学术投稿

IgA肾病肾阴虚证cDNA文库的构建

魏敏;孙晓敏;黄平;赵晓山;李玉萍;陈晶;赖名慧;罗仁

关键词:IgA肾病, 肾阴虚证, 抑制性消减杂交, cDNA文库
摘要:目的 应用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)技术构建汉族人IgA肾病肾阴虚证cDNA消减文库.方法 选择IgA肾病且中医辨证为肾阴虚证的患者以及正常人作为其对照组,进行正向和反向消减杂交.采用Trizol BD法提取总RNA,用SMART技术逆转录并扩增总cDNA,用Rsa Ⅰ酶切基因组cDNA成大小不等的片段,分别与两种不同的接头连接,进行2次消减杂交及2次抑制性PCR,然后将PCR产物与U载体连接,经蓝白斑筛选后,再用PCR方法插入片段筛选出阳性重组质粒.构建IgA肾病肾阴虚证消减文库.结果 用SSH方法筛选出了IgA肾病肾阴虚证的差异cDNA片段.其中正向消减文库共获得325个阳性克隆,反向消减文库获得306个阳性克隆,从而成功地构建了IgA肾病肾阴虚证的cDNA消减文库.结论 SSH技术能够快速有效地分离差异cDNA片段.成功构建了IgA肾病肾阴虚证的cDNA文库,为进一步克隆肾阴虚证的相关基因奠定了基础.
热带医学杂志相关文献
  • 脑脊液病原菌变迁和耐药性分析

    目的 了解临床脑脊液培养阳性患者病原菌分布及其耐药情况.方法 对2002~2008年临床脑脊液培养病原菌阳性患者标本进行回顾性统计分析;按常规方法进行细菌分离和鉴定;细菌药物敏感试验采用Kirby-Bauer纸片扩散法.结果 分离出细菌97株,其中革兰阳性球菌占54.63%,革兰阴性菌占28.87%;新型隐球菌占13.40%.常见的6种感染菌分别为凝固酶阴性葡萄球菌(40.21%)、不动杆菌属(8.25%)、铜绿假单胞菌(6.19%)、金黄色葡萄球菌(5.15%)、肺炎克雷伯菌(5.15%)、肠球菌属(5.15%);耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRSCN)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率分别是89.7%和80.0%,细菌对常用抗生素耐药性较高,未见万古霉素耐药的葡萄球菌;美洛培南以及头孢哌酮/舒巴坦对革兰氏阴性杆菌有良好的抗菌活性.结论 近6年来细菌性脑膜炎患者病原菌以革兰阳性球菌为主,主要为医院获得性细菌性脑膜炎感染.检出病原菌对常用抗生素耐药性较高,临床需警惕新型隐球菌的高发病趋势.

    作者:肖柯玲;魏衍超;陈文捷;孙卫民;郭海波 刊期: 2009年第04期

  • 德国小蠊抗药性及抗性机理的研究进展

    德国小蠊的抗药性问题日渐突出,成为城市害虫防治的一大难点.德国小蠊抗性机理的研究可为抗性监测、治理以及新型杀虫剂的开发提供理论基础.本文主要就德国小蠊的抗药性产生情况及抗性机理的研究进展进行综述.

    作者:赵霞;张仁利;张韶华;胡章立 刊期: 2009年第04期

  • 儿童感染肺炎克雷伯菌产AmpC酶和ESBLs的检测及耐药性分析

    目的 了解广州地区儿童感染肺炎克雷伯菌产质粒介导的AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特征,为临床合理用药提供参考依据.方法 采用标准纸片扩散法检测ESBLs,头孢西丁三维试验法检测AmpC酶,K-B纸片法测定肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性.结果 共检出248株肺炎克雷伯菌,其中46株产AmpC酶,阳性率为18.5%;157株产ESBLs,阳性率为63.3%;同时产AmpC酶和ESBLs菌株阳性率为18.1%.产AmpC酶肺炎克雷伯菌对第三代头孢菌素高度耐药.耐药率达80%~100%:对头孢吡肟、含酶抑制剂复合药的耐药率也在56.5%~93.5%之间;但对环丙沙星、阿米卡星的耐药率则在30%以下,对亚胺培南全部敏感.产ESBLs菌株对头孢菌素、含酶抑制剂复合药的耐药率也较高,在50%~91.7%之间.但对阿米卡星、环丙沙星、亚胺培南仍高度敏感.ESBLs阴性肺炎克雷伯菌对所测抗生素的敏感率均在81.2%以上.产酶菌株耐药率明显比非产酶菌株高.结论 广州地区儿童感染肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的状况已十分突出:产酶菌株对常用抗生素的耐药率较高;碳青霉烯类抗生素可作为治疗产AmpC酶和/或ESBLs肺炎克雷伯菌感染的经验用药.

    作者:黄勇;周珍文;邓秋连;万根平;谢永强 刊期: 2009年第04期

  • 江门市某公司诺如病毒性肠炎暴发的调查

    目的 查明2007年江门市某公司一起诺如病毒引起的肠炎的流行特点,探讨暴发疫情调查处理的经验,为今后控制类似疫情提供科学依据.方法 由疾控中心专业人员用专门的个案调查表对所有病例进行流行病学调查.部分病例采集大便样本进行检测,并结合实验室结果进行流行病学分析.结果 本次疫情由诺如病毒引起.呈腹痛、腹泻等胃肠炎症状,病情较轻,共有71人发病,罹患率为7.68%,病例主要分布在30~39岁年龄段,集中在集装箱厂内的总装部和完工部.结论 本次疫情通过日常生活的密切接触相互感染,经及时落实各项相应防控措施后迅速得到控制.

    作者:周悦亮;钟文龙;陈茂余 刊期: 2009年第04期

  • 山西长治市妇科门诊病人阴道毛滴虫感染流行病学调查

    目的 对长治市妇科门诊病人阴道毛滴虫感染情况进行调查,分析其流行因素,为制定本地区阴道毛滴虫防治措施提供科学依据.方法 随机选择2007年12月至2008年11月在长治市晋城妇幼保健医院妇科门诊就诊的妇女作为调查对象,用阴道分泌物生理盐水涂片法检查阴道毛滴虫,并对受检者年龄、职业、文化水平、性行为等进行问卷调查.结果 共检测516份标本,55份阳性,滴虫阳性率为10.66%.对所收集资料进行统计学分析得出,阴道毛滴虫感染与年龄、职业、文化水平、性病知识知晓水平、性行为等因素具有相关性.结论 阴道毛滴虫感染是该地区妇科门诊患者的主要病原体之一;应根据其流行因素,制定预防保健措施,从保障该地区妇女生殖健康.

    作者:郭步平;李宇飞;张建斌 刊期: 2009年第04期

  • 多模式CT指导下的急性脑梗死rt-PA静脉溶栓初步研究

    目的 探讨多模式CT指导下rt-PA静脉溶栓治疗急性脑梗死的疗效与安全性.方法 选择16例符合美国国立神经疾病与卒中研究院溶栓试验(NINDS)标准的急性脑梗死患者行多模式CT检查,对符合溶栓标准的8例患者给予重组组织型纤溶酶原激活物(rt-PA)0.9 mg/kg溶栓治疗,比较治疗前和治疗后24h、7 d、30 d的美国卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分及生活质量评分(Barthel)指数.结果 治疗前NIHSS评分为(12.8±5.33),治疗后24 h、7 d、30 d的NIHSS评分分别为(10.01±6.69)(6.77±3.56)、(4.12±3.09),治疗前和治疗后7 d、30 d比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗前生活质量评分(Barthel)指数为(20.63±8.67),治疗后24 h、7 d、30 d Barthel指数分别为(22.77±8.96)、(45.78±23.89)、(59.45±31.03),治疗前和治疗后7 d、30 d比较差异有统计学意义(P<0.05).1例因再梗塞死亡.结论 多模式CT指导下的急性脑梗死早期rt-PA静脉溶栓治疗是有效和安全的,有助于减少症状性颅内出血风险,使更多的患者从溶栓治疗中获益.

    作者:成秋生;潘小平;杨勇;李泽;余健敏;李蒙燕;王彦莉;黄翬 刊期: 2009年第04期

  • 登革病毒感染对白纹伊蚊生理生态特性的影响

    目的 了解登革病毒感染对白纹伊蚊生理、生态以及对杀虫剂敏感性的影响.方法 观察比较通过胸腔接种方式人工感染登革病毒的白纹伊蚊和胸腔注射生理盐水的对照组蚊虫的死亡率、产卵量、孵化率、子代发育情况,以及对拟除虫菊酯类杀虫剂的敏感性.结果 两组蚊虫在死亡率、存活时间、产卵量等方面的差异有统计学意义,其它方面的差异不显著.结论 登革病毒感染能够增加白纹伊蚊的死亡率并降低蚊虫的产卵能力.

    作者:江毅民;严子锵;胡志刚;李成玲;伍浩荣 刊期: 2009年第04期

  • 广西血吸虫病十年监测分析

    目的 探索近十年广西新发现的残存钉螺的分布特点及流动人口血吸虫病感染情况,为血吸虫病防治提供科学依据.方法 根据查到残存钉螺年份长短将广西原血吸虫病钉螺孳生地分成三类,针对不同螺区分类,对原螺区及毗邻地区采用不同的监测方案.结合血清学方法及粪便检查方法,抽样检查当地居地、原血吸虫病人及流动人口的监测检查工作,对监测结果进行考核.结果 近十年来,广西发现5处残存螺点,分别位于玉林、靖西、宜州、横县等地,其中隶属南宁市辖区的横县发现残存钉螺2处.广西未发现本地血吸虫病人,流动人13监测过程中发现输入性病例23例,病人分别来自湖北、湖南、江西和安徽4省,除2例为女性外,其余均为男性.职业则以干部、商人、民工(农民)、学生及武警新兵为主.结论 广西虽然保持阻断传播标准的成果,但由于不断新发现残存钉螺及输入性血吸虫病例,广西仍然面临血吸虫病的威胁.

    作者:张陆娟;欧阳颐;张鸿满;林睿;谭裕光;阮延清;黄福明;江河 刊期: 2009年第04期

  • HBsAg含量与脂代谢关系的探讨

    目的 探讨乙肝HBsAg携带者HBsAg含量与脂代谢的关系.方法 对70例乙肝HBsAg携带者(其中26例低滴度携带者,44例高滴度携带者)及74例正常人的ALT、TG、CHOL、HDL、LDL、APOA、APOB等指标进行检测.结果 与正常对照组相比,乙肝病毒携带组TG、CHOL、LDL、APOB等结果明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与低滴度乙肝HBsAg携带者相比,高滴度组CHOL、HDL、LDL、APOA、APOB有下降的趋势.结论 HBsAg的持续表达可能造成脂类慢性消耗,影响机体的脂质水平.

    作者:吴莫龄;朱逸文;吴晓蔓 刊期: 2009年第04期

  • 改革人体寄生虫实验教学模式注重学生创新能力培养

    人体寄生虫学实验是基础医学教学的重要组成部分,是理论与实践研究的技术基础.改革人体寄生虫学实验教学,调动学生的积极性和主动性,有利于培养学生的创新意识和创新能力,对保证教学质量、提高教学效果有很重要的作用.

    作者:张健;徐文岳;黄复生 刊期: 2009年第04期

  • 缬沙坦对人脐动脉平滑肌细胞妊娠相关蛋白-A、基质金属蛋白酶-9表达的影响

    目的 探讨缬沙坦对人脐动脉平滑肌细胞PAPP-A、MMP-9表达的影响.方法 分别在10-5mol/L的Ox-LDL的基础上,给予Ang Ⅱ以及Ang Ⅱ、缬沙坦混合培养人脐动脉平滑肌细胞,以普通培养基培养为对照,应用RT-PCR法检测PAPP-A、MMP-9的表达量.结果 AngⅡ组PAPP-A与MMP-9的表达量均显著高于对照组、Ox-LDL及缬沙坦组(P<0.01),缬沙坦组PAPP-A的表达量高于对照组(P<0.01),而与Ox-LDL组无明显差异(P>0.05),缬沙坦组MMP-9的表达量与Ox-LDL组及对照组均无明显差异(P>0.05).结论 Ang Ⅱ可促进人脐动脉平滑肌细胞PAPP-A和MMP-9的表达.缬沙坦可以抑制Ang Ⅱ的这种作用.

    作者:查政;张清华;蒋知新;王小冬 刊期: 2009年第04期

  • 应用悬浮点阵和变性高效液相色谱技术检测β地中海贫血基因的比较

    目的 比较悬浮点阵技术(suspension array,SA)及变性高效液相色谱技术(DHPLC)在β-地中海贫血及基因分型诊断中的应用.方法 通过分析100例正常人标本和69例经PCR反向斑点杂交技术(PCR-RDB)确认的β-地中海贫血患者外周血DNA标本,经PCR扩增并分别运用SA及DHPLC两种方法对其进行基因分型诊断.结果 100例正常人标本结果为阴性,69例β-地中海贫血标本经两种方法检测其缺失和突变的基因型别完全一致,其中单位点基因突变65例,多位点基因突变4例.结论 两种检测技术在β-地中海贫血基因分型诊断中准确性完全一致,具有快速、高效、检测平台的通用性的共同点;但悬浮点阵技术在临床标本检测具有更高的优势,变性高效液相色谱技术则可检测未知突变,在基础研究方面具有优势.

    作者:邹汉良;梁汉彰;赵毅;张松;罗史科;候家兴 刊期: 2009年第04期

  • 中国新型化学灭螺药的研究

    化学药物灭螺是目前主要采用的杀灭钉螺的方法.中国近研究出强螺杀粉剂、25%氯硝柳胺悬浮剂、4%杀螟丹颗粒剂和50%杀螟丹可溶性粉剂、三苯基锡壳聚糖羧酸酯、氯代水杨胺、荣宝与荣芽、O-磷酰化酚基化合物、密达利等新剂型的化学灭螺药.这些药物(除O-磷酰化酚基化合物)均已被证实具有一定的灭螺作用,有望用于现场灭螺,但尚需进一步研究以提高其灭螺效果及改进其不足.本文就这些新研究情况做一综述.

    作者:吴月英;宁安 刊期: 2009年第04期

  • 鼠艾滋病病毒荧光定量PCR标准品RNA的构建

    目的 合成构建鼠艾滋病病毒(FLV)荧光定量检测标准品,明确核糖核酸(RNA)标准品体外合成的基本原则.方法 通过序列对比,找到FLV为保守的区段作为RNA标准品的合成目标,进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,克隆于T载体,测序,设计带有T7启动子的引物,PCR扩增,将所得的PER产物凝胶回收纯化,用T7RNA聚合酶进行体外合成RNA,后用PER和电泳检测验证.结果 成功合成了FLV荧光定量PCR标准品.结论 FLV荧光定量标准品的成功合成必须遵守以下4条基本原则:①选择保守序列;②设计引物时将潜在的终止密码或起始密码排除在PCR目标产物之外;③将启动子(如r17启动子)挂在适当的引物上,保证所合成的RNA模板与所要定量检测的RNA模板一致,而不是互补;④合成RNA后必须检测,以保证不含其他RNA或者未消化完的DNA.

    作者:葛文华;何金洋 刊期: 2009年第04期

  • 无创正压通气治疗急性中毒性肺水肿的临床研究

    目的 探讨无创正压通气(noninvasive positive pressure ventilation,NIPPV)对急性中毒性肺水肿的临床效果.方法 选择符合中毒性肺水肿诊断并且氧合指数(oxygenation index,PaO2/FiO2,OI)低于300mmHg的患者48例,随机分成无创正压通气组(NIPPV组)25例及常规治疗组23例;NIPPV组在常规治疗的基础上给予以经面罩接呼吸机辅助通气(通气模式ASB+PEEP).结果 治疗1 h后,NIPPV组的血气分析结果、氧合指数、呼吸频率(respiratory rate,RR)、氧饱和度(blood oxygen saturation,SaO2)均较治疗前显著改善(P<0.01).与常规治疗组比较,OI、SaO2明显占优(P<0.01),总住院费用及住院天数也明显少于常规治疗组(P<0.001);同时,NIPPV组的气管插管机械通气率显著低于常规治疗组(P<0.01).结论 急性中毒性肺水肿早期应用无创压力支持通气能迅速改善患者的氧合能力,提高组织氧供,减少并发症,这对提高抢救成功率,改善患者预后有积极作用.

    作者:李小强;陈运超;刘移民 刊期: 2009年第04期

  • 颈动脉支架置入术治疗外伤性颈内动脉夹层3例报告

    外伤性颈内动脉夹层(traumatic carotid dissection,TCaD)是一种少见疾病,常发生于交通事故或其他原因导致的头颈部钝性损伤,目前对其发病率尚无确切统计,其治疗尚存在较大争议.近年来,颈动脉支架治疗TCaD备受关注,我院自2007年6月至2008年3月为3例TCaD行支架成形治疗.

    作者:郭兵;焦力群;叶明;凌锋 刊期: 2009年第04期

  • 黄连解毒汤对小鼠肠道菌群的影响

    目的 通过观察黄连解毒汤对小鼠肠道菌群的影响,为临床合理使用清热解毒中药提供参考资料.方法 建立抗生素引起菌群失调的小鼠模型和不同剂量的黄连解毒汤灌胃小鼠模型,与正常小鼠比较,评价黄连解毒汤对小鼠肠道菌群的影响情况.结果 灌胃14 d后黄连解毒汤高剂量组出现菌群失调,其肠道益生菌与正常组差异有统计学意义(P<0.05).黄连解毒汤低剂量组无菌群失调现象,其肠道益生菌乳酸杆菌、双歧杆菌与抗生素组差异有统计学意义(P<0.05),且其条件致病菌肠球菌显著减少.结论 黄连解毒汤在高剂量长期应用时有类似滥用抗生素的破坏作用,在低剂量使用时或许有调节肠道菌群平衡的作用.

    作者:罗海华;董姝;张晟;李达;时权;周红;邝枣园 刊期: 2009年第04期

  • 造影剂相关性肾病患者尿液β2-MG、NAG及KIM-1的变化

    目的 通过检测造影剂相关性肾病患者尿液中β2微球蛋白(β2-MG)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)及肾损伤分子1(KIM-1)的水平,了解β2-MG、NAG及KIM-1在造影剂相关性肾病患者中的改变及其与肾功能之间的关系.方法 收入49例造影剂相关性肾病患者,同时收入52例健康志愿者,以ELISA法分别检测其尿液中的β2-MG、NAG及KIM-1水平,分析其与患者肾功能之间的关系.结果 造影剂相关性肾病患者尿液中β2-MG、NAG、KIM-1分别为(594.62±87.93)mg/L、(24.52±4.64)U/L、(4.68±0.83)ng/mL,均高于健康对照组[β2-MG(108.16±10.55)mg/L,NAG(8.74±1.75)U/L,KIM-1(0.28±0.10)ng/mL],差异有统计学意义(P均<0.05);患者组的肌酐清除率Ccr为(25.09±7.50)ml/min,低于健康对照组的(83.75±33.84)ml/min,差异亦有统计学意义(P<0.05).结论 造影剂相关性肾病患者尿液中β2-MG、NAG及KIM-1水平较健康对照组明显升高,反映了肾小管的损伤情况,可作为造影剂相关性肾病患者肾功能的检测指标.

    作者:徐向明;何坚;贺军 刊期: 2009年第04期

  • 卡维地洛对心绞痛患者心率变异性的影响

    目的 评价卡维地洛对冠心病心绞痛型患者心率变异性(HRV)的影响.方法 冠心病心绞痛型患者120例随机分为卡维地洛组(62例)和对照组(58例),用药前后2周分别记录24 h动态心电图,评价患者心率变异性指标的变化.结果 两组治疗后心率变异性各参数较治疗前均显著改善(P<0.01),治疗后卡维地洛组较对照组改善更为显著(P<0.01).结论 卡维地洛可以显著提高冠心病心绞痛型患者的心率变异性.

    作者:余新东;王孝杰;李庆云 刊期: 2009年第04期

  • 基孔肯雅热的流行现况及其防治对策

    基孔肯雅热(Chikungunya fever,CHIK)是由基孔肯雅病毒(chikungunya virus,CHIKV)引起的一种急性传染病.本文针对基孔肯雅热的病原学、流行现况、诊断方法、防治对策等方面做一综述.

    作者:刘春芳;司菡;陆家海 刊期: 2009年第04期

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主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会