刘家超；李志樑；严全能；傅强
目的 观察大鼠肾小球系膜细胞中内脏脂肪素(Visfatin)对肾素血管紧张素系统(RAS)mRNA表达的影响及探讨其机制.方法 分别构建Visfatin表达载体质粒及Visfatin RNAi表达载体质粒,将细胞分为8组:正常糖对照组、正常糖+NF-κB特异性抑制剂吡咯烷二硫基甲酸酯(PDTC)组、过表达Visfatin组、过表达Visfatin +PDTC组、空白过表达载体组、空白过表达载体+PDTC组、Visfatin RNAi组及空白沉默载体组,用Realtime-PCR方法检测血管紧张素原(AGT)、血管紧张素转化酶(ACE)、血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)、血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2R)等RAS相关基因表达,使用电泳迁移率变动分析法(EMSA)检测NF-κB活性,比较各组间基因表达及NF-κB活性的差异；以及通过观察PDTC处理对照组、过表达Visfatin组、空白过表达载体组前后上述指标的变化.结果 细胞过表达Visfatin后,NF-κB活性、Visfatin、AGT、ATIR mRNA表达量显著升高,分别为正常糖对照组的1.52、11.42、2.85、1.25倍(P均＜0.01)；转染RNAi质粒pSIREN-Visfatin/sh RNA后,NF-κB活性、Visfatin、AGT、AT1R mRNA表达量显著降低,分别为正常糖对照组的10.90％、26.83％、30.00％、73.47％(P均＜0.01).经PDTC处理的各组NF-κB活性、AGT mRNA表达量与相应的未经PDTC处理组相比显著降低(P＜0.01),正常糖+PDyT℃干预组NF-κB活性、AGT mRNA表达量是正常糖对照组的21.60％、34.59％;过表达Visfatin+PDTC干预组的NF-κB活性、AGT mRNA表达量是过表达Visfatin组的37.96％、19.72％；空白过表达载体+PDTC干预组NF-κB活性、AGT mRNA表达量是空白表达载体组的52.53％、33.08％,差异均具有统计学意义(P＜0.01).结论 在大鼠肾小球系膜细胞中,Visfatin可通过NF-κB引起RAS相关基因表达的变化.
作者：吴秋菊；郭颖；曾华；何爽；冯志美；丁鹤林 刊期： 2012年第05期
目的 评价SF-36量表在新疆公务员的信度和效度.方法 应用SF-36对2 695名新疆公务员进行测试.结果 SF-36的Cronbach α系数为0.921.SF-36的两个分半量表的Spearman-Brown分半信度为0.776.SF-36量表各条目得分与其所在维度得分的相关性均较大,而与其他维度得分的相关性较小;各维度分与其所在子量表分的相关系数较大,而与其他子量表的相关系数较小.因子分析得到的7个因子与SF-36的理论构想基本一致.结论 应用SF-36测量新疆公务员与健康有关的生存质量状况具有较好的信度和效度.
作者：陈洁；丘金彩；许军；周增桓 刊期： 2012年第05期
目的 构建带有血凝素(HA)标签的小鼠组蛋白变异体macroH2A1 (mH2A1)的真核表达载体,并观察其在人胚肾293T细胞中的表达定位情况.方法 提取内毒素休克的BALB/c小鼠肝脏组织的总RNA,通过逆转录-聚合酶链反应获得内毒素休克小鼠肝脏组织的cDNA,以cDNA为模板使用PCR方法扩增得到mH2A1编码序列,并将其酶切后连接至带有HA标记的载体pcDNA3-HA上;对阳性克隆进行酶切、PCR和测序鉴定.随后将重组质粒瞬时转染293T细胞,利用荧光显微镜观察.结果 PCR、双酶切和测序鉴定表明pcDNA3-mH2A1-HA真核表达质粒构建正确；经转染实验发现,该质粒能够在293T细胞中表达,表达产物主要定位在细胞核中.结论 mH2A1真核表达载体pcDNA3-mH2A1-HA的成功构建及明确其在哺乳动物细胞中的具体核定位,为进一步研究mH2A1作用细胞的信号通路提供了一个重要的工具.
作者：张菁；罗海华；王娟；卢康荣；姜勇 刊期： 2012年第05期
目的 建立2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的BALB/c小鼠炎症性肠病(IBD)模型,探讨其影响因素.方法 将48只BALB/c小鼠随机分为8组:乙醇非夹闭对照组、乙醇夹闭对照组、低剂量非夹闭组、低剂量夹闭组、中剂量非夹闭组、中剂量夹闭组、高剂量非夹闭组、高剂量夹闭组,每组6只.各组分别用相应试剂灌肠造模,利用DAI评分及Wallace评分并结合一般情况评价模型.结果 一般情况显示夹闭各组死亡小鼠均有肠梗阻现象,非夹闭组死亡小鼠未见肠梗阻现象；非夹闭各组体重低于乙醇非夹闭对照组(P＜0.01)；中剂量夹闭组和高剂量夹闭组体重低于乙醇夹闭对照组(P＜0.01)；高剂量夹闭组体重低于高剂量非夹闭组(P＜0.01).疾病模型评价显示中剂量非夹闭组和高剂量非夹闭组第7天DAI评分及Wallace评分均高于乙醇非夹闭对照组(P＜0.01),中剂量夹闭组和高剂量夹闭组第7天DAI评分及Wallace评分均高于乙醇夹闭对照组(P＜0.01)；中剂量夹闭组第7天DAI评分高于中剂量非夹闭组(P＜0.05)；中剂量夹闭组和高剂量夹闭组Wallace评分高于同等剂量的非夹闭组(P＜0.01)；中剂量夹闭组Wallace镜下评分高于中剂量非夹闭组(P＜0.01).结论 TNBS诱导BALB/c小鼠IBD模型过程中,在造模试剂注入结肠后不宜夹闭肛门.同时,相对于大鼠,小鼠造模所用的TNBS剂量略高.
作者：王振磊；黎曙霞 刊期： 2012年第05期
目的 探讨胃肠间质瘤(GIST)的临床特征和分子病理学特点,分析影响GIST预后的相关因素.方法 回顾性分析2004年4月至2011年8月南方医院收治的212例GIST患者的临床病理和随访资料,应用生存分析比较不同因素对预后的影响.对接受甲磺酸伊马替尼治疗的53例患者,采用基质辅助激光解析/电离-飞行时间质谱方法检测KIT和PDGFRa基因相关位点的突变情况.结果 单因素生存分析显示肿瘤大小、核分裂数、美国国立卫生研究所(NIH)危险度分级、转移、手术及甲磺酸伊马替尼影响GIST患者的生存率.多因素生存分析提示,NIH危险度分级和甲磺酸伊马替尼是影响预后的独立因素.53例GIST患者中,KIT基因突变39例(73.6％),其中外显子11突变21例(53.8％),外显子9突变13例(33.3％).KIT外显子11突变形式主要为5'端第557-558密码子缺失常见;外显子9突变均为插入串联重复.未检测到PDGFRa基因突变的病例.结论 NIH危险度分级和甲磺酸伊马替尼治疗与GIST患者的生存密切相关,基因突变检测对指导生物靶向治疗和预测其疗效具有重要意义.
作者：李增辉；秦岭；李荣；罗荣城 刊期： 2012年第05期
目的 探讨白细胞介素8(IL-8)对OX-LDL诱导的小鼠单核巨噬细胞264.7细胞株(RAW264.7)的作用.方法 以IL-8作用于OX-LDL诱导RAW264.7细胞株,48 h后收集细胞和上清培养液,分别用流式细胞仪检测细胞表位CD14、CD34、CD86及其早、晚期凋亡率；用RT-PCR法检测细胞内IL-8 mRNA的表达水平；用Western bot检测IL-8 mRNA表达蛋白的量；用ELISA方法检测上清液IL-1β、IL-10的量.结果 与对照组相比,实验组的CD14、CD34表位表达及晚期凋亡明显增多(P＜0.05),而对CD86、早期凋亡影响不明显(P＞0.05),IL-8 mRNA及其表达的蛋白量明显升高,上清培养液中IL-1β增多(P＜0.05),IL-10减少(P＜0.05).结论 IL-8致动脉粥样硬化(AS)作用可能是部分通过上调单核巨噬细胞表面CD14、CD34表位表达,促进IL-8 mRNA及其表达蛋白的量,促进IL-1β、抑制IL-10的分泌,并促进其晚期凋亡,参与AS的炎症反应.
作者：刘家超；李志樑；严全能；傅强 刊期： 2012年第05期
目的 观察不同浓度的鱼卵小分子多肽对SD大鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)增殖作用的影响.方法 分离、培养SD大鼠BM-MSCs,并采用流式细胞仪进行鉴定.选取第3代细胞进行观察和检测.实验组选取25、50、75、100、125、150、200、250、300 μg/ml9个多肽浓度,对照组加入不含小分子多肽的DMEM完全培养基.各组孵育24h后采用MTT法检测其细胞增殖情况,确定其佳作用剂量.在佳作用量下,于12、16、20、24、32、40、48h7个时间点观察鱼卵小分子多肽对SD大鼠BM-MSCs增殖的情况.并采用流式分析鱼卵小分子多肽对BM-MSCs细胞周期的影响.结果 鱼卵小分子多肽对BM-MSCs的促增殖作用的佳浓度为100μg/ml,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05).流式分析显示鱼卵小分子多肽可提高SD大鼠BM-MSCs非G1/G0期细胞比例.结论 鱼卵小分子多肽对SD大鼠BM-MSCs有促增殖作用,佳作用浓度为100μg/ml.
作者：郭思政；邓新燕；陆杰；郭中敏 刊期： 2012年第05期
B细胞主要通过分泌各种抗体发挥免疫学作用,新近研究发现在B细胞中存在一种新的细胞亚群——调节性B细胞,它们可通过分泌IL-10和TGF-β1抑制获得性免疫介导的炎症反应发展和(或)加快炎症的恢复,相关研究表明此种细胞可在炎症性肠病、系统性红斑狼疮、肿瘤等疾病中发挥重要作用.本文综述了调节性B细胞的来源、功能、作用机制及相关研究进展.
作者：刘洪波；封艳玲；郑学宝 刊期： 2012年第05期
内质网(ER)是细胞内重要的细胞器,参与多种细胞进程,这些进程对于维持细胞存活和发挥细胞的正常生理功能具有重要的作用.然而在多种生理病理条件下,内质网稳态会发生变化而失衡,从而诱发内质网应激(ERS),此时机体通过激活未折叠蛋白反应(UPR)来恢复内质网的正常功能.当持续的ERS状态无法恢复时,ERS就会触发细胞凋亡程序,通过不同的凋亡途径引起细胞凋亡.
作者：王硕；孟庆华；秦秀德；刘辉；王丹丹；康立源 刊期： 2012年第05期
目的 观察白介素32(IL-32)在胃癌细胞株中的表达情况,探讨其在胃癌发生、发展中的意义.方法 采用逆转录PCR、real-time PCR及Western blot法分别从基因和蛋白水平上检测IL-32在正常胃上皮细胞GES-1以及胃癌细胞株MKN-45、KATO中的表达情况.结果 逆转录PCR及real-time PCR结果均显示胃癌细胞IL-32 mRNA表达水平明显高于正常胃上皮细胞,逆转录PCR灰度比值(目的/内参)为:GES-1(0.34±0.09)、MKN-45 (0.79±0.11)、KATO( 0.90±0.17),差异有统计学意义(P＜0.05).real-time PCR Ct值显示:MKN-45的IL-32基因表达量是GES-1的(5.34±1.09)倍,KATO是GES-1的(4.07±1.69)倍,差异均有统计学意义(P＜0.05).Western blot结果显示IL-32在蛋白表达水平的结果与前一致,灰度比值(目的/内参)为:GES-1 (0.30±0.10)、MKN-45(0.92±0.32)、KATO(0.86±0.15),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IL-32在胃癌细胞株中呈高表达,推测其可能在胃癌的发生、发展中起一定作用.
作者：詹磊磊；唐保东 刊期： 2012年第05期
目的 回顾性分析轻微血糖升高对大陆地区孕妇不良妊娠结局的影响.方法 符合以下入选标准:①年龄大于18岁;②单胎、头胎、胎龄符合孕周；③于孕24～32周行50 g GCT试验,1 h PG≥7.8 mmol/L者于1周内行75 g OGTT试验,且OGTT试验在正常范围内(FBG＜5.1 mmol/L、1 h＜10.0 mmol/L、2 h＜8.5 mmol/L).结果 共有527例符合入选标准,根据血糖水平高低将FBG、1 h BG、2h BG等各分为4个亚组,每个亚组相差一个标准差.随着FBG、1h BG、2h BG水平升高,大于胎龄儿、新生儿高胆红素血症的发生率也随着增加；而胎儿宫腔内感染、先兆子痫、1min Apgar评分低及转儿科监护治疗的发生率并未达到差异具有统计学意义的升高.结论 对于轻微血糖升高的孕妇而言,大于胎龄儿、新生儿高胆红素血症的血糖阈值是4.6 mmol/L＜FBG≤5.0 mmol/L、9.5 mmol/L＜1 h BG≤9.9 mmol/L、8.0 mmol/L＜2 h BG≤8.4 mmol/L,而需转新生儿监护治疗的血糖阈值是4.6 mmol/L＜FBG≤5.0 mmol/L、9.5 mmol/L＜1 h BG≤9.9 mmol/L.但这仍需更大规模的前瞻性研究加以证实.
作者：潘燕飞；沈洁；韩亚娟；陈超凤；谢敏 刊期： 2012年第05期
目的 了解艾滋病病毒(HIV)感染者和艾滋病( AIDS)病人(简称PLWHA)焦虑状况,探讨其影响因素.方法 采用Zung氏焦虑自评表(SAS)和评价方法,在广州市番禺区艾滋病VCT门诊对144名PLWHA进行面对面问卷调查,采用SPSS统计软件进行统计学析.结果 PLWHA的SAS总粗分(32.19±6.91)高于国内常模,差异有统计学意义(t=3.919,P＜0.01).焦虑总发生率为17.36％,其中HIV感染者和AIDS病人分别为16.16％和20.00％.SAS标准总分方面,AIDS病人、年龄＞50岁者、在本市居住的非本市户籍者中居住年限＜5年者、确认感染HIV年限＜1年者、抗病毒治疗年限＜1年者和CD4细胞计数≤200个/mm3者均相对较高,差异均有统计学意义(P＜0.05).年龄＞ 50岁者和确认感染HIV年限＜1年者的焦虑患病率均相对较高,差异均有统计学意义(P＜0.05).Logistic多因素分析发现,性别、年龄和确认感染年限是PLWHA焦虑的主要影响因素,年龄＞50岁者产生焦虑的危险是≤50岁者的7.8倍.结论 PLWHA的焦虑状况较一般人群严重,并受多方面因素的影响,应在随访关怀过程中加强心理支持体系的构建,改善其焦虑状况,提高生活质量.
作者：杨燕君；凌莉；张晖；秦小洁；黄桂锋；曾锐志；李功理 刊期： 2012年第05期
目的 观察乳腺癌组织中PTPN12的表达情况,初步探讨其可能作用的蛋白,并分析其与临床病理参数及预后的关系.方法 收集2005-2009年南方医院收治的84例乳腺癌患者的病理及临床资料,其中“三阴”乳腺癌患者50例,“非三阴”乳腺癌患者34例.采用免疫组化染色方法检测组织中PTPN12、EGFR的表达,并分析PTPN12表达与临床病理参数以及患者预后的关系.结果 “三阴”乳腺癌患者中PTPN12的缺失表达率、EGFR的阳性表达率显著高于“非三阴”乳腺癌患者(42.0％ vs 20.6％,P=0.041；76.0％vs 47.1％,P=0.007).PTPN12的表达与EGFR (r,=-0.208,P=0.058)、Her-2(r,=-0.250,P=0.022)存在负相关关系.PTPN12表达阴性的患者,其生存期更短.多因素分析表明PTPN12是乳腺癌独立的预后因子.结论 PTPN12在“三阴”乳腺癌中具有更高的缺失突变,它的表达与EGFR和Her-2负相关.PTPN12是乳腺癌独立的预后因子.
作者：李理；邓欢；吕成伟；陈元平；张军一；李荣；罗荣城 刊期： 2012年第05期
目的 建立环介导等温扩增技术(LAMP)快速检测痢疾志贺菌,并对其特异性、灵敏度与传统PCR进行比较.方法 以痢疾志贺菌侵袭性质粒抗原H基因(ipaH)为靶序列,设计6条特异性引物(内引物、外引物和环引物各2条),优化LAMP反应体系及反应条件,检测LAMP反应的灵敏度、特异性及模拟样品,同步与PCR进行比较.结果 LAMP法和PCR均能特异性地扩增出志贺菌靶DNA,而其他非志贺菌均未扩增出特有条带.检测细菌纯培养物和模拟食品的灵敏度LAMP法分别为5.3×101 cfu/ml、6.8× 101 cfu/ml,PCR法分别为5.3× 102 cfu/ml和6.8× 102 cfu/ml.结论 利用LAMP技术,可快速、灵敏、简便地检测痢疾志贺菌,与PCR方法比较,特异性强、操作简便、检测成本低、耗时短,有望发展成为快速检测痢疾志贺菌的有效手段.
作者：曾桂芬；龙北国；姜容；刘行超；廖韫婕；范宏英 刊期： 2012年第05期
目的 评价目前水痘疫苗接种方案对儿童集体单位水痘暴发的保护效果.方法 在发生水痘疫情的儿童集体单位,按年龄分层,以接种疫苗为暴露因素进行1∶1配对病例对照研究,评价疫苗保护效果.结果 儿童于1～2岁接种水痘疫苗后,在2～8岁时发生水痘的OR值为0.083(95％ CI 0.037～0.185),疫苗保护效果为91.7％(95％ CI 81.5％～96.3％);在9～15岁时OR值差异无统计学意义.结论 1～2岁接种水痘疫苗后6年内有良好的保护作用,但之后会快速衰减,应适时接种第2剂疫苗.
作者：何蔚云；梁建华；吴莉萍；陈清 刊期： 2012年第05期
目的 应用四聚体技术研究肺结核患者治疗前后各时间点外周血中E7多肽特异性CD4+T细胞的变化及结核患者肺组织切片中特异性CD4+T细胞的分布.方法 培养能稳定分泌表达E7/HLA-DRB1*0404和E7/HLA-DRB1*1602的果蝇S2细胞株,表达纯化获得2种蛋白质单体,并制备成PE标记的相应四聚体,流式细胞分析检测肺结核患者外周血中特异性CD4+T细胞.制备FITC标记的四聚体,对肺结核患者的肺组织切片进行原位染色,观察特异性CD4+T细胞的分布.结果 肺结核患者治疗前组及治疗1～60 d组分别与治疗61 d后各组及脐带血组之间的四聚体阳性多肽特异性CD4+T细胞差异均有统计学意义(P＜0.05),但治疗前组与治疗1～60 d组之间、治疗61 d后各组之间及分别与脐带血之间、2个四聚体检测组之间差异均无统计学意义(P＞0.05).在肺结核患者的肺组织切片中可观察到特异性CD4+T细胞.结论 制备的2种E7/HLA-DR四聚体对于结核病的检测具有一定的意义,可以用于检测研究肺结核患者治疗前后外周血E7多肽特异性CD4+T细胞的变化及肺结核患者局部病理组织中特异性CD4+T细胞的分布.
作者：黄利荣；李研；方毅敏；任亮亮；朱艳；赖小敏 刊期： 2012年第05期
目的 探讨复方中药含药血清对人A375黑素瘤细胞酪氨酸酶(TYR)活性的影响.方法 体外培养人A375黑素瘤细胞,采用多巴速率氧化法研究复方中药含药血清对TYR活性的影响.结果 低浓度(5％～10％)的Ⅰ方、Ⅱ方、Ⅲ方对酪氨酸酶活性无明显激活作用(P＞0.05)；高浓度(20％～30％)的Ⅰ方、Ⅲ方、Ⅵ方对TYR活性均有明显激活作用(P＜0.05),以Ⅵ方作用显著,且与其它各组相比,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 对TYR具有激活作用的中药组成复方并不一定对TYR有激活作用,具有祛风活血和补肾三重作用的Ⅵ方在促进TYR活性上优于祛风除湿Ⅰ方、养血活血Ⅱ方和滋补肝肾Ⅲ方.
作者：刘利利；杨柳；洪逊强 刊期： 2012年第05期
目的 构建并表达弓形虫复合基因SAG1-BAG1及分析重组抗原的免疫反应性.方法 利用PCR扩增弓形虫SAG1基因,利用RT-PCR扩增弓形虫BAG1基因,通过酶切连接分别将SAG1、BAG1基因克隆到pET28a表达载体中构建复合基因SAG1-BAG1.将质粒pET28a-SAG1-BAG1转入大肠杆菌BL21( DE3)中进行诱导表达,Western-blot分析该重组蛋白的免疫反应性.结果 复合基因SAG1-BAG1全长约1 407 bp,重组蛋白相对分子质量约为50 000,表达量约占菌体总蛋白的10％,Western-blot分析显示重组蛋白具有良好的免疫反应性.结论 成功构建并表达弓形虫复合基因SAG1-BAG1.
作者：秘文婷；姚硕；钟志刚；杨培梁；吴焜；陈晓光 刊期： 2012年第05期
目的 用一种简单可行且与临床接近的方法建立大鼠慢性酒精性脂肪肝模型.方法 将66只健康雄性SD大鼠随机分成正常对照组、白糖组、模型组3组.正常对照组大鼠自由饮水；白糖组大鼠自由饮用含10％的糖水；模型组大鼠自由饮用55°二锅头白酒配制成不同浓度的酒水饮料,并含有10％的白糖,其白酒度按照5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％(Ⅴ/Ⅴ)逐渐递增,每个浓度持续10d,40％时维持20周.并于第15、20、25周末随机取2只模型组大鼠行肝脏病理切片观察,造模结束后测定各组血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及血脂四项指标即甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)水平并观察肝脏病理形态学改变.结果 随着造模时间延长,模型组肝脏脂肪变性程度逐渐加重,造模结束后肝脏病理提示为重度脂肪变性,血清转氨酶及血脂(TG、CHO、LDLC)水平明显升高,与正常对照组比较差异有统计学意义(ALT:P＜0.01,AST、TG、CHO、LDLC:P＜0.001),HDLC水平降低,与正常对照组比较差异有统计学意义(P＜0.001).结论 本造模方法与人类慢性酒精性脂肪肝的发生发展相似,并且简单易行,稳定,可重复,动物死亡率低,为慢性酒精性脂肪肝的相关研究提供了较有价值的动物模型.
作者：文健；魏威；王萍；李珍；董文其 刊期： 2012年第05期
目的 探讨心率变异性生物反馈( HRV BF)干预高血压前期患者心血管应激反应的效果.方法 比较高血压前期者与正常血压者应激反应上血压变化的差异;将36位高血压前期受试者随机分为心率变异性生物反馈(HRV BF)组、慢腹式呼吸(SAB)组和空白对照组.干预组受试者接受每次30 min,每周2次,持续2个月共15次的训练；空白对照组不予干预.实验间隔期嘱受试者每天进行不少于20 min的家庭训练.所有受试者在实验开始前及实验结束后均接受连续2d同一时间点进行的两种应激测试.结果 高血压前期者较正常血压者在应对心算应激时收缩压和舒张压反应性更大.干预2个月后,HRV BF和SAB组收缩压和舒张压平均降压幅度分别为15.4/10.2 mmHg、11.6/7.4 mmHg;空白对照组干预后血压无明显变化.HRV BF能显著降低受试者心算应激时收缩压反应性,较SAB更为明显.结论 高血压前期者应激反应性较高,HRV BF训练可以降低受试者应对心理应激时心血管的反应,并降低高血压前期者血压.
作者：陈思娟；汪胜；林桂平；孙鹏；李平；赵妍；王庭槐 刊期： 2012年第05期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
