学术投稿

双重荧光定量RT-PCR快速检测流感病毒H1、H3亚型的研究

肖丽霞;刘涛;李健雄;王婷;房师松

关键词:流感病毒, H1亚型, H3亚型, 荧光定量RT-PCR
摘要:目的 利用荧光定量RT-PCR技术建立一种快速检测流感病毒H1、H3亚型的方法.方法 根据H1、H3亚型流感病毒HA基因的相对保守序列,设计两对引物及其相应的Taqman探针,利用一步法RT-PCR试剂盒建立优化反应体系后,将荧光定量RT-PCR的产物采用10倍稀释法,即107~100 copies/μl,再次用荧光定量PCR方法检验建立体系的灵敏度和重复性,并建立相对定量标准曲线;利用多种流感病毒和具有相似临床症状的呼吸道病毒检验建立体系的特异性.结果 H1和H3亚型流感病毒的检测灵敏度为102 copies/μl,扩增效率分别为101.35%和113.28%,标准曲线相关系数大于99%,重复性良好,特异度实验未发现有非特异性扩增.结论 本研究建立的双重荧光定量RT-PCR技术可以快速、准确地检测H1、H3亚型流感病毒.
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  • 产ESBLs、AmpC、KPC酶的葡萄糖不发酵细菌的耐药性分析及临床分布

    目的 了解本地区葡萄糖不发酵细菌中泛耐药菌(代表株铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌)在临床标本中的分离与耐药情况,为临床合理使用抗生素提供指导.方法 对临床分离的180株葡萄糖不发酵细菌进行分类鉴定和药敏试验,并用纸片扩散法筛选出产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(AmpC酶)及碳青霉烯类水解酶(KPC酶)的耐药菌株.结果 在葡萄糖不发酵细菌的梅成比中,其中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)56株(31.1%),产AmpC酶22株(12.2%),KPC酶2株(1.1%);同时产ESBLs和AmpC酶16株(8.9%),同时产ESBLs、AmpC、KPC酶1株(0.6%).3种主要葡萄糖不发酵细菌对头孢他啶、头孢三嗪、头孢噻肟、哌拉西林的耐药率高,其中铜绿假单胞菌对阿米卡星、左氧氟沙星、环丙沙星耐药率较低,鲍曼不动杆菌对亚胺培南、左氧氟沙星耐药率较低,嗜麦芽窄食单胞菌对复方新诺明、环丙沙星耐药率较低.结论 葡萄糖不发酵细菌中泛耐药菌特别是铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌均有较高的多重耐药性,临床上应重视葡萄糖不发酵细菌引起的感染,根据药敏试验结果合理使用抗生素.

    作者:伍尚剑;袁炜华;潭宗宪;辛伟标;陈聚兴 刊期: 2012年第01期

  • 不同种鼠对实验脑型疟发生的影响研究

    目的 比较昆明小鼠和C57BL/6小鼠作为种鼠对实验脑型疟模型的影响.方法 分别以伯氏疟原虫ANKA株感染C57BL/6小鼠和昆明小鼠作为传代用种鼠,当种鼠原虫率为5%~15%时接种子代C57BL/6小鼠,观察两组小鼠原虫率、脑型疟发生率以及死亡率.同时,通过脑组织切片和脑部淋巴细胞的流式检测,观察两组发生脑型疟小鼠的脑部微血管中感染疟原虫红细胞和CD8+T细胞的粘附情况,另外,通过感染CD8+T KO小鼠,证实CD8+T细胞在两组小鼠发生脑型疟中的作用.结果 用昆明小鼠作为种鼠的实验组的原虫率和脑型疟发生率均明显高于用C57BL/6小鼠作为种鼠的实验组,发生脑型疟小鼠的脑部组织切片发现,脑部微血管可见明显的感染疟原虫红细胞的粘附和CD8+T淋巴细胞浸润;而用昆明小鼠作为种鼠感染CD8+T细胞缺失的C57BL/6小鼠并不能诱导实验脑型疟的发生.结论 与C57BL/6小鼠相比,昆明小鼠作为种鼠的实验组的脑型疟发病率更高,而且感染疟原虫红细胞和CD8+T细胞在脑部微血管内的粘附也是该脑型疟发生的主要因素,因此,更适合用于实验脑型疟模型的建立及其机制的探讨.

    作者:付雍;丁艳;郭波;刘太平;郑鸿;谭章平;徐文岳 刊期: 2012年第01期

  • 基于WEB的寄生虫虫卵特征分类检索系统的建立

    目的 利用数字化技术和网络技术,方便基层医务人员和研究人员获取寄生虫病防治和研究的相关数据资源,特别是辅助其进行虫卵的甄别.方法 使用基于web 2.0的网络技术、特征提取算法和数据库检索的相关技术对寄生虫虫卵的特征进行归纳、提取和分类识别的研究,制定其特征数据编码存储规则和虫卵检索、识别的流程.结果 构建了基于网络设施基础上的病原体远程监测网站系统,可提供寄生虫虫卵特征分类检索的手段与服务.结论 测试结果表明,建立的寄生虫虫卵特征分类检索方案是可行和有效的,值得推广试用.

    作者:方子豪;刘燕;李正宇;刘治远;吴忠道 刊期: 2012年第01期

  • 实时荧光定量PCR检测泌尿生殖道患者尿液解脲脲原体

    目的 应用实时荧光核酸恒温扩增检测技术(SAT)检测泌尿生殖道患者尿液解脲脲原体(UU),并评价其敏感性和特异性.方法 对140例疑似泌尿生殖道感染患者的拭子和尿液样本,分别采用培养法、SAT进行解脲脲原体检测,检测结果有差异的标本用实时荧光定量PCR法对拭子进行复测,根据实验结果评估SAT检测尿液UU的敏感性和特异性.结果 140例疑似患者试子培养和尿液SAT检测阳性率均为60%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05),其中16例培养结果与SAT检测结果不一致,8例培养法阳性、SAT阴性的拭子PCR结果复测阳性;8例培养法阴性、SAT阳性的拭子标本PCR结果4例阴性、4例阳性,结合培养法结果和PCR结果作为“扩大金标准”,得出SAT对尿液检测的敏感性为95.5%、特异性为100%.结论 SAT检测泌尿生殖道患者尿液UU具有取样方便,检测快速、准确等优点,适用于临床实验室泌尿生殖道UU的检测.

    作者:李林海;何宇玲;石玉玲;杨永泉;陈建芸 刊期: 2012年第01期

  • 腰大池持续外引流合并鞘内注射尿激酶治疗脑血管痉挛的临床效果

    目的 探讨鞘内局部注射尿激酶治疗蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的疗效.方法 将动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者随机分为对照组和实验组,对照组采用常规综合治疗加静脉泵入尼莫地平治疗,实验组在对照组的基础上放置腰大池引流管并脑池内注射尿激酶治疗,通过观察病情变化评价两组的治疗疗效.结果 实验组剧烈头痛、恶心呕吐、意识障碍及脑膜刺激征等主要症状及体征的缓解率明显高于对照组(P<0.05),实验组(5/26)脑血管痉挛发生率明显低于对照组(10/24,P<0.05).结论 早期鞘内注射尿激酶并持续外引流防治脑血管痉挛的效果良好,且术后脑积水的并发症少.

    作者:刘政委;孔文龙;石小峰;尹夕龙;纠智松;叶宇;黄凯雄;陈委 刊期: 2012年第01期

  • 慢性乙型肝炎患者健康相关生命质量评价研究现状

    随着社会的发展,健康相关生命质量的评估越来越受到人们的重视.慢性乙型肝炎常给患者带来抑郁或焦虑的负面影响,使其心理、生理、社会功能降低.因此,评估慢性乙型肝炎患者健康相关生命质量以及治疗措施对患者健康相关生命质量的改善具有十分重要的意义.本文主要综述了国内外对慢性乙型肝炎患者健康相关生命质量的研究现状,包括常用测评工具、慢性乙肝患者健康相关生命质量评价的应用领域和相关影响因素以及控制措施.

    作者:邹俐;郑萍;侯连兵 刊期: 2012年第01期

  • SUMO化修饰在病毒感染中的作用研究进展

    Small ubiquitin-related modifier (SUMO)是一类重要的类泛素蛋白,其修饰过程与泛素类似,但功能不尽相同,SUMO通过对底物蛋白的修饰来调节蛋白间的相互作用、定位及稳定性等功能.近年来,包括一些病毒蛋白在内的大量底物蛋白陆续被发现,SUMO化作为一种重要的蛋白质翻译后修饰,在病毒对宿主细胞的感染中既可发挥促进病毒感染的作用,也可发挥抑病毒感染的作用.

    作者:何莉;张萍;吴敏吴;黄曦 刊期: 2012年第01期

  • 东莞市男男性行为者艾滋病知识行为调查

    目的 了解男男性行为者(MSM)艾滋病防治知识掌握情况及高危行为方式,为在该人群中开展艾滋病预防干预工作提供依据.方法 在男男性行为者聚集场所进行问卷调查.结果 调查对象年龄中位数为29岁,以未婚、高中文化程度、省外流动人口及在东莞居住2年以上者为主;艾滋病知识知晓率为91.75%;74.75%的调查者在过去的6个月中有过同性性行为(其中3.34%的人有过同性商业性行为),其中51.84%的人每次都使用安全套;39%的人在过去的6个月与女性有过性行为,其中37.82%的人每次都使用安全套;27.25%的人在过去的6个月与男性、女性都有过性行为;7.25%的人在近一年曾患过性病;10.5%的人HIV抗体筛查结果阳性.结论 应采用民间组织宣传干预与VCT检测相结合的模式,加强MSM人群的艾滋病宣传教育工作,推广使用安全套,防止HIV在MSM人群中的传播及经其女性性伴向一般人群传播.

    作者:陈柏芬;钟洁莹;张巧利;朱建琼;伦玉华;王晓霞;刘爱红;方昌勇;卓彬鼓 刊期: 2012年第01期

  • 血管内支架治疗鼻咽癌放疗后颈部血管狭窄闭塞病变的效果

    目的 探讨血管内支架置人术治疗鼻咽癌放疗后的颈动脉狭窄或闭塞病变的疗效.方法 对3例鼻咽癌患者放疗后出现严重动脉狭窄或闭塞病变的颈部血管行球囊成形术及支架置入术并进行随访.结果3例患者均为男性,其中1例为双侧颈动脉闭塞,进行了一侧颈动脉闭塞病变再通术;1例为双侧颈动脉重度狭窄,进行了左侧颈动脉支架成形术;1例右颈内动脉起始段严重狭窄,左侧颈动脉闭塞,对右侧颈动脉严重狭窄处进行了血管内支架治疗;经过随访并未发现有支架内再狭窄.结论 血管内支架置人术是治疗鼻咽癌放疗后颈部血管重度狭窄或闭塞病变的有效手段.

    作者:杨志华;刘磊;李少明;邵明 刊期: 2012年第01期

  • 定坤汤联合敏使朗治疗椎动脉型颈椎病的临床疗效分析

    目的 观察定坤汤联合敏使朗治疗椎动脉型颈椎病的临床效果.方法 随机选取106例门诊椎动脉型颈椎病患者,将106例患者随机分为治疗组与对照组,每组各53例.治疗组给予口服定坤汤、敏使朗,对照组给予口服敏使朗,分别观察治疗前后两组患者临床症状的变化.结果 治疗组痊愈31例,显效11例,有效6例,无效5例,总有效率为90.57%;对照组痊愈21例,显效8例,有效12例,无效12例,总有效率为77.36%,两组疗效比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 定坤汤联合敏使朗治疗椎动脉型颈椎病的疗效可靠,值得临床推广应用.

    作者:魏国健 刊期: 2012年第01期

  • 非诺贝特对高甘油三酯血症并骨质疏松大鼠骨代谢的影响

    目的 探讨非诺贝特对去卵巢骨质疏松并高甘油三酯(TG)血症大鼠股骨中细胞核因子κB受体活化因子配体/护骨素(RANKL/OPG)mRNA表达的影响.方法 将40只3月龄雌性SD大鼠,用果糖饲养复制高TG模型,大鼠共分为去卵巢+果糖组、去卵巢+果糖+非诺贝特(FF)组、去卵巢+普食组、假手术+果糖组.12周后取股骨检测细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL) mRNA、护骨素(OPG)mRNA表达水平.结果 去卵巢+果糖组的TG水平高于去卵巢+普食组(P<0.01),也高于去卵巢+果糖+FF组(P<0.01);去卵巢+果糖组RANKL mRNA/OPG mRNA水平,均高于去卵巢+果糖+FF组、去卵巢+普食组和假手术+果糖组(P<0.01或<0.05).结论 非诺贝特可通过降低TG而保持RANKL mRNA/OPG mRNA的平衡.

    作者:曾炼坤;刘雪芳;邱丽浈;李万根;邓煜辉;夏碧文 刊期: 2012年第01期

  • 不同年龄组肺结核合并糖尿病患者的临床特征

    目的 分析不同年龄组肺结核合并糖尿病住院患者的临床特点.方法 将126例肺结核合并糖尿病的住院患者分为老年组(≥60岁)和中青年组(30~59岁),观察两组糖尿病症状、肺结核症状、空腹血糖水平、痰涂片抗酸杆菌阳性(涂阳)结果和X线胸片表现等情况.结果 中青年组糖尿病症状和肺结核症状比老年组更明显;中青年组涂阳发生率高于老年组(76.5%比42.2%,P<0.01),中青年组空洞发生率也高于老年组(84.0%比48.9%,P<0.01),差异均有统计学意义;中青年组空腹血糖水平>16.7 mmol/L的发生率高于老年组(45.7%比31.1%,P>0.05),病灶所占5~6肺野发生率中青年组亦高于老年组(29.6%比22.2%,P>0.05),但差异均无统计学意义.结论 老年组与中青年组肺结核合并糖尿病住院患者临床特征有所不同,中青年组较老年组的临床症状更严重.

    作者:杨仪;黄钥藩;陈尊杰 刊期: 2012年第01期

  • ATDE教学模式在《临床免疫学与检验》实验教学中的应用

    目的 探索新的医学检验实验教学方式,以适应医学检验学科的发展及教学模式的转变.方法 在医学检验本科班《临床免疫学与检验》实验教学中引入ATDE模式,探讨其在《临床免疫学与检验》教学中的实施过程及实施注意事项.结果 该教学法可以有效地培养学生的思维能力及动手能力,受到了同学们的欢迎和认可.结论 ATDE教学模式能增加学生对《临床免疫学与检验》实验的兴趣,提高学生的创新能力,是目前实验教学改革的新举措之一.

    作者:姚军 刊期: 2012年第01期

  • 腹股沟疝修补术围手术期抗菌药物使用的合理性评价

    目的 了解I类切口疝修补术手术预防性使用抗菌药物情况,为加强抗菌药物的合理使用和规范管理提供依据.方法 随机抽查2010年6-12月本院普外科出院的80例疝修补术患者住院病历,对抗菌药物的使用情况进行统计分析.结果 I类切口疝修补手术预防用药率为100%;使用的抗菌药物品种为头孢唑啉和克林霉素;使用时间为1~5 d,平均3.2 d,用药时间小于24h为8例(10.0%);术前30 min至2 h 100%预防使用抗菌药物.结论 I类切口疝修补术手术预防用药存在使用率高及用药时间过长等问题,应进一步规范管理,以促进抗菌药物的合理使用.

    作者:郝伟迤;刘丹;罗晓波;杨思芸;李胜前 刊期: 2012年第01期

  • 小儿左冠状动脉异常的矫治术麻醉管理方法探讨

    目的 分析小儿起源于肺动脉的左冠状动脉异常矫治手术的麻醉特点,为今后开展类似手术提供可行的麻醉管理方法.方法 回顾性分析2006年3月至2010年7月本院20例小儿起源于肺动脉的左冠状动脉异常矫治术的麻醉管理方法.结果 采用静吸复合全麻,术中均未出现急性心衰或心梗,CPB时间为58~204( 80.6±44.4)min,主动脉阻断时间为25~ 125( 53.4±32.2) ain,开放主动脉后均自动复跳,适时应用血管活性药物,以保证麻醉平稳,停CPB时SBP为(78.6+8.0)mmHg,DBP为(45.4±3.5)mmHg,HR为(130.8±10.5)次/min,术中无死亡及麻醉并发症.1例术后第2天死于严重低心排综合征,死亡率为5%,其余痊愈出院.结论 小儿左冠状动脉异常矫治术以静吸复合全麻的方法,辅以严密监测,尽力维持血流动力学稳定,积极采取各种措施避免加重心肌缺血的麻醉管理方法是正确可行的,可以推广应用于术前有心功能损害的手术.

    作者:张永勤;梁杰贤 刊期: 2012年第01期

  • 广州市海珠区2007-2010年麻疹、风疹检测结果分析

    目的 分析广州市海珠区2007-2010年麻疹、风疹流行特征,为麻疹、风疹的预防和控制提供可靠依据.方法 对辖区内2007-2010年的麻疹、风疹病例的实验室检测结果进行统计分析.结果 辖区内2007-2010年间麻疹年平均发病率为15.61/10万;风疹年平均发病率为2.57/10万.麻疹病例多集中在婴幼儿及中青年人群;风疹病例以10~25岁青少年为主,且麻疹、风疹的病例发生具有明显的季节性.结论 要达到消除麻疹、控制风疹发病率的目标,应继续做好计划免疫工作,提高免疫覆盖率,严密监测,预防暴发.

    作者:郭鹏娟;甘标;詹希关 刊期: 2012年第01期

  • 妇产科围手术期抗菌药物使用的合理性评价

    目的 调查本院妇产科围手术期抗菌药物的使用情况,为促进临床合理使用抗菌药物提供参考.方法 抽取2010年1-12月妇产科手术病例316例,记录相关内容,根据《抗菌药物临床应用指导原则》、药品说明书及《应用抗菌药物防治外科感染的指导意见》等相关资料,对妇产科围手术抗茵药物的使用进行合理性评价.结果 被调查的病例均使用了抗菌药物,共4大类9个品种.药物选择合理率为64.3%,在术前0.5~2 h预防给药的有66例(20.9%),术后用药疗程大于3d者有120例(38%),抗菌药物的使用费用所占比例普遍过高.结论 本院妇产科围手术期抗菌药物在药物使用率、品种选择、用药时间、药品费用所占比例等方面有待进一步进行干预管理.

    作者:黎小妍;张二红;张平;曲彩红 刊期: 2012年第01期

  • 282例HBV感染无症状表面抗原阳性者血清ALT与乙肝前S1抗原的检测

    目的 了解乙型肝炎病毒(HBV)感染无症状表面抗原阳性者血清ALT和乙肝前S1抗原的状况.方法 用ELISA法检测血清标志物(HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc)和乙肝前S1抗原,用日立7060全自动生化分析仪检测血清ALT.结果 282例无症状表面抗原阳性者,乙肝前S1抗原总检出率为37.6%; ALT升高87例,占总人数的30.8%; ALT升高的87例患者中前S1抗原检出率为67.8%;ALT正常的195例患者中前S1抗原检出率为24.1%,两组比较差异有统计学意义(P<0.01).在282例无症状表面抗原阳性者中,HBeAg阳性组,乙肝前S1抗原检出率为73.9%,ALT异常阳性率为52.2%;HBeAg阴性组,乙肝前S1抗原检出率为31.0%,ALT异常阳性率为25.6%,两组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 乙肝病毒携带者不能完全排除ALT正常情况下的病毒复制;血清中出现HBeAb并不一定表示HBV复制停止.因此,对于无症状表面抗原阳性者应进行定期复查,监测其乙肝血清标志物、ALT和前S1抗原.

    作者:林凤金;梁雅 刊期: 2012年第01期

  • 静脉吸毒人员共用针具行为调查

    目的 了解静脉吸毒人群的针具共用情况并探索可能的影响因素.方法 采用横断面研究方法于2011年5-6月对广东省某戒毒所内静脉吸毒人员进行一对一的问卷调查,调查内容包括一般人口学信息、吸毒相关行为、性行为及艾滋病综合防治知识.结果 调查的267名男性静脉吸毒人员的平均年龄为(38±6.1)岁,首次注射吸毒的平均年龄为(28土6.9)岁.30.71%的被调查者曾有过共用针具行为,被调查者使用的毒品种类主要是海洛因.Logistic回归分析表明,与别人一起吸毒(0R=3.62,95%CI=1.77-7.37)以及共用过辅助器具者(0R=13.48,95%CI=6.66-27.27)是共用针具的危险因素.结论 共用针具行为普遍存在于静脉吸毒人群中,相关部门应采取有效管理措施,以减少该人群中高危行为的发生.

    作者:汪慧;卢次勇;何源;吴杰;洪令瑶;高雪;邓雪清 刊期: 2012年第01期

  • 五金塑胶业作业工人肌肉骨骼疾患调查

    目的 通过横断面流行病学调查了解五金塑胶业作业工人肌肉骨骼疾患现况,探讨其主要危险因素.方法 选取某五金塑胶厂1 032人为调查对象,采用经修改的北欧国家标准调查表进行肌肉骨骼疾患横断面流行病学调查.结果 五金塑胶业作业工人肌肉骨骼疾患以腰部、颈部和踝足部疾患为主,年患病率分别为26.2%、17.9%和16.3%.女工肩和膝部疼痛年患病率显著高于男工(P<0.05).不同工种腰痛年患病率由高到低依次为工模技工(37.3%)、包装工(36.1%)、操作工(27.3%)、车床工(25.0%)、碰焊工(20.0%)和冲压工(19.6%).腰部职业性肌肉骨骼疾患(OMSD)年患病率随工龄增长有增加趋势(P<0.05).长时间保持经常稍微转身姿势、经常稍微弯腰、经常大幅度弯腰、以不舒服的姿势工作、搬举重物远离身体、搬举重物需要转身、以不舒服的体位搬举重物、经常替同事换班均可增加腰痛的年患病率;选择性Logistic回归分析表明,搬举重物需要转身、长时间保持稍微弯腰姿势、经常替同事换班、休息是否充足被选人模型.结论 五金塑胶业作业工人肌肉骨骼疾患以腰痛为主,不良劳动姿势、手工搬举重物以及二者同时存在是导致腰痛的首要危险因素,应积极采取工效学手段进行干预.

    作者:徐雷;罗孝文;关玉荣;苏嘉任;杨建云;杨磊 刊期: 2012年第01期

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主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会