祝程诚；李宝钏；李舒婷；朱钥；姬鹏宇；赵子然；吴忠道；吕志跃
目的 构建可溶性DC-SIGN(sDC-SIGN)原核表达载体,获得不含标签蛋白的sDC-SIGN蛋白.方法 采用PCR方法,从含人DC-SIGN cDNA的重组质粒pGM-DC-SIGN扩增DC-SIGN胞外区基因片段,插入原核表达载体pET17b,构建重组表达载体pET17b-sDC-SIGN,经酶切图谱和测序鉴定,转入E.coli BL21 (DE3)诱导表达蛋白,用抗人DC-SIGN抗体-Sepharose 4B亲和层系纯化表达产物,以SDS-PAGE和Western blot鉴定.结果 从重组质粒pGM-DC-SIGN扩增获得1 300 bp目的基因片段,构建重组表达质粒pET17b-sDC-SIGN,其酶切图谱和序列与预期相符.纯化表达产物sDC-SIGN,鉴定其分子质量为38 000,Western bolt证明其可与抗人DC-SIGN抗体特异性结合.结论 获得了能高效表达重组人sDC-SIGN的大肠杆菌菌株和不带任何标签蛋白的sDC-SIGN蛋白,为深入研究sDC-SIGN的功能奠定了基础.
作者：张婧；张丽芸；卢晓；陈政良 刊期： 2013年第06期
目的 研究重组广州管圆线虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂(AcCystatin)的理化性质及其生物学功能.方法 原核表达质粒pGEX-4T-1-AcCystatin经诱导表达、纯化酶切后获得纯化AcCystatin,采用Edman降解法N-端氨基酸测序进行重组蛋白鉴定.分别检测其紫外光谱、荧光光谱、圆二色谱和对人源Cathepsin B、Cathepsin G、Cathepsin L和Cathepsin S酶的抑制活性,分析AcCystatin理化性质.结果 重组AcCystatin蛋白经纯化、酶切后相对分子质量约为13 600,纯化效果良好,氨基酸测序结果与理论氨基酸序列完全相同.光谱学检测结果显示重组AcCystatin可形成二硫键,二级结构中α-螺旋、β-折叠和无规卷曲分别占39.57％、35.28％和25.25％.酶抑制实验结果显示AcCystatin可显著抑制Cathepsin B、Cathepsin L和Cathepsin S酶的活性,但对Cathepsin G酶活性无明显作用.结论 获得的可溶性AcCystatin重组蛋白产量大、纯度高、蛋白结构折叠正常,具有良好的生物学活性,为AcCystatin免疫调节机制的深入研究奠定了实验基础.
作者：祝程诚；李宝钏；李舒婷；朱钥；姬鹏宇；赵子然；吴忠道；吕志跃 刊期： 2013年第06期
目的 探索香芹酚(CAR)对心肌缺血再灌注(I-R)时线粒体损伤的作用.方法 C57 BL/6小鼠冠状动脉左前降支结扎45 min,解除结扎2h构建心肌I-R损伤模型.将小鼠随机分为3组(每组n=12):假手术组、Vehicle (DMSO in saline)+ I-R组、CAR(60 mg/kg)+ I-R组.Vehicle或CAR于冠脉结扎前15 min给药.心肌缺血45 min再灌注2h后,检测心肌梗死面积,并测定平均线粒体面积、线粒体分裂百分比、线粒体基质微粒及脂滴数量以评估线粒体损伤情况.结果 与假手术组相比,Vehicle组心梗面积显著增加,差异有统计学意义(P＜0.05)；与Vehicle组相比,CAR(60 mg/kg)预处理可显著减少心梗面积,差异有统计学意义(P＜0.05).与Vehicle组相比,CAR预处理可显著降低平均线粒体面积、线粒体基质微粒数、线粒体周围脂滴数和线粒体分裂百分比,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 CAR可通过减轻心脏组织中线粒体损伤降低小鼠心肌I-R后心梗面积.
作者：王先宝；宋旭东；杨平珍；刘映峰；王丽姿；刘磊；瞿玲玲；陈爱华 刊期： 2013年第06期
目的 观察促红细胞生成素(EPO)对同型半胱氨酸(Hcy)导致的血管内皮细胞损伤是否具有保护作用.方法 采用不同浓度(1.25、2.5、5、10、20 mmol/L)的Hcy处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC),观察细胞的损伤情况,建立Hcv诱导的内皮细胞损伤模型,然后采用不同浓度(0.1、1、10、100 U/ml)的EPO进行预处理,观察细胞的损伤情况.通过MTT法测定细胞存活率,ELISA法检测细胞上清IL-6含量,Hoechst33258染色检测细胞凋亡来评价细胞损伤情况.结果 Hcy对HUVEC有损伤作用,并且随浓度增加损伤作用更明显.EPO可增加细胞存活率,抑制Hcy诱导HUVEC IL-6的产生,抑制细胞凋亡.结论 EPO对Hcy导致的内皮细胞损伤具有一定的保护作用.
作者：李敏子；杨卫红；刘振华 刊期： 2013年第06期
目的 观察残余肾功能(RRF)对透析患者心功能的影响分析.方法 将100例维持性血液透析患者以内生肌酐清除率水平为依据分为RRF(+)组和RRF(-)组,并对两组患者进行尿量(UR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、尿素氮(BUN)、肌肝(Scr)、血磷(P3+)、碳酸氢根(HCO3-)、甲状旁腺素(PTH)、血红蛋白(Hb)、内生肌酐清除率(Ccr)的检测,以及分析左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS)的变化.结果 治疗1年后,两组患者的UR、Scr、HCO3-和Ccr与治疗前相比差异均有统计学意义(P＜0.05),RRF(+)组的Hb高于RRF(-)组(P＜0.05),PTH水平低于RRF(-)组(P＜0.05).治疗后RRF(+)组的LVEF和LVFS均高于RRF(-)组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 RRF能提高血液透析患者的透析效能,降低心脏负荷,减低肾毒性物质对心脏的毒害从而改善长期血透患者的心功能损害.
作者：黄宇静；伍锦泉；黄力 刊期： 2013年第06期
目的 探讨比伐卢定(直接凝血酶抑制剂)在大鼠胰岛分离过程中保护胰岛细胞的作用.方法 将SD大鼠分为比伐卢定处理组和对照组,处理组在胰岛分离全过程中加用比伐卢定进行干预,对照组则不加比伐卢定处理,采用Ficoll非连续密度离心纯化后对两组胰岛细胞的凋亡(采用原位末端核苷酸标记法及流式细胞仪检测)、胰岛产量及活力方面进行比较性研究.结果 比伐卢定5000U处理组的胰岛细胞凋亡计数(5±4)个/HPF、凋亡率(16.5±3.6)％、Fas-1基因表达水平(4.6±1.9)％均显著低于对照组(P＜0.01),胰岛产量(315.3±6.1)IEQ、胰岛素释放水平(179.11±2.18)mIU/L和Bcl-2基因表达水平(10.5±1.2)％均显著高于对照组(P＜0.01),差异有统计学意义.结论 胰岛分离过程中加用比伐卢定对胰岛具有抑制凋亡、提高胰岛产量和保护胰岛活力的作用.
作者：邱立；柳玉红；温寿青；汪春福 刊期： 2013年第06期
目的 对云南宾川地区爆发人体片形吸虫病的村落进行牛羊的片形吸虫感染调查和检测,为当地片形吸虫病的研究提供数据.方法 采用尼龙袋集卵法收集牛羊粪便中的虫卵,进行镜检.对检出的样本进行PCR扩增和测序；用MP法、NJ法及ML法进行种系发育分析.结果 从134 (28.63％)头牛和27(25.23％)头羊中查到了片形吸虫的虫卵,对所检到的虫卵进行线粒体pcox1基因的扩增和测序,比对后发现所检样本主要为肝片吸虫和大片吸虫两个种.采用MP法、NJ法及ML法进行种系发育分析表明,宾川地区牛羊感染的片形吸虫虫种主要为肝片吸虫和大片吸虫两种.结论 宾川地区牛羊片形吸虫感染严重,云南宾川为肝片形吸虫及大片形吸虫混合感染地区,当地政府应重视该病的防治.
作者：艾琳；陈木新；吕山；臧伟；诸廷俊；许学年；蔡玉春；陈韶红；罗家军 刊期： 2013年第06期
目的 探讨和评价ALT血液筛查项目在临床用血血液安全中的意义.方法 采用回顾性调查法对2010年10月至2012年12月期间,ALT单项阳性并再次献血的献血者血液筛查结果进行追踪调查和分析.结果 3 910例再次献血者中,HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP以及ALT血液筛查结果均合格3 053例,占再次献血的78.1％,ALT单项仍为阳性845例,占不合格的98.6％ (845/857),ALT阴性而ELISA筛查项目阳性9例,核酸筛查阳性3例,其中ALT合并NAT阳性1例.结论 ALT血液筛查在肝炎病毒感染“窗口期”或隐匿性感染中有提示的作用,在一定程度上能减少漏检的发生,在保障血液安全中具有一定的意义.
作者：黎世杰；汪传喜；梁华钦；廖峭；戎霞；陈锦艳；林昌周；梁浩坚 刊期： 2013年第06期
目的 分析慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)合并肝损害患者的临床特点、保肝治疗对其预后的影响.方法 回顾性分析82例AECOPD合并肝损害者的外周血白细胞计数、中性粒细胞百分比、肝功能及动脉血气分析,并对治疗前后检验结果、住院天数、住院费用、肝功能转归和死亡率进行比较分析.结果 AECOPD患者治疗后症状、动脉血氧分压(PaO2)、外周血白细胞、中性粒细胞百分比和肝功能各参数值较治疗前均有明显改善(P＜0.01)；随pH值、PaO2、PaCO2指标的改善及感染的控制,肝功能亦逐渐恢复至正常.酸中毒时(pH＜7.35)pH值与ALT、AST结果显著负相关,PaO2与ALT、AST结果显著负相关,PaCO2与ALT、AST结果显著正相关.结论 AECOPD患者肝脏功能有明显的损害,给予抗感染等原发病治疗,肝功能可恢复正常,但常规护肝降酶治疗对转归无显著影响.
作者：吴燕廷；廖卫平 刊期： 2013年第06期
目的 探讨IVF-ET助孕治疗中新鲜周期移植不孕而后续的冷冻周期成功妊娠的原因以指导治疗.方法 回顾性分析体外受精或单精子卵母细胞浆内注射-胚胎移植术(IVF/ICSI-ET)治疗患者950个周期,其中新鲜周期妊娠组780个周期和新鲜周期未孕冷冻周期妊娠组170个周期,比较两组患者年龄、不孕年限、病因及基础FSH水平、Gn使用情况、hCG日内膜、激素水平、卵泡数、获卵及胚胎情况的差异.采用单因素分析筛选出差异有统计学意义的因素进行多因素分析.结果 经Logistic回归分析得出hCG日P4、hCG日E2/1 000是妊娠的独立影响因素.hCG日P4(OR=1.653,P=0.015,95％ CI:1.101～2.482),hCG日E2/1 000(OR=1.219,P=0.001,95％ CI:1.085～1.369).hCG日酮孕每增加1 ng/ml,新鲜周期不孕而冷冻周期妊娠的风险将增加1.653倍.hCG日E2每增加1 000 pg/ml,新鲜周期不孕而冷冻周期妊娠的风险将增加1.219倍.结论 hCG日的P4和E2是导致新鲜移植不孕而冷冻周期妊娠的重要原因.P4和E2过高,可考虑放弃新鲜移植,采用冷冻移植.
作者：谭焱；宋亚丽；马从顺；刘颖；邢福祺 刊期： 2013年第06期
目的 观察脾脏NK细胞及NKT细胞在黄芪多糖(APS)发挥免疫佐剂功能的作用.方法 使用鸡卵白蛋白(OVA)与APS经皮下免疫C57BL/6小鼠3次.末次免疫7～14 d,取血清,使用ELISA观察OVA特异性抗体的含量；分离脾脏淋巴细胞,使用流式细胞仪检测NK和NKT细胞的百分比含量；使用PMA和Ionimycin刺激淋巴细胞,使用细胞内细胞因子染色的方法检测IFN-γ和IL-4的分泌情况.结果 APS组小鼠OVA特异性抗体含量明显高于OVA组小鼠(P＜0.05),但小鼠脾脏内NK和NKT细胞的百分比含量与OVA组和正常小鼠差别不大(P＞0.05).经PI刺激以后,APS组小鼠脾脏内NK细胞中IL-4+细胞明显高于OVA组和正常组(P＜0.05),且IFN-γ+细胞的比例明显下降(P＜0.05)；虽然经过PI刺激以后,APS组小鼠脾脏内NKT细胞中IL-4+细胞升高不明显,但是IFN-γ+细胞的比例明显下降(P＜0.05).结论 APS可以通过调节NK和NKT细胞的功能来促进体液免疫应答.
作者：谢红艳；张文伟；林丹义；吴凡；余秀雪；陈殿慧；罗雪平；王颖；黄俊 刊期： 2013年第06期
目的 了解深圳市福田区医疗机构消毒效果.方法 对2006-2012年146家医疗机构消毒效果监测数据进行分析.结果 共采样12 287份,合格11 857份,合格率96.5％.2006-2012年合格率分别为96.7％、97.2％、95.2％、95.9％、95.2％、97.9％、97.2％,差异有统计学意义(x2=39.465,P＜0.05).室内空气、物体表面、医护人员手、使用中消毒液、污水合格率依次为97.3％、97.2％、90.9％、99.7％、98.9％、96.5％,差异有统计学意义(x2=374.858,P＜0.05).市级医院、区级医院、私营医院和个体诊所的消毒合格率分别为97.8％、97.9％、97.3％和94.1％,差异有统计学意义(x2=104.470,P＜0.05).结论 采取措施加强对医疗机构消毒工作的管理,重点是个体诊所和手卫生方面.
作者：钟剑明；周志峰；石向辉；刘小敏；黄慧萍；陈建忠 刊期： 2013年第06期
目的 研究外源性肿瘤坏死因子α(TNF-α)对原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)活性及程序性死亡因子配体PD-L1蛋白表达的影响,探讨动脉粥样硬化的免疫机制.方法 体外培养HUVECs,加入不同浓度TNF-α持续刺激48 h,CCK-8法检测450 nm波长处吸光度值(OD值),计算细胞生长存活率.选同代细胞重复培养并干预,Western blot方法检测细胞PD-L1蛋白表达.使用SB203580阻断p38MAPK通路后再用TNF-α干预HUVECs,比较各组细胞PD-L1蛋白表达.结果 实验组HUVECs在450 nm波长处的吸光度值较空白对照组明显降低(P＜0.05),细胞存活率依次下降.实验组细胞PD-L1蛋白表达随TNF-α浓度增高逐渐降低(P＜0.05).TNF-α单独刺激组PD-L1蛋白表达较TNF-α与SB203580共刺激组明显降低(P＜0.05),SB203580阻断效应明显.结论 TNF-α可明显抑制HUVECs细胞活性,并降低PD-L1蛋白表达,p38MAPK通路可能参与了这一过程.
作者：吕自明；刘映峰；缪绯；龙日；刘芃；刘磊 刊期： 2013年第06期
目的 评价绒毛细胞染色体核型分析在孕早期产前诊断中的应用价值.方法 对有产前诊断指征的孕妇在B超引导下经腹绒毛穿刺取绒毛组织行细胞培养、染色体制备及核型分析.结果 成功培养绒毛细胞451例,培养成功率为97.41％,共发现胎儿染色体核型异常136例,异常检出率为30.16％.136例异常核型中染色体数目异常79例(58.09％),其中包括常染色体三体型55例,性染色体数目异常23例,三倍体1例.检出染色体结构异常11例,嵌合体16例,染色体多态性30例.超声筛查胎儿异常及夫妇染色体结构异常携带这两个指征检出胎儿染色体异常率高.结论 孕早期绒毛细胞染色体检查结合孕早期超声筛查及血清学筛查能及早发现胎儿染色体异常并早期干预,对于减少染色体畸形儿的出生具有重要的意义.
作者：钟惠珠；易翠兴；潘敏；杨昕；刘晗；袁思敏；李东至 刊期： 2013年第06期
目的 建立贾第鞭毛虫和隐孢子虫的基因检测方法.方法 根据GenBank中贾第鞭毛虫和隐孢子虫相对保守序列,设计引物及其相应的Taqman探针.通过对引物和探针浓度、Taq酶以及反应条件等优化筛选后,建立检测贾第鞭毛虫和隐孢子虫的荧光PCR方法.结果 贾第鞭毛虫和隐孢子虫的检测结果为阳性,对其它DNA样本如日本血吸虫、刚地弓形虫、溶组织内阿米巴、旋毛虫和阴道毛滴虫的检测均为阴性.本法的敏感性高,可检测到10～102copies/μl的DNA浓度.结论 建立的基因检测方法,对贾第鞭毛虫和隐孢子虫的检测具有高度的特异性和敏感性,可用于饮用水和临床样本等的快速检测.
作者：杨晓华；侯炎昌 刊期： 2013年第06期
目的 探讨肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)在新型毒品中毒患者诊治中的意义.方法 将232例新型毒品中毒危重患者按照cTnI的水平分为升高组(97例)和正常组(135例),分别对两组患者一般临床资料、生化指标及APACHEⅡ评分、多器官功能障碍综合征(MODS)发生率、机械通气使用率、总住院时间、死亡率等临床指标进行系统回顾性分析.结果 两组患者一般临床资料、生化指标比较差异均无统计学意义(P＞0.05).cTnI升高组APACHEⅡ评分、MODS发生率、机械通气使用率、死亡率、总住院时间均高于cTnI正常组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 伴有cTnI升高的新型毒品中毒危重患者有较高的APACHEⅡ评分、MODS发生率、机械通气使用率和死亡率,且总住院时间较长.监测cTnI水平在新型毒品中毒危重患者病情评估和治疗中可发挥重要作用.
作者：管健；蓝光明；吴彪；郭旭昌；张文；朱永 刊期： 2013年第06期
目的 研究应用不同方案行索拉非尼联合经皮肝动脉化疗栓塞(TACE)及射频消融(RFA)(局部介入术前开始应用索拉非尼以及局部介入术后开始应用索拉非尼)治疗中晚期＞5cm肝癌的适用性及安全性,初步观察其疗效.方法 2008年11月始筛选纳入＞5 cm的中晚期肝癌患者.随机分为2组,A组为先行TACE联合RFA,术后开始口服索拉非尼；B组为先口服索拉非尼1～2周,再行TACE及RFA.规律随访,观察毒副反应的发生情况及患者生存情况.结果 截至2013年2月21日,A组与B组分别纳入患者15例.肝癌直径(8.9±3.1)cm,患者随访时间(27±11.8)月.两组均未发生与治疗相关的死亡,索拉非尼主要相关不良反应有手足皮肤反应(53.3％ vs 66.7％,P=0.710)、食欲下降(53.3％ vs 46.7％,P=0.999)、乏力(53.3％ vs 40.0％,P=0.715)以及腹泻(33.3％ vs 46.7％,P=0.710)等,只有1例患者出现4级的上消化道出血,两组比较差异均无统计学意义.两组患者的远期生存疗效差异无统计学意义(中位生存时间:A组31月vs B组32月,x2=0.050,P=0.822).结论 两种联合方案在治疗中晚期大肝癌均是安全适用的,且治疗风险相当.生存分析并未显示出应用哪一种联合方案更具有优势.
作者：梁恒毅；陆骊工；李勇；胡宝山 刊期： 2013年第06期
目的 了解广州市海珠区18岁以上社区居民脑卒中患病率及高血压、糖尿病等常见危险因素在人群中的分布.方法 2012年12月采用Kish Grid表法分层抽样后问卷调查的方法,在海珠区瑞宝社区抽取1 000人为调查对象,采用x2检验和t检验对结果进行统计分析.结果 海珠区居民脑卒中、冠心病的患病率均较2008年有明显上升(3.4％ vs 1.6％,18.5％vs 4.5％),而高血压病、糖尿病、血脂异常、肥胖率和吸烟率均较2008年下降(16.2％ vs 22.9％,7.0％vs 9.2％,37.9％ vs 59.7％,6.2％vs 7.1％,18.2％vs 24.6％),差异有统计学意义(P＜0.05).男性高血压患病率、吸烟率和饮酒率分别为20.0％、29.0％和11.2％,与女性11.9％、5.8％和5.1％相比较高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 海珠区脑卒中患病率上升呈年轻化趋势,冠心病患病率较前增高,应提倡早期对心脑血管疾病相同危险因素进行筛查并控制预防.
作者：李粲；韩莉娜；霍富元；陈健；金俊；吴培华；李武英；郭阳；谭盛 刊期： 2013年第06期
目的 研究Bridging integrator 1 (BIN1)在胃腺癌中的表达及其预后价值.方法 通过免疫组化研究BIN1在234个胃腺癌组织样本中的表达,之后运用荧光定量PCR (RT-qPCR)和蛋白质印迹(Western blotting)技术对免疫组化结果进行进一步验证.结果 通过免疫组化数据表明,在234个胃腺癌病例中,有128例的BIN1表达水平下降(54.7％).此外,BIN1的表达水平与组织学分级、肿瘤侵袭、淋巴结转移及TNM分期显著相关(P＜0.05).通过RT-qPCR和Western blotting分析,发现与非胃腺癌组织相比较,大多数肿瘤组织中的BIN1的转录和转录后水平下调(P=0.001 5和P=0.012).Kaplan-Meier存活曲线证实BIN1表达水平的下降与胃腺癌患者的预后不良有关.进一步的多因素分析结果提示BIN1是胃腺癌患者的总存活率的独立预后因子(HR=0.552,95％CI:0.354～0.862,P=0.009).结论 在胃腺癌中BIN1表达的下降可导致疾病预后不良,BIN1作为潜在的肿瘤抑制基因可能在防止肿瘤进展方面起重要作用.
作者：刘传新；罗荣城 刊期： 2013年第06期
目的 探讨不同类型体力活动与缺血性脑卒中的关系.方法 运用病例对照研究的方法,将146例缺血性脑卒中患者作为病例组,156名非脑血管疾病居民作为对照组,运用多因素非条件Logisitic回归模型分析不同类型体力活动与缺血性脑卒中的相关性.结果 多因素非条件Logistic回归分析提示,与闲暇时间体力活动不活跃居民比较,闲暇时间体力活动活跃居民的OR=0.042(95％CI:0.011～0.158),与交通行程体力活动不活跃居民比较,交通行程体力活动活跃居民的OR=0.181(95％CI:0.061～0.534).结论 在该调查人群中闲暇时间体力活动、交通行程体力活动可能与缺血性脑卒中相关.
作者：霍富元；李粲；韩莉娜；谭盛 刊期： 2013年第06期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
