黎世杰;汪传喜;梁华钦;廖峭;戎霞;陈锦艳;林昌周;梁浩坚
目的 构建可溶性DC-SIGN(sDC-SIGN)原核表达载体,获得不含标签蛋白的sDC-SIGN蛋白.方法 采用PCR方法,从含人DC-SIGN cDNA的重组质粒pGM-DC-SIGN扩增DC-SIGN胞外区基因片段,插入原核表达载体pET17b,构建重组表达载体pET17b-sDC-SIGN,经酶切图谱和测序鉴定,转入E.coli BL21 (DE3)诱导表达蛋白,用抗人DC-SIGN抗体-Sepharose 4B亲和层系纯化表达产物,以SDS-PAGE和Western blot鉴定.结果 从重组质粒pGM-DC-SIGN扩增获得1 300 bp目的基因片段,构建重组表达质粒pET17b-sDC-SIGN,其酶切图谱和序列与预期相符.纯化表达产物sDC-SIGN,鉴定其分子质量为38 000,Western bolt证明其可与抗人DC-SIGN抗体特异性结合.结论 获得了能高效表达重组人sDC-SIGN的大肠杆菌菌株和不带任何标签蛋白的sDC-SIGN蛋白,为深入研究sDC-SIGN的功能奠定了基础.
作者:张婧;张丽芸;卢晓;陈政良 刊期: 2013年第06期
目的 比较研究2HRZE/4HR方案联合胸腺肽、左氧氟沙星治疗初治涂阳肺结核的临床疗效,为临床用药提供参考.方法 将104例初治涂阳肺结核患者随机分成两组,每组52例,观察组采用2HRZE/4HR化疗方案并联合胸腺肽、左氧氟沙星,对照组予2HRZE/4HR抗结核,观察两组治疗后痰菌阴转、病灶吸收情况、不良反应发生率及治疗转归.结果 观察组2、4、6月末痰菌转阴率分别为90.38%(47/52)、94.23%(49/52)和96.15%(50/52),显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组在2、6月末的病灶吸收情况也明显好于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).观察组初治涂阳肺结核患者的总治愈好转率为96.15%,完全吸收88.46%,明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 2HRZE/4HR方案联合胸腺肽、左氧氟沙星治疗初治涂阳肺结核可以明显提高痰菌阴转率及病灶吸收率,治疗转归方面比传统2HRZE/4HR方案好,临床上值得推广.
作者:周家杰;刘伟玲 刊期: 2013年第06期
目的 观察促红细胞生成素(EPO)对同型半胱氨酸(Hcy)导致的血管内皮细胞损伤是否具有保护作用.方法 采用不同浓度(1.25、2.5、5、10、20 mmol/L)的Hcy处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC),观察细胞的损伤情况,建立Hcv诱导的内皮细胞损伤模型,然后采用不同浓度(0.1、1、10、100 U/ml)的EPO进行预处理,观察细胞的损伤情况.通过MTT法测定细胞存活率,ELISA法检测细胞上清IL-6含量,Hoechst33258染色检测细胞凋亡来评价细胞损伤情况.结果 Hcy对HUVEC有损伤作用,并且随浓度增加损伤作用更明显.EPO可增加细胞存活率,抑制Hcy诱导HUVEC IL-6的产生,抑制细胞凋亡.结论 EPO对Hcy导致的内皮细胞损伤具有一定的保护作用.
作者:李敏子;杨卫红;刘振华 刊期: 2013年第06期
目的 观察喷他佐辛用于全麻苏醒期的临床效果.方法 择期行插管全麻手术者90例(ASA Ⅰ~Ⅱ级),随机分为生理盐水对照组(A)、氯诺昔康组(B)和喷他佐辛组(C),每组30例,依次分别于手术结束前30 min静注生理盐水2 ml、氯诺昔康0.2 mg/kg、喷他佐辛0.5 mg/kg.记录三组麻醉前(T1)、拔管时(T2)、拔管后5 min (T3)的心率(HR)和平均动脉压(MAP),T2的躁动评分、T3的Ramsay镇静和疼痛评分以及从手术结束至拔管的时间.结果 三组T2的HR和MAP均较T1明显升高(P<0.05);A组T3的HR和MAP较T1明显升高(P<0.05);B、C组T2、T3的HR和MAP均明显低于A组(P<0.05);B、C组T2的躁动评分明显低于A组(P<0.05);B、C组T3镇静和疼痛评分明显优于A组(P<0.05);C组镇静评分明显优于B组(P<0.05).结论 手术结束前30 min静脉注射喷他佐辛不影响拔管时间,全麻术后的苏醒质量较高.
作者:汪吉明;刘怀萍 刊期: 2013年第06期
目的 了解MDR1-C3435T的基因多态性在汉族、维吾尔族和哈萨克族健康人群中的分布差异,为临床用药提供参考.方法 用PCR-RFLP的方法检测汉族、维吾尔族和哈萨克族MDR1-C3435T等位基因突变位点的分布情况.计算各民族基因型频率,并与已报道的其他民族的基因型频率和等位基因频率进行比较.结果 MDR1-C3435T基因在汉族、维吾尔族和哈萨克族三个民族中常见的等位基因是MDR1-3435T,频率依次为汉族43.3%、维吾尔族58.0%和哈萨克族56.9%.等位基因MDR1-3435T在汉族中的发生频率显著低于维吾尔族和哈萨克族,而突变频率在维吾尔族和哈萨克族之间则无明显差异.汉族的基因突变发生频率与其他亚洲人相似,与高加索人差异显著;而维吾尔族和哈萨克族的发生频率介于亚洲人和高加索人之间.结论 汉族、维吾尔族和哈萨克族的MDR1-C3435T基因型分布有明显的差异,对临床用药将产生显著影响.
作者:王一西;谢志红;叶丽卡;李嘉丽;张羽 刊期: 2013年第06期
目的 研究重组广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(AcCystatin)的理化性质及其生物学功能.方法 原核表达质粒pGEX-4T-1-AcCystatin经诱导表达、纯化酶切后获得纯化AcCystatin,采用Edman降解法N-端氨基酸测序进行重组蛋白鉴定.分别检测其紫外光谱、荧光光谱、圆二色谱和对人源Cathepsin B、Cathepsin G、Cathepsin L和Cathepsin S酶的抑制活性,分析AcCystatin理化性质.结果 重组AcCystatin蛋白经纯化、酶切后相对分子质量约为13 600,纯化效果良好,氨基酸测序结果与理论氨基酸序列完全相同.光谱学检测结果显示重组AcCystatin可形成二硫键,二级结构中α-螺旋、β-折叠和无规卷曲分别占39.57%、35.28%和25.25%.酶抑制实验结果显示AcCystatin可显著抑制Cathepsin B、Cathepsin L和Cathepsin S酶的活性,但对Cathepsin G酶活性无明显作用.结论 获得的可溶性AcCystatin重组蛋白产量大、纯度高、蛋白结构折叠正常,具有良好的生物学活性,为AcCystatin免疫调节机制的深入研究奠定了实验基础.
作者:祝程诚;李宝钏;李舒婷;朱钥;姬鹏宇;赵子然;吴忠道;吕志跃 刊期: 2013年第06期
目的 采用TaqMan探针建立检测沙眼衣原体的实时荧光定量PCR(real-time PCR)方法.方法 根据沙眼衣原体外膜蛋白A的基因(ompA)序列设计引物和探针,以克隆的ompA部分基因片段作DNA模板,建立实时荧光定量检测方法.结果 建立的荧光定量PCR检测方法的低检出限为5 copies/反应,检测线性范围100107线性关系良好(r2=0.997),比巢式PCR敏感100倍;且与鹦鹉热衣原体、淋球菌、解脲脲原体、大肠杆菌等病原菌DNA以及人基因组DNA均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性.以巢式PCR作参比,建立的荧光定量PCR法检测沙眼衣原体的阳性符合率为100.00%,阴性符合率为95.09%,总符合率为96.81%.结论 建立的检测沙眼衣原体实时荧光定量PCR具有特异性强和敏感性高的特点,可快速检测样本中微量沙眼衣原体DNA,适用于对沙眼衣原体进行大规模筛选.
作者:陆中奎 刊期: 2013年第06期
目的 对近年广州市无偿献血血液报废情况进行分析,探讨降低血液报废率的措施,以减少血液浪费.方法 收集广州血液中心2010-2012年所有血液采集制备信息和血液报废的信息,使用统计软件进行整理分析.结果 共采集制备血液2 827 955 U,报废179 794 U,报废率为6.35%;感染性不合格血液导致的报废占总报废量的64.79%,是血液报废的主要原因.感染性不合格血液报废率由高到低依次为ALT (2.12%) >HBV (0.85%)>梅毒(0.53%)>HCV(0.49%)>HⅣ(0.12%);非感染性不合格原因的报废占总报废量的35.20%,报废率由高到低依次为乳糜血(1.63%)>过期血(0.27%)>血袋破裂和渗漏(0.16%)>其他(0.08%)>溶血(0.06%)>血凝块(0.01%)>纤维蛋白析出(0.005%).结论 血液报废的主要原因是感染性标志物阳性导致的血液不合格.做好献血前的征询和宣传,进行ALT初筛,加强献血知识普及和献血前注意事项的告知,对降低血液报废率,加强血液安全有重要意义.
作者:徐国胜;黄可君;游冉冉 刊期: 2013年第06期
目的 探讨与标准剂量氨溴索(60 mg/d)治疗比较,大剂量氨溴索(300 mg/d)治疗社区获得性肺炎(CAP)患者在预后、住院天数、住院费用、氧合指标及血清和痰液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平变化上的差别.方法 采用前瞻性研究方式收集在东莞市东华医院呼吸内科收治的CAP患者120例,采用随机分组方式将入选患者分为标准剂量氨溴索治疗组及大剂量氨溴索治疗组,每组60例.对入选患者进行CURB65评分评估,并对患者预后、住院天数、住院费用、动脉氧分压(PaO2)、吸氧浓度(FiO2)等指标,同时对患者入选及结束治疗时其血清和痰液中TNF-α水平进行检测,后对上述指标进行统计分析.结果 两组患者入选时CURB65评分,治疗前PaO2、FiO2、氧合指数、血清TNF-α、痰液TNF-α等数据比较差异无统计学意义(P均>0.05);治疗后,两组平均住院时间、FiO2、氧合指数、血清TNF-α、痰液TNF-α等数据比较差异均有统计学意义(P均<0.05),而平均住院费用、PaO2差异无统计学意义(P>0.05).标准剂量氨溴索治疗组患者治愈/好转率为75.0%,大剂量氨溴索治疗组患者治愈/好转率为86.7%.结论 大剂量氨溴索治疗有助于改善CAP患者氧合指标及减轻炎症反应指标,降低平均住院时间,并有助于改善患者治愈/好转率.
作者:刘同刚;马诚;刘旺林 刊期: 2013年第06期
目的 观察残余肾功能(RRF)对透析患者心功能的影响分析.方法 将100例维持性血液透析患者以内生肌酐清除率水平为依据分为RRF(+)组和RRF(-)组,并对两组患者进行尿量(UR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、尿素氮(BUN)、肌肝(Scr)、血磷(P3+)、碳酸氢根(HCO3-)、甲状旁腺素(PTH)、血红蛋白(Hb)、内生肌酐清除率(Ccr)的检测,以及分析左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS)的变化.结果 治疗1年后,两组患者的UR、Scr、HCO3-和Ccr与治疗前相比差异均有统计学意义(P<0.05),RRF(+)组的Hb高于RRF(-)组(P<0.05),PTH水平低于RRF(-)组(P<0.05).治疗后RRF(+)组的LVEF和LVFS均高于RRF(-)组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 RRF能提高血液透析患者的透析效能,降低心脏负荷,减低肾毒性物质对心脏的毒害从而改善长期血透患者的心功能损害.
作者:黄宇静;伍锦泉;黄力 刊期: 2013年第06期
目的 探讨不同类型体力活动与缺血性脑卒中的关系.方法 运用病例对照研究的方法,将146例缺血性脑卒中患者作为病例组,156名非脑血管疾病居民作为对照组,运用多因素非条件Logisitic回归模型分析不同类型体力活动与缺血性脑卒中的相关性.结果 多因素非条件Logistic回归分析提示,与闲暇时间体力活动不活跃居民比较,闲暇时间体力活动活跃居民的OR=0.042(95%CI:0.011~0.158),与交通行程体力活动不活跃居民比较,交通行程体力活动活跃居民的OR=0.181(95%CI:0.061~0.534).结论 在该调查人群中闲暇时间体力活动、交通行程体力活动可能与缺血性脑卒中相关.
作者:霍富元;李粲;韩莉娜;谭盛 刊期: 2013年第06期
目的 探讨11β-羟基类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)基因多态性与2型糖尿病及其不同临床表型患者的关系.方法 选择广州医学院第三附属医院和中山大学附属第三医院内分泌科新诊断为2型糖尿病患者345例,根据其空腹血糖和餐后血糖水平的不同,将2型糖尿病分为单纯空腹高血糖(110例)、单纯餐后高血糖(127例)和空腹并餐后高血糖(108例)三种不同临床表型,同时选择96名健康体查者作为对照组进行比较.采用改良碘化钠提取外周血白细胞DNA,应用套式PCR进行目的片段扩增,通过基因测序检测11β-HSD1 5’端-2940多态位点rs846910-G/A基因型及等位基因分布频率,比较2型糖尿病不同临床表型患者及对照组基因型和等位基因分布频率差异.结果 rs846910-A/G的AA、AG、GG基因型以GG较常见,AA较少见.单纯空腹高血糖者的AA、AG、GG基因型的频率分别为5.0%、16.0%和84.0%,单纯餐后高血糖者分别为4.0%、16.6%和80.0%,空腹并餐后高血糖者分别为4.7%、15.8%和79.2%,对照组分别为5.9%、32.9%和61.2%,四组之间比较差异有统计学意义(P<0.05),但三种不同临床表型者之间比较差异无统计学意义(P>0.05).G和A等位基因分布频率主要以G等位基因为主.单纯空腹高血糖者的G和A等位基因分布频率分别为85.2%和14.8%,单纯餐后高血糖者分别为83.5%和16.5%,空腹并餐后高血糖者分别为85.4%和14.6%,对照组分别为75.9%和24.1%,四组之间比较差异有统计学意义(P<0.05),但三种不同临床表型者之间比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 2型糖尿病患者的11 β-HSD1基因多态性与健康对照者分布不同,但在不同临床表型患者之间相似,11β-HSD1基因多态性可能与2型糖尿病发生有关.
作者:许命锋;陈忠城;黄玉玲;刘恩 刊期: 2013年第06期
目的 观察藤黄酸对人结肠癌SW480细胞增殖和APC蛋白表达的影响,探讨其可能抗肿瘤的作用机制.方法 以不同浓度(0、0.5、1、4μg/ml)的藤黄酸干预体外培养的人结肠癌细胞株SW480,分别于24、36、48 h后,应用MTT法检测细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,Western-blot分析APC蛋白的变化.结果 1 μg/ml以上浓度的藤黄酸可以显著抑制人结肠癌细胞株SW480细胞增殖,且随浓度增加效果增强,随着时间增加抑制率显著增加(P<0.01).藤黄酸浓度达到4 μg/ml时,C2/M期细胞达到54.74%;藤黄酸浓度为0、0.5、1、4μg/ml时SW480细胞的凋亡率分别为(0.17±0.08)%、(0.85±0.19)%、(7.12±1.21)%、(15.87±1.59)%.用不同浓度的藤黄酸处理SW480细胞株24 h,APC蛋白的表达随药物浓度的升高而增加(P<0.01).结论 藤黄酸能够抑制人结肠癌细胞株SW480增殖并诱导其凋亡,干扰SW480细胞周期使其阻断于G2/M期,高表达APC蛋白有可能是藤黄酸抗癌作用的重要机制.
作者:杨平;曹杰;张通;王强;孙政;张伟健;曾山崎 刊期: 2013年第06期
目的 探讨尿浓缩和稀释对随机尿蛋白和肌酐比结果的影响.方法 选取慢性肾脏病人213例,按照随机尿肌酐(Ucr)浓度分为5组,A组:35例,Ucr≤2 000 mmol/L;B组:33例,2 000 mmol/L<Ucr≤3 000 mmol/L;C组:46例,3 000 mmol/L< Ucr≤7000 mmol/L;D组:58例,7 000 mmol/L<Ucr≤15 000 mmol/L;E组:41例,Ucr>15 000 mmol/L.所有病例均测定尿蛋白/尿肌酐比值(UACR)和24 h尿蛋白定量(24 h UTP)水平,对各组UACR和24 h UTP进行相关分析和Kappa检验.结果 B、C、D组患者随机尿UACR与24 h UTP呈高度相关且一致性较强,r值分别为0.836、0.886、0.868,Kappa值分别为0.762、0.758、0.753;而A、E组两者呈较低相关且一致性较差.B、C、D组总的r和Kappa值分别为0.887和0.757,仍具有较高的相关性和中度一致性.结论 慢性肾病患者在随机尿2 000 mmol/L<Ucr≤15 000 mmol/L时,UACR可作为24 h UTP定量检测的初筛实验;而在Ucr≤2 000 mmol/L和>15 000 mmol/L时,随机尿UACR结果不可靠.
作者:黄志宏;付文金;徐娜媚;方海畴;方爱娟;陈楚填 刊期: 2013年第06期
目的 分析慢性乙型肝炎患者HBV逆转录酶区耐药变异情况及rtA181变异准种的分布.方法 提取患者血清中HBV DNA,PCR扩增逆转录酶区域,产物测序后经软件比对分析耐药变异情况和基因型;对部分rtA181变异标本进行克隆后测序分析准种分布.结果 489例标本中,检出明确耐药变异265例,在B、C基因型中分布比例存在差异(56.6% vs 43.0%,P=0.022).拉米夫定相关耐药138例(52.1%),以M204I、M204I/V+L180M±L80I/V变异为主;阿德福韦相关耐药35例(13.2%),以N236T+ A181T/V较为多见;拉米夫定+阿德福韦相关耐药70例(26.4%),几乎都和A181有关.rtA181准种分析发现1例位于同一病毒株的多耐药组合,且未发现单一A181T变异的病毒准种.结论 HBV耐药变异主要表现为M204和A181相关变异,耐药模式复杂;检测HBV逆转录酶区的变异有助于临床及时发现和确认耐药情况,指导临床合理进行抗病毒用药.
作者:李平;骆抗先;汪茂荣;杨志国 刊期: 2013年第06期
目的 探讨和评价ALT血液筛查项目在临床用血血液安全中的意义.方法 采用回顾性调查法对2010年10月至2012年12月期间,ALT单项阳性并再次献血的献血者血液筛查结果进行追踪调查和分析.结果 3 910例再次献血者中,HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP以及ALT血液筛查结果均合格3 053例,占再次献血的78.1%,ALT单项仍为阳性845例,占不合格的98.6% (845/857),ALT阴性而ELISA筛查项目阳性9例,核酸筛查阳性3例,其中ALT合并NAT阳性1例.结论 ALT血液筛查在肝炎病毒感染“窗口期”或隐匿性感染中有提示的作用,在一定程度上能减少漏检的发生,在保障血液安全中具有一定的意义.
作者:黎世杰;汪传喜;梁华钦;廖峭;戎霞;陈锦艳;林昌周;梁浩坚 刊期: 2013年第06期
目的 探索香芹酚(CAR)对心肌缺血再灌注(I-R)时线粒体损伤的作用.方法 C57 BL/6小鼠冠状动脉左前降支结扎45 min,解除结扎2h构建心肌I-R损伤模型.将小鼠随机分为3组(每组n=12):假手术组、Vehicle (DMSO in saline)+ I-R组、CAR(60 mg/kg)+ I-R组.Vehicle或CAR于冠脉结扎前15 min给药.心肌缺血45 min再灌注2h后,检测心肌梗死面积,并测定平均线粒体面积、线粒体分裂百分比、线粒体基质微粒及脂滴数量以评估线粒体损伤情况.结果 与假手术组相比,Vehicle组心梗面积显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);与Vehicle组相比,CAR(60 mg/kg)预处理可显著减少心梗面积,差异有统计学意义(P<0.05).与Vehicle组相比,CAR预处理可显著降低平均线粒体面积、线粒体基质微粒数、线粒体周围脂滴数和线粒体分裂百分比,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 CAR可通过减轻心脏组织中线粒体损伤降低小鼠心肌I-R后心梗面积.
作者:王先宝;宋旭东;杨平珍;刘映峰;王丽姿;刘磊;瞿玲玲;陈爱华 刊期: 2013年第06期
目的 研究Bridging integrator 1 (BIN1)在胃腺癌中的表达及其预后价值.方法 通过免疫组化研究BIN1在234个胃腺癌组织样本中的表达,之后运用荧光定量PCR (RT-qPCR)和蛋白质印迹(Western blotting)技术对免疫组化结果进行进一步验证.结果 通过免疫组化数据表明,在234个胃腺癌病例中,有128例的BIN1表达水平下降(54.7%).此外,BIN1的表达水平与组织学分级、肿瘤侵袭、淋巴结转移及TNM分期显著相关(P<0.05).通过RT-qPCR和Western blotting分析,发现与非胃腺癌组织相比较,大多数肿瘤组织中的BIN1的转录和转录后水平下调(P=0.001 5和P=0.012).Kaplan-Meier存活曲线证实BIN1表达水平的下降与胃腺癌患者的预后不良有关.进一步的多因素分析结果提示BIN1是胃腺癌患者的总存活率的独立预后因子(HR=0.552,95%CI:0.354~0.862,P=0.009).结论 在胃腺癌中BIN1表达的下降可导致疾病预后不良,BIN1作为潜在的肿瘤抑制基因可能在防止肿瘤进展方面起重要作用.
作者:刘传新;罗荣城 刊期: 2013年第06期
目的 对体检公务员患糖尿病视网膜病变的情况进行分析,为临床防治提供依据.方法 以2012年1-6月在广东省人民医院进行体检的1 526名公务员为研究对象,调查内容包括基本情况、相关病史资料、相关实验室检查,并进行常规眼科检查等.结果 研究对象的糖尿病患病率为15.66%(239/1 526),并发糖尿病视网膜病变的患病率为32.64%(78/239).糖尿病视网膜病变的患病率在不同性别和不同年龄段之间差异无统计学意义(P>0.05).糖尿病视网膜病变组与非糖尿病视网膜病变的糖尿病组的身高、体重、空腹血糖、糖化血红蛋白、甘油三脂、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白比较差异无统计学意义(P>0.05),而两组间的病程、收缩压、舒张压、餐后2h血糖、总胆固醇、血肌酐、尿素氮比较差异具有统计学意义(P<0.05).结论 该研究人群糖尿病视网膜病变患病率高,糖尿病视网膜病变患者同时患高血压、高胆固醇、肾功能异常等全身异常的几率大.
作者:郭瑞 刊期: 2013年第06期
目的 探讨肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)在新型毒品中毒患者诊治中的意义.方法 将232例新型毒品中毒危重患者按照cTnI的水平分为升高组(97例)和正常组(135例),分别对两组患者一般临床资料、生化指标及APACHEⅡ评分、多器官功能障碍综合征(MODS)发生率、机械通气使用率、总住院时间、死亡率等临床指标进行系统回顾性分析.结果 两组患者一般临床资料、生化指标比较差异均无统计学意义(P>0.05).cTnI升高组APACHEⅡ评分、MODS发生率、机械通气使用率、死亡率、总住院时间均高于cTnI正常组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 伴有cTnI升高的新型毒品中毒危重患者有较高的APACHEⅡ评分、MODS发生率、机械通气使用率和死亡率,且总住院时间较长.监测cTnI水平在新型毒品中毒危重患者病情评估和治疗中可发挥重要作用.
作者:管健;蓝光明;吴彪;郭旭昌;张文;朱永 刊期: 2013年第06期