解传仁;尹锡洲;殷容暖;谢健;郝永钟;丁胜文
玛希隆大学是泰国古老、著名的大学之一.在医学、公共卫生和自然科学领域享有盛誉.我们对玛希隆大学热带医学医疗、教学和科研情况进行了较为深入细致的考察,本文介绍了该校热带医学教学科研的经验和值得借鉴的管理体系.
作者:宝福凯 刊期: 2011年第04期
目的 分析广州40株稻叶型霍乱弧菌的毒力基因和PFGE特征,探讨菌株的同源性和广州稻叶型霍乱弧菌流行的特点.方法 应用PCR方法 检测稻叶型菌株的4种毒力基因,采用限制性内切酶Not I对菌株进行PFGE分型,使用BioNumerics Version 4.0软件(复选Dice相关系数和UPGMA方法 )对菌株进行聚类和同源分析.结果 绝大多数水型稻叶霍乱疫情相关菌株为genotype A型菌,而绝大多数环境分离稻叶型霍乱弧菌为genotype B型和C型菌.40株霍乱菌株分布于18种pulsotype,水型霍乱疫情相关菌株的pulsotype极为相近(相似性系数98%以上),而环境分离的稻叶型霍乱弧菌呈现明显的pulsotype多样性.结论 是否携带ctxA基因是稻叶型霍乱弧菌人源分离株与环境分离株的主要区别之一,绝大多数环境分离的稻叶型霍乱弧菌与人源分离株的同源性较低,但仍需加强对不同来源菌株的同源性分析和溯源追踪.
作者:李孝权;庞杏林;张欣强;邓志爱;李美霞;陈守义;邓小玲;王鸣 刊期: 2011年第04期
目的 对来宾市HIV-1感染者进行分子流行病学调查,为来宾市艾滋病的防治工作提供实验依据.方法 将流行病学方法 与分子生物学方法 相结合,对来宾市HIV株进行序列测定和亚型分析,总结其传播途径,分析流行毒株特点及各个流行毒株间的关系.结果 来宾市HIV感染者以性传播为主,流行毒株存在B、01-AE、CRF-BC 3种亚型,其中以CRF-BC流行毒株为主.结论 来宾市艾滋病流行形势严峻,HIV-1感染者中以流行重组型亚型CRF-BC为主,应加强对HIV-1毒株亚型变异的监测,积极进行行为干预,及时制定新的防治策略.
作者:周方;骆安德;蒋就喜;陶田秀;黄甲清;胡婷停;李赫伟 刊期: 2011年第04期
随着艾滋病感染患者的不断增多,艾滋病检测技术的发展在防止艾滋病的大规模流行以及在艾滋病的早期诊断和治疗方面发挥着重要作用.本文介绍了引起艾滋病的人类免疫缺陷病毒的检测方法,重点说明了各种检测方法 的原理、特异性、可靠性及该方法 的临床实用性.目前艾滋病检测技术正向着开发简易、快速、可靠的方法 的方向发展,以适应艾滋病的大规模筛查和尽量早期诊断治疗的需要.
作者:张英 刊期: 2011年第04期
目的 探讨中药复方安神方抗抑郁作用的机制.方法 以慢性中等强度应激刺激建立大鼠抑郁模型,用强迫游泳试验进行行为学评分,用高效液相电化学检测方法 检测大鼠脑干内单胺类神经递质的含量,观察模型大鼠给药前后的变化.结果 抑郁模型大鼠第7天与第28天水中强迫游泳不动时间分别为(133.4土24.0)s、(179.7土35.3) s,正常组则为(127.9土31.3)s、(131.8土29.3)s,模型组显著高于正常组(P<0.05);脑干内5-HT、NE含量显著降低,模型组为(0.093±0.031) ng/mg、(0.146土0.038) ng/mg,正常组为(0.160土0.023) ng/mg、(0.237士0.049) ng/mg (P<0.05);安神方高剂量组第7天与第28天水中强迫游泳不动时间分别为(121.5±27.8)s、(145.1土24.2)s,与模型组比较显著降低(P<0.05),大鼠脑干内5-HT、NE含量分别为(0.151士0.021)ng/mg、(0.208土0.057)ng/mg,较正常组显著提高(P<0.05).结论 安神方具有抗抑郁作用,对中枢单胺类神经递质的调节作用是其疗效机制之一.
作者:葛鑫宇;陈宝田;于林;伍志勇;白方会;邱爱珠 刊期: 2011年第04期
目的 探讨扩散加权成像技术在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)预后评估中的价值.方法 回顾性分析96例临床确诊为HIE患儿的所得资料.将96例患儿分为A组和B组,A组采用常规核磁检查,B组采用扩散加权成像技术检查.观察两种检查方法 在HIE诊断中的影像学特点,并随访患儿的预后.结果 两组患儿一般情况比较差异无统计学意义(P>0.05).A组检出影像学变化21例,随访预后不良7例,B组检出影像学变化32例,随访预后不良19例;B组HIE患儿的预后评估价值明显高于A组(P<0.05).结论 扩散加权成像可充分反映HIE患儿的病理变化和脑损害,对评估HIE患儿的预后具有一定的应用价值,有利于临床及早采取干预治疗措施.
作者:崔云刚 刊期: 2011年第04期
目的 研究高血压病患者外周血树突状细胞(DCs)的表达情况及其在高血压病发生发展过程中的作用.方法 用流式细胞仪四色荧光标记技术检测29例高血压病(HT)患者(实验组)及31例非高血压患者(对照组)外周血树突状细胞亚群的比例及数量,评价组间差异,并分析高血压病患者外周血浆细胞样树突状细胞(pDC)与血压(blood pressure,BP)的关系.结果 高血压病(HT)患者与血压正常患者相比,外周血中髓样树突状细胞(mDC)比例[(7.917土4.296)‰比(8.18士5.669)‰]及绝对数[(6.971士2.115)x10(7)/L比(7.123土5.387)×10(7)/L]均降低,但差异无统计学意义(P>0.05).而浆细胞样树突状细胞(pDC)比例[(1.239士0.669)‰比(1.897±0.859) ‰]及绝对数[(1.794土2.244)×10(7)/L比(2.819土4.997) ×10(7)/L]明显升高,且差异有统计学意义(P<0.05),高血压病患者的外周pDC数量与收缩压(SBP)、舒张压(DBP)均成呈正相关关系(r=0.424及0.487,P<0.05),pDC比例与SBP、DBP无明显相关(P>0.05).结论 高血压病的发生发展中存在着炎症反应和免疫活化,树突状细胞可能在该过程中发挥一定的作用.
作者:华经海;傅强;李志梁;刘亚杰;靳文;陶丹萍;曹龙兴;刘鹏 刊期: 2011年第04期
目的 采用组织块培养技术探索大鼠骨骼肌卫星细胞的原代培养方法.方法 以成年SPF级Sprague-Dawley大鼠为研究对象,采用组织块培养法获取大鼠骨骼肌卫星细胞,并与C2C 12成肌细胞进行比较,对两种细胞进行形态学研究及采用免疫荧光和免疫组织化学法测定两种细胞a-actin蛋白和Desmin蛋白的表达及分布,从而对骨骼肌卫星细胞进行鉴定.结果 通过组织块培养法获取的细胞增殖旺盛,分化良好.免疫细胞荧光和免疫组织化学实验结果 显示,a-actin蛋白和Desmin蛋白在两种细胞胞浆中均有分布.结论 用组织块培养法获取的骨骼肌卫星细胞具有良好的增殖与分化能力,用此种方法 可培养出高纯度的骨骼肌卫星细胞.
作者:陈思凡;李文学;陈建玲;杨光宇;刘华章;朱伟 刊期: 2011年第04期
目的 初步探讨活菌卡介苗(BCG)对哮喘小鼠IL-17的调节作用.方法 4周龄雌性Balb/c小鼠30只随机分为A组(对照组)、B组(哮喘组)和C组(BCG干预组),每组各10只.B、C两组予OVA腹腔注射致敏、OVA雾化诱发哮喘,C组在致敏前14d接种BCG.HE 染色观察小鼠肺部病理改变,计数支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavage fluid,BALF)中细胞总数并分类,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清及BALF中白介素-17(IL-17)含量.结果 肺组织病理观察显示A组气管周围基本无炎症细胞浸润,B组支气管周围大量炎症细胞浸润,杯状细胞增生,C组炎症较B组减轻.B、C组BALF中细胞总数和嗜酸性粒细胞、淋巴细胞百分率均显著高于对照组(P<0.01),而C组嗜酸性粒细胞比例则明显低于B组(P<0.01).B、C组小鼠血清、BALF中IL-17含量高于A组(P<0.01),而C组则明显低于B组(P<0.01).各组小鼠血清及BALF中IL-17水平与BALF中嗜酸性粒细胞呈正相关(P<0.01).结论 BCG接种可抑制IL-17的产生,减轻哮喘小鼠气道炎症反应.
作者:易丽;于化鹏;邓火金;夏虎;樊慧珍;刘俊芳 刊期: 2011年第04期
目的 制备重组人源细胞珠蛋白(recombinant human Cytoglobin,rhCygb)单克隆抗体,并建立检测该蛋白双抗体夹心ELISA法,为下一步研究rhCygb药代动力学做准备.方法 用纯化的rhCygb免疫BALB/c小鼠,采用甲基纤维素半固体培养基法获得抗rhCygb的单克隆抗体杂交瘤细胞,间接ELISA法筛选制备单克隆抗体,建立双抗体夹心ELISA法.结果 筛选获取了稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过抗原表位相加法实验获得5株表位不同的细胞株,Westem-blotting验证能与rhCygb特异性结合,间接ELISA法验证其不与本实验室制备的其它PET28a-BL21蛋白及BL21裂解液发生交叉反应.本方法 灵敏度为1.25ng/ml,在浓度为10~1250 ng/ml时,线性关系良好,相关性达0.9931,实验内和实验间平均变异系数分别为6.2%和10.92%.结论 成功建立了灵敏度好、特异性高的双抗体夹心法,为下一步研究rhCygb药代动力学奠定了基础.
作者:汤金萍;魏威;王萍;李珍;李莹;董文其 刊期: 2011年第04期
目的 建立外周血单个核细胞与HepG2.215细胞共培养体系,探讨不同培养基及效靶比对共培养体系的影响.方法 分离正常人外周血单个核细胞,加人植物血凝素(PHA),置于不同的培养基(DMEM,RPMI1640)中进行培养,采用不同效靶比((5:1、10:1、20:1、40:1)构建PBMCs与HepG2.215细胞共培养体系.用倒置显微镜观察细胞的形态及生长情况,台盼蓝拒染法检测PBMCs与HepG2.215细胞的细胞活力,cck-8法检测HepG2.215细胞的增殖活性.结果 DMEM培养基培养的HepG2.215细胞的细胞活力比RPM11640培养基培养的细胞高;而两种培养基培养的PBMCs的细胞活力无明显变化.共培养条件下,PBMCs对HepG2.215细胞增殖活性的抑制作用随效靶比的不同而有所差别,效靶比为20:1时抑制作用强.结论 在PBMCs与HepG2.215细胞共培养体系中,细胞培养基和效靶比对HepG2.215细胞的生长有影响.
作者:胡勇;吴晓蔓 刊期: 2011年第04期
目的 制备人微小RNA-16(miR-16)重组腺病毒,研究其在人骨髓间充质于细胞(hMSCS)中的表达及对细胞周期素依赖蛋白激酶6(CDK6)表达的影响.方法 从人基因组DNA中扩增miR-16前体的DNA,定向插人腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV.将经Pme I线性化的重组穿梭载体pAdTrack-CMV-miR-16与腺病毒骨架质粒pAdEasy- I共转化感受态大肠杆菌BJ5183,在细菌内同源重组获得重组腺病毒质粒rAdTrack-miR-16.将经Pac I线性化的rAdTrack-miR-16在人胚肾293细胞(HEK293 )中包装并扩增出miR-16的重组腺病毒rAd-miR-16.将重组腺病毒感染hMSCs,分别检测miR-16前体和miR-16靶基因CDK6的表达.结果 pAdTrack-CMV-miR-16构建正确,在HEK293细胞中成功包装并扩增出重组腺病毒rAd-miR-16.rAd-miR-16感染的hMSCs中miR-16前体水平显著升高(P<0.05),CDK6mRNA的表达降低不明显,CDK6蛋白表达水平显著降低(P<0.01).结论 成功制备了表达人miR-16的重组腺病毒,并能有效介导 miR-16在hMSCs中的表达,为进行miR-16的功能研究创造了条件.
作者:刘居理;林秋雄;邓春玉;朱杰宁;麦丽萍;余细勇;单志新 刊期: 2011年第04期
目的 构建携带人c-Myc和EGFP基因的慢病毒表达载体pFUMGW.方法 Xho I线性化plenti-EFla-c-Myc-IRES-EGFP,回收片段并补平Xho I,接着BamH I酶切该片段,回收2722 bp片段而获连接用c-Myc-IRES-EGFP;EcoR I线性化pFUGW,回收并补平EcoR I,然后BamH I酶切该片段,回收9174bp片段获连接用载体片段,后使用DNA连接试剂盒(TaKaRa)中的 Solution I将其与连接用c-Myc-IRES-EGFP连接,连接产物转化,次日挑选单菌落,提取质粒并行酶切鉴定.所构建载体命名为pFUMGW.获pFUMGW后,按Invitrogen公司推荐的标准程序进行慢病毒包装和确认慢病毒是否成功生产;携带c-Myc和EGFP基因的慢病毒感染人胚肾细胞株293、肿瘤细胞株CNE1和C666以建立相应的病毒感染体系.结果 酶切证实成功构建了pFUMGW,按标准程序生产的携带c-Myc和EGFP基因的慢病毒上清高效率感染293,CNE1和C666.结论 成功构建携带人c-Myc和EGFP基因的慢病毒表达载体pFUMGW,为相关后续研究打下了良好基础.
作者:李艳青;史俊文;肖高芳;肖东;姚开泰 刊期: 2011年第04期
目的 探讨MMP-9、TIMP-1在HIE患儿血清中表达的临床意义.方法 采集正常新生儿和30例HIE患儿(按病情分为轻度、中度、重度3组)发病后1、3、7 d血液,采用ELISA法检测MMP-9,透射比浊法检测TIMP-1浓度,并与正常组进行比较分析.结果 轻、中、重度3组HIE患儿血清MMP-9与TIMP-1水平于发病后1、3、7 d与对照组比较均升高,差异有统计学意义(P<0.05);3组患儿中尤以重度组增高显著(P<0.01),且发病第3天MMP-9与TIMP-1均达峰值.结论 MMP-9,TIMP-1参与了HIE的发病,检测其血清水平对疾病严重程度及预后有一定的提示作用.
作者:王瑞华;庞国象;史治宙 刊期: 2011年第04期
目的 研究汞暴露对男性工人血清睾酮水平的影响.方法 选择111名职业性汞作业工人为暴露组,46名无汞暴露史的工人为对照组,测定两组工人血清睾酮(ST)水平,并分析ST与年龄、工龄和尿汞(HgU)的相关性.结果 暴露组工人HgU、ST显著升高,暴露时间是ST升高的主要因素;暴露组工人ST升高率明显高于对照组;暴露组工人ST和尿汞水平无明显相关性.结论 职业性汞暴露可使工人血清睾酮水平明显升高.
作者:赖关朝;艾宝民;梁金霞;刘晓勇;张爱华;唐小江 刊期: 2011年第04期
目的 分析东莞市2008-2009年手足口病流行病学特征,为制定有效防控措施提供科学依据.方法 描述性分析东莞市2008-2009年网络直报的手足口病资料.结果 东莞市2008-2009年共报告手足口病病例12687例,年均发病率为87.21/10万,其中2008年发病率为46.26/10万,2009年发病率为128.16/10万,不同年份间发病率的差异具有统计学意义(P<0.01);发病主要集中在4-7月,占总病例数的56.59%;我市各镇(街)均有病例报告,发病率高为大朗镇(364.64/10万),低为长安镇(34.05/10万),不同地区间发病率差异具有统计学意义(P<0.01);发病主要集中在5岁以下儿童,占总病例数的91.09%;以散居儿童为主,占总病例数的76.81%;男性发病率高于女性;两年间共报告暴发疫情22起,罹患率为0.48%~14.58%,时间集中在4-6月份.结论 手足口病是东莞市重点防控的传染病之一,应加强疫情监测和控制,防止其暴发流行.
作者:曾耀明;卢展鹏;张巧利 刊期: 2011年第04期
目的 了解临床分离嗜麦芽窄食单胞菌的整合子I和ISCR1的分布情况及其基因型.方法 分离临床85株嗜麦芽窄食单胞菌,用WHONET5.4分析菌株药敏情况,采用ERIC-PCR方法 进行基因分型.采用PCR检测整合酶I、整合子I、ISCR1以及ISCR1携带的耐药基因.结果 嗜麦芽窄食单胞菌对亚胺培南、氨曲南、庆大霉素、阿米卡星高度耐药,整合子I阳性菌株和整合子I阴性菌株对复方新诺明耐药性差异有统计学意义.85株嗜麦芽窄食单胞菌12株整合酶阳性,11株整合子I阳性,2株ISCRI和ISCRI携带的耐药基因阳性,ERIC-PCR分为75个基因型.结论 整合子I在嗜麦芽窄食假单胞菌中介导复方新诺明耐药性方面有重要作用,ERIC-PCR是研究临床分离嗜麦芽窄食假单胞基因分型的有效方法 之一.
作者:吴奎海;孙静静;陈清;俞守义;王前;芮勇宇 刊期: 2011年第04期
目的 探讨高血压患者Hotter上心肌缺血性改变与左心室后壁(LVPW)厚度之间的相关性.方法 收集2005年5月至2008年9月在本院经查冠脉CTA及超声心动图排除冠心病的高血压患者共138例,首先根据Holter上有无发作性ST段压低将资料分为有缺血性改变与无缺血性改变两组,分析缺血性改变与LVPW厚度之间的相关性,并比较两组间LVPW厚度的大小;然后以单因素及多因素分析筛选Hotter上缺血性改变的影响因素;后建立ROC曲线评估LVPW厚度预测发生缺血性改变的价值.结果 高血压患者Holte:上有或无缺血性改变与LVPW厚度及收缩压(SBP)均呈正相关(r=0.429,P=0.000;r=0.274,P=0.034),高血压伴有缺血性改变的患者其LVPW厚度与无缺血性改变的患者相比差异有统计学意义(z=-5.025,P=0.000);伴有LVPW增厚的高血压患者出现Holter上缺血性改变的机率高于无LVPW增厚的患者(χ(2)=23.670,P=0.000);多因素分析中只有LVPW厚度被筛选出来(OR=26.024,P=0.001);以LVPW厚度预测心肌缺血的AUC为(0.760土0.044),P=0.000.佳分界值为9.5mm,以LVPW≥9.5 mm来预测高血压患者Holter上出现缺血性改变,敏感性为63.6%,特异性为80.9%.结论 高血压患者Holter上出现缺血性改变与LVPW厚度呈正相关;以LVPW预测高血压患者Holter上出现缺血性改变的特异性较高,但敏感性较差.
作者:廖海星;汤庆;何文凯 刊期: 2011年第04期
目的 观察涪陵地区食盐碘化后甲状腺功能亢进症(甲亢)病例就诊变化趋势和临床特点,分析影响因素.方法 收集2000-2009年涪陵地区涪陵中心医院门诊甲亢病例资料;以T3 (FT3)或T4(FT4)升高、TSH降低,结合病人甲亢临床表现诊断为甲亢;计算甲亢年发现率;用F检验分析甲状腺容积和肿大变化趋势,X2检验分析甲亢年发现率变化.结果 共发现甲亢病例1995例,年均病例发现率为17.78/10万,其中,2000-2003年发现率为14.55/10万,2004-2009年发现率为19.85/10万,后阶段显著高于前阶段(χ(2)=42.83,P<0.01).患者甲状腺容积平均为46.15 ml,肿大率为79.80%,甲状腺容积和肿大率均呈下降趋势(F=22.13、62.84,P<0.01).30岁起,随着年龄的增长,甲状腺容积和甲状腺肿大率均呈下降趋势(F=31.02、117.50,P<0.01/0.05);病例女性多于男性((1:2.5),发病主要年龄集中在20~50岁组(占92.94%).结论 涪陵区2000-2009年甲亢发现率呈上升趋势,甲亢患者甲状腺容积和甲状腺肿大率呈下降趋势,可能与全民食盐加碘有关.
作者:勾正兴;赵义刚 刊期: 2011年第04期
目的 探讨AEG-1在大肠癌中的表达及其临床病理意义.方法 采用免疫组化的方法 检测60例正常大肠粘膜、22例大肠腺瘤和60例大肠腺癌中AEG-1的表达.结果 大肠腺癌和腺瘤中AEG-1的阳性率分别为91.7%和90.9%,明显高于正常大肠粘膜组织的23.3%,两者之间差异有统计学意义(P<0.001),其中大肠腺癌的中度阳性率和强阳性率分别为31.7%和60%,而大肠腺瘤分别为63.6%和27.3%,两者差异具有统计学意义(P=0.019);对大肠腺癌中AEG-1表达与肿瘤临床病理特征做相关性分析,结果 表明,AEG-1表达强度与肿瘤T、N分期显著正相关(P<0.05).结论 AEG-1在大肠癌和大肠腺瘤中表达增强,在大肠腺瘤恶变、大肠癌发生发展过程中发挥重要作用,可作为诊断大肠癌新的生物标记物.
作者:罗何三;董忠谊;邹金金;曾钦;吴德华 刊期: 2011年第04期