龄、不孕年限、病因及基础FSH水平、Gn使用情况、hCG日内膜、激素水平、卵泡数、获卵及胚胎情况的差异.采用单因素分析筛选出差异有统计学意义的因素进行多因素分析.结果 经Logistic回归分析得出hCG日P4、hCG日E2/1 000是妊娠的独立影响因素.hCG日P4(OR=1.653,P=0.015,95% CI:1.101~2.482),hCG日E2/1 000(OR=1.219,P=0.001,95% CI:1.085~1.369).hCG日酮孕每增加1 ng/ml,新鲜周期不孕而冷冻周期妊娠的风险将增加1.653倍.hCG日E2每增加1 000 pg/ml,新鲜周期不孕而冷冻周期妊娠的风险将增加1.219倍.结论 hCG日的P4和E2是导致新鲜移植不孕而冷冻周期妊娠的重要原因.P4和E2过高,可考虑放弃新鲜移植,采用冷冻移植.
作者:谭焱;宋亚丽;马从顺;刘颖;邢福祺 刊期: 2013年第06期
目的 探讨与标准剂量氨溴索(60 mg/d)治疗比较,大剂量氨溴索(300 mg/d)治疗社区获得性肺炎(CAP)患者在预后、住院天数、住院费用、氧合指标及血清和痰液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平变化上的差别.方法 采用前瞻性研究方式收集在东莞市东华医院呼吸内科收治的CAP患者120例,采用随机分组方式将入选患者分为标准剂量氨溴索治疗组及大剂量氨溴索治疗组,每组60例.对入选患者进行CURB65评分评估,并对患者预后、住院天数、住院费用、动脉氧分压(PaO2)、吸氧浓度(FiO2)等指标,同时对患者入选及结束治疗时其血清和痰液中TNF-α水平进行检测,后对上述指标进行统计分析.结果 两组患者入选时CURB65评分,治疗前PaO2、FiO2、氧合指数、血清TNF-α、痰液TNF-α等数据比较差异无统计学意义(P均>0.05);治疗后,两组平均住院时间、FiO2、氧合指数、血清TNF-α、痰液TNF-α等数据比较差异均有统计学意义(P均<0.05),而平均住院费用、PaO2差异无统计学意义(P>0.05).标准剂量氨溴索治疗组患者治愈/好转率为75.0%,大剂量氨溴索治疗组患者治愈/好转率为86.7%.结论 大剂量氨溴索治疗有助于改善CAP患者氧合指标及减轻炎症反应指标,降低平均住院时间,并有助于改善患者治愈/好转率.
作者:刘同刚;马诚;刘旺林 刊期: 2013年第06期
目的 应用代谢组学方法探索疲劳型亚健康的尿液代谢标志物.方法 分别收集正常对照组和疲劳型亚健康的尿液,应用1H NMR代谢组学方法,建立疲劳型亚健康尿代谢物的诊断分子指标.结果 健康组和疲劳型亚健康组尿液代谢谱差异有统计学意义,其中疲劳型亚健康组有3-磷酸甘油酸(3.65 ppm)、辅酶Q(4.01 ppm)、α-酮戊二酸(3.00 ppm)、丙氨酸(3.77 ppm)、组胺(3.29 ppm)、鸟苷(3.81 ppm)等6个代谢物水平显著升高(P<0.05).这些化合物涉及到糖异生、糖酵解、三羧酸循环、脂肪酸、氨基酸以及嘌呤等多条代谢通路.结论 能量代谢紊乱可能参与了疲劳型亚健康的发生发展过程,其中特异的代谢标志物可用于疲劳型亚健康的评价.
作者:刘艳艳;肖雅;邱玉明;孙晓敏;欧阳明子;黄颖;李斐;罗仁;赵晓山 刊期: 2013年第06期
目的 了解南方某三甲医院原发性肝癌(PLC)住院患者的基本特征和治疗特点.方法 回顾性分析某院2010年1月至2011年12月间2 353例PLC住院患者的临床资料.结果 患者平均年龄(52.48±11.65)岁,男性占88.7%,82.7%的患者伴乙型肝炎病毒(HBV)感染.89.1%(386/433)为肝细胞癌,6.0%(26/433)为胆管细胞癌,4.8%(21/433)为混合型.33.1%(778/2 353)患者AFP<20 μg/L.巴塞罗那分期(BCLC)0~A期患者占27.0%,主要进行外科手术治疗(45.0%),联合治疗占14.9%;B期患者占19.0%,主要进行肝动脉化疗栓塞术(TACE) (43.0%),10.5%患者行联合治疗;C期患者占42.0%,主要是对症支持治疗(43.9%)和TACE治疗(40.0%),7.7%患者为联合治疗;D期患者占12.0%,其中对症支持治疗79.9%、TACE治疗15.2%和联合治疗1.5%.结论 PLC人群以中年男性HBV感染者占绝大多数,且以中晚期患者为主.规范化治疗有待进一步提高,多学科协作治疗模式有待进一步发展.
作者:王腾;洪永孟;胡晓云;郭亚兵 刊期: 2013年第06期
目的 探讨不同类型体力活动与缺血性脑卒中的关系.方法 运用病例对照研究的方法,将146例缺血性脑卒中患者作为病例组,156名非脑血管疾病居民作为对照组,运用多因素非条件Logisitic回归模型分析不同类型体力活动与缺血性脑卒中的相关性.结果 多因素非条件Logistic回归分析提示,与闲暇时间体力活动不活跃居民比较,闲暇时间体力活动活跃居民的OR=0.042(95%CI:0.011~0.158),与交通行程体力活动不活跃居民比较,交通行程体力活动活跃居民的OR=0.181(95%CI:0.061~0.534).结论 在该调查人群中闲暇时间体力活动、交通行程体力活动可能与缺血性脑卒中相关.
作者:霍富元;李粲;韩莉娜;谭盛 刊期: 2013年第06期
目的 采用TaqMan探针建立检测沙眼衣原体的实时荧光定量PCR(real-time PCR)方法.方法 根据沙眼衣原体外膜蛋白A的基因(ompA)序列设计引物和探针,以克隆的ompA部分基因片段作DNA模板,建立实时荧光定量检测方法.结果 建立的荧光定量PCR检测方法的低检出限为5 copies/反应,检测线性范围100107线性关系良好(r2=0.997),比巢式PCR敏感100倍;且与鹦鹉热衣原体、淋球菌、解脲脲原体、大肠杆菌等病原菌DNA以及人基因组DNA均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性.以巢式PCR作参比,建立的荧光定量PCR法检测沙眼衣原体的阳性符合率为100.00%,阴性符合率为95.09%,总符合率为96.81%.结论 建立的检测沙眼衣原体实时荧光定量PCR具有特异性强和敏感性高的特点,可快速检测样本中微量沙眼衣原体DNA,适用于对沙眼衣原体进行大规模筛选.
作者:陆中奎 刊期: 2013年第06期
目的 探讨尿低分子量蛋白联合检测在新生儿羊水粪染肾损害中的临床意义.方法 采用病例对照研究的方法,选择120例足月新生儿,其中90例羊水粪染新生儿为研究组,按污染程度分为3组,30名正常羊水新生儿为对照组.测定血气分析、血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿β2-微球蛋白(β2-MG)、尿α1-微球蛋白(α1-MG)及尿微量白蛋白(MALB)水平.结果 随着羊水粪染程度加重,BUN、Cr、尿β2-MG、尿α1-MG及尿MALB水平逐渐增高.研究组和对照组中的BUN和Cr水平比较差异均无统计学意义(P>0.05).脐带血pH值(血气分析)、尿β2-MG、尿α1-MG及尿MALB在羊水Ⅲ度粪染组中的含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而在Ⅰ、Ⅱ度粪染组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 尿低分子量蛋白联合检测对羊水粪染引起的肾功能损害早期发现及评估其程度有一定的意义.
作者:李丽;陈敬国 刊期: 2013年第06期
目的 观察残余肾功能(RRF)对透析患者心功能的影响分析.方法 将100例维持性血液透析患者以内生肌酐清除率水平为依据分为RRF(+)组和RRF(-)组,并对两组患者进行尿量(UR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、尿素氮(BUN)、肌肝(Scr)、血磷(P3+)、碳酸氢根(HCO3-)、甲状旁腺素(PTH)、血红蛋白(Hb)、内生肌酐清除率(Ccr)的检测,以及分析左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS)的变化.结果 治疗1年后,两组患者的UR、Scr、HCO3-和Ccr与治疗前相比差异均有统计学意义(P<0.05),RRF(+)组的Hb高于RRF(-)组(P<0.05),PTH水平低于RRF(-)组(P<0.05).治疗后RRF(+)组的LVEF和LVFS均高于RRF(-)组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 RRF能提高血液透析患者的透析效能,降低心脏负荷,减低肾毒性物质对心脏的毒害从而改善长期血透患者的心功能损害.
作者:黄宇静;伍锦泉;黄力 刊期: 2013年第06期
目的 比较研究2HRZE/4HR方案联合胸腺肽、左氧氟沙星治疗初治涂阳肺结核的临床疗效,为临床用药提供参考.方法 将104例初治涂阳肺结核患者随机分成两组,每组52例,观察组采用2HRZE/4HR化疗方案并联合胸腺肽、左氧氟沙星,对照组予2HRZE/4HR抗结核,观察两组治疗后痰菌阴转、病灶吸收情况、不良反应发生率及治疗转归.结果 观察组2、4、6月末痰菌转阴率分别为90.38%(47/52)、94.23%(49/52)和96.15%(50/52),显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组在2、6月末的病灶吸收情况也明显好于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).观察组初治涂阳肺结核患者的总治愈好转率为96.15%,完全吸收88.46%,明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 2HRZE/4HR方案联合胸腺肽、左氧氟沙星治疗初治涂阳肺结核可以明显提高痰菌阴转率及病灶吸收率,治疗转归方面比传统2HRZE/4HR方案好,临床上值得推广.
作者:周家杰;刘伟玲 刊期: 2013年第06期
目的 探讨尿浓缩和稀释对随机尿蛋白和肌酐比结果的影响.方法 选取慢性肾脏病人213例,按照随机尿肌酐(Ucr)浓度分为5组,A组:35例,Ucr≤2 000 mmol/L;B组:33例,2 000 mmol/L<Ucr≤3 000 mmol/L;C组:46例,3 000 mmol/L< Ucr≤7000 mmol/L;D组:58例,7 000 mmol/L<Ucr≤15 000 mmol/L;E组:41例,Ucr>15 000 mmol/L.所有病例均测定尿蛋白/尿肌酐比值(UACR)和24 h尿蛋白定量(24 h UTP)水平,对各组UACR和24 h UTP进行相关分析和Kappa检验.结果 B、C、D组患者随机尿UACR与24 h UTP呈高度相关且一致性较强,r值分别为0.836、0.886、0.868,Kappa值分别为0.762、0.758、0.753;而A、E组两者呈较低相关且一致性较差.B、C、D组总的r和Kappa值分别为0.887和0.757,仍具有较高的相关性和中度一致性.结论 慢性肾病患者在随机尿2 000 mmol/L<Ucr≤15 000 mmol/L时,UACR可作为24 h UTP定量检测的初筛实验;而在Ucr≤2 000 mmol/L和>15 000 mmol/L时,随机尿UACR结果不可靠.
作者:黄志宏;付文金;徐娜媚;方海畴;方爱娟;陈楚填 刊期: 2013年第06期
目的 研究应用不同方案行索拉非尼联合经皮肝动脉化疗栓塞(TACE)及射频消融(RFA)(局部介入术前开始应用索拉非尼以及局部介入术后开始应用索拉非尼)治疗中晚期>5cm肝癌的适用性及安全性,初步观察其疗效.方法 2008年11月始筛选纳入>5 cm的中晚期肝癌患者.随机分为2组,A组为先行TACE联合RFA,术后开始口服索拉非尼;B组为先口服索拉非尼1~2周,再行TACE及RFA.规律随访,观察毒副反应的发生情况及患者生存情况.结果 截至2013年2月21日,A组与B组分别纳入患者15例.肝癌直径(8.9±3.1)cm,患者随访时间(27±11.8)月.两组均未发生与治疗相关的死亡,索拉非尼主要相关不良反应有手足皮肤反应(53.3% vs 66.7%,P=0.710)、食欲下降(53.3% vs 46.7%,P=0.999)、乏力(53.3% vs 40.0%,P=0.715)以及腹泻(33.3% vs 46.7%,P=0.710)等,只有1例患者出现4级的上消化道出血,两组比较差异均无统计学意义.两组患者的远期生存疗效差异无统计学意义(中位生存时间:A组31月vs B组32月,x2=0.050,P=0.822).结论 两种联合方案在治疗中晚期大肝癌均是安全适用的,且治疗风险相当.生存分析并未显示出应用哪一种联合方案更具有优势.
作者:梁恒毅;陆骊工;李勇;胡宝山 刊期: 2013年第06期
目的 探索香芹酚(CAR)对心肌缺血再灌注(I-R)时线粒体损伤的作用.方法 C57 BL/6小鼠冠状动脉左前降支结扎45 min,解除结扎2h构建心肌I-R损伤模型.将小鼠随机分为3组(每组n=12):假手术组、Vehicle (DMSO in saline)+ I-R组、CAR(60 mg/kg)+ I-R组.Vehicle或CAR于冠脉结扎前15 min给药.心肌缺血45 min再灌注2h后,检测心肌梗死面积,并测定平均线粒体面积、线粒体分裂百分比、线粒体基质微粒及脂滴数量以评估线粒体损伤情况.结果 与假手术组相比,Vehicle组心梗面积显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);与Vehicle组相比,CAR(60 mg/kg)预处理可显著减少心梗面积,差异有统计学意义(P<0.05).与Vehicle组相比,CAR预处理可显著降低平均线粒体面积、线粒体基质微粒数、线粒体周围脂滴数和线粒体分裂百分比,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 CAR可通过减轻心脏组织中线粒体损伤降低小鼠心肌I-R后心梗面积.
作者:王先宝;宋旭东;杨平珍;刘映峰;王丽姿;刘磊;瞿玲玲;陈爱华 刊期: 2013年第06期
目的 研究Bridging integrator 1 (BIN1)在胃腺癌中的表达及其预后价值.方法 通过免疫组化研究BIN1在234个胃腺癌组织样本中的表达,之后运用荧光定量PCR (RT-qPCR)和蛋白质印迹(Western blotting)技术对免疫组化结果进行进一步验证.结果 通过免疫组化数据表明,在234个胃腺癌病例中,有128例的BIN1表达水平下降(54.7%).此外,BIN1的表达水平与组织学分级、肿瘤侵袭、淋巴结转移及TNM分期显著相关(P<0.05).通过RT-qPCR和Western blotting分析,发现与非胃腺癌组织相比较,大多数肿瘤组织中的BIN1的转录和转录后水平下调(P=0.001 5和P=0.012).Kaplan-Meier存活曲线证实BIN1表达水平的下降与胃腺癌患者的预后不良有关.进一步的多因素分析结果提示BIN1是胃腺癌患者的总存活率的独立预后因子(HR=0.552,95%CI:0.354~0.862,P=0.009).结论 在胃腺癌中BIN1表达的下降可导致疾病预后不良,BIN1作为潜在的肿瘤抑制基因可能在防止肿瘤进展方面起重要作用.
作者:刘传新;罗荣城 刊期: 2013年第06期
目的 观察脾脏NK细胞及NKT细胞在黄芪多糖(APS)发挥免疫佐剂功能的作用.方法 使用鸡卵白蛋白(OVA)与APS经皮下免疫C57BL/6小鼠3次.末次免疫7~14 d,取血清,使用ELISA观察OVA特异性抗体的含量;分离脾脏淋巴细胞,使用流式细胞仪检测NK和NKT细胞的百分比含量;使用PMA和Ionimycin刺激淋巴细胞,使用细胞内细胞因子染色的方法检测IFN-γ和IL-4的分泌情况.结果 APS组小鼠OVA特异性抗体含量明显高于OVA组小鼠(P<0.05),但小鼠脾脏内NK和NKT细胞的百分比含量与OVA组和正常小鼠差别不大(P>0.05).经PI刺激以后,APS组小鼠脾脏内NK细胞中IL-4+细胞明显高于OVA组和正常组(P<0.05),且IFN-γ+细胞的比例明显下降(P<0.05);虽然经过PI刺激以后,APS组小鼠脾脏内NKT细胞中IL-4+细胞升高不明显,但是IFN-γ+细胞的比例明显下降(P<0.05).结论 APS可以通过调节NK和NKT细胞的功能来促进体液免疫应答.
作者:谢红艳;张文伟;林丹义;吴凡;余秀雪;陈殿慧;罗雪平;王颖;黄俊 刊期: 2013年第06期
目的 观察喷他佐辛用于全麻苏醒期的临床效果.方法 择期行插管全麻手术者90例(ASA Ⅰ~Ⅱ级),随机分为生理盐水对照组(A)、氯诺昔康组(B)和喷他佐辛组(C),每组30例,依次分别于手术结束前30 min静注生理盐水2 ml、氯诺昔康0.2 mg/kg、喷他佐辛0.5 mg/kg.记录三组麻醉前(T1)、拔管时(T2)、拔管后5 min (T3)的心率(HR)和平均动脉压(MAP),T2的躁动评分、T3的Ramsay镇静和疼痛评分以及从手术结束至拔管的时间.结果 三组T2的HR和MAP均较T1明显升高(P<0.05);A组T3的HR和MAP较T1明显升高(P<0.05);B、C组T2、T3的HR和MAP均明显低于A组(P<0.05);B、C组T2的躁动评分明显低于A组(P<0.05);B、C组T3镇静和疼痛评分明显优于A组(P<0.05);C组镇静评分明显优于B组(P<0.05).结论 手术结束前30 min静脉注射喷他佐辛不影响拔管时间,全麻术后的苏醒质量较高.
作者:汪吉明;刘怀萍 刊期: 2013年第06期
目的 研究外源性肿瘤坏死因子α(TNF-α)对原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)活性及程序性死亡因子配体PD-L1蛋白表达的影响,探讨动脉粥样硬化的免疫机制.方法 体外培养HUVECs,加入不同浓度TNF-α持续刺激48 h,CCK-8法检测450 nm波长处吸光度值(OD值),计算细胞生长存活率.选同代细胞重复培养并干预,Western blot方法检测细胞PD-L1蛋白表达.使用SB203580阻断p38MAPK通路后再用TNF-α干预HUVECs,比较各组细胞PD-L1蛋白表达.结果 实验组HUVECs在450 nm波长处的吸光度值较空白对照组明显降低(P<0.05),细胞存活率依次下降.实验组细胞PD-L1蛋白表达随TNF-α浓度增高逐渐降低(P<0.05).TNF-α单独刺激组PD-L1蛋白表达较TNF-α与SB203580共刺激组明显降低(P<0.05),SB203580阻断效应明显.结论 TNF-α可明显抑制HUVECs细胞活性,并降低PD-L1蛋白表达,p38MAPK通路可能参与了这一过程.
作者:吕自明;刘映峰;缪绯;龙日;刘芃;刘磊 刊期: 2013年第06期
目的 探讨和评价ALT血液筛查项目在临床用血血液安全中的意义.方法 采用回顾性调查法对2010年10月至2012年12月期间,ALT单项阳性并再次献血的献血者血液筛查结果进行追踪调查和分析.结果 3 910例再次献血者中,HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP以及ALT血液筛查结果均合格3 053例,占再次献血的78.1%,ALT单项仍为阳性845例,占不合格的98.6% (845/857),ALT阴性而ELISA筛查项目阳性9例,核酸筛查阳性3例,其中ALT合并NAT阳性1例.结论 ALT血液筛查在肝炎病毒感染“窗口期”或隐匿性感染中有提示的作用,在一定程度上能减少漏检的发生,在保障血液安全中具有一定的意义.
作者:黎世杰;汪传喜;梁华钦;廖峭;戎霞;陈锦艳;林昌周;梁浩坚 刊期: 2013年第06期