余新东；王孝杰；李庆云
目的 比较悬浮点阵技术(suspension array,SA)及变性高效液相色谱技术(DHPLC)在β-地中海贫血及基因分型诊断中的应用.方法 通过分析100例正常人标本和69例经PCR反向斑点杂交技术(PCR-RDB)确认的β-地中海贫血患者外周血DNA标本,经PCR扩增并分别运用SA及DHPLC两种方法对其进行基因分型诊断.结果 100例正常人标本结果为阴性,69例β-地中海贫血标本经两种方法检测其缺失和突变的基因型别完全一致,其中单位点基因突变65例,多位点基因突变4例.结论 两种检测技术在β-地中海贫血基因分型诊断中准确性完全一致,具有快速、高效、检测平台的通用性的共同点;但悬浮点阵技术在临床标本检测具有更高的优势,变性高效液相色谱技术则可检测未知突变,在基础研究方面具有优势.
作者：邹汉良；梁汉彰；赵毅；张松；罗史科；候家兴 刊期： 2009年第04期
目的 研究胶体金免疫层析法用于鼠疫耶尔森菌的快速诊断.方法 采用胶体金免疫层析测试条,加入待测鼠疫耶尔森菌液及对照菌液.结果 金标免疫层析试纸条在检测中并未出现交叉反应,特异性达到100%,显示其在鼠疫耶尔森菌的检测中特异性较好,结果可靠.同时该试纸条敏感性亦较高.少量细菌或抗原就可得到阳性结果,检测效果好.结论 该方法简便、快速、敏感、特异性好,适合于公共突发卫生事件中的鼠疫快速诊断和现场鼠疫监测.
作者：李珺；江凌晓；张文炳；彭亮；陈清；曹虹 刊期： 2009年第04期
化学药物灭螺是目前主要采用的杀灭钉螺的方法.中国近研究出强螺杀粉剂、25%氯硝柳胺悬浮剂、4%杀螟丹颗粒剂和50%杀螟丹可溶性粉剂、三苯基锡壳聚糖羧酸酯、氯代水杨胺、荣宝与荣芽、O-磷酰化酚基化合物、密达利等新剂型的化学灭螺药.这些药物(除O-磷酰化酚基化合物)均已被证实具有一定的灭螺作用,有望用于现场灭螺,但尚需进一步研究以提高其灭螺效果及改进其不足.本文就这些新研究情况做一综述.
作者：吴月英；宁安 刊期： 2009年第04期
目的 了解广州地区儿童感染肺炎克雷伯菌产质粒介导的AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特征,为临床合理用药提供参考依据.方法 采用标准纸片扩散法检测ESBLs,头孢西丁三维试验法检测AmpC酶,K-B纸片法测定肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性.结果 共检出248株肺炎克雷伯菌,其中46株产AmpC酶,阳性率为18.5%;157株产ESBLs,阳性率为63.3%;同时产AmpC酶和ESBLs菌株阳性率为18.1%.产AmpC酶肺炎克雷伯菌对第三代头孢菌素高度耐药.耐药率达80%～100%:对头孢吡肟、含酶抑制剂复合药的耐药率也在56.5%～93.5%之间;但对环丙沙星、阿米卡星的耐药率则在30%以下,对亚胺培南全部敏感.产ESBLs菌株对头孢菌素、含酶抑制剂复合药的耐药率也较高,在50%～91.7%之间.但对阿米卡星、环丙沙星、亚胺培南仍高度敏感.ESBLs阴性肺炎克雷伯菌对所测抗生素的敏感率均在81.2%以上.产酶菌株耐药率明显比非产酶菌株高.结论 广州地区儿童感染肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的状况已十分突出:产酶菌株对常用抗生素的耐药率较高;碳青霉烯类抗生素可作为治疗产AmpC酶和/或ESBLs肺炎克雷伯菌感染的经验用药.
作者：黄勇；周珍文；邓秋连；万根平；谢永强 刊期： 2009年第04期
德国小蠊的抗药性问题日渐突出,成为城市害虫防治的一大难点.德国小蠊抗性机理的研究可为抗性监测、治理以及新型杀虫剂的开发提供理论基础.本文主要就德国小蠊的抗药性产生情况及抗性机理的研究进展进行综述.
作者：赵霞；张仁利；张韶华；胡章立 刊期： 2009年第04期
目的 研究乌梢蛇蛋白对体外培养的类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞(fibroblast-likesynoviocytes,FLS)生长的抑制情况,探讨乌梢蛇蛋白影响FKS凋亡的可能分子机制.方法 常规方法提取乌梢蛇总蛋白,组织贴块法培养FLS;采用不同剂量(高、中、低剂量)乌梢蛇蛋白作用FLS后,应用MTT法检测乌梢蛇蛋白对细胞增殖的影响,流式细胞仪技术检测细胞的凋亡情况,RT-PCR方法检测细胞wt-p53/bcl-2 mRNA的变化.结果 乌梢蛇蛋白中高剂量组FLS增殖率与空白对照组比较明显减少.细胞凋亡率明显增加.差异均有统计学意义(P<0.01);乌梢蛇蛋白中高剂量组FLS的wt-p53 mRNA表达量增加,Bcl-2 mRNA表达量降低,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01).结论 乌梢蛇蛋白可抑制FLS增殖和促进其凋亡,其作用机制可能是通过调节wt-p53/bcl-2基因表达来实现.
作者：吴贺勇；李娟 刊期： 2009年第04期
目的 探索宝安地区肝吸虫感染的危险因素,为制定适合本地的防制策略提供参考.方法 采用多级整群抽样法对宝安区居民进行肝吸虫血清学监测,并利用病例对照研究方法分析肝吸虫感染危险因素.结果 共抽查856人,阳性32人,阳性率为3.74%.各年龄组感染率差别有统计学意义;性别及学历组感染率差别无统计学意义.病例对照研究表明生吃或半生吃海鱼、生吃或半生吃淡水鱼、食用生鱼粥、生吃或半生吃淡水虾、有过抓生鱼虾后不洗手就抓食物吃的行为、用盛过生鱼虾的器皿不洗干净就盛熟食以及用切过生鱼的刀及砧板不洗就切熟食是当地引起感染的危险因素.结论 引起本地区肝吸虫感染增高的主要原因是由于个人或家庭的饮食和卫生行为习惯不良而造成.
作者：马智超；陈兵；余家麟；余平；朱奕；黄振宇；周小涛；张仁利；高世同 刊期： 2009年第04期
目的 了解登革病毒感染对白纹伊蚊生理、生态以及对杀虫剂敏感性的影响.方法 观察比较通过胸腔接种方式人工感染登革病毒的白纹伊蚊和胸腔注射生理盐水的对照组蚊虫的死亡率、产卵量、孵化率、子代发育情况,以及对拟除虫菊酯类杀虫剂的敏感性.结果 两组蚊虫在死亡率、存活时间、产卵量等方面的差异有统计学意义,其它方面的差异不显著.结论 登革病毒感染能够增加白纹伊蚊的死亡率并降低蚊虫的产卵能力.
作者：江毅民；严子锵；胡志刚；李成玲；伍浩荣 刊期： 2009年第04期
目的 了解泉州市2000-2007急性弛缓性麻痹(AFP)病例的发病情况、分布特征及AFP监测系统运转情况,为我市继续保持无脊髓灰质炎(脊灰)决策提供依据.方法 采用回顾性调查方法,分析泉州市2002-2007年AFP病例个案调查表、随访表和实验室病毒学检测结果等资料.结果 泉州市2002-2007年AFP病例监测系统共报告AFP病例183例,15岁以下儿童非脊灰AFP病例报告发病率为1.7/10万.AFP病例男女比为2.6:1,以5岁小年龄组居多,全年各月分布无差异.报告AFP病例未完成OPV基础免疫及免疫史不详的病例分别占9.8%(18/183)和6.0%(11/183),其中181例为脊灰排除病例,2例为脊灰临床符合病例.AFP病例合格粪便标本采集率为96.2%(176/183),脊灰病毒分离率为4.0(7/176),其中6例为脊灰疫苗株,1例为脊灰疫苗高变异株.75 d内随访及时率为99.4%(180/181).结论 2002-2007年泉州市无脊灰野病毒确诊病例,AFP病例监测系统各项指标均达到<全国急性弛缓性麻痹(AFP)病例监测方案>的要求,但适龄儿童的基础免疫工作仍需加强,还应加强临床医生的培训,提高AFP病例监测系统的工作质量.
作者：詹惠春；张建成；杨德林 刊期： 2009年第04期
目的 了解老年大鼠血液白细胞基因表达水平的变化.方法 将雄性Wister大鼠分为老年组(18月龄)和年轻组(4月龄),用illumina大鼠全基因组芯片研究其分子水平的变化.结果 生物信息学分析显示.造成老年组和年轻组显著生物学差异的基因功能及所属基因是:28条凋亡基因和22条炎性基因上调,9条涉及氧与活性氧中间物代谢的基因下调.结论 差异基因功能导致老年大鼠和年轻大鼠的生物学差异.
作者：张燕；罗炳德 刊期： 2009年第04期
目的 探讨肝豆状核变性(HLD)患者的心理状况.方法 对58例住院HLD患者采用症状自评量表(Scl-90)进行测查,并与43名正常人进行对照.结果 HLD患者的焦虑、敌对性、躯体化、抑郁、恐怖因子、阳性项目数与健康对照组比较差别有统计学意义(P<0.001,P<0.01);锥体外系症状为主的HLD患者(脑型)躯体化、焦虑、敌对性、恐怖因子均分高于肝损害为主的HLD患者(肝型,P<0.05).结论 HLD患者有许多心理症状.尤其是脑型HLD患者;在药物驱铜治疗的同时,应重视心理治疗,以提高临床疗效.
作者：张明兴；洪铭范；桀骜 刊期： 2009年第04期
目的 构建尿激酶型纤溶酶原激活因子(uPA)原核表达质粒,并在大肠埃希菌BL21中表达,为进一步研究uPA奠定基础.方法 应用逆转录RT-PCR,从人肝细胞cDNA中扩增人尿激酶型纤溶酶原激活因子基因序列,与原核表达质粒pET32a重组,获得表达质粒uPA-pET32a.用氨苄青霉素平板筛选转化子,双酶切与DNA测序进行鉴定,用IPTG诱导表达,并用Western blotting进行鉴定.结果 从肝细胞cDNA中扩增的uPA基因片段长1296 bp,酶切及DNA测序证实uPA-pET32a重组质粒构建正确,表达融合蛋白分子量约为68900Mr,经Western blotting证实为目的蛋白.结论 成功构建了重组原核表达质粒uPA-pET32a.并能在大肠埃希菌内表达,所表达的融合蛋白分子量大小与预期的相一致,为进一步的研究奠定了基础.
作者：邱峰；刘振杰；陈富 刊期： 2009年第04期
目的 建立具有足够感染度的感染有广州管圆线虫的福寿螺模型.方法 将福寿螺随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,每组16只.分别用每只螺0条、1500条、2500条、3500条一期幼虫感染福寿螺.感染24 h后以相同感染数量相同时间重复感染一次.35～40 d后,使用酶消化法查找三期幼虫,观察螺的死亡率、感染率、感染度等指标.结果 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组死亡率分别为0、31.25%、31.25%、62.5%;Ⅰ组各螺无三期幼虫感染,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组感染率均为100%;感染度Ⅲ组和Ⅳ组明显高于Ⅱ组(P<0.05),Ⅲ组与Ⅳ组之间感染度差异无统计学意义(P>0.05).结论 无广州管圆线虫感染时,Ⅰ组螺可正常生存,无死亡;Ⅱ组螺死亡率较低,但感染度亦不高;Ⅳ组螺感染度较高死亡率亦高;Ⅲ组福寿螺死亡率较低、感染度较高、感染虫数较均衡.适宜作为模型.
作者：孙志坚；彭东觉；贺华良；何蔼；杨潇；曲振宇；詹希美 刊期： 2009年第04期
外伤性颈内动脉夹层(traumatic carotid dissection,TCaD)是一种少见疾病,常发生于交通事故或其他原因导致的头颈部钝性损伤,目前对其发病率尚无确切统计,其治疗尚存在较大争议.近年来,颈动脉支架治疗TCaD备受关注,我院自2007年6月至2008年3月为3例TCaD行支架成形治疗.
作者：郭兵；焦力群；叶明；凌锋 刊期： 2009年第04期
目的 通过检测造影剂相关性肾病患者尿液中β2微球蛋白(β2-MG)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)及肾损伤分子1(KIM-1)的水平,了解β2-MG、NAG及KIM-1在造影剂相关性肾病患者中的改变及其与肾功能之间的关系.方法 收入49例造影剂相关性肾病患者,同时收入52例健康志愿者,以ELISA法分别检测其尿液中的β2-MG、NAG及KIM-1水平,分析其与患者肾功能之间的关系.结果 造影剂相关性肾病患者尿液中β2-MG、NAG、KIM-1分别为(594.62±87.93)mg/L、(24.52±4.64)U/L、(4.68±0.83)ng/mL,均高于健康对照组[β2-MG(108.16±10.55)mg/L,NAG(8.74±1.75)U/L,KIM-1(0.28±0.10)ng/mL],差异有统计学意义(P均<0.05);患者组的肌酐清除率Ccr为(25.09±7.50)ml/min,低于健康对照组的(83.75±33.84)ml/min,差异亦有统计学意义(P<0.05).结论 造影剂相关性肾病患者尿液中β2-MG、NAG及KIM-1水平较健康对照组明显升高,反映了肾小管的损伤情况,可作为造影剂相关性肾病患者肾功能的检测指标.
作者：徐向明；何坚；贺军 刊期： 2009年第04期
目的 调查南京市儿童医院门诊儿童隐孢子虫病的流行情况.进而了解2008年夏秋季节南京及周边地区儿童人群中隐孢子虫病的流行情况.方法 收集2008年7～8月份和9～10月份两个时间段南京市儿童医院门诊儿童粪样,用改良抗酸染色和金胺酚-改良抗酸复合染色法.检查粪样中的隐孢子虫卵囊.同时,随机收集部分门诊儿童的血样,通过分子生物学技术纯化特异性隐孢子虫重组蛋白SA35,用微粒子免疫检测法检测血清中抗SA35 IgG抗体水平.结果 共收集儿童医院门诊儿童的粪样2268份,血样207份.粪样隐孢子虫检出率为0.97%,血检结果阳性率为29.95%,经卡方检验,粪检和血检的阳性率在性别之间差异无统计学意义(P>0.05);但血检阳性率1岁以上的儿童比1岁以内的儿童明显增高(P<0.05).结论 南京及周边地区门诊儿童在夏秋季仍然存在隐孢子虫感染,需要进一步加强血检以监控隐孢子虫病的传播.
作者：杜学利；戈建军；秦圆方；孟睿；刘云；储凯；侯敏；杨萍灿；吴海玮 刊期： 2009年第04期
目的 应用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)技术构建汉族人IgA肾病肾阴虚证cDNA消减文库.方法 选择IgA肾病且中医辨证为肾阴虚证的患者以及正常人作为其对照组,进行正向和反向消减杂交.采用Trizol BD法提取总RNA,用SMART技术逆转录并扩增总cDNA,用Rsa Ⅰ酶切基因组cDNA成大小不等的片段,分别与两种不同的接头连接,进行2次消减杂交及2次抑制性PCR,然后将PCR产物与U载体连接,经蓝白斑筛选后,再用PCR方法插入片段筛选出阳性重组质粒.构建IgA肾病肾阴虚证消减文库.结果 用SSH方法筛选出了IgA肾病肾阴虚证的差异cDNA片段.其中正向消减文库共获得325个阳性克隆,反向消减文库获得306个阳性克隆,从而成功地构建了IgA肾病肾阴虚证的cDNA消减文库.结论 SSH技术能够快速有效地分离差异cDNA片段.成功构建了IgA肾病肾阴虚证的cDNA文库,为进一步克隆肾阴虚证的相关基因奠定了基础.
作者：魏敏；孙晓敏；黄平；赵晓山；李玉萍；陈晶；赖名慧；罗仁 刊期： 2009年第04期
目的 探索近十年广西新发现的残存钉螺的分布特点及流动人口血吸虫病感染情况,为血吸虫病防治提供科学依据.方法 根据查到残存钉螺年份长短将广西原血吸虫病钉螺孳生地分成三类,针对不同螺区分类,对原螺区及毗邻地区采用不同的监测方案.结合血清学方法及粪便检查方法,抽样检查当地居地、原血吸虫病人及流动人口的监测检查工作,对监测结果进行考核.结果 近十年来,广西发现5处残存螺点,分别位于玉林、靖西、宜州、横县等地,其中隶属南宁市辖区的横县发现残存钉螺2处.广西未发现本地血吸虫病人,流动人13监测过程中发现输入性病例23例,病人分别来自湖北、湖南、江西和安徽4省,除2例为女性外,其余均为男性.职业则以干部、商人、民工(农民)、学生及武警新兵为主.结论 广西虽然保持阻断传播标准的成果,但由于不断新发现残存钉螺及输入性血吸虫病例,广西仍然面临血吸虫病的威胁.
作者：张陆娟；欧阳颐；张鸿满；林睿；谭裕光；阮延清；黄福明；江河 刊期： 2009年第04期
目的 培育并鉴定转细粒棘球绦虫Eg95-EgA31融合基因苜蓿,为进一步研究转基因苜蓿疫苗提供依据.方法 将构建好的Pbi-Eg95-EgA31质粒电穿孔转化根瘤农杆菌(Agrobacterium tumefaciens,At)LBA4404株,利用重组根瘤农杆菌(rAt)侵染苜蓿(alfalfa)叶片,卡那霉素抗性筛选伤愈组织体胚,培育转基因苜蓿,用SDS-PAGE、Western-blot、PCR和RT-PCR鉴定转基闪苜蓿.结果 SDS-PAGE和Western-blot证实Eg95-EgA31融合基因在苜蓿中得到表达,表达产物分子质量约为37500 Mr,表达效率约占苜蓿叶总蛋白的0.05%,且能被感染细粒棘球蚴的鼠血清特异识别.PCR和RT-PCR均扩增出1016 bp Eg95-EgA31融合基因片段.结论 成功培育了转细粒棘球绦虫Eg95-EgA31融合基因苜蓿,为进一步研究细粒棘球绦虫转基因苜蓿疫苗奠定了基础.
作者：周辉；李文桂；叶艳菊；周必英 刊期： 2009年第04期
目的 合成构建鼠艾滋病病毒(FLV)荧光定量检测标准品,明确核糖核酸(RNA)标准品体外合成的基本原则.方法 通过序列对比,找到FLV为保守的区段作为RNA标准品的合成目标,进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,克隆于T载体,测序,设计带有T7启动子的引物,PCR扩增,将所得的PER产物凝胶回收纯化,用T7RNA聚合酶进行体外合成RNA,后用PER和电泳检测验证.结果 成功合成了FLV荧光定量PCR标准品.结论 FLV荧光定量标准品的成功合成必须遵守以下4条基本原则:①选择保守序列;②设计引物时将潜在的终止密码或起始密码排除在PCR目标产物之外;③将启动子(如r17启动子)挂在适当的引物上,保证所合成的RNA模板与所要定量检测的RNA模板一致,而不是互补;④合成RNA后必须检测,以保证不含其他RNA或者未消化完的DNA.
作者：葛文华；何金洋 刊期： 2009年第04期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
